Цистин определение методом

Целый ряд исследователей получил аномально высокие значения для цистина. Определение проводилось по первоначальному варианту метода Фолина в дезаминированных или частично гидролизованных белках или в препаратах, гидролизованных в присутствии больших количеств углеводов. Поэтому к полученным таким образом данным следует относиться с большой осторожностью. [c.186]

Гемоглобин лошади, не содержащий цистина, представляет особый интерес, так как методом измерения поверхностного натяжения удалось показать [129], что его молекулярный вес равен 12 000. Гидродинамические методы определения дают молекулярный вес около 68 ООО, который при работе с растворами мочевины снижается примерно вдвое [345]. Если [c.176]

Таким образом, метод Шульца (определение цистина цинком и щелочным раствором свинца), опубликованный в 1898 г., можно, повидимому, считать первым количественным методом определения аминокислот в белках. Этот метод был действительно опубликован за год до выделения из белка цистина Мёр-нер и Эмбденом. [c.189]

Все нижеописанные видоизменения представляют попытку повысить специфичность этого метода определения цистина. [c.191]

ПОЛЯРОГРАФИЧЕСКИЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИСТИНА (БРДИЧКА [130, 131]) [c.207]

Примечание. Этот метод, вероятно, имеет особое значение при определении цистина в препаратах белка, содержащих значительные примеси углеводов. [c.211]

Под заголовком Метод приводятся основные способы, применяемые для определения или расчета цистина и метионина. Так как методы определения серы однотипны, то они в таблицах не фигурируют. В связи с тем, что при определении серы по методу [c.218]

Полярографический метод особенно удобен при определении содержания металлов в сплавах, анализе минералов, руд и примесей металлов в различных препаратах. Он применяется также для количественного определения многих органических веществ, способных к восстановлению или окислению, содержания кислорода в технических газах и т. п. Ошибка при полярографическом определении различных веществ не превышает 2—5%, если их содержание в пробе колеблется в пределах от 10 до 10 моль/л. В некоторых случаях чувствительность полярографического метода оказывается еще более высокой. Так, полярографически можно открывать и количественно определять соли платины, цистеин, цистин и другие органические соединения, содержащие группы — SH и — NH2, если их концентрации составляют всего лишь 10" мольЫ. В присутствии платины волна водорода начинается [c.334]

Поллард и Чибнэл [524] производили гидролиз белка трав, применяя 20 i H l (в течение ночи) и пепсин, трипсин и эреп-син. Выходы цистина, определенного очень специфическим методом Салливана, были вполне сравнимы. Однако после 20 час. гидролиза с 8 н. H-.-SOi обнару/1сивается только 84 < ожидаемого цистина. [c.186]

НитроируСсид Натрия образует с метионином и гликоколлом красный нигмент. Если вести реакцию в сильно щелочной среде, то присутствие других аминокислот (гистидина и триптофана) не влияет на образующуюся окраску. Однако присутствие значительных количеств цистина препятствует определению. Метод применим к белковым гидролизатам. [c.163]

Если же принять, что в частице казеина содержится 2 остатка цистина, то молекулярный вес будет равен 8000x2=16 000. Эта величина имеет тот же порядок, который получается при определении ее физическими методами. Молекулярная формула казеина в таком случае будет 7ogHJJзo022 NJ8(,S PJ. [c.389]

При учете локализации S-S-мостика конформационный анализ цистин-содержащего фрагмента природного олигопептида или белка может быть ограничен рассмотрением его состояний только с замкнутыми формами основной цепи. Значительное сокращение объема вычислительных работ не сопровождается при этом снижением требований к строгости рещения задачи. В этом случае для пептида определенной длины необходимо располагать набором соответствующих циклических структур с известными геометрическими и энергетическими характеристиками. Он может быть получен путем количественной оценки стерической и энергетической предрасположенности всех возможных конформаций модельного пептида того же размера ys -(Ala) 2 ys" к образованию дисульфидной связи. В работах В.З. Спасова и Е.М. Попова [106, 107] оценены конформационные возможности модельных олигопептидов с числом остатков л от двух до шести. При большей длине цепи с концевыми остатками ys предложенный метод становится малоэффективным. [c.326]

Эта реакция не пригодна для отщепления С-концевых остатков пролина, так как они не образуют тиогидантоин, остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот, которые образуют циклические ангидриды, а не тиогидантоины (аспарагин и глутамин, наоборот, дают тиогидантоины [301]), а также остатков серина, треонина, цистина, аргинина и лизина [19, 301], которые неустойчивы при циклизации или регенерации аминокислоты из тиогидантоинового производного. Таким образом, этот метод находит весьма ограниченное применение для прямого определения строения пептидов и белков. Для определения С-концевого остатка по разности [107] реакция может оказаться более полезной, но ее все же нельзя использовать для определения аспарагиновой и глутаминовой кислот и пролина. Однако путем микробиологического анализа [107], специфичного для остатков /-аминокислот, эти аминокислоты могут быть определены по потере оптической активности на 50% вследствие рацемизации в том случае, когда они являются С-концевыми. [c.247]

По сравнению с оптическими методами определение радиоактивности представляет собой более чувствительный метод установления присутствия небольших примесей изомеров. Метод разделения является, вероятно, общим для меченых а-аминокислот, а также других рацемических соединений (см. синтез цистина-3,3 -Са ). Способ расщепления в общих чертах описан Томасом [8] и Гильваргом [9] и подробно изложен Peno [10]. [c.246]

Другой способ удаления воды рекомендован Зомзели и др. [131]. Основываясь на ранее описанной методике [57], авторы добавляли к кислому этанольному раствору кеталь, полученный из соответствующего спирта и ацетона (диалкоксипропан). Кеталь удаляет воду, используя ее на расщепление до спирта и ацетона. Однако, согласно некоторым данным [19], ни метод Джонсона и др. [42] с использованием НС1 вместо НВг, ни последняя методика [131] не годятся для получения н-амиловых эфиров. Применение кислых ионообменных смол [77] также не привело к удовлетворительным результатам. Количественное образование н-амиловых эфиров идет лишь при более высокой температуре и при введении в смесь газообразного НС1 [19]. Превращение аминокислот в высшие эфиры затруднено тем, что определенные аминокислоты, такие, как цистин, очень плохо растворимы в спиртах, насыщенных НС1. н-Бутиловые эфиры были приготовлены [53] переэтерификацией [c.320]

В. Л. Кретович и А. А. Бундель разработали быстрый метод определения аспарагиновой и глютаминовой кислот, который основан на том, что активированный, подкисленный оксид алюминия адсорбирует аспарагиновую, глютаминовую кислоты и цистин. Другие аминокислоты, которые проходят через хроматографическую колонку, этим адсорбентом не задерживаются. Цистин вымывают из колонки дистиллированной водой, насыщенной H2S (цистин при этом восстанавливается в цистеин, а оставшиеся дикарбоновые кислоты последовательно элюируют). Установлено, что глютаминовая кислота, адсорбированная на AI2O3, при элюировании слабым раствором кислоты быстрее передвигается по колонке, чем аспарагиновая. В полученных элюатах определяют азот методом Кьельдаля. [c.23]

Для получения чистой культуры и определения токсигенности подозрительные колонии микроскопируют (мазки окрашивают по Граму, Нейссеру и другими методами), пересевают на сывороточную среду и в чашку с фосфатно-пептонным агаром (средой Илека). Чистые культуры сеют в среды пестрого ряда (глюкоза, сахароза, крахмал), среду с цистином для обнаружения цистина-зы (проба Пизу), среду с мочевиной, среду с пиразинамидом и др. (табл. 2.20). [c.201]

Косвенное определение сульфгидрильных групп в белках основано на соединении с л-хлормеркурбензоатом натрия и полярографическом восстановлении [90, 174]. При pH 7 восстановление продукта реакции происходит при более отрицательном потенциале полуволны, чем восстановление п-хлормеркурбензоата. Высота первой волны пропорциональна концентрации в области 0,001—0,0001 М. Метод был проверен на цистеине, альбуминах и глобулинах. Цистин, метионин, кислород, иодид и гидросульфит мешают анализу. [c.394]

По методу Брдички [37, 38] в аммиачном растворе, содержащем двухвалентный кобальт и NH4 1 в качестве буферной добавки, получают каталитическую волну при потенциале —1,6 в для веществ, содержащих цистеиновые или цистиновые ядра. Этот метод использовали для определения цистина, цистеина и белков или их гидролизатов [37, 38, 92, 147, 289]. Можно определять количества цистеина, не превышающие [c.396]

Обзор методов определения меркаптанов был опубликован Уайлдом [128]. Их можно определять при помощи 18-фосфорновольфрамовой кислоты, которая восстанавливается до синих продуктов тиосоединениями, а также рядом других соединений. Путем снижения pH раствора до 5 и тщательного контроля времени можно устранить мешающее влияние многих менее энергичных восстановителей. Реагент Фолина [24], содержащий 18-фосфорноволь-фрамовую кислоту, применяли для фотометрического определения цистеина, цистина и аналогичных веществ [661, в том числе других сульфгидрильных и дисульфидных соединений [97, 102[. Метод неселективен. Обзор других реагентов для определения сульфгидрильных групп, включая феррицианид двухвалентного железа, феррицианид двухвалентной меди, 2,3,5-трифенилтетразолийхлорид и бруцин и персульфат калия, был выполнен Фрейтагом [26]. [c.329]

Таким образом, для чисто химических или физико-химических исследований основным требованием является точность для широкого обзора в области пищевых белков самое первое, что нужно, это — получить возможно больше материала по присутствию и содержанию незаменимых аминокпслот. В нашей практике часто встречалось, что пищевой белок является хорошим источником больщинства незаменимых аминокислот, которые легко определить (именно цистин, метионин, аргинин, гистидин, лизин, тирозин и триптофан), и все же неполноценен в отношении других аминокислот, для выявления которых нет простых и точных способов определения. Если в таких случаях руководствоваться только анализами первой группы аЛтинокислот, то можно было бы впасть в серьезную ошибку при биологической оценке данного белка. Поэтому только полный анализ аминокислот, имеющих значение для питания, может дать правильную и полноценную картину исследуемых продуктов, даже если определение отдельных аминокислот будет произведено не абсолютными, а скорее сравнительными методами. [c.9]

Осторожная обработка гидролизата активированным углем (Дарко, S—51) позволяет получить более чистые фосфорновольфрамовые соли без потерь оснований или только с небольшими потерями. Хотя з настоящее время известно, что кроме оснований и цистина фосфорновольфрамовая кислота осаждает небольшие количества других аминокислот, тем не менее этим методом часто пользуются для предварительного исследования, перед определением днa пiнoки лoт более точными способами. [c.37]

Было предположено компенсировать тормозящее действие аммиака и других веществ вычерчиванием кривой кажущегося содержания аргинина во взятом для анализа количестве белка [127]. Полагают, что при экстраполяции кривой до нулевой концентрации белка можно получить истинное значение аргинина. Такой общий метод был применен ранее Краусом и Ра-гинсом для триптофана и Бёшиллом, Лемпитом и Бекером для определения цистина. [c.53]

Авторы полагают, что разложение цистина до сульфида по Шульцу можно использовать для колориметрического определения цистина. Выделяющийся при подкислении сероводород дает с диметилфенилендиамином метиленовый голубой. Этот метод может иметь особое значение при определении цистина в присутствии больших количеств углеводов. [c.189]

Эта реакция между цистеином и фосфорновольфрамовой кислотой послужила Фолину и Люнэй [231] основанием для разработки в 1922 г. метода количественного определения цистина в растворе. Они воспользовались наблюдением Гефтера [285], что цистин восстанавливается до цистеина сульфитом натрия. Фолин полагал, что эта реакция протекает количественно, но Кларк [165] показал, что она идет согласно следующему уравнению [c.190]

Для определения цистина и цистеина Кассель и Бранд [356 также пользовались реакцией Винтерштейн — Фолина в фикации Лагга и вели отсчеты в фотометре Цейсса. Они употребляли вдвое меньшее количество реактивов, чем Лагг [425]. Развитие окраски проводилось при 25" в течение 8 мпн. вместо 7 мин., предложенных автором метода. [c.194]

История вопроса. В 1929 г. Ф. Г. Гопкинс сделал интересное наблюдение, что тиольные производные (восстановленный глю-татион) осаждаются количественно небольшим избытком закиси меди из разбавленного раствора серной кислоты (0,5 н.— 1 н.). Это открытие послужило основанием для следующих методов определения цистина. [c.203]

Г. 30МЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИСТИНА И ЦИСТЕИНА (БАРНШТЕЙН 39]) [c.207]

Истори.ч вопроса. В 1933 г. Брдичка [130] сообщил о том,, что, пользуясь полярографом с капельным ртутным катодом, можно в присутствии солей кобальта обнаружить небольшие количества белка. Оказалось, что в реакцию вступает дисульфид-ная группа цистина. Это открытие послужило основанием для разработки метода определения цистина и других дисульфидов в очень малых количествах белкового гидролизата [131]. [c.207]

Опыт показал, что исходный гидролиз белков до аминокислот является одним из серьезных препятствий при проведении анализа. За исключением спектрографических методов для ароматических а.минокислот (см. гл. 1J) и некоторых реакций на цистин (см. гл. III), имеется лишь один общий принцип исследования белков без предварительного гидролиза, при помощи которого можно будет достигнуть достаточной точности. Это наблюдение Видла и Татума Г60], нашедших, что под влиянием рентгеновских лучей возможно вывести определенные штаммы neurospora, которые нормально развиваются на полноценной питательной среде, но почти не растут, если в среде нехва ает одного ингредиента. Удалось среди 2000 выведенных штаммов выбрать три таких. мутанта. Один из них не обладал способностью синтезировать пиридоксин, другой — тиамин, а третий не был в состоянии обойтись без добавления л-аминобензойной кислоты. Если бы удалось вывести подобные штаммы из этого или другого вида микроорганизмов, которые реагировали бы таким же образом на определенные аминокислоты в неизмененной белковой молекуле, то открылся бы путь для создания нового метода анализа. [c.350]

Несколькими исследователями разработаны ускоренные методы хроматографического анализа аминокислот не только для обнаружения многих врожденных дефектов метаболизма, о которых упоминалось выше, но и для быстрого анализа многих аминокислот физиологических жидкостей. Так, Льюис [79] использовал короткую ионообменную колонку для определения метионина и цистина. Для разделения при комнатной температуре была использована колонка размером 40X1.5 см, заполненная смолой зеокарб-225 (>200 меш) пробу предварительно окисляли. При скорости течения буферного раствора 200 мл/ч цистеиновая кислота элюируется при объеме элюата 36—40 мл. [c.13]

Одноколоночный метод анализа, смола иЯ-40. Поддерживая постоянными температуру колонки, концентрацию ионов натрия и цитрат-ионов и скорость течения буфера, варьируют величину pH первого буфера. Понижение pH с 3,545 до 3,515 ухудшает разделение треонина и серина (отношение высоты впадины к высоте пика равно 0,07 определение этого понятия см. в разд. 1.5.1). Цистин элюируется из колонки медленнее, но разделение серина и глутаминовой кислоты улучшается приблизительно до 0,19. Увеличение pH второго буфера с 4,25 до 4,30 при прочих неизменных условиях анализа ухудшает разделение изолейцина и лейцина. При увеличении pH третьего буфера гистидин элюируется быстрее. [c.41]

Применение. В электронной микроскопии для прокраски структур с целью увеличения контрастности исследуемых белковых компонентов клеток и тканей [1—4]. В гистохимии для определения цистина и цистеина в тканях Пирс, 94]. и выявления сульфатов по методу Макаллума. [c.354]

Другая цель качественного органического анализа состоит в открытии определенного органического вещества в какой-либо смеси продуктов. Эта задача, по причине чрезвычайного разнообразия и большой изменяемости органических соединений, сопряжена со значительными трудностями, и здесь нет возможности установить точных общих правил, как в анализе неорганическом [4, с. 139]. Происходило это потому, что методы неорганического анализа для разделения или осаждения ионов практически не могли найти применения в органическом анализе. Правда, существует, казалось бы, некоторая аналогия между качественными реакциями на неорганические ионы и реакциями на определенные функциональные группы в органических соединениях. Но, во-первых, органические реакции вообще менее специфичны и избирательны во-вторых, идентификация какой-либо функциональной группы редко дает представление вообще о соединении, скорее она может быть использована для группового анализа, для установления, к какому классу соединений можно отнести испытуемое вещество. Присутствие некоторых функциональных групп с трудом можно было установить химическими методами исследования, а физические методы еще не были в достаточной степени разработаны. Тем не менее в конце аналитического периода истории органической химии, как это видно из цитированного руководства Жерара и Шанселя, имелась уже некоторая система в вещественном качественном анализе, позволяющем идентифицировать определенные органические соединения, особенно имеющие практическое значение, и в первую очередь для медицины. В этом руководстве указаны, например, способы идентификации органических оснований, или алкалоидов (анилина, никотина), большой группы собственно алкалоидов (морфина, наркотина, стрихнина, хинина и др.), органических кислот (синильной, уксусной, муравьиной, бензойной, щавелевой, виннокаменной, лимонной и яблочной), а также группы углеводов, белковых веществ, мочевой кислоты, карбамида (мочевины), креатина, цистина, ксантина и т. д. [c.290]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология