Михаэлиса константа функция

Каждый член AF относится к обратимой побочной реакции с участием катализатора. Он выражается произведением концентраций и констант равновесия и является безразмерной величиной. Если интермедиат Боденштейна сам вовлечен в дополнительное равновесие, то соответствующи< член узнают по наличию константы Михаэлиса (или функции Михаэлиса). Существенной особенностью знаменателя в уравнении скорости, представляющем физическую модель, является то, что все входящие в него члены должны быть безразмерными. Конечно, знаменатель можно записать по-разному, но наиболее общепринятая форма записи —- это та, что приведена в последнем уравнении, где первый член — единица. При такой форме записи выявляется функция образования комплекса между катализатором и другими компонентами реакционной смеси, т.е. функция закомплексованности. Если знаменатель равен единице, это означает, что весь катализатор находится в свободном состоянии, т.е. [С] = [ ]q. Очень важен, конечно, второй член (iTj [А]), являющийся неотъемлемой характеристикой каталитического процесса поскольку он описывает образование активного комплекса между катализатором и одним из исходных реагентов. Каждый следующий член соответствует обратимой побочной реакции катализатора, в результате чего снижается действующая концентрация катализатора. [c.131]

Формально уравнением Михаэлиса — Ментен можно представить также и начальную стационарную скорость многостадийной реакции, в которой все стадии обратимы. Но в этом случае значения и окажутся весьма сложными функциями констант скоростей отдельных стадий. Подробная информация по кинетическому описанию сложных ферментативных реакций изложена в специальных руководствах. [c.108]

Величины каталитической константы и константы Михаэлиса как функции концентрации второго субстрата линеаризуются в [c.59]

Величины каталитической константы и константы Михаэлиса как функции концентрации второго субстрата линеаризуются в обратных координатах, при этом значение k JK не зависит от концентрации второго субстрата (рис. 2.18). [c.127]

Кинетические параметры У т — максимальная скорость и Кт(кят)— кажущаяся константа Михаэлиса ферментативной реакции— функции констант скоростей индивидуальных стадий (см. соотношения 5.10, 7.2, 7.3). Для раздельного определения этих параметров в общем случае нельзя использовать интегральные методы обычной неферментативной кинетики вследствие смешанного порядка ферментативных процессов. Например, метод Гуггенгейма (см. гл. 2) пригоден для обработки кинетики ферментативных реакций только в случае. т(каж)> [8]о или [Е]о>[8]о, т. е. только при наличии кинетики первого порядка по субстрату или продукту. [c.166]

Экспериментальная зависимость скорости реакции от начальной концентрации фермента является критерием диссоциативного механизма. Смещения равновесия в результате различного связывания субстрата димером и мономером приводит к отклонению от простого уравнения Михаэлиса вследствие того, что эффективная константа связывания К становится функцией локальных констант Михаэлиса для димера и мономера К, и начальной концентрации субстрата [c.480]

При постоянном потенциале + 150 мВ (относительно н.к.э.) и температуре 30°С электродная функция линейна до концентрации глюкозы 30 мМ с постоянной времени 30 с [9]. При низких концентрациях глюкозы (до 8,0 мМ) сигнал сенсора не зависит от pH в диапазоне pH 7,0-9,0, хотя при высоких концентрациях глюкозы такая зависимость наблюдается. С ростом температуры до 45 °С ток электрода увеличивался со скоростью 4,0%/град, при более высокой температуре происходит инактивация. Присутствие кислорода вызывает уменьшение генерируемого тока, поскольку кислород является естественным акцептором электрона для используемого фермента. Кажущаяся константа Михаэлиса для окисления глюкозы при помощи иммобилизованной этим способом глюкозооксидазы составляла 24 мМ. Поликарбонатная мембрана, помещенная на датчик, не влияет на значение i ,. Однако в случае диализной мембраны повышается до 74 мМ. При этом отклик системы из кинетически контролируемого становится диффузионно контролируемым, что можно использовать для расширения диапазона линейности. [c.233]

Из уравнения (128) следует, что величина обратной скорости является линейной функцией обратной концентрации субстрата, так как макс и постоянны для данной реакции. Это позволяет экспериментально определять константу Михаэлиса, измеряя скорость при разных концентрациях субстрата. На рис. 55 показано нахождение константы Михаэлиса по экспериментальным данным. Константа Михаэлиса имеет размерность концентрации моль л). Зная концентрацию фермента, можно вычислить к , к% и к . Например, в реакции [c.255]

Как известно константа Михаэлиса, даже в простейшем виде является функцией по крайней мере трех констант скорости, т. е. [c.46]

После образования комплекса Михаэлиса (Е5) происходит его распад с выделением первого продукта реакции — спирта — и образованием ацилированного фермента Е5. Последний в результате реакции с водой образует второй продукт ферментативной реакции — кислоту — и превращается в исходный фермент. Определяемая экспериментально Кт для холинэстераз представляет собой функцию четырех констант скорости к+х, к х, к+2 и к+ . При этом стационарная скорость реакции определяется уравнением Михаэлиса [78] [c.161]

Приведенные выше данные о величинах констант Михаэлиса для реакций, катализируемых холинэстеразами, не позволяют считать, что эти константы могут однозначно характеризовать сродство субстрата к ферменту — нередко низкие значения Кт (т. е. высокое сродство ) сочетаются с относительно невысокой скоростью реакции, и наоборот. Это вполне естественно, поскольку скорость реакции при прочих равных условиях есть функция не только константы скорости распада фермент-субстратного комплекса +2, но и константы Михаэлиса. Положение осложняется еще и тем, что последняя константа определяется не только но и другими константами. Таким образом, влияние как и влияние Кт, на скорость реакции зависит от соотношения величин констант скорости отдельных стадий процесса. В связи с этим в настоящее время предпринимаются попытки раздельного определения констант скорости известных стадий реакций, катализируемых холинэстеразой. [c.163]

Случай з ЛГ[А1 ] = 1. Практически это довольно редкий случай, когда константа равновесия ни мала, ни велика для того, чтобы можно было упростить уравнение (3-8). Тогда полезно свести выражение к / к 4- к2[А2]) к новой псевдоконстанте. Вводя константу Михаэлиса = (к + к2)/к (величину, обратную приведенной выше), обозначим ее как функцию Михаэлиса А ,так как она не постоянна, а зависит от А2. Используя это обозначение, уравнение (3-8) можно переписать в виде [c.61]

Экспериментальное исследование зависимости от So показало, что функция не линейна, а имеет вид, близкий к виду, заданному уравнением Михаэлиса с дополнительной, константой [c.80]

Все-таки следует иметь в виду, что для значительной части ферментативных реакций соблюдается не простая схема Михаэлиса с одним промежуточным продуктом, а речь идет о последовательных превращениях нескольких фермент-субстратных комплексов. Здесь простое уравнение Михаэлиса аппроксимирует более сложные кинетические уравнения, а определяемая на опыте максимальная скорость V и вычисляемая из нее величина оказываются сложной функцией констант скоростей отдельных процессов. В этих условиях величина [c.59]

Хорошо известны видовые различия первичных последовательностей белков, выполняющих одинаковую функцию. Более того, даже в одном организме имеется несколько различных форм белков, выполняющих одинаковые функции, но на разных этапах развития,—так называемых изоэнзимов. Такие различия первичных последовательностей не препятствуют выполнению основной функции, но обеспечивают количественную разницу параметров таких как константа Михаэлиса, ингибиторная константа, максимальная скорость (или, что то же, число оборотов фермента), скорость переноса и т. д. Эти параметры, в свою очередь, управляют образованием ДС. [c.256]

Когда имеется только один фермент-субстратный комплекс и все стадии связывания достаточно быстрые, параметр at в уравнении Михаэлиса — Ментен представляет собой просто константу скорости первого порядка для химического превращения комплекса ES в комплексе ЕР. В более сложных ситуациях at является функцией всех констант скорости первого порядка и не может быть отнесена ни к какому конкретному процессу, за исключением крайних случаев. Например, для механизма Бриггса — Холдейна, когда комплекс ЕР диссоциирует достаточно быстро, at = 2 [уравнение (3.10)]. Однако если диссоциация комплекса ЕР протекает медленно, то константа скорости этого процесса вносит вклад в параметр at и в предельном случае, когда скорость диссоциации ЕР значительно меньше скоростей химических стадий, параметр at будет равен константе скорости диссоциации. Из рассмотрения схемы (3.19) видно, что в этом случае at является функцией констант 2 и 3. Однако если одна из этих констант много меньше другой, at становится равной меньшей константе. Например, если 3 <. 2, то, согласно (3.22), at = 3. Из этого следует, что at не может превышать ни одной из констант скорости первого порядка для реакционного пути в прямом направлении и представляет собой, таким образом, нижний предел для констант скорости химических реакций. [c.115]

Кроме того, возможны и другие, параллельно протекающие реакции образования некоторых промежуточных продуктов. Но и в таких случаях уравнение Михаэлиса—Ментен оказывается справедливым, только представляет собой более сложную функцию констант скорости частных реакций. [c.83]

В. Кинетические методы. Поскольку степень потребления ацетата в пробе воды связана с копцентрацией субстрата, существует возможность определения функциональной зависимости аналогичной функции энзиматических реакций, описываемых уравнением Михаэлиса — Ментепа [31]. Соответствующий график позволяет определить кинетические константы, отражающие время превращения субстрата и его концентрации (Кб) при половине максимальной степепи потребления. Сравнение величины показателя Кз с соответствующей константой Михаэлиса невозможно, так как она включает также неизвестные количества субстрата, уже имеющегося в воде [36]. [c.249]

При выводе уравнения для электродного потенциала Нейджи и др. [511] предположили следующее а) скорость реакции не зависит от концентрации кислорода (экспериментально доказано, что насыщение раствора пробы кислородом не влияет на электродную функцию), т. е. концентрация кислорода в реакционном слое постоянна б) толщина слоя, в котором протекает реакция, очень мала и постоянна в) концентрация в объеме раствора постоянна, и на нее не влияют процессы, протекающие в ферментном слое г) скорость реакции (14.3) немногим меньше скорости реакции (14.1) (стационарное состояние устанавливается сравнительно быстро, это также подтверждено экспериментом) д) концентрация субстрата намного меньше, чем константа Михаэлиса е) величины активности и концентрации взаимозаменяемы. Если все эти условия выполняются, то справедливо следующее уравнение для электродного потенциала при постоянной концентрации глюкозы [c.174]

Из кинетических соображений следует, что график log V как функции pH отражает ионизацию группировок, влияющих на мономолекулярную стадию простого односубстратного механизма. Если же функцией pH является log V/Km, то, как опять-таки следует из кинетики (см. последний раздел гл. IV), график отражает влияние pH лишь на группировки, имеющие значение для комплексо-образования, т. е. на группировки либо свободного фермента, либо субстрата. Интересно, что по логарифмическим графикам изменения константь Михаэлиса можно выявить эффекты обоих типов (фиг. 23). [c.215]

Эта проблема весьма важна. Простое графическое представление зависимости констант Михаэлиса и максимальных скоростей в случае мультисубстратных систем может привести к грубым ошибкам в оценке величин рК. Это объясняется кинетической сложностью таких систем, вследствие чего константа Михаэ-ииса, например, оказы-рается сложной функцией многих констант скоростей. [c.216]

Эта аналогия вряд ли совсем случайна, тем более что в обоих случаях могут наблюдаться как нулевые, так и первые порядки в зависимости от значений констант и концентраций. По-видимому, дело здесь в сходстве внешних механизмов, выражающемся в том, что и там и здесь равновесно образуется промежуточное состояние и возможно полное заполнегше или поверхности или емкости энзима. Существенно также, что уравнение типа Михаэлиса довольно хорошо оправдывается при разложении перекиси водорода на платиновой черни. Однако не все ферментативные реакции подчиняются этому уравнению. Так, при упоминавшемся ранее разложении перекиси водорода в присутствии каталазы не получается линейной зависимости 1/г =/(1/с). Как видно из рис. ХП.9, нужны по меньшей мере две прямые — одна для малых, другая для больших концентраций, чтобы описать этот график линейными функциями. [c.353]