Цистеин, проба

Эту реакцию широко применяли для определения меркаптогрупп в белках муки [28—31], и для нее, по-видимому, не требуется точно контролировать pH среды. В работе [32] сообщалось, что соединение I устойчиво в условиях последующего гидролиза полипептида, однако позже выяснилось, что значительная часть этого аддукта (около 20%) претерпевала дальнейший гидролиз с образованием 5-сукцинил-ь-цистеина(П) и этиламина [33]. Для того чтобы избежать необходимости вводить поправки, связанные с частичным превращением соединения I в соединение П [33, 34], было предложено вести гидролиз в условиях, обеспечивающих количественное превращение I во II [28]. Такое полное превращение можно обеспечить путем гидролиза белка, содержащего аддукт ь-цистеина и ЫЭМ(1), в 6 н. соляной кислоте в запаянной и деаэрированной трубке [29, 30] при температуре 120 °С в течение 22 ч или при температуре 110 °С в течение 72 ч [35]. Если в пробе присутствуют лишь чрезвычайно малые количества ь-цистеина, то перед гидролизом в реакционную смесь желательно добавить соединение I в качестве носителя. Для измерения радиоактивности продуктов гидролиза их нетрудно предварительно разделить методом хроматографии на бумаге. [c.354]

Полярографический метод особенно удобен при определении содержания металлов в сплавах, анализе минералов, руд и примесей металлов в различных препаратах. Он применяется также для количественного определения многих органических веществ, способных к восстановлению или окислению, содержания кислорода в технических газах и т. п. Ошибка при полярографическом определении различных веществ не превышает 2—5%, если их содержание в пробе колеблется в пределах от 10 до 10 моль/л. В некоторых случаях чувствительность полярографического метода оказывается еще более высокой. Так, полярографически можно открывать и количественно определять соли платины, цистеин, цистин и другие органические соединения, содержащие группы — SH и — NH2, если их концентрации составляют всего лишь 10" мольЫ. В присутствии платины волна водорода начинается [c.334]

Выполнение анализа. К исследуемому веществу , растворенному в 0,2 М ацетатном буферном растворе (pH 5,3), прибавляют избыточное количество 0,005 М раствора п-хлорбензоата ртути (II) Количество непрореагировавшего л-хлорбензоата ртути (И) определяют через 15 мин титрованием 0,005 М раствором цистеина. Точку эквивалентности определяют на пластинке для капельных проб при помощи нитропруссида натрия (появление красной окраски). [c.594]

Работа 87. Проба на цистеин и гомоцистеин (иод-азидная) [c.281]

По количеству времени (в минутах) исчезновения окраски реактива судят о примерной концентрации указанных аминокислот. Нижняя граница чувствительности пробы — 0,3 мг/мл. Использование стандартных растворов цистеина и гомоцистеина (0,3—0,6 мг/мл) позволяет дать полуколичественную оценку пробы. Проба положительна при наследственной и приобретенной цистинурии (более [c.281]

Выявление способности бактерий продуцировать H2S основано на реакции образования сульфидов металлов. Наиболее распространенный способ — проба с уксуснокислым свинцом. Микроорганизмы выращивают в МПБ, содержащем 0,01 % цистина и цистеина, которые добавляют к стерильному бульону в виде раствора в подкисленной дистиллированной воде. Растворы цистеина и цистина стерилизуют фильтрованием. После посева исследуемых бактерий над средой помещают стерильную полоску фильтровальной бумаги, пропитанную насыщенным раствором уксуснокислого свинца укрепив ее под ватной пробкой. Пробку пробирки заворачивают полиэтиленом, чтобы затруднить улетучивание H2S. Продолжительность культивирования 7—10 суток. Выделение сероводорода обнаруживают по почернению бумаги вследствие образования сульфида свинца. [c.159]

К 0,4 мл раствора фермента в буфере, содержащем - О мМ 2-глицерофосфат и 30 мМ цистеин (pH 6,0 или 6,8), добавляют 0,2 мл 4% раствора гликогена, инкубируют 2—3 мин при 30 °С. Одновременно в том же термостате прогревают раствор глюкозо- -фосфата или глю-козо-1-фосфата, содержащего АМФ. Реакцию начинают внесением в пробу 0,2 мл глюкозо-1-фосфата или 0,2 мл глюкозо-1-фосфата, содержащего АМФ. Конечные концентрации компонентов реакционной смеси таковы [c.101]

Авторы [528] рекомендуют проводить однократную экстракцию бензолом при соотношении объемов экстрагента и пробы 1 100, утверждая при этом, что эффективность извлечения метилртути достигает 90- 95 %. Расчеты, сделанные нами на основании приведенных в этой статье градуировочных графиков, показали, что эффективность экстракции метилртути при рекомендуемых условиях не превышает 25 %. При выбранных нами условиях (увеличение объема бензола в 6 раз и трехкратная экстракция) эффективность выделения метилртути составляет в среднем 40 %. Полученные нами данные близки с результатами других исследователей [291], которые, анализируя потери метилртути на каждом этапе анализа, показали, что общая эффективность извлечения метилртути в раствор цистеина составляет 42 % от исходного содержания [c.165]

Метод основан на образовании окрашенных продуктов ароматических аминокислот с реактивом Фолина в сочетании с биуретовой реакцией на пептидные связи. Метод характеризуется высокой чувствительностью (10—100 мкг белка в пробе). На развитие окраски влияет большое количество веществ компоненты буферных систем (трис-буфер в концентрации 0,2 мМ, глицилглицин), восстановители (цистеин, дити-отреитол в концентрации 0,01—0,4 мМ, аскорбиновая кислота), комп-лексоны (ЭДТА в концентрации 0,5 мМ), детергенты (тритон Х-100 в концентрации 0,1—0,2% вызывает выпадение осадка), сернокислый аммоний в концентрации 0,15%, сахароза в концентрации 10% и др. [c.81]

Определение качественного и количественного аминокислотного состава белков и пептидов проводят после их гидролиза кислотой или щелочью. Оба вида гидролиза разрушают некоторые аминокислоты. При щелочном гидролизе частично разрушаются цистеин, серии, треонин и происходит частичная рацемизация некоторых аминокислот. При гидролизе соляной кислотой (5,7 н., 105—110° С), которая обычно используется при кислотном гидролизе пептидных связей, практически полностью разрушается триптофан. В связи с этим содержание триптофана в пробах обычно определяют после щелочного гидролиза или спектрофотометрическим методом Кроме того, наблюдаются значительные потери оксиаминокислот (серина, треонина, тирозина), се-русодержащих аминокислот (цистеина, метионина) и частично пролива. При этом степень разрушения аминокислот зависит от чистоты и концентрации НС1, используемой для гидролиза, а также длительности и температуры гидролиза. Следует отметить, что примеси альдегидов при кислотном гидролизе приводят к значительной потере тирозина, а также цистеина, гистидина, глутаминовой кислоты и лизина, а примеси углеводов в больших концентрациях — к разрушению аргинина. [c.123]

Восстановленный глутатион, N-этилимид малеиновой кислоты, гидрохлорид цистеина, меркаптоэтанол, гликолевая кислота (99%-ная), гомоцистеин, кр 1стал-лический яичный альбумин, эрготионеин и тиолгистидин. Прокипяченный водный экстракт печени крысы готовили, как указано в работе [30]. N-Этиламид малеиновой кислоты получали, прибавляя 0,3 мл 0,5 н. раствора гидроксида натрия к 1 мл 0,01 М раствора N-этилимида малеиновой кислоты, выдерживая раствор 5 мин. Перед проведением реакции глутатиона с N-этилимидом малеиновой кислоты для нейтрализации к пробе добавляли 6 мл 0,1 М фосфатного буферного раствора (pH = 6,8). [c.565]

Рис. 176. Тонкослойная ионофоретическая хроматограмма смеси аминов и аминокислот на силикагеле Г (пластинка 20 X 20 см). Проба 2 дл водного раствора, содержащего по 1—8 дг веществ. Сокращенные названия аминокислот см. в табл. 103, цис — цистеин, К — кадаверин, В — диметиламин, Г—гистамин, М — метиламин, Мц — мецкалин, Н — норадреналин, ф — фенилэтиламин, П — 1,3-нронилендиамин.

Метод. После разложения сероводородом осадка ртутной соли гистидина и удаления избытка реагентов доводят pH раствора баритом до pH 7,0. Пропускают через жидкость ток воздуха до полного превращения цистеина в цистин — отрицательная нитропруссидная проба. Нейтральный раствор кипятят 30 минут с избытком Си(0Н)2 или СиСОз, не содержащими нитрата, охлаждают, фильтруют и промывают. После удаления реагентов гистидин выделяют в виде дифлавианата. [c.21]

Монофенолы, спирты, углеводы, инозит и хинная кислота (содержащая три рядом расположенные оксигруппы в алицикли-ческом шестичленном кольце) не дают окраски с железотартратом и не препятствуют анализу. Лимонная кислота ослабляет окраску лишь при ее содержании свыше 1000 мкг на пробу. Другие органические кислоты (если они не вызывают сдвига pH, когда приходится увеличивать количество буферного раствора), не препятствуют определениям. Цистеин и аскорбиновая кислота в больших концентрациях дают с железотартратным реактивом слабую розовую окраску, которая в условиях определения (красный светофильтр) не влияет на результаты анализа. [c.66]

Полярографический метод особенно удобен при определении содержания металлов в сплавах, анализе минералов, руд и при нахождении примесей металлов в различных препаратах. Он применяется также для количественного определения многих способных к восстановлению или окислению органических веществ, содержания кислорода в технических газах и т. д. Ошибка при полярографическом определении различных веществ не превышает 2—5%, если их содержание в пробе колеблется в пределах от 10 до 10- моль л. В некоторых случаях чувствительность полярографического метода оказывается еще более высокой. Так, полярографически можно открывать и количественно определять соли платины, цистеин, цистин и другие органические соединения, содержащие группы —5Н и —КНг, если их концентрации составляют всего 10 —10 моль1л. В присутствии платины волна водорода начинается при более положительных потенциалах и ее высота увеличивается с концентрацией платины в растворе. Эти эффекты связаны, вероятно, с тем, что на платине выделение водорода протекает несравненно легче, чем на ртути. Повышение чувствительности метода в присутствии соединений с —5Н и —ЫНг группами следует отнести за счет их каталитического действия на процесс выделения водорода. В этом случае волна водорода начинается при более положительных, чем обычно, потенциалах и имеет большую высоту. [c.408]

Браунштейн и сотрудники [529] описали синтез глутатиона из глицина, цистеина и глутаминовой кислоты в срезах печени крысы они наблюдали реальный прирост количества этого три-пептида в пробах в результате синтеза. Блох и сотрудники [530—536] обстоятельно изучили реакции, приводящие к синтезу глутатиона. В их ранних исследованиях критерием служило включение меченого глицина и глутаминовой кислоты в глутатион. Позднее было установлено наличие реального синтеза в опытах с очищенными ферментными препаратами и показано, что реакция протекает в два этапа [c.268]

Слабокислый анализируемый раствор кипятили несколько минут в присутствии небольшого количества бензолсульфоната натрия, затем охлаждали до комнатной температуры, добавляли несколько миллилитров конц. НС1 и экстрагировали раствор толуолом. Экстракт промывали водой и добавляли к нему ацетат цистеина. После отстаивания отбирали шприцем пробу то.чуоль-ного раствора и анализировали на газовом хроматографе. [c.81]

Этот электрод успешно применялся для определения этанола в крови. Ошибка при определении этанола в сыворотке крови может быть обусловлена, во-первых, непосредственной реакцией фермента с другими субстратами и, во-вторых, расходом кислорода на неферментативные реакции, например с аскорбиновой кислотой или цистеи-ном. В первом случае некоторые карбоновые кислоты и оксикислоты (уксусная, муравьиная, молочная, оксимасляная, пировиноградная и хлоруксусная кислоты) окисляются алкогольоксидазой и тем самым мешают определению спирта в крови. Мешающее действие молочной кислоты, содержащейся в сыворотке крови, можно снять, добавив к пробе перед анализом лактатдегидрогеназу. Во втором случае мешающие вешества предварительно определяют при тех же условиях с платиновым электродом в отсутствие фермента [255]. Установлено, что ни одно из веществ, обычно имеющихся в крови, например аскорбиновая кислота, цистеин, фенилаланин, глюкоза, мочевая кислота, не реагирует на электроде. В то же время ферментный электрод чувствителен к альдегидам и карбоновым кислотам так же, как и к спиртам, и поэтому его можно использовать для определения и альдегидов, и кислот. [c.90]

Время отклика чувствительного к ь-фенилаланину электрода, основанного на датчике концентрации ионов аммония, колеблется в пределах 60—180 с и зависит от толщины реакционного слоя и концентрации L-фенилаланина в анализируемой пробе. При использовании электрода на г-фенилаланин, основанного на иодидном ион-селектив-ном электроде, в качестве электрода сравнения применялся второй иодид-селективный электрод. Этот электрод значительно менее чувствителен к L-лейцину, L-метионину L-аланину L-цистеин мешает определению. [c.189]

После фотоокисления цистеина в присутствии метиленового синего отбирают пробы и спектрофотометрически титруют Ы-этилмалеимидом. Рассчитайте из приведенных ниже данных время полупревращения цистеина в этой реакции. Начальная концентрация цистеина 0,01 М. [c.373]

Первичная реакция гексоз с 1-цистеином и серной кислотой [1]. К 1. ил раствора, содержащему 10—100 у гексозы, добавляют при охлаждении водой со льдом 5 мл 86%-ной (по объему) сорной кислоты (1 часть воды на 6 частей серной кислоты). Через 2 мин пробу осторожно встряхивают, не вынимая из охлаждаю цей бани, затем помещают на 1 мин в баню с водопроводной водой, после чего нагревают 3 мин на сильно юшящей водяной бане. После охлаждения водопроводной водой добавляют 0,1 мл 3%1-ного раствора моногидрата солянокислого ь-цистеина и пробу энергично встряхиваю . Появляется желтое окрангивание, интенсивность которого достигает люксимума уже через несколько минут. Максимум поглощения соответствует 412—414 ммк. Относительный коэффициент экстинкции, если за единицу принять коэффициент экстинкции в-глюкозы, равен 0,5 для в-галактозы, 0,4 для в-маннозы и 1,12 для [c.30]

Следовательно, кодовое значение любого триплета может быть выяснено в прямых опытах, в которых определяется, какую из аминоацил-тРНК будут связывать рибосомы в серии гомологичных проб, содержащих исследуемый триплет и тРНК, несущую одну из 20 аминокислот, меченных С или Н. Например, в таких опытах был вскоре установлен смысл трех изомеров триплета УаГ было показано, что УУГ, УГУ и ГУУ кодируют соответственно лейцин, цистеин и валин. [c.440]

Специфичность метода. Использование сильной серной кислоты (86% по объему) позволяет определять количество метилпентоз в составе различных углеводсодержащих соединений без их предварительного гидролиза. Однако если в исследуемой пробе присутствуют полисахариды, гликолипиды и гликопротеиды, то в смеси появляются самые различные сахара пентозы, гексоз-амины и гексуроновые кислоты, которые, так же как и 6-дезоксигексозы, могут образовывать фурфуролы и при добавлении цистеина давать окрашенные продукты. Таким образом, основная трудность метода заключается в определении специфического поглощения 6-дезоксигексоз в присутствии других сахаров. Гексозы под действием серной кислоты образуют 5-оксиметилфурфурол, который при конденсации с гидрохлоридой цистеина дает хромоген с максимумом поглощения при 415 нм. Абсорбционная кривая гексоз симметрична и поглощение при 396 и 430 нм равны. Для б-дезоксигексоз максимум поглощения находится при 396 нм, а при 430 нм поглощение равно 0. Поэтому для их количественного определения в присутствии гексоз используют разницу в поглощении при 3% и 430 нм. Влияние гексоз можно также в значительной мере исключить более длительным нагреванием проб перед добавлением Ь-цистеина, в течение 10 мин вместо 3, что приводит к значительному уменьшению поглощения гексоз. Величина поглощения 6-де-зоксигексоз при этом почти не изменяется. [c.115]

Образование парных соединений. Образование таких соединений с глюкуроновой кислотой, гликоколом, цисти-ном и серной кислотои часто бывает понижено. Например, синтез гиппуровой кислоты из гликокола и бензойной кислоты (проба Квика) значительно уменьшается. Уменьшается также образование ароматических кислот и спиртов (фенол, бензойная и салициловая кислоты, фенолфталеин, ментол, камфора) в соединении с глюкуроновой кислотой. Понижается образование парных соединений с цистеином и возникновение меркаптопуровых кислот. Резко понижается образование индикана из индола при соединении его с серной кислотой. [c.233]

При производстве кисломолочных продуктов окислительно-восстановительные условия среды могут меняться под влиянием таких факторов, как аэрация (перемешивание), добавление редуцирующих веществ (например, аскорбиновой кислоты), и в результате жизнедеятельности самих микроорганизмов. У некоторых микроорганизмов в качестве-акцептора водорода могут служить "кроме кислорода аскорбиновая кислота, цистеин, глютатион, метиленовый голубой, ре-зазурин. Два последних вещества применяют в молочной промышленности для выявления пктивн.ого процесса обмена веществ микроорганизмов в молоке. Чем больше в молоке микроорганизмов и интенсивнее нх обмен веществ. , тем быстрее падает окислительно-восстановительный потенциал и быстрее восстанавливается метиленовый голубой или резазурин. Процесс восстановления этих веществ сопровождается их обесцвечиванием или изменением цвета, что легко установить при визуальном наблюдении за пробами. [c.94]

Разработанная под руководством автора экстракционная методик определения метилртути в природных водах, реализуемая в экспедиционнь условиях, базируется на ряде методов, рекомендуемых ддя объектов окружг ющей среды [283, 291, 344, 432, 449, 528, 584, 640]. Поскольку приведенные этих работах условия выполнения анализов (способ связывания неорганич< ской ртути, соотношение объемов пробы и экстрагента, длительность и К( личество экстракционных циклов, объем раствора цистеина при реэкстра] ции, количество и продолжительность реэкстракционных циклов), а так>1 достигаемые при этом значения эффективности извлечения метилрту] очень сильно различаются между собой, было необходимо оптимизирова условия определения метилртути, реализуемые в экспедиционных условия [c.164]

Неорганическую ртуть связывали в устойчивое комплексное состо ние, добавляя 40 мл 8 М раствора мочевины и 30 мл концентрированн( соляной кислоты к 1 л пробы. Смесь энергично встряхивали в литровой д лительной воронке с 20 мл бензола и оставляли на 5 мин для разделен фаз. Такое блокирование неорганической ртути рекомендовано автораг [449] как эффективный метод, предотвращающий переход неорганическ ртути в фазу органического растворителя. Однако, как показали наши I зультаты, в зависимости от условий проведения экстракции и реэкстракц от 1 до 3 % неорганической ртути, находящейся в водном растворе, все попадает в финальный раствор цистеина. Кроме того, был проверен мет связывания неорганической ртути в бромидные комплексы при добавлен [c.164]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология