Камера для бумажной хроматографии

Когда фронт растворителя переместится на определенное расстояние (обычно 10 см), пластинку вынимают из камеры и высушивают. Разделенные вещества можно идентифицировать различными методами. Мерой скорости передвижения веществ, в бумажной хроматографии является — относительная величина, зависящая от условий определения. Хроматограмма дает лишь информацию о распределении пятен, так называемый рисунок пятен. [c.88]

Аппаратура для бумажной хроматографии. Основными элементами аппаратуры для БХ являются хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки и элюирования, пульверизаторы, лампы для облучения хроматограмм, приспособления для измерения / /, планиметры и денситометры для количественных определений. [c.353]

Аппаратура для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, сосуды для элюента, лампы для облучения хроматограмм и др. Хроматографические камеры значительно различаются по форме и размерам, и это в большой степени зависит от характера процесса хроматографирования (восходящее, нисходящее, круговое, двумерное, препаративное), На рис. 9.15 изображена камера для восходящей хроматографии, на рис. 9.16 — аппаратура для нисходящей бумажной хроматографии. [c.239]

Метод электрофореза на носителе во многом подобен методу хроматографии. Камера для электрофореза состоит из трех частей, двух электродных сосудов и расположенной выше подставки для носителя, например бумаги. Камеры должны быть плотно закрыты для предотвращения испарения растворителя. Носитель укладывают горизонтально, уровень растворителей в обеих электродных камерах должен быть одинаковым. Электроды, платиновый или графитовый, встроены в диафрагму. Вещество наносят на носитель в виде точек или полос. Место нанесения пробы зависит от предполагаемого направления движения. При движении разделяемых, веществ к аноду пробу наносят на катодную сторону, и наоборот. Для количественной и качественной оценки процесса разделения (проявление вещества и т. д.) применяют методы, используемые в бумажной хроматографии. [c.387]

На рис. 59 показаны некоторые из таких воздействии на градиент, отмечаемый в круговой бумажной хроматографии, а на рис. 62 иллюстрируются некоторые ситуации, отмечаемые в круговой (центробежной) тонкослойной хроматографии при работе с и-камерами. Как и предполагалось, количество растворителя в слое снижается при увеличении расстояния от центра пластинки. Создается типичный "антипараллельный градиент" (см. соответствующую главу), сжимающий пятна таким образом, что они преобразуются в эллипс. Профиль градиента оказывается довольно пологим при наибольщей скорости поступления растворителя в слой (порядка 1 мкл/с), но приобретает увеличивающуюся крутизну прн снижении скорости потока (показанный на рис. 62.а). Кривая, соответствующая скорости 1 мкл/с (показанная на рис. 62.6), представляет собой специальный случай (когда профиль идеально полог и находится на одном уровне) аналогичный график, приведенный на рис. 62.а, скошен вниз. Такое существенное различие объясняется тем, что эксперименты в случае а проводились при относительной влажности около 45%, а в случае б - 90%. При такой высокой влажности слоем улавливается столь много воды, что она частично вытесняется движущимся фронтом гидрофильного ацетона (в результате вода движется в виде бесцветного кольца впереди фронта растворителя). Поскольку вода перемещается по слою медленнее ацетона, следующий за ней растворитель замедляется кольцом воды, в результате чего объемный градиент выравнивается (см. также рис. 19). [c.166]

Как уже было сказано, при хроматографировании на закрепленных слоях в некоторых системах растворителей величины Rf одних и тех же веществ по краям слоя выше, чем в середине. Это так называемый краевой эффект возникает из-за недостаточного насыщения объема хроматографической камеры парами растворителя. Насыщение камеры обычными приемами, используемыми в бумажной хроматографии, приводит к хорошим результатам (разд. 2.5). Кроме того, часто применяют устройство, сводящее к минимуму объем камеры при этом малый объем очень быстро насыщается парами растворителя, растворитель не испаряется из слоя и поэтому краевой эффект и другие отклонения в подвижностях хроматографируемых веществ не имеют места. [c.99]

Если перечисленные способы обнаружения оказались неэффективными, необходимо пожертвовать частью слоя. Используется прием, заимствованный из бумажной хроматографии основную часть хроматограммы закрывают, оставляя открытыми узкие полосы по обеим сторонам. Эти полоски обнаруживают подходящим реагентом. Рекомендуют разграничивать эти полосы от основной части хроматограммы, чтобы предупредить возможное просачивание раствора реагента в основной слой. Если по ходу обнаруж ения хроматограмму необходимо нагревать, то закрытую часть слоя покрывают асбестовой, пластиной, а свободные боковые участки хроматограммы после опрыскивания обнаружителем нагревают под инфракрасной лампой. Чтобы быть уверенным в том, что зоны веществ, обнаруженные по краям пластинки, находятся на том же уровне по всей длине слоя, необходимо работать с качественными слоями, равномерно нагруженными на старте разделяемой смесью и проявленными в камере, насыщенной парами растворителя. Можно также пользоваться и таким приемом, при котором обнаруживают предварительную, вспомогательную хроматограмму, а полученные значения Яр переносят вслепую на препаративный слой. Этот способ, однако, требует строжайшего [c.137]

В последнее время в качестве носителя для неподвижного растворителя вместо колонки используют полоски или листы фильтровальной бумаги, не содержащей минеральных примесей. В этом случае каплю водного испытуемого раствора, например смесь растворов солей железа (П1) и кобальта, наносят на край полоски бумаги. Бумагу подвешивают в закрытой камере (рис. 56), опустив ее край с нанесенной на него каплей испытуемого раствора в сосуд с растворителем, например с н-бутиловым спиртом. Растворитель, перемещаясь по бумаге, смачивает ее. При этом каждое содержащееся в анализируемой смеси вещество с присущей ему скоростью перемещается в том же направлении, что и растворитель. По окончании разделения ионов бумагу высушивают и затем опрыскивают реактивом, например К4[Ре(СМ)д1, который образует окрашенное соединение с Ре -, Со - и другими ионами. Образующиеся прн этом зоны в виде окрашенных пятен позволяют установить состав смеси (рис. 57). Такой вид распределительной хроматографии называют бумажной хроматографией. [c.412]

Разделение веществ методом бумажной хроматографии можно осуществить следующим образом. Раствор, содержащий исследуемую смесь радиоактивных веществ, наносят в виде отдельных капель на так называемую стартовую линию , расположенную недалеко (на расстоянии 3—4 см) от края полосы хроматографической бумаги. После подсушивания этот край погружают в соответствующий растворитель, налитый на дно хроматографической камеры, причем стартовая линия должна быть расположена несколько выше поверхности растворителя (рис. 67). В качестве растворителей обычно используют полярные органические жидкости (алифатические спирты и кетоны с небольшим молекулярным весом, простые эфиры, а также хлороформ, трибутил-фосфат и т. д.) или смеси растворителей, насыщенные водой и органической или минеральной кислотой. В плотно закрытой хроматографической камере, атмосфера которой насыщена парами подвижного растворителя, последний под действием капиллярных сил поднимается вверх по листу бумаги. Как только растворитель достигнет стартовой линии, происходит перераспределение компонентов разделяемой смеси между подвижной и неподвижной фазами в соответствии с коэффициентами распределения каждого компонента. В результате смесь подразделяется на отдельные зоны, перемещающиеся с различной скоростью по потоку растворителя. Через определенное время (от 2—3 ч до нескольких суток — в зависимости от скорости перемещения фронта раствори- [c.194]

Рис. 67. Камера для бумажной хроматографии

Камера для нисходящей бумажной хроматографии. [c.300]

Хроматографическая камера для нисходящей бумажной хроматографии высотой 50 см и диаметром 30 см. [c.305]

Хроматографическая камера для восходящей бумажной хроматографии. [c.312]

Количественные анализы по определению концентрации аминокислоты в камерах ячейки вели методом бумажной хроматографии. Точность метода составляла 5% отн. [c.310]

Эксперименты по бумажной хроматографии проводили восходящим методом на полосках бумаги ватман № 1 длиной 20 см и шириной 1 см. Растворитель перед использованием приводили в равновесие с 3 н. соляной кислотой при этом хроматографическая камера насыщалась парами этой кислоты. После развития хроматограммы значения Rf определяли путем измерения активности полосы с помощью счетчика Гейгера, снабженного окошком в виде узкой щели. [c.237]

Камера для бумажной хроматографии (рис. 1). [c.77]

В качестве герметических камер могут быть использованы стеклянные аквариумы или стеклянные цилиндрические сосуды (например, вегетационные сосуды). Схема большой камеры для бумажной хроматографии показана на рис. 6. [c.26]

Рис. 7. Малая цилиндрическая камера для бумажной хроматографии

Техника бумажной хроматографии не сложна. Хроматографирование обыч-. но проводят в герметически закрытых сосудах или камерах, где поддерживается насыщенная парами растворителя атмосфера. Это предотвращает испарение растворителя с листов фильтровальной бумаги. Капля исследуемого раствора наносится на некотором расстоянии от края бумажной полосы. Подвижный растворитель наливают в ванночку, куда опускают конец бумажной полосы. Бумагу закрепляют так, чтобы она свободно провисала. Сосуд, в котором происходит хроматографирование, плотно закрывают и помещают в термостат на все время опыта. Колебания температуры на протяжении всего опыта не должны превышать 1,5 С. [c.353]

Бумажная хроматография обычно выполняется в двух вариантах восходящим и нисходящим движением растворителя. На рис. 145 показан общий ид простейшей камеры для получения нисходящей хроматограммы. [c.354]

Мол-сно получить хроматограмму и способом, который применяют в бумажной хроматографии, т. е. в верху камеры подвешивают лодочку с растворителем. Пластинка находится в [c.121]

Методика. Разделение катионов методом бумажной хроматографии проводят в закрытых камерах, чтобы избежать испарения растворителя с полоски бумаги. [c.172]

К бумажной хроматографии красителей обычно применимы закономерности распределительной хроматографии [1, 5]. Для проведения эксперимента необходимы подходящая хроматографическая бумага, система растворителей, камера для проявления хроматограмм, микропипетка и пульверизатор для опрыскивания реактивами с целью обнаружения бесцветных соединений. [c.70]

Вместо обычных пятен на бумаге можно получить концентрически расположенные кольца. Это достигается с помощью круговой бумажной хроматографии. Для ее получения из бумаги вырезают круг, в центр которого наносят каплю исследуемого раствора. В качестве камеры может служить небольшой эксикатор. Когда пятно высохнет, на круге вырезают небольшую полоску (рис. 42), которую отгибают, а круг укладывают на выступ в эксикаторе. Полоска при этом должна быть опущена в растворитель (на-сыщенйый. неподвижной фазой), налитый на дно эксикатора. Скорость поступления растворителя к центру круга можно регулировать изменением ширины вырезанной полоски. [c.161]

Предварительное насыщение слоя молекулами из газовой фазы (из атмосферы камеры) не является ни новинкой, ни специфичной особенностью тонкослойной хроматографии еше в бумажной хроматографии стандартным приемом считалось "уравновешивание" бумаги перед началом элюирования. При обеспечении- равновесия со всеми компонентами газовой фазы такое равновесное состояние оказывалось столь же сложным, как и состав самих подвижных фаз, обычно употреблявшихся в бумажной хроматографии. Бунгенберг, Де Джонг и Хогивин [162] бьши среди первых специалистов, обративших внимание на необходимость специального предварительного насыщения в бумажной хроматографии и пользовавшихся таким подходом для сглаживания градиентов, обусловленных расслоением подвижной фазы [c.107]

Прибор для нисходящего метода в закрепленном слое сорбента для хроматографирования на пластинках больших размеров, например 13x18 см, построен по типу приборов для бумажной хроматографии [87]. Хроматографирование проводят в стеклянной камере с притертой крышкой и подставкой из стекла или нержавеющей стали, на которую подвешивают лодочку, применяемую обычно в бумажной хроматографии. [c.36]

Разделение ведется в тонком слое сорбента (окись алюминия, кизельгур, крахмал и др.), наносимого на стеклянные пластинки в виде незакрепленного или закрепленного слоя (закрепление осуществляется при помощи гипса). Так же, как при бумажной хроматографии, капли растворов исследуемой смеси и чистых веществ — свидетелей наносятся на линию старта пластинки, затем пластинку помещают в наклонном положении в камеру С системой растворителей, которые, поднимаясь вследствие капиллярности слоя вверх по пластинке, перемещают нaнe ieн-ные вещества на то или иное расстоянне. После проявления (или — для окрашенных веществ — без него) определяют Л,f. [c.14]

После нанесения проб хроматографическую бумагу протягнвают до стартовой линии, не касаясь нанесенных проб, через 50%-ный раствор ДМФА в ацетоне или этаноле, находящийся в эмалированной кювете. Затем бумагу отжимают между листами фильтровальной бумаги и проделывают ту же операцию с другим ее концом. После этого в течение 10 мин испаряют на воздухе растворитель с поверхности бумаги, а затем последнюю помещают в герметично закрываемую хроматографическую камеру, насыщенную предварительно в течение ночи парами системы растворителей ДМФА — гексан. Разделяют методом нисходящей бумажной хроматографии до тех, пор, пока подвижный растворитель (гексан) не пройдет хроматографический путь, равный 40 см. Затем хроматограмму сушат на воздухе и проявляют. [c.303]

Мастер производственного обучения знакомит учашихся с практическими приемами работы при анализе восходящей бумажной хроматографии. На полоску хроматографической бумаги на расстоянии 4—5 см от нижнего края наносят несколько капель анализируемого раствора и помещают в камеру. В качестве камеры для узких полосок бумаги можно использовать стеклянный цилиндр с пробкой. На дно цилиндра наливают небольшое количество растворителя. Нижний конец бумажной полосы погружают в растворитель, а верхний закрепляют в пробке, где имеется специальный крючок. [c.233]

Рис. 1. Камера для бумажной хроматографии. Приготавливают спиртовоп раствор гептахлора с концентрацией 5 г/л и наносят на полоски хроматографической бумаги 0,01 0,015, 0,03 и 0,04 мл данного раствора, что соответствует 50, 70, 150 и 200 мкг гептахлора.

Учитывая ослабление интереса к бумажной хроматографии, мы рассмотрим только чаще всего употребляемую, доступную или простую аппаратуру для БХ. Более полное описание различных видов аппаратуры можно найти в рекламной литературе и в специальных монографиях по БХ (см., например, [50], а также список литературы в гл. 13). За последнее десятилетие аппаратура и техника БХ почти не совершенствовались. Некоторая работа в этом направлении проведена только Бущем и Кроушоу [19], ее мы обсудим ниже. Список аппаратуры для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, чашки для обнаружения и пропитки, сосуды для элюента, сушильные шкафы, лампы для облучения хроматограмм, приспособления для измерения Rf, а также планиметры и денситометры для количественных определений, ко-лировальные машины и т. д. [c.62]

Способы разделения жирных кислот в тонком слое сорбента. Так же как и в бумажной хроматографии, здесь различают восходящий, нисхо-дяндий и горизонтальный способ. Камерой может служить любой сте-КЛЯ1П1ЫЙ сосуд с плоским дном, который закрывают пришлифованным стеклом. Пластинку, установленную в камере под углом 15—20°, погружают на 5 мм в растворитель, налитый на дно сосуда. Для насыщения камеры на боковых стенках укрепляют полосы фильтровальной бумаги, опущенные одним краем в растворитель. Прибор для нисходящей хроматографии в закрепленном слое строят по типу прибора для бумажной хроматографии [104]. Пластинку укрепляют в раме из дюралюминия. Растворитель из специального сосуда поступает на пластинку и стекает с нее при помощи полос фильтровальной бумаги. [c.43]

Если проводят разделение методом нисходящей хроматографии, то небольшую пластинку с закрепленным слоем опускают в пробирку с припаянной сбоку колбой для растворителя. Проби.рку закрывают пробкой, к которой прикреплена на крючке пластинка. Пластинка соединена с растворителем при помощи бумажной полоски, один конец которой закреплен на носителе, а другой — опущен в растворитель (рис. 37). Можно получить такую хроматограмму и способом, который применяют в бумажной хроматографии, т. е. хроматографирование проводят в камере, в верху которой подвешена лодочка с растворителем. Пластинка находится в вертикальном пололсении, а растворитель попадает на нее при помощи опять же бумажной полоски, как в вышеуказанном приборе. [c.99]

Этот вариант ТСХ, широко применяемый в бумажной хроматографии, в сущности можно рассматривать как один из способов многократного или ступенчатого элюирования в двумерном пространстве. Однако двумерная хроматография более универсальна, чем оба эти метода. Первыми двумерное элюирование в ТСХ применили Кирхнер и сотр. [57]. Согласно разработанному ими методу, пробу наносят на угол квадратной хроматографической пластинки и элюируют обычным способом, после этого извлекают пластинку из камеры, дают растворителю испариться и помещают в другой растворитель таким образом, чтобы элюирование шло в направлении, перпендикулярном первому. Следует обратить внимание на то, чтобы линия пятен разделенных при первом элюировании веществ после поворота пластинки на 90° не оказалась ниже уровня второго элюента. Данный метод позволяет модифицировать адсорбент перед вторым элюированием. Изучая разделение мононенасыщенных жирных кислот, Бергельсон и сотр. [124] проводили первое элюирование на силикагеле, пропитанном додеканом, а перед вторым элюированием в перпендикулярном направлении дополнительно пропитывали слой адсорбента нитратом серебра. Иоханссон и Раймо [125] сочетали тонкослойную гель-фильтрацию на [c.151]

Сущность этого метода, как и хроматографирования на бумаге, заключается в нанесении раствора вещества или смеси веществ на тонкий слой с последующим продвижением отдельных компонентов смеси с разной скоростью по этому слою под действием одновременно движущегося в том же направлении растворителя. Процесс протекает в закрытой камере, атмосфера которой насыщена парами растворителя. Поэтому многие приведенные в этой главе указания, каеающиеся техники эксперимента, могут быть с успехом применены как при тонкослойной, так и при бумажной хроматографии. [c.294]

Р. Консден, А. Г ордон, А. Мартин Разработка распределительного варианта жидкостной хроматографии на бумаге (бумажная хроматография) [10, 11]. Разделение смеси аминокислот на полоске бумаги ( Ватман № 1 размером 1,5x20-56 см) в трубчатой вертикальной камере, подвижная фаза — органические растворители, частично смешивающиеся с водой (такие, как трет-пентило-вый спирт, бензиловый спирт и др.) [c.8]

Затем в качестве твердого носителя для разделения модифицироваииых аминокислот стали использовать фильтровальную бумагу. Хроматография на бумаге, единственный широко применяемый в биохимии вид жидкостной хроматографии, является одним из наиболее эффективных аналитических методов разделения. Полоску фильтровальной бумаги, на которую недалеко от верхнего конца нанесено некоторое количество смеси аминокислот, насыщают водной неподвижной фазой и помещают в камеру, насыщенную парами обеих фаз верхний конец полоски опускают в лодочку, содержащую подвижную фазу, п закрепляют в ней. Подвижная фаза под действием капиллярных сил поступает из лодочки и движется далее вниз по полоске бумаги. Индивидуальные аминокислоты перемещаются вниз по бумаге с различными скоростями, зависящими от их коэффициентов распределения для данной пары фаз (по аналогии с противоточным распределением или колоночной жидкостной хроматографией). Порядок движения аминокислот по бумаге различен в разных растворителях, и ни один из применяемых растворителей не позволяет произвести полное разделение всех 20 аминокислот, но, используя хроматографирование в двух перпендикулярных направлениях (рис. 5.14), можно добиться полного их разчсления. Аминокислоты можно обнаружить, опрыскивая бумагу раствором нингидрина, что приводит к появлению синеватых окрашенных пятен аминокислот. Описанная методика соответствует нисходящей бумажной хроматографии. Иногда в [c.149]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология