Цистин определение

Целый ряд исследователей получил аномально высокие значения для цистина. Определение проводилось по первоначальному варианту метода Фолина в дезаминированных или частично гидролизованных белках или в препаратах, гидролизованных в присутствии больших количеств углеводов. Поэтому к полученным таким образом данным следует относиться с большой осторожностью. [c.186]

Гемоглобин лошади, не содержащий цистина, представляет особый интерес, так как методом измерения поверхностного натяжения удалось показать [129], что его молекулярный вес равен 12 000. Гидродинамические методы определения дают молекулярный вес около 68 ООО, который при работе с растворами мочевины снижается примерно вдвое [345]. Если [c.176]

Производные аминокислот обычно циклизуются труднее, особенно в случае глицина, чем те же аминокислоты, входящие в состав пептидов. Для синтеза производных фенил-тиогидантоина (ФТГ) [86, 91] или количественного определения N-концевых остатков ФТК-производные часто циклизуют в 1 н. растворе НС1 в течение 1 час при 100°. Однако в этих условиях ФТГ-производные серина, треонина и цистина нестабильны, поэтому их не удается выделить и количественно определить. Кроме того, все ФТГ-производные в кислой среде разлагаются, причем степень разложения возрастает с увеличением кислотности и повышением температуры [114, 317]. В водной среде максимальный выход ФТГ-производных достигается при действии сильной кислоты при сравнительно низких температурах и по возможности меньшей продолжительности реакции. При низкой температуре реакционной смеси и применении концентрированных кислот (1—5 н.) удалось синтезировать ФТГ-производные серина, треонина и цистина в водной среде [159, 195]. Кроме того, эти соединения легко получаются в среде уксусная кислота — HG1 [289]. [c.240]

Аминокислоты (гликоколь, цистин з, пролин, триптофан, аргинин, гистидин, серин °), а также ди- и полипептиды реагируют своими аминогруппами, образуя соответствующие сульфокислоты, замещенные у азота °. Последняя реакция была применена для определения строения белков и продуктов их расще-пления . [c.267]

Необходимо, чтобы растворы А и В имели строго определенный pH, поскольку даже небольшое изменение pH вызывает значительное ухудшение разделения. При элюировании раствором А маркером на хроматограмме может служить цистин. В идеальном случае он выходит между аланином и валином. Если же pH выше 3,28, пик цистина смещается ближе к пику аланина или даже сливается с ним. С другой стороны, если pH раствора ниже 3,28, пик цистина смещается к пику валина, перекрывает его или даже предшествует ему на хроматограмме. В первом случае буфер подкисляют добавлением 0,5—1,0 мл концентрированной НС1 на 1 л раствора. [c.175]

БЫСТРОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИСТЕИНА И ЦИСТИНА В ФОРМЕ ЦИСТЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ В ОБРАЗЦАХ РАСТИТЕЛЬНОГО [c.262]

Анализ аминокислотного состава включает полный кислотный гидролиз исследуемого белка или пептида с помощью 5,7 н. соляной кислоты и количественное определение всех аминокислот в гидролизате. Гидролиз образца проводится в запаянных ампулах в вакууме при ПО "С в течение 24 ч. При этом полностью разрушается триптофан и частично серии, треонин, цистин и цистеин. а глутамин и аспарагин превращаются соответственно в глутаминовую и аспарагиновую кислоты. В то же время пептидные связи, образованные аминокислотными остатками с разветвленной боковой цепью (Val, Не. Leu), из-за стерических препятствий гидролизуются частично. Особенно стабильны связи Val—Val. Ile—Ile, Val—De и Ile—Val. [c.34]

Цистеин(определенная как цистеиновая кислота + /г цистина 0,67 0,08 2,0 [c.364]

Поллард и Чибнэл [524] производили гидролиз белка трав, применяя 20 i H l (в течение ночи) и пепсин, трипсин и эреп-син. Выходы цистина, определенного очень специфическим методом Салливана, были вполне сравнимы. Однако после 20 час. гидролиза с 8 н. H-.-SOi обнару/1сивается только 84 < ожидаемого цистина. [c.186]

Цистин, определение в белках 7250. 7898 Цитизин, определение 8366 Цитрал, определение в лимонном масле 7831 Цитрат натрия, определение 8159 Цитраты, комплексы со свинцом 481 [c.398]

Сера входит в состав некоторых важнейших аминокислот. Так, в молекуле цистсина содержится группа 8Н. При определенных условиях из двух молекул цистеина образуется ци-стин — в нем остатки цистеина связаны между собой дисуль-фидной связью (8 — 8). Эти связи необходимы для придания белковым молекулам определенной конфигурации. Переход 8—8 8Н осуществляется в процессах переноса водорода в клетках. Этот обратимый процесс служит организму защитой от радиационного поражения улавливаются радикалы Н-и ОН-, появляющиеся в клетках при расщеплении воды под действием радиации. Цистин образуется при гидролизе белков, образующих покровные ткани (из волос, шерсти, рогов и т. д.). [c.182]

Если же принять, что в частице казеина содержится 2 остатка цистина, то молекулярный вес будет равен 8000x2=16 000. Эта величина имеет тот же порядок, который получается при определении ее физическими методами. Молекулярная формула казеина в таком случае будет 7ogHJJзo022 NJ8(,S PJ. [c.389]

По длине пептидных цепей гормоны гипофиза значительно различаются между собой. Некоторые из них относятся к белкам среднего молекулярного веса. Например, гормон роста человека имеет мол. вес. 21 500 и характеризуется высокой специфичностью гормоны роста из других источников не могут его заменять. Гормон, стимулирующий функцию щитовидной железы (тиреотропии, ТТГ), представляет собой гликопротеид с мол. весом 28 000. С другой стороны, гормоны нейрогипофиза (задней доли гипофиза) вазопрессии и окситоцин являются простыми пептидами, построенными всего лишь из 9 аминокислотных остатков (собственно, из восьми, если считать цистин одной аминокислотой рис. 2-2). Как указывает уже само название, нейрогипофиз состоит из нервной ткани, секреторная функция которой находится под непосредственным контролем центральной нервной системы. Вазопрессии является основным фактором, регулирующим объем циркулирующей крови и артериальное давление на уровень секреции этого гормона оказывает влияние стресс. Окситоцин действует на гладкие мышцы матки при родах, а также служит триггером лактации. Выделение молока из молочных желез в определенной мере зависит от сосательных движений младенца, под влиянием которых происходит рефлекторное высвобождение окситоцина в кровоток. [c.321]

С. в виде сплавов применяется для чеканки монет, для изготовления ювелирных изделий, столовых приборов, лабораторной посуды, как катализатор, для аккумуляторов. Из солей С. практическое значение имеют галогениды в производстве фотоматериалов нитрат серебра AgNOздля получения других соединений С., в аналитической химии для определения галоид-ионов, в медицине ( ляпис ), в производстве зеркал. Ионы серебра обладают хорошими антисептическими свойствами. Серии СНг(ОН)—СН(ЫНг)—СООН—а-амино-Р-оксипропиоиовая кислота, входит в состав белков растительного и животного происхождения, содержится в казеине (белковое вещество молока). В печени из С. образуется цистин. [c.118]

При учете локализации S-S-мостика конформационный анализ цистин-содержащего фрагмента природного олигопептида или белка может быть ограничен рассмотрением его состояний только с замкнутыми формами основной цепи. Значительное сокращение объема вычислительных работ не сопровождается при этом снижением требований к строгости рещения задачи. В этом случае для пептида определенной длины необходимо располагать набором соответствующих циклических структур с известными геометрическими и энергетическими характеристиками. Он может быть получен путем количественной оценки стерической и энергетической предрасположенности всех возможных конформаций модельного пептида того же размера ys -(Ala) 2 ys" к образованию дисульфидной связи. В работах В.З. Спасова и Е.М. Попова [106, 107] оценены конформационные возможности модельных олигопептидов с числом остатков л от двух до шести. При большей длине цепи с концевыми остатками ys предложенный метод становится малоэффективным. [c.326]

Результаты определения аминокислотного состава большинства белков указывают на наличие такого количества цистина, которого вполне достаточно для образования дисульфидных мостиков между известным числом открытых полипептидных цепей. Однако гемоглобин лошади, имеющий шесть N-кoнцeвыx валииовых остатков [160, 245], не содержит [c.175]

Эта реакция не пригодна для отщепления С-концевых остатков пролина, так как они не образуют тиогидантоин, остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот, которые образуют циклические ангидриды, а не тиогидантоины (аспарагин и глутамин, наоборот, дают тиогидантоины [301]), а также остатков серина, треонина, цистина, аргинина и лизина [19, 301], которые неустойчивы при циклизации или регенерации аминокислоты из тиогидантоинового производного. Таким образом, этот метод находит весьма ограниченное применение для прямого определения строения пептидов и белков. Для определения С-концевого остатка по разности [107] реакция может оказаться более полезной, но ее все же нельзя использовать для определения аспарагиновой и глутаминовой кислот и пролина. Однако путем микробиологического анализа [107], специфичного для остатков /-аминокислот, эти аминокислоты могут быть определены по потере оптической активности на 50% вследствие рацемизации в том случае, когда они являются С-концевыми. [c.247]

По сравнению с оптическими методами определение радиоактивности представляет собой более чувствительный метод установления присутствия небольших примесей изомеров. Метод разделения является, вероятно, общим для меченых а-аминокислот, а также других рацемических соединений (см. синтез цистина-3,3 -Са ). Способ расщепления в общих чертах описан Томасом [8] и Гильваргом [9] и подробно изложен Peno [10]. [c.246]

Другой способ удаления воды рекомендован Зомзели и др. [131]. Основываясь на ранее описанной методике [57], авторы добавляли к кислому этанольному раствору кеталь, полученный из соответствующего спирта и ацетона (диалкоксипропан). Кеталь удаляет воду, используя ее на расщепление до спирта и ацетона. Однако, согласно некоторым данным [19], ни метод Джонсона и др. [42] с использованием НС1 вместо НВг, ни последняя методика [131] не годятся для получения н-амиловых эфиров. Применение кислых ионообменных смол [77] также не привело к удовлетворительным результатам. Количественное образование н-амиловых эфиров идет лишь при более высокой температуре и при введении в смесь газообразного НС1 [19]. Превращение аминокислот в высшие эфиры затруднено тем, что определенные аминокислоты, такие, как цистин, очень плохо растворимы в спиртах, насыщенных НС1. н-Бутиловые эфиры были приготовлены [53] переэтерификацией [c.320]

Из полученного центрифугата (фильтрата) отбирают 10 мл раствора, прибавляют 0,5 мл 80%-ного раствораСН3СООН и 1 г К1 (в порошке). Выделившийся иод титруют 0,01 н. раствором МааЗаОз с 5 каплями крахмала в качестве индикатора. Наличие мути в центрифугах или фильтратах может привести к ошибкам в определении, а поэтому необходимо следить, чтобы они были прозрачны. Кроме того, необходимо учитывать, что не все аминокислоты образуют растворимые соли меди, например соль цистина труднорастворима. [c.18]

В. Л. Кретович и А. А. Бундель разработали быстрый метод определения аспарагиновой и глютаминовой кислот, который основан на том, что активированный, подкисленный оксид алюминия адсорбирует аспарагиновую, глютаминовую кислоты и цистин. Другие аминокислоты, которые проходят через хроматографическую колонку, этим адсорбентом не задерживаются. Цистин вымывают из колонки дистиллированной водой, насыщенной H2S (цистин при этом восстанавливается в цистеин, а оставшиеся дикарбоновые кислоты последовательно элюируют). Установлено, что глютаминовая кислота, адсорбированная на AI2O3, при элюировании слабым раствором кислоты быстрее передвигается по колонке, чем аспарагиновая. В полученных элюатах определяют азот методом Кьельдаля. [c.23]

Пробы, взятые у лиц, подвергавшихся медикаментозному лечению, например, алкалоидами хинной коры, требуют специальной очистки. В некоторых случаях мешающие вещества можно удалить, экстрагируя пробу эфиром. При изучении реакпдш кремневольфрамовой кислоты с некоторыми метаболитами и родственными веществами было установлено, что глицин, тирозин, метионин, цистин, ци-стеин, холин, креатинин, мочевая кислота, аллантоин, фенол, пирокатехин и гидрохинон при содержанйи до 50 мг в условиях определения не образуют осадков с креглневольфрахмовой кислотой. [c.225]

Сублиматор может быть снабжен шлифом [85] в этом случае он пригоден для фракционированной сублимации. Подобна5 же пробирка, имеющая плоское дно, на котором сублимируемое вещество распределяется тонким слоем, пригодна для количественной микросублимации. Расстояние сублимируемого вещества от конца конденсатора составляет всего лишь 10 мм. Это устройство применялось для определения 2-метил-4-нафтохинона, ацетилсалициловой кислоты, фенацетина, фенобарбитола, никотинамида, салола и сульфаниламида в фармацевтических таблетках. Другие соединения, содержащиеся в таблетках, например крахмал, сахароза, лактоза, тальк, стеарат магния, /-цистин и а-углутаминовая кислота, при 150° и 10 (i. не сублимируются. [c.524]

Для получения чистой культуры и определения токсигенности подозрительные колонии микроскопируют (мазки окрашивают по Граму, Нейссеру и другими методами), пересевают на сывороточную среду и в чашку с фосфатно-пептонным агаром (средой Илека). Чистые культуры сеют в среды пестрого ряда (глюкоза, сахароза, крахмал), среду с цистином для обнаружения цистина-зы (проба Пизу), среду с мочевиной, среду с пиразинамидом и др. (табл. 2.20). [c.201]

Среда для определения цистиназы. К 90 мл расплавленного МПА (pH 7,6) добавляют 2 мл 1%-го щелочного раствора цистина, тщательно перемешивают и добавляют 2 мл О, I N раствора серной кислоты. Среду стерилизуют при 112 °С 30 мин. К расплавленной и охлажденной до 50 °С среде добавляют 1 мл 10%-го раствора уксуснокислого свинца (двукратно стерилизованного текучим паром), перемешивают и добавляют 9 мл нормальной лошадиной сыворотки. Среду асептически разливают по 2 мл в маленькие пробирки. При посеве уколом дифтерийные коринебактерий вызывают почернение среды по ходу укола и вокруг него в виде облака (образование сероводорода ведет к формированию черного преципитата сульфида свинца). [c.201]

Относительную чувствительность аминокислотных остатков в инсулине к "[-излучению исследовали Дрейк и его сотрудники [69]. Как указывалось ранее, интенсивное исследование инсулина особенно желательно, поскольку он является единственным белком, строение которого полностью известно. На основании результатов определений концевых групп, изучения спектров поглощения и хроматографии аминокислот на бумаге в образцах, подвергнутых облучению дозами до 40 мегафэр, были сделаны выводы 1) что цистин, тирозин, фенилаланин, пролин и гистидин обладают высокой радиочувствительностью 2) что лейцин, изолейцин, валин, лизин и аргинин заметно разрушаются при наиболее высоких дозах и 3) глицин и фенилаланин, Н-концевые аминокислоты (т. е. имеющие свободные а-аминогруппы) дезаминируются. [c.227]

Коулт [48] описал определение аминокислот, содержащих сульфгидрильные и дисульфидные группы — цистеина, цистина, глутатиона, гомоцистеина и гомоци-стина, — в 0,05 н. НС1, используя катодно-лучевой полярограф. [c.392]

Полярографическое определение цистина и окисленного глутатиона в присутствии друг друга основано на том факте, что такие поверхностно-активные вещества, как тимол, при соответствующей концентрации смещают волну цистина к более отрицательным потенциалам, в то время как на пептидную волну они практически не влияют [250]. В полярографическую ячейку вводят 2 мл 1 М уксусной кислоты и 2 мл 1 М раствора КС1. В ячейку вводят также образец, содержащий дисульфиды с общей концентрацией 0,0005—0,015 М, и приливают воду до общего объема 20 мл. К освобожденному от воздуха раствору добавляют 0,6—0,7 мл насыщенного раствора тимола и с помощью КРЭ определяют диффузионные токи при —0,5 и —0,9 в. По величинам iJ , измеренным при —0,9 в для окисленного глутатиона и цистина, и по величинам тока, измеренным в смеси при —0,5 и —0,9 в, можно вычислить концентрации пептида и цистина с точностью до 3—6%. Отношение окисленного глутатиона и цистина может изменяться от 0,1 до 2,4. Эта методика особенно пригодна для определения дисульфидсодержащих пептидов и цистина в растворах частично гидролизованных белков. Она имеет большое значение при исследованиях скорости гидролиза и денатурации белка в биологических материалах, таких, как сыворотка крови. [c.394]

Косвенное определение сульфгидрильных групп в белках основано на соединении с л-хлормеркурбензоатом натрия и полярографическом восстановлении [90, 174]. При pH 7 восстановление продукта реакции происходит при более отрицательном потенциале полуволны, чем восстановление п-хлормеркурбензоата. Высота первой волны пропорциональна концентрации в области 0,001—0,0001 М. Метод был проверен на цистеине, альбуминах и глобулинах. Цистин, метионин, кислород, иодид и гидросульфит мешают анализу. [c.394]

Сумму сульфгидрила и дисульфида (процентное содержание цистина) в необработанной шерсти можно определить следующим образом. К буферу с pH 8,5 (приготовленному так же, как описано выше), содержащему 1/5 воды (по обьему), 8 г мочевины и 1,6 г порошка КагЗОз-ТНгО на каждые 15 мл разбавленного буфера, добавляют желатину, растворенную в минимальном количестве воды, доводя ее концентрацию в буферном растворе до 0,005%. Образец шерсти весом 6,5—8,5 мг помещают в колбу и приливают приблизительно 22,5 мл буферного раствора и 1,5 мл 0,004 М раствора неогидрина. Затем производят операции, описанные при определении сульфгидрила. [c.395]

По методу Брдички [37, 38] в аммиачном растворе, содержащем двухвалентный кобальт и NH4 1 в качестве буферной добавки, получают каталитическую волну при потенциале —1,6 в для веществ, содержащих цистеиновые или цистиновые ядра. Этот метод использовали для определения цистина, цистеина и белков или их гидролизатов [37, 38, 92, 147, 289]. Можно определять количества цистеина, не превышающие [c.396]

Для определения общего содержания сульфгидрилов и дисульфидов в образцах шерсти весом 0,05—0,10 жг образец гидролизуют 0,2 мл концентрированной НС1 и 0,2 мл 98—100%-ной муравьиной кислотой при ПО + 0,5° в трубке, закрытой пробкой, к которой присоединен небольшой холодильник в виде охлаждаемого пальца [106]. Через 4,5 час трубку охлаждают, содержимое сушат вымораживанием и переносят в ячейку на 20 мл с помощью четырех порций по 5 0,1 М раствора МН40Н и НН4С1, содержащего 0,005% желатины. После обезгаживания добавляют 1 мл 0,02 М раствора СоС12 и снимают полярограмму между —0,8 и —2,0 в. Для получения абсолютных величин содержания цистина необходимо построить калибровочную кривую, желательно по гидролизату большего образца того же волокна. Результаты воспроизводятся с точностью до 3%, но они, по-видимому, заметно занижены по сравнению с большими образцами того же волокна. [c.396]

При анализе пяти различных органических соединений (бензойная кислота, цистин, декстроза, глицин, Р-нафталинсульфокислота) среднее отклонение при определении содержаний уг.перода состав.ляло +0,5% и водорода +0,8%. Анализы проводили с большим разрывом во времени, а результаты рассчитывали на основе начальной калибровки. Продолжительность одного анализа не превышает 17 мин. Данные трех повторных определений при однократном сожжении могут быть получены за 40 мин. Для сравнения отметим, что определение углерода и водорода по Преглю длится 135—145 мин. (в случае повторных анализов) и требует от экспериментатора большого опыта и тщательного соблюдения деталей методики [10]. [c.139]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология