Этерификация аминокислот, пептидов

В данном методе в отличие от рассмотренных выше пептиды сначала защищают и затем, за некоторыми исключениями, непосредственно подвергают ГХ. Аминогруппы защищаю остатком ТФА, а карбоксильную группу блокируют в процессе этерификации метанолом. На летучесть ТФА-соединений уже неоднократно указывалось с помощью возгонки в высоком вакууме было достигнуто разделение соответствующих производных аминокислот, ди-, три- и более крупных пептидов [107]. [c.341]

Свободные трет-бутиловые эфиры большинства аминокислот представляют собой устойчивые жидкости, перегоняющиеся без разложения. Они не претерпевают самоконденсации [48] даже при хранении при комнатной температуре (о самоконденсации грет-алкиловых эфиров глицина см. [2395]) это является еще одним достоинством грег-бутиловых эфиров в дополнение к их способности легко расщепляться под действием кислот. Они весьма устойчивы к гидразинолизу и аминолизу [48] и значительно труднее омыляются щелочью, чем соответствующие метиловые и этиловые эфиры. Благодаря этим ценным свойствам грег-бутиловых эфиров их введение в химию пептидов значительно расширило возможности синтеза пептидов, содержащих, в частности, остатки аминодикарбоновых кислот. В то же время не следует считать, что р-трег-бутиловые эфиры аспарагиновой кислоты всегда устойчивы к действию гидразина и щелочи [2017а]. и-трет-Бутиловые эфиры аминодикарбоновых кислот являются весьма удобными производными для синтеза соответствующих а-пептидов [1173, 1974, 1975, 2007, 2019, 2598, 2598а], и, наоборот, а-грет-бутиловые эфиры можно с успехом использовать для получения со-пептидов аминодикарбоновых кислот [2274, 2281, 2283]. трег-Бутиловые эфиры настолько устойчивы к действию щелочей, что в их присутствии можно проводить гидролиз нитрильной группы до соответствующего амида [1419]. Синтезы трет-бутиловых эфиров аргинина, N -зaмeщeннoгo аргинина, гистидина и триптофана до настоящего времени не описаны. Этерификация серина и треонина с помощью изобутилена сопровождается алкилированием гидроксильных групп с образованием 0-эфира [228] правда, это не приводит к каким-либо осложнениям, поскольку простые трет-бутиловые эфиры расщепляются с такой же легкостью, как и соответствующие сложные эфиры. Напротив, при синтезе пептидов, содержащих остатки оксиаминокислот, простые трет-бутиловые эфиры иногда целесообразно использовать в качестве 0-защитной группы [230, 457, 1962 [c.95]

В общем случае это достигается этерификацией карбоксильной группы, подлежащей защите. Для получения метилового или этилового эфира обрабатывают аминокислоту метанолом или этанолом, насыщенным НС1 (этерификация по Фищеру). Однако обычно предпочитают эфиры, гидролиз которых легко провести в мягких условиях. Хотя эфиры омыляются основаниями гораздо легче, чем пептиды (поскольку алкоксиды — лучщие уходящие группы), используемые для этого щелочные условия нельзя применять для деблокирования полипептидов. Использование бензи-ловых эфиров позволяет удалять защитные группы при нейтральных условиях с помощью каталитического гидрирования. Бензи-ловые эфиры синтезируют из кислоты и бензилового спирта в присутствии кислоты или тиоиилхлорида (который переводит спирт в сульфохлорид, и уже последний замещается кислотой), [c.77]

В синтезах пептидов с применением метиловых эфиров для защиты концевой карбоксильной группы могут встретиться затруднения в омылении эфира без сопутствующего частичного гидролиза пептидных связей. Пб этой причине для защиты карбоксильной группы часто прибегают к бензиловым эфирам, которые можно легко получить прямой этерификацией, применяя бензолсульфокислоту [402] или полифосфорную кислоту [403] в качестве катализатора (см. также [2]). Бензиловые эфиры можно снова превратить в свободные карбоновые кислоты каталитическим гидрогенолизом [2, 64], действием металлического натрия в жидком аммиаке [404] или же кислотным или щелочным омылением. Следует отметить, что неги-дролитически, действием бромистого водорода в уксусной кислоте, можно отщепить группу ЫНСООСНаСеНв, но не НСООСНгСвНв [120]. Защита карбоксильной группы в аминокислотах и пептидах превращением в бензиловые эфиры, несомненно, тесно связана с применением карбобензилоксигруппы для защиты аминогрупп (см. раздел Уретановые производные , стр. 209). Обе защитные группы обычно отщепляются при действии одних и тех же реагентов, за исключением одного упоминавшегося метода. [c.245]

Эфиры аминокислот и пептидов получают в очень мягких условиях из их цезиевых солей реакцией с алкилгалогенидами [207]. Одностадийный метод этерификации аминокислот первичными, вторичными и третичными спиртами в присутствии имидхлорида, полученного из диметилформамида, описал Штадлер [208]. [c.73]

Пептиды недостаточно летучи, чтобы их можно было изучать епосредственно с помощью масс-спектрометрии электронного удара. Первые попытки применения масс-спектрометрии для определения последовательности включали предварительное ацилирование аминогрупп и этерификацию карбоксильных групп. Масс-спектры таких производных показали, что расщепление происходит с обеих сторон карбонильных групп. Расщепление связи С—N приводит к ионам ацилия —ЫНСНДС=0+, в то время как расщепление связи С—С дает альдиминиевые ионы —+NH= HR. Это основная тенденция кроме того, происходит дополнительная фрагментация боковых групп некоторых аминокислот, включая валин, лейцин, аспарагин, серин, треонин и цистеин. [c.278]

Сульфокислоты. Благодаря работам Соколовской и др. ([2157, 2158] ср. [2524]) метод с использованием бензолсульфо-. хлорида нашел широкое применение в пептидном синтезе. Брюстер и Сиотти [359] с помощью бензолсульфохлорида в пиридине осуществляли реакцию этерификации аминокислот они предложили механизм реакции через стадию образования симметричного ангидрида. Тем не менее при синтезе пептидов бен-золсульфохлоридным методом выходы всегда превышают 50%, поскольку кислота, выделяющаяся в процессе ацилирования, вступает в реакцию с еще присутствующим бензолсульфохлори-дом, вновь образуя смешанный ангидрид (32) [c.141]

Способы защиты карбоксильной группы. Карбоксильную группу обычно защищают путем этерификации, а после проведения синтеза освобождают карбоксил щелочным гидролизом. Чаще всего применяются метиловые и этиловые эфиры аминокислот и пептидов. В настоящее время все шире используются бензиловые эфиры аминокислот (см. стр. 780), преимущество которых состоит в том, что удаление бензильного остатка может быть достигнуто не только омылением, но и более мягко— каталитическим гидрированием [c.802]

Аминокислоту, которая будет С-концевым остатком в синтезируемом пептиде, присоединяют к полимеру через ее карбоксильную группу при этом аминогруппа защищена. Эта защищенная аминокислота присоединяется за счет образования сложноэфирной, т. е. ковалентной связи, а не за счет ионного обмена, как ошибочно полагают некоторые (см. рис. 3). Чтобы осуществить эту реакцию этерификации между аминокислотой и полимером, последний необходимо прежде всего сделать реакционноспособным. В распоряжении химии полимеров имеются удобные методы такой активации. Бензольные кольца сополимера сти- рола и дивинилбензола можно хлорметилировать по реакции Фриделя — Крафтса, используя в качестве [c.25]

Бензиловые эфиры простых N-защищенных аминокислот получают сравнительно редко, так как их использование в синтезе пептидов в качестве аминокомпонента должно предусматривать снятие N-защитной группы. Бензиловые эфиры указанного типа обычно получают путем этерификации N-защищенных аминокислот бензиловым спиртом в присутствии каталитических количеств толуолсульфокислоты [149, 596], хлористого сульфурила [2278] или эквивалентного количества хлористого тионила [1315] в бензоле или смжл-тетрахлорэтане. Кроме того, предложены методы с использованием фенилдиазометана [1911а, 2163], а также реакции серебряных солей N-защищенных аминокислот с бензилгалогенидами [759]. [c.98]

Дорман и Лав [22] превращали хлорметилированный полимер в сульфониевую соль реакцией с диме-тилсульфидом. Если соль грет-бутилоксикарбонил-аминокислоты непродолжительно нагревать с этим сульфоний-полимером, происходит количественная этерификация аминокислоты полимером. Хотя синтез пептидов на таких полимерах пока еще не описан, высокий выход подобной этерификации делает ее привлекательной, особенно при использовании очень дорогих (например, радиоактивных) аминокислот. [c.29]

Превращение пептидов в Ы-ТФА-метиловые эфиры происходит совершенно аналогично аминокислотам сначала их переводят в хлоргидраты метиловых эфиров, а затем трифторацетилируют. Если индивидуальные вещества не собираются определять количественно (в связи с тем, что расщепление различных пептидных связей зависит и от метода деградации, и от самой последовательности), то желательно исчерпывающее превращение, так как при этом образуется меньше продуктов расщепления. В ходе этерификации следует соблюдать предосторожности, особенно при работе с ферментативным гидролизатом, чтобы предотвратить дополнительное расщепление лабильных связей под действием кисло- [c.346]

Эфиры карбобензоксиаминокислот имеют большое значение как исходные соединения для синтеза пептидов азидным методом. Их можно приготовить этерификацией карбобензоксиаминокислот, однако лучше получать карбобензоксилированием эфиров аминокислот. Реакцию можно проводить в различных условиях в хлороформе в присутствии триэтиламина [1052], в этилацетате или хлороформе с окисью магния [774, 2148], в гетерогенной смеси хлороформ — вода в присутствии окиси магния [201] или едкого натра и карбоната натрия [86, 192]. Эфиры карбобензоксиаминокислот в ряде случаев плохо кристаллизуются, однако и без дальнейшей очистки их можно использовать для получения гидразидов [201, 2148]. Во время карбобензоксилирования часто наблюдается образование побочных продуктов реакции, обусловленное присутствием избытка карбобензоксихлорида избыток последнего разрушают добавлением пиридина. Образующийся при этом хлористый бензил необходимо удалить перед получением гидразида [1957]. [c.53]

Бензиловые эфиры аминокислот. Использование бензиловых эфиров в карбобензокси-методе синтеза пептидов имеет то преимущество, что обе защитные группы можно удалить одновременно каталитическим гидрированием. Однако при прямой этерификации с применением бензилового спирта и минеральной кислоты получаются низкие выходы. По методу Эрлангера и Бранда [15] (ошибочно приписываемому Максу Бергманну) аминокислоту превращают в N-карбоксиангидрид (2), который с бензиловым спиртом в присутствии хлористого водорода дает бензиловый эфир (3). В первоначальной методике N-карбоксиангидрид (оксазолидиндион-2,5) получали косвенным методом, однако последующие исследователи использовали реакцию аминокислоты с Ф. [16—18]. Обработка ангидрида (2) в сухом диоксане НС1 или НВг дает аналитически чистый галоген-гидрат ацилгалогенида [18]. [c.80]

Введение грет-бутилоксикарбонильной защитной группировки в эфиры аминокислот и пептидов можно осуществить путем взаимодействия этих эфиров с п-нитрофениловым эфиром трет-бутилугольной кислоты [2020] в пиридине или еще лучше с соответствующим азидом [1103, 2036]. грет-Бутилоксикарбонилами-нокислоты нельзя этерифицировать спиртами в присутствии сильных кислот, поскольку их защитная группа очень чувствительна к действию последних [49, 1487] однако возможна этерификация с помощью диазометана [2022]. [c.69]

Виниловые эфиры N-защищенных аминокислот получены методом переэтерификации с винилацетатом в присутствии хлористого палладия (ср. [2109, 2110]). По-видимому, их можно использовать для реакций конденсации с пространственно экранированными аминокислотами. Во время аминолиза виниловых эфиров отщепляется ацетальдегид, который можно связать, например, малоновым эфиром. До настоящего времени описаны главным образом виниловые эфиры трифторацетиламинокислот. Эти эфиры реагируют с эфирами аминокислот с образованием соответствующих пептидов при комнатной температуре реакция продолжается 10 час, а при нагревании до 65° — 40 мин. С помощью газовой хроматографии установлено, что во время этерификации и последующей реакции конденсации при синтезе TFA-L-Val-L-Val-OMe методом виниловых эфиров происходит незначительная рацемизация [2502] (относительно аминолиза пропаргиловых эфиров см. [266]). [c.151]

Метиловые эфиры пептидов можно получить в результате обработки их ацилпроизводных диазометаном, путем их исчерпывающего метилирования [290], а также обработки тионилхло-ридом в метаноле или метанольном раствором НС1 [282, 291]. В последнем случае этерификация сопровождается частичным расщеплением пептидных связей [292]. Трифторацетилирование пептидов следует проводить при значительно более низкой температуре, чем соответствующую обработку аминокислот [293, 294], или использовать в этих целях вместо ангидрида трифторуксусной кислоты ее метиловый эфир и проводить реакцию в метаноле в присутствии триэтиламина в качестве катализатора [253]. Перечень некоторых производных пептидов и подробные методики их получения приведены в руководстве Кнаппа [187]. [c.83]

Хотя из литературных данных известно, что изучались различные химические методы определения С-концевых аминокислот [206], ни один из этих методов не обнаружил достаточно удовлетворительных результатов, которые давали бы основание к его широкому использованию. Поэтому наибольшее распространение получил способ, основанный не на химической, а на ферментативной реакции с карбоксипептидазой — ферментом, реагирующим лишь с теми пептидами, которые содержат свободную карбоксильную группу. Поскольку рассмотрение ферментативных реакций выходит за рамки настоящего раздела книги, реакция с карбоксипептидазой в данном изложении не описывается. Следует отметить, однако, что проблема развития химии белка настолько важна, что вполне оправданы постоянно продолжающиеся исследования, направленные на поиск и разработку удобных и с широкими возможностями применения химических методов. Было показано, что для установления последовательности аминокислот с С-конца белковой молекулы по крайней мере ограниченное применение могут найти три разных химических метода, так как они дают результаты, подтверждающие данные, получающиеся при использовании карбоксипептидазы. Речь идет о гидразинолизе, этерификации с последующим восстановлением сложноэфирной группы на конце молекулы в спиртовую, а также о реакции с неорганическим тиоци-анатом. [c.376]

Защищенную аминокислоту вводят в реакционную смесь в виде соли. Для этого необходимо подобрать такое основание, которое давало бы соль, растворимую в органическом растворителе, применяемом при этерификации. Хотя триэтиламмониевые соли дают удовлетворительные выходы этерифицированных защищенных аминокислот, применение третичного амина является причиной одной побочной реакции, которую следует иметь в виду. Хлорметилированный полимер может реагировать с триэтиламином, образуя четвертичные триэтиламмониевые группы на носителе (рис. 4). Эти группы — сильные основные ионообменные центры, и хотя большинство из них в процессе синтеза, вероятно, остается в хлоридной форме, имеются некоторые доказательства того, что небольшие количества защищенных аминокислот могут удерживаться этими группами на полимере. Об этом свидетельствует тот факт, что неочищенный продукт, полученный в конце синтеза, обычно содержит в качестве примеси к нужному пептиду небольшое количество аминокислоты, которую вводили последней. Если вслед за последней конденсацией провести стадию деблокирования с использованием хлористого водорода, то эта свободная аминокислота в неочищенном прр- [c.27]

С целью сведения к минимуму реакции образования четвертичных аммонийных групп Мэррифилд предложил применять при реакции этерификации немного менее 1 эквивалента триэтиламина. Присутствие четвертичных аммонийных групп означает также, что для определения количества первой аминокислоты на носителе нельзя использовать элементарный анализ на азот. Для этой цели, как и для всего аналитического контроля синтеза, абсолютно необходимы другие подходящие методики или прибор количественного аминокислотного анализа. Было показано, что элементарный анализ не обеспечивает определения чистоты пептидов, и многие опытные химики, занимающиеся пептидами, больше не тратят бесполезно свое время и силы на выполнение таких анализов. Единственным удовлетворительным методом определения количества аминокислоты на носителе является кислотный гидролиз с последующим количественным аминокислотным анализом. Гидролиз нужно проводить в растворителе, который смачивает полимер и обеспечивает его набухание. Для этой цели обычно используют смесь эквивалентных количеств диоксана и концентрированной соляной кислоты. [c.28]

I Еще более важным, чем этерификация кислородсодержащих I соединений, является трифторацетилирование азотистых соеди-I нений. Этим способом можно временно блокировать амино-I группу IB аминокислотах, что является важным вопомогательным I средством при синтезе пептидов. Для ацилирования применяют I безводную трифторуксусную кислоту [785] и даже чаще ее ангидрид [72, 782, 783], Для той же цели служит и S-этиловый эфир трифтортиоуксусной кислоты [671]. В то время, как этот эфир ацилирует в щелочной среде аминогруппу диаминокислот в 1)- лоложени1И, трифторуксусный аигидрид в трифторуксусной кислоте ацилирует преимущественно аминогруппу в а-положении [671, 782] [c.212]

Смотреть страницы где упоминается термин Этерификация аминокислот, пептидов: [c.97] [c.97] [c.386] [c.322] [c.148] [c.203] [c.277] [c.280] [c.302] [c.315] [c.229] [c.148] [c.198] [c.203] [c.249] [c.277] [c.280] [c.302] [c.315] [c.29] [c.78] [c.122]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология