Пепсин окисление

Ничтожно малые количества ферментов способны расщеплять огромные количества реагирующих веществ. Так, 1 г кристаллического пепсина расщепляет 50 кг коагулированного яичного белка, а 1 г кристаллического ренина свертывает 72 т молока. Фермент пероксидаза, который ускоряет окисление субстрата за счет пероксида водорода, проявляет свою активность при разбавлении 1 мае. ч. фермента в 500 ООО ООО мае. ч. воды. [c.166]

Принятый метод обозначения мест атаки фермента на субстрат порядковыми номерами остатков не может передать всю сложность состава гидролизатов. Например, в случае цепи А окисленного инсулина инкубирование с пепсином приводит к образованию семи пептидов за счет разрыва четырех связей, указанных ниже [c.209]

В противоположность далеко идущему гидролизу окисленной рибонуклеазы при действии пепсина в определенных условиях на нативный белок гидролизуется только одна пептидная связь с отщеплением от С-концевого участка тетрапептида и образованием вещества, лишенного ферментной активности [8]. [c.210]

Легочная протеиназа I и реннин. Очищенная протеиназа, выделенная из легкого быка, разрывает в цепи Б окисленного инсулина те же связи, что и пепсин [67]. Синтетические субстраты для легочной протеиназы до сих пор не найдены. [c.213]

Изучено также действие кристаллического реннина на окисленный инсулин [103]. Найдено, что он гидролизует некоторые связи, атакуемые пепсином. Б условиях, в которых исключена возможность загрязнения препарата реннина пепсином, было установлено, какие связи разрывает этот фермент (см. рис. 2). [c.213]

Рога и копыта состоят не из одного кератина, помимо него в них имеется жир (в количестве до 4%) и некоторые белковые вещества иного состава, чем кератин, обладающие иными свойствами, чем последний. Жир не оказывает вредного влияния на технические свойства рогов и копыт. При переработке их в изделия бывает выгодно пропитывать их жиром дополнительно—это улучшает их пластичность. Совсем по-иному действуют белковые примеси, сопутствующие кератинам. Кератины сами по себе весьма ограниченно гидрофильны, набухаемость их в воде очень слабая и ферменты на них не действуют. Сопутствующие же им протеины и гидрофильны и перевариваются ферментами — пепсином и трипсином. При переработке рогов стремятся удалить эти вредные примеси путем длительного вымачивания в теплой воде в противном случае они вызывают образования трещин в роговой пластине вдоль ее слоев. Сам кератин рога является не абсолютно стойким веществом. Помимо легкого распада цистина с выделением сероводорода долгое кипячение в воде, длительное пребывание во влажном состоянии на воздухе ведет к изменению кератина. В первом случае он в некоторой степени гидролизуется, во втором— кислород воздуха, изменяя кератин, делает его доступным действию ферментов. В производстве это нужно учитывать и охранять влажный рог от окисления. [c.37]

Следует учесть, что ферменты, как и любые катализаторы, в равной степени ускоряют как прямую, так и обратную реакции. Поэтому ферменты расщепления — гидролазы в то же время являются ферментами синтеза, ферменты окисления — ферментами восстановления и т. д. Некоторые ферменты, как, например, пепсин, трипсин, обладают автокаталитическими свойствами. Попадая на соответствующий белковый субстрат, они превращают его в фермент. Этот процесс, ведущий к размножению фермента, весьма напоминает процесс размножения вирусов— мельчайших возбудителей заболеваний растений и животных. Многие вирусы, подобно ферментам, получены в кристаллическом состоянии, как, например, вирус табачной мозаики с молекулярным весом 4-10 , вирус столбура томата с молекулярным весом 10 , вирус некроза табака (6 10 ), вирус желтой мозаики репы (5-10 ) и т. д. Диаметр наиболее мелких вирусов равен приблизительно 20 ммк, т. е. близок к величине наиболее крупных ферментов. Мелкие вирусы отличаются под электронным микроскопом гомогенностью внутреннего содержимого и полным единообразием размеров и формы. [c.253]

Нативная рибонуклеаза не чувствительна к действию трипсина и химотрипсина. Поэтому сначала проводили окисление рибонуклеазы (остатки цистина при. этом окислялись до остатков цистеиновой кислоты) и окисленный препарат подвергали затем действию протеолитических ферментов. При помош,и хроматографии на дауэкс 50-Х-2 [82] из триптического гидролизата было выделено 15 пептидных фрагментов [82], а из гидролизата после действия химотрипсина — 32 фрагмента [83]. Для количественного определения аминокислотного состава выделенных пептидов и для достижения их чистоты необходимо использовать достаточное количество исходного материала (200 мг). Фракции, содержащие более одного компонента, подвергают повторному фракционированию в несколько измененных условиях. Расщепление с помощью пепсина [6], хотя оно и не столь селективно, позволяет, однако, получить другие пептиды, которые помогают воссоздать полную структуру рибонуклеазы. [c.415]

На рисунке показаны места атаки трех протеолитических ферментов при их действии на окисленную форму рибонуклеазы (сплошными линиями показаны места атаки пепсином, волнистыми — места атаки трипсином, прерывистыми — химотрипсином). [c.416]

Проферменты (или зимогены). Проферментами (или зимогенами) называют неактивную форму фермента. Механизм превращения неактивной формы в активную различен. Ферменты, у которых активная группа связана пара-лизатором (ингибитором), активируется при отщеплении его (например, неактивный пепсиноген или трипсиноген превращаются в активные пепсин и трипсин после отщепления от каждого из них ингибитора полипептидной природы). Ферменты, у которых неактивной является окисленная форма, [c.99]

Типичные кривые для гидролиза окисленной рибонуклеазы трипсином и химотрипсином [161, а также пепсином [17] показаны на фиг. 52 и 53. [c.120]

Была изучена также [64] возможная роль ионов металлов в качестве активаторов тирозиназы при окислении инвертазы и пепсина. Повидимому, только медь и золото ускоряют инактивирование инвертазы при помощи тирозиназы. Оба металла сами по себе также ингибируют инвертазу, однако если эти металлы взяты в концентрациях, меньших, чем это необходимо для частичного ингибирования инвертазы, то они не ускоряют действия тирозиназы на инвертазу . [c.289]

Максимальное увеличение активности тирозиназы наблюдалось при концентрации СиСЬ, равной 3 10 7 М. В этом случае активность инвертазы по сравнению с активностью контрольной пробы, содержащей неактивную тирозиназу, уменьшалась на 30%. Золото оказалось значительно менее удовлетворительным ускорителем, так как оно одновременно сильно ингибирует инвертазу. Ионы меди ускоряют окисление пепсина без одновременной инактивации, хотя пепсин даже и без добавления меди интенсивно окисляется тирозиназой. [c.289]

Медь способствует росту организма, усиливает процессы кроветворения, влияет на скорость окисления глюкозы и распад гликогена. Она входит в состав ферментов дыхательной цепи, повышает активность липазы, пепсина и других ферментов. Для взрослых людей недостаточность меди не характерна. [c.71]

В качестве белковых субстратов использовали классический субстрат — гемоглобин и окисленный по Сан-геру лизоцим. Этот низкомолекулярный белок, содержа- щий 12,7% аргинина, прекрасно расщепляется как пепсином (рвется около 30 связей), так и трипсином (освобождается 18 пептидов).- [c.205]

Действие некоторых протеолитических ферментов на окисленную В-цепь бычьего инсулина показано на рис. 6.2. Расщепление ферментами пепсином, химотрипсином или трипсином носит ограниченный характер и относительно специфично по сравнению с фактически беспорядочным частичным кислотным гидролизом. [c.179]

Мур, Штейн и Хирс подвергли рибонуклеазу окислению надмуравьиной кислотой и затем гидролизу химотрипсином, трипсином и пепсином. Образовавшуюся смесь пептидов они разделили на препаративной автоматической колонке на смоле даузкс = 50х2. Аминокислотный состав пептидов был определен на смоле дауэкс = 50x4. Всего было получено 32 пептида (см. стр. 521). [c.521]

Примечание пеп — пепсин, хим — химотрипоия, трип — трипсин О—окисленная [c.522]

Действие пепсина на цепи А [267] и Б [272] окисленного инсулина (рис. 1 и 2), на кортикотропии [23] (рис. 6) и окисленную рибонуклеазу [17] (рис. 4) изучено довольно подробно. [c.208]

Установлено [27], что частично очищенный папаин способен атаковать синтетические субстраты амидного и пептидного типа. Аналогичными свойствами обладает и кристаллический фермент [178], который вызывает расщепление, хотя и с весьма различными скоростями, всех синтетических субстратов для трипсина, пепсина, химотрипсина, карбоксипепти-дазы и пептидаз. Из известных в настоящее время субстратов папаина наиболее чувствительным оказался бензоил-/-арги-ниламид. Атака фермента иа фракцию А окисленного инсулина свидетельствует о широком спектре гидролитического действия, напоминающем действие пепсина, хотя степень разрыва различных связей этими ферментами весьма различна. [c.210]

Видоизменение свойств шерсти. Механическая обработка шерсти во влажном и нагретом состоянии способствует сцеплению или свойлачиванию волокон. Различные виды шерсти и других животных волокон могут сильно различаться по способности к свойлачиванию. В производстве фетра для шляп необходимая способность к свойлачиванию часто достигается путем окисления волокна в тщательно контролируемых условиях. В прошлом для этой цели применяли азотную кислоту, содержащую соли ртути в качестве катализатора, но в 1936 г. сделано открытие, что ядовитый раствор ртутной соли может быть заменен раствором нерекиси водорода, содерж ащим минеральную кислоту [28]. Окисляющее действие, по-видимому, состоит в присоединении кислорода к дисульфидным группам цистина шерсти [29] с последующим разрывом этих цистиновых мостиков в структуре белка [30]. Раньше считали [30], что перекись водорода и амииная или карбиминная группа волокна образуют фактически аддитивное соединение. Описано влияние такого рода обработки иа кроличий пух [31]. Сообщается также о видоизменении пуха ангорских кроликов путем последовательной обработки тиогликолятом натрия, пепсином и окислителем вроде перекиси водорода [32]. [c.487]

Прежде чем перейти к классификации ферментов, посмотрим, из чего складывается название фермента. Большинство нз них оканчивается на -аза (например, мальтаза, оксидаза, зстераза пептидаза, трансфераза). Корень слов соответствует либо суб страту, на который действует данный фермент, либо реакции которую он катализирует. Например, мальтаза — фермент, дей ствующий на мальтозу. Оксидаза — фермент, катализирующий биологическое окисление. Эстеразы действуют на эфиры ester) пептидазы — на пептиды. Трансферазы — ферменты, осуществляющие перенос определенных групп или радикалов от одного субстрата к другому. Наименования некоторых пищеварительных ферментов (например, пепсин, трипсин, реннин) составляют исключение из этого правила. [c.355]

LDH-коллагеновую мембрану (LDH — лактатдегидрогеназа) получали по методу Карубе [484] из коллагеновой волокнистой суспензии. Эту суспензию обрабатывают пепсином, чтобы разрущить ( разварить ) волокна и получить почти прозрачную жидкость, и после этого добавляют LDH. Анод, покрытый коллагеновой мембраной с LDH, погружают в раствор глутарового альдегида, а затем промывают дистиллированной водой. В качестве электроактивного вещества был выбран флавинмононуклеотид (FMN), который окисляет NADH в NAD (были испытаны и другие электроактивные вещества, например тиогликолевая кислота, метилвиологен, феназинметасульфат, однако FMN оказался наиболее удобным). Восстановленный FMN (FMN/H ) окисляется на аноде, так что ток окисления измерить легко. [c.167]

Данных по аминокислотной последовательности каждой полипептидной цепи белка еще не достаточно для установления его первичной структуры. Необходимо определить число и местоположение дисульфидных мостиков, связывающих эти цепи в единое целое. Разрешение этой задачи требует очень мягких условий гидролиза, ибо воздействие таких реагентов, как концентрированная соляная кислота приводит к окислению цистина до цистеиновой кислоты и ряда других продуктов. Поэтому белок подвергают энзиматическому гидролизу в возможно более мягких условиях и в присутствии тиоловых ингибиторов (например, Ы-этилмалеинимида). Часто для этой цели используют пепсин и химотрипсин, и расщепление ведут при pH 1,9 и 8,0 соответственно. Полученную смесь пептидов подвергают разделению с помощью одного или нескольких перечисленных выше приемов, п фрагменты, содержащие дисульфидную связь, выделяют в чи- [c.86]

По-видимому, -а-токоферилацетат п мепадион, скармливаемые коровам для защиты против развития привкуса окисленных соединений в молоке , не дают остатков. Остатков пе обнаруживается при скармливании свиньям в целях улучшения откорма фермента диастазы, пепсина, панкреатина или ннвертазы . [c.102]

Как упомянуто выше, нуклеин под действием пепсина или трипсина распадается на альбумин и нуклеиновую кислоту. Последняя под дейст-вием нуклеазы распадается на фосфорную кислоту и четыре основания цитозин, тимин, аденин и гуанип. Аденин под влиянием аденазы превращается в гипоксантип, а гуанин под влиянием гуаиазы в ксантин. Дальнейшая деградация этих веществ идет уже путем окисления при содействии оксидаз. Под влиянием ксантиноксидазы гипоксантин и ксантин окисляются свободным кислородом в мочевую кислоту. Последняя под [c.100]

Повидимому, маловероятно, чтобы действие эндопептидаз было беспорядочным действительно, некоторые белки гидроли-зуются одними ферментами и не гидролизуются другими. Например, инсулин не распадается под действием трипсина [466], но легко разрушается пепсином и химотрипсином. Более того, эти три эндопептидазы гидролизуют не одни и те же связи, о чем свидетельствует тот факт, что добавление одной из них в гидролизат другой вызывает резкое возрастание аминного азота [467]. Наконец, гидролиз некоторых простых белков и полипептидов не кажется, повидимому, a priori несовместимым с положениями Бергмана в самом деле, трипсин энергично гидролизует клупеин [468] и сальмин [469] , которые богаты аргинином, а также воздействует на полилизины и лизин-аргининовые сополимеры [470]. К сожалению, ни один из этих фактов не является достаточным для доказательства высказанной точки зрения, и для разрешения проблемы необходимо выяснить структуру ряда белков и идентифицировать пептиды, образующиеся при ферментативном гидролизе. Хотя это может показаться весьма затруднительным, такая задача была уже однажды решена Зангером и Таппи [398а] в случае цепи В окисленного инсулина. Здесь трипсин атакует, повидимому, одну связь арг.гли и одну связь лиз. ала, в то время как химотрипсии гидролизует одну связь тир.лей, одну связь фен.тир и одну связь тир.тре. Повидимому, для этих двух ферментов положения Бергмана оказываются в первом приближении справедливыми. Однако характер действия пепсина на цепь В не согласуется столь же хорошо с этими взглядами. [c.184]

При изучении инактивирования инвертазы дрожжей при помощи тирозиназы Сайзер [65в] обнаружил, что препараты тиро-зиназы, полученные из различных источников, сильно различались по своей активности независимо от степени чистоты, что является труднообъяснимым. Дальнейшее исследование показало, что инактивирование инвертазы тирозиназой можно значительно ускорить добавлением определенных соединений типа фенола, превращающихся под действием тирозиназы в хиноны, которые, в свою очередь, инактивируют инвертазу [65г]. В этой системе тирозиназа может быть заменена РеСЬ. Кроме того, окисление в присутствии фенолов не было специфическим, так как оно затрагивало первичные амино- и сульфгидрильные группы, а также тирозильные остатки, а пепсин, трипсин, химотрипсин и инсулин легко можно было инактивировать совместным действием тирозиназы и этих фенольных соединений. [c.289]

Многие белки весьма устойчивы к окислению тирозиназой. Так, например, сывороточный альбумин устойчив, инсулин относительно устойчив, а яичный альбумин вообще не подвергается действию тирозиназы [60, 65а]. Пепсин, будучи весьма чув-ствитель ньпм к окислению тирозиназой, повидимому, легче реагирует в денатурираваиной форме, хотя при рН 5,6 он окисляется также и в нативном состоянии [64]. Было высказано предположение о том, что относительная устойчивость большинства белков к воздействию тирозиназы, возможно, обусловлена либо пространственной недоступностью фенольных групп на поверхности молекулы, либо образованием водородной связи между фенолом и боковыми цепями других аминокислот, либо, наконец, одновременным действием обеих причин [65а]. Окисление тирозиназой производных тирозина, в которых карбоксильная и аминная [c.289]

В нейтральной или щелочной среде тирозиновые группы ряда белков реагируют с иодом легко и специфично, образуя 3,5-дииодтирозиновые группы. Тот факт, что замещение в этих случаях протекает селективно, был доказан тщательным анализом продуктов реакции сывороточного альбумина [93], зеина [94], пепсина [95], лактогенного гормона [96], инсулина [97] и шерсти [98]. Специфичности не наблюдалось в реакциях с гемоглобином [99] и рядом других белков [100], в которых происходило замещение или окисление имидазольных групп даже в нейтральной и кислой среде. [c.351]

Структуру олигосахарида из ИгГ человека исследовали Кламп и Путнэм [74]. Они обрабатывали ИгГ человека последовательно пепсином и проназой и выделяли образующиеся гликопептиды. При периодатном окислении гликопептидов были получены результаты, сходные с данными Ротфуса и Смита [67]. Кроме того, используя специфические ферменты для гидролиза концевых остатков, Кламп и Путнэм показали, что эти олигосахариды имеют сильно разветвленную структуру и содержат в виде нередуцирующих концевых остатков 3 глюкозамина, 2 фукозы и 1 остаток сиаловой кислоты [c.114]

Предварительные исследования нерастворимой ДНФ осажденной фракции [34] показали, что это сложное вещество обладает несколькими N-концевыми остатками и дисульфидными связями. Окисление его надмуравьиной кислотой с последующей гель-фильтрацией на сефадексе Г-25 приводило к разделению на четыре главных и меньший пятый компоненты. Углеводы были найдены главным образом только в одной из полос молекулярный вес этой фракции, определенный по поглощению в ультрафиолетовой области ДНФ-грунпы, был равен 4170. Аминокислотный состав выделенной фракции был следующим аспарагиновая кислота (1), треонин (2), серин (1), глутаминовая кислота (2), пролин (4), глицин (1), аланин (2), изолейцин (1), лейцин (2), тирозин (2), фенилаланин (1), аргинин (1) и цистеиновая кислота (3). Анализ углеводов позволил установить, что на ДНФ-группу приходится 2,8 остатка гексоз и 2,6 остатка гексозаминов. Обработка этой фракции проназой, пепсином и химотрипсином с последующим фракционированием гель-фильтрацией на сефадексе Г-25 позволило выделить фракцию, которая содержала, кроме углеводов, только тирозин и аспарагиновую кислоту. Таким образом, вполне вероятно, что углеводная часть связана с остатком аспарагиновой кислоты пептидной цепи. [c.238]

В табл. 25 приведены данные, полученные описанным аргининовым минрометодом, по активности пепсина и трипсина по трем различным белковым субстратам — окисленйому лизоциму, гемоглобину я сывороточному альбумину человека. Последние два белка перед опытом денатурировали нагреванием при 95 С в течение 30 тайн. Расщепление белков пепсином проводили при pH 2, а расщепление трипсином — при pH 8,5. [c.213]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология