Различие ионообменной и молекулярной хроматографии

При разделении нуклеиновых кислот используют те же методы, что и при фракционировании белков, однако имеются ограничения, обусловленные большим диапазоном величин молекулярной массы (2-10 —Ы0 ° Да), отклонениями от глобулярной формы, различиями в четвертичной структуре (двухнитевые, однонитевые, кольцевые), значительным отрицательным зарядом в нейтральной области pH. Поэтому методы гель-фильтрации и ионообменной хроматографии не получили широкого распространения при фракционировании нуклеиновых кислот и значительно уступают ультрацентрифугированию и электрофоретическому разделению в геле агарозы, полиакриламидном геле или их смеси. Поскольку величина отрицательного заряда нуклеиновых кислот и продуктов их расщепления мало зависит от pH, а отношение заряда к молекулярной массе сохраняется практически неизменным, разделение нуклеиновых кислот при электрофорезе определяется не их зарядом, а размером молекул. При наличии маркеров с известной молекулярной массой возможно определение молекулярной массы препаратов нуклеиновых кислот и их фрагментов. [c.171]

Между ионообменной хроматографией и молекулярной адсорбционной, рассмотренной в предыдущей главе, существует принципиальное различие. Если молекулярная адсорбционная хроматография основана на адсорбции поверхностью твердой фазы веществ из раствора, то в ионообменной хроматографии осуществляется стехиометрический эквивалентный обмен ионов раствора на ионы [c.99]

В основе метода хроматографии в современном его развитии лежит ряд физико-химических явлений избирательная адсорбция молекул или ионов на твердом адсорбенте, распределение веществ между двумя растворителями, обмен ионов, образование осадков и др. В соответствии с этими явлениями различают несколько типов хроматографии адсорбционную (молекулярную), ионообменную, распределительную, осадочную и хроматографию на бумаге. Основы хроматографии, области ее применения и вопросы теории подробно изложены в ряде специальных монографий и обзорных статей [8—25]. [c.45]

Хроматография — метод разделения и анализа смеси веществ, основанный на различной сорбции компонентов анализируемой смеси определенным сорбентом. Впервые X. предложена в 1903 г. русским ученым М. Цветом. Разделение ведут в колонках, наполненных силикагелем, оксидом алюминия, ионообменными смолами (ионитами) и др., или же на специальной бумаге. Вследствие различной сорби-руемости компонентов смеси (подвижная фаза) происходит их зональное распределение по слою сорбента (неподвижная фаза) — возникает хроматограмма, позволяющая выделить и проанализировать отдельные вещества (процесс подобен многоступенчатой ректификации). В зависимости от агрегатного состояния подвижной фазы различают газовую и жидкостную X. по механизмам разделения — ионообменную, осадочную, распределительную и молекулярную (адсорбционную) X. в зависимости от техники проведения разделения в X. различают колоночную (колонки сорбентов), бумажную (специальная фильтровальная бумага), капиллярную (используют узкие капилляры), тонкослойную X. (применяют тонкие слои сорбентов). Методами X. анализируют смеси неорганических и органических соединений, концентрируют следы элементов. В химической технологии X. применяют для очистки, разделения веществ. X. позволяет разделять и анализировать смеси веществ, очень близких по свойствам (напр,, лантаноиды, актиноиды, изотопы, аминокислоты, углеводороды и др.). [c.151]

В зависимости от характера процессов, на которых основано разделение, наиболее важно различать следующие виды хроматографии, которые широко применяются в химическом анализе I) молекулярная адсорбционная-, 2) распределительная, или бумажная, 3) осадочная 4) ионообменная. [c.69]

Несмотря на большое сходство в технике эксперимента при разделении компонентов смесей, между ионообменной и адсорбционной хроматографией имеется существенное различие. Первая основана на законах стехиометрии, приложимых к реакциям ионного обмена. Вторая — основана на молекулярной адсорбции, которая обычно подчиняется закономерностям, выражаемым изотермами адсорбции Лэнгмюра или Фрейндлиха. Поэтому в молекулярной хроматографии отдельные вещества могут десорбироваться и элюироваться (вымываться) чистым растворителем, тогда как в случае ионообменной хроматографии в качестве элюента необходим раствор электролита. [c.119]

Между ионообменной хроматографией и адсорбционной молекулярной имеется существенное различие. Если молекулярная адсорбционная хроматография основана на явлении адсорбции, подчиняющейся в первом приближении теории Лэнгмюра, то ионообменная основана на стехиометрическом обмене ионов раствора с ионами ионита. В соответствии с этим вымывание адсорбированных веществ в молекулярной хроматографии может производиться чистым растворителем, тогда как в ионообменной в качестве вымывающего вещества необходимо применять растворы электролитов. [c.61]

Хроматографию применяли для разделения сложных смесей, природных веществ, например пигментов, витаминов, аминокислот, причем в этих областях метод оказался чрезвычайно чувствительным к незначительным различиям в молекулярной структуре. Хроматография ионов (ионообменная хроматография) в настоящее время играет важную роль в очистке редких земель и других ценных элементов. Только за последние годы этот метод нашел применение к разрешению проблем, касающихся анализа нефтяных продуктов. Вероятно, он окажется исключительно важным также и при изучении состава нефтей. [c.152]

РАЗЛИЧИЕ ИОНООБМЕННОЙ И МОЛЕКУЛЯРНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ [c.60]

ХРОМАТОГРАФИЯ — метод разделения и анализа смесей газов, паров, жидкостей или растворенных веществ сорбционными методами в динамических условиях. Хроматографические сорбционные, методы различаются по следующим. признакам по средам, в которых производится разделение (газовая, газожидкостная, жидкостная X.) по механизмам разделения (молекулярная, ионообменная, осадочная и распределительная X.) по технике проведения разделения (колоночная, капиллярная, бумажная и тонкослойная X.), Методами X. анализируют смеси неорганических соединеиий, концентрируют следы элементов. В химической т хнологии X. применяют для очистки и разделения различных веществ, близких по свойствам лантаноидов, актиноидов, аминокислот и др. [c.280]

Различают газовую, газоадсорбционную, жидкостную, жидкостную распределительную и другие виды хроматографии. Эти различия определяются по признакам, характеризующим или среду, в которой осуществляется разделение, или механизм разделения (молекулярный, ионообменный и т. д.), или форму проведения процесса—бумажная, капиллярная, тонкослойная и т. д. [c.196]

В настоящее время используют различные методы и варианты хроматографии. Так, в зависимости от механизма разделения разработаны методы молекулярной, распределительной, ионообменной и осадочной хроматографии по форме проведения процесса различают методы колоночной, капиллярной, тонкослойной и бумажной хроматографии. [c.63]

Хроматографические методы можпо различать по условиям проведения разделения газовый и жидкостный по механизмам разделения молекулярно-адсорбционный, ионообменный, распределительный. Существенное значение имеет форма проведения процесса и способ неремещення смеси вдоль сорбента. Перемещение смеси можно осуществить в проявительном режиме, когда вещество-носитель практически не сорбируется. Этот метод обычно используется в газовой хроматографии. Перемещение смеси может быть во фронтальном режиме, нри котором происходит последовательное выделение сначала наименее сорбируемого компонента. Распространен и вытеснительный режим, при котором исходная [c.288]

Хорошие результаты были получены при разделении смеси монотонных олигонуклеотидов ионообменной хроматографией [36] (рис. 20). Однако при переходе к смеси олигонуклеотидов сложного состава обычные методы оказались малопригодными. По мере увеличения молекулярного веса различия в свойствах олигонуклеотидов (адсорбционное взаимодействие и разница суммарных зарядов) быстро сглаживаются. Существенным становится вклад зарядов нуклеиновых оснований в суммарный заряд олигомера адсорбционное взаимодействие увеличивается, что влечет появление более строгих критериев для выбора ионита и элюирующей системы. [c.332]

В качестве осадителей в осадочной хроматографии применяются как неорганические, так и органические вещества. Последние различаются по своему строению и механизму действия и подразделяются на ряд классов, а именно вещества, образующие нормальные соли комплексные и внутри-комплексные соединения адсорбционные органические соединения соединения, участвующие в окислительно-восстановительных реакциях и каталитических процессах, и др. При применении в качестве осадителей веществ, относящихся к диссоциирующим неорганическим и органическим соединениям, в качестве носителя может быть использовано вещество, способное как к молекулярной, так и ионообменной сорбции. В остальных случаях носителем должно быть вещество, обеспечивающее только молекулярную сорбцию осадителя. [c.42]

Более подробное рассмотрение студней, возникающих при синтезе ионообменных смол, выходит за пределы задач настоящей книги. Мы кратко коснемся этого вопроса еще раз в связи с рассмотрением метода гель-проникаю-щей хроматографии, основанного на различии в проницаемости студней для молекул разного размера и позволяющего разделить полимер по молекулярному весу. [c.239]

Хроматография является важным физико-химическим способом разделения веществ, который в общем виде основывается на различиях сорбционного равновесия на твердой фазе или на различном распределении вещества между двумя жидкими или между газообразной и жидкой фазами. Во многих случаях одновремен о эффективны как адсорбция, так и распределение. Распределение веществ осуществляется между подвижной и стационарной фазами. В качестве подвижных или движущихся фаз используются растворители или, в специальном случае газовой хроматографии, газ-носитель в качестве стационарных фаз — твердые адсорбенты или жидкости, фиксированные на твердом носителе. Особыми видами хроматографии являются ионообменная хроматография и способы разделения, основанные на использовании молекулярных сит или на фильтрации через гели. До сих пор широкое применение находит адсорбционная или распределительная хроматография в колонках, на бумаге, тонкослойная и газовая. [c.203]

В зависимости от применяемого типа адсорбента и характера процесса, протекающего на адсорбенте, различают адсорбционную,- ионообменную, распределительную и осадочную хроматографию. При адсорбционной хроматографии первичным актом является молекулярная или ионная адсорбция. В случае распределительной хроматографии происходит распределение растворенных веществ между подвижными и неподвижными растворителями, причем адсорбент является веществом, удерживающим неподвижный растворитель. Ионообменная хроматография основана на обмене ионов между раствором и ионообменными веществами, в качестве которых могут служить природные и синтетические алюмосиликаты и синтетические смолы. Такие вещества содержат подвижные ионы металлов, водорода или гидроксила, способные к замещению. При этом процессе катион (в анионитах) или анион (в катионитах) представляет собой единое целое и не переходит в раствор при обмене. Ионообменная хроматография на искусственных смолах является основным методом адсорбционного разделения радиоактивных элементов, в частности-продуктов деления урана. Осадочная хроматография основана иа различии в произведениях растворимости соединений, образуемых разделяемыми ионами с раствором соединений, пропитывающих наполнитель колонки. Первичным актом при этом является образование осадков. [c.23]

В зависимости от природы процесса, обусловливающего механизм разделения, различают следующие варианты жидкостной хроматографии молекулярный адсорбционный, распределительный, ионообменный и ситовой, или гель-фильтрационный. [c.413]

Это обусловлено многообразием хроматографических методов. Они различаются во-первых, по той среде, в которой происходит разделение (различают газовую, газожидкостную и жидкостную хроматографию) во-вторых, по механизмам разделения (молекулярная или адсорбционная, ионообменная, осадочная и распределительная хроматография) в-третьих, по форме проведения процесса (колоночная, капиллярная, бумажная и тонкослойная хроматография). [c.150]

В литературе встречаются и другие классификации видов хроматографии. Например, иногда их подразделяют на хроматографию адсорбционную и распределительную, а также хроматографию, в которой стационарная фаза колонки обладает особым действием по отношению к разделяемым компонентам. К последнему виду относят ионообменную хроматографию, осадочную, адсорбционно-комплексообразовательную, гель-фильтрацию и т. д. Наиболее общей классификацией является классификация, в основе которой лежит природа атомно-молекулярного взаимодействия разделяемых компонентов и материала колонки. По этой классификации различают молекулярную и хемосорбционную хроматографию. Внутри этих видов хроматографии имеются разновидности. Молекулярная хроматография подразделяется на адсорбционную молекулярную хроматографию (этот вид описан М. С. Цветом) и абсорбционную молекулярную хроматографию (распределительная хроматография). Хемосорбцион-ная хроматография включает в себя ионообменную, осадочную и другие разновидности. [c.10]

Адсорбционная хроматография впервые была использована Цветом для разделения окрашенных веществ. В общепринятом смысле адсорбент — это твердое вещество, способное удерживать на своей поверхности молекулы эта способность особенно ярко выражена в тех случаях, если поверхность адсорбента содержит большое количество мелких пор. В отличие от ионообменных смол (см. разд. 3.6.1), притяжение молекул к поверхности адсорбента в идеальных условиях не является электростатическим. Сорбция веществ может быть специфической, что позволяет избирательно адсорбировать одно вещество из смеси. В основе разделения методом адсорбционной хроматографии лежат различия в степени адсорбции данных веществ адсорбентом и растворимости их в соответствующем растворителе. Эти свойства определяются в основном молекулярной структурой соединения. [c.68]

Классификация на основе природы элементарного акта. Если неподвижной фазой является твердое вещество, то элементарным актом взаимодействия анализируемого вещества (сорбата ) с твердой фазой (сорбентом) может быть 1) акт адсорбции— адсорбционная молекулярная хроматография 2) обмен ионов, содержащихся в твердой фазе, на ионы из раствора — ионообменная хроматография 3) химическое взаимодействие с образованием труднорастворимого осадка — осадочная хроматография. При адсорбционной молекулярной хроматографии жидких или газообразных веществ хроматографическое разделение основывается на различии адсорбционного сродства между компонентами разделяемой смеси и веществом твердой фазы, называемым в данном случае адсорбентом. Этот вариант хроматографии относится к классическому цветовскому варианту. [c.12]

Как показывает название, в основе адсорбционной хроматографии лежит адсорбция разделяемых веи еств на твердой поверхности выбранного адсорбента. Адсорбция обусловлена или физическими ван-дер-ваальсовыми силами межмолекулярного взаимодействия в системе адсорбат—адсорбент (молекулярная хроматография), или силами химического сродства, действующими, например, в процессе реакции при обмене ионов разделяемых компонентов на поверхностные ионы применяемого ионообменного адсорбента (ионообменная хроматография). В обоих случаях главным условием для осуществления разделения должно быть различие энергии адсорбции разделяемых веществ, что равносильно различию коэффициентов адсорбции. [c.11]

Большое значение имеет классификация существующих видов и разновидностей хроматографии. Единой, общепринятой классификации в хроматографии не существует. В современной хроматографии хроматографическое разделение может осуществляться в основном благодаря различию в адсорбируемости разделяемых компонентов, в распределении компонентов разделяемой смеси между двумя несмешиваю-щимися жидкостями и в растворимости образующихся осадков. В соответствии с этим по классификации Е. П. Гапон и Т. Б. Гапон различают три вида хроматографии адсорбционную (она включает молекулярную хроматографию и ионообменную), распределительную и осадочную. [c.10]

Различия в сорбируемости веществ могут быть весьма разнообразными. Это различия, обусловленные неодинаковым видом сорбции (межвидовые различия). Например, два вещества можно хроматографически разделить при условии, что o) нo из них сорбируется по молекулярному типу, а второе — по ионообменному типу сорбции. Различия в сорбируемости веществ при данном виде сорбции (внутривидовые различия) могут быть количественно охарактеризованы соответствующими энергиями связи или константами сорбции, входящими в уравнения изотерм сорбции. Например, в адсорбционной молекулярной хроматографии вещества разделяются в результате различий в константах сорбции, входящих в уравнение линейных изотерм или изотерм Ленгмюра, в распределительной хроматографии — в коэффициентах распределения в уравнении распределения, в ионообменной хроматографии — в константах обмена, входящих в уравнения изотерм ионного обмена, в осадочной хроматографии ионов — благодаря различиям в растворимости. [c.18]

Выделение индиввдуального белка. Для выделения индивидуального белка из смеси белков с близкими физико-химическими свойствами используют различия по молекулярной массе (методы ультрацентрифугирования и гель-хроматографии) различия в заряде (методы электрофореза и ионообменной хроматографии) способность белков к специфическим взаимодействиям (аффинная хроматография). [c.50]

По природе взаимодействия разделяемых веществ с твердой фазой различают адсорбционную, распределительную и ионообменную хроматографии. Адсорбционная хроматография основана на молекулярной адсорбции и подчиняется уравнению Лэнгмюра. Ионообменная хроматография определяется процессом ио1нообмена. В основе распределительной хроматографии лежит различие н коэффициентах распределения разделяемых веществ между двумя жидкими фазами. По методике проведения различают колоночную, хроматографию на бумаге и тонкослойную. Сорбция, иоиный обмен, распределение между фазами различного состава протекают непрерывно при последовательном многократном повторении. При колоночной хроматографии изучаемую смесь веществ в виде раствора (жидкая фаза) пропускают через колонку со слоем сорбента (твердая фаза). [c.254]

Метод хроматографического разделения, обусловленный главным образом различием в ионообменном сродстве компонентов к неподвижной фазе Метод хроматографического разделения, основанный прежде всего на эффекте исключения, обусловленном различием в размере или форме молекул (например, в хроматографии на молекулярных ситах — mole ular-sieve hroma- [c.215]

Иммуноглобулины составляют группу макромолекул, чрезвычайно гетерогенную по биологической активности, заряду и молекулярному весу. Это наиболее щелочные из сывороточных глобулинов, обладающие наименьшей электрофоретической подвижностью (обзор Eisen, 1973). Для их отделения от остальных белков сыворотки используют либо обычные физико-химические методы, такие, как высаливание, ионообменная хроматография, гель-фильтрация и препаративный зональный электрофорез, либо аффинную хроматографию последний метод особенно пригоден для выделения из сыворотки специфических антител. Все эти методы достаточно просты, не требуют большой затраты времени и обеспечивают хороший выход иммуноглобулинов. Иммуноглобулины разных животных различаются по заряду, молекулярному весу и электрофоретической подвижности, поэтому методы фракционирования, пригодные для выделения иммуноглобулинов одного вида, не всегда будут без каких-либо изменений пригодны для глобулинов другого вида в каждом отдельном случае необходима подработка методики. В этой главе дается краткое описание общих методов фракционирования, позволяющих выделять иммуноглобулины большинства видов животных. [c.58]