Хлорофилл экстракция

Основоположником хроматографического анализа является русский ботаник Михаил Семенович Цвет, изучавший состав хлорофилла. Он настойчиво искал эффективный метод разделения сложных смесей органических соединений, которые извлекал неводными растворителями из свежих и сухих листьев растений. Анализируя причины неполной экстракции, М. С. Цвет высказал предположение, что полному извлечению пигментов препятствует их адсорбция тканью листа. Опыты с различными порошкообразными сорбентами подтвердили это—при пропускании растворов сложных смесей через заполненную мелом колонку они разделялись на отдельные окрашенные зоны. [c.5]

Предварительная работа. Раствор хлорофилла нужно приготовить заранее. Для этой цели берут примерно 60 г зеленых листьев, мелко нарезают их и тщательно растирают в фарфоровой ступке с метиловым или этиловым спиртом. Для экстракции хлорофилла обычно берут около 600 мл растворителя. Полученный раствор сначала фильтруют через обычный фильтр, а затем переносят его в делительную воронку, куда приливают примерно 10 мл бензина. Смесь в делительной воронке тщательно взбалтывают и дают ей хорошо отстояться. При этом почти весь хлорофилл перейдет в бензиновый слой, который отделяют и используют при постановке опыта. [c.165]

Экстракцией можно удалить и пятна от травы. Помните опыт, в котором мы экстрагировали хлорофилл спиртом [c.33]

Наиболее эффективными растворителями для экстракции каротина являются петролейный эфир, гексан, ацетон и их смеси предполагают, что они разрывают белково-каротиновый комплекс. Для объектов, богатых каротином, лучшим экстрагентом служит смесь гексана и ацетона (1 1). При экстракции тканей, бедных каротином, желательно увеличение доли ацетона в смеси. Хорошие результаты дает применение смеси петролейного эфира и ацетона (2 1). Если каротин экстрагируют из продукта, содержащего хлорофилл, в присутствии которого ускоряется фотохимический распад р-каротина, то экстракцию проводят по возможности быстро с добавлением антиоксиданта и хлорофилл из экстракта удаляют омылением с этаноловой щелочью при комнатной температуре. [c.201]

Экстракцию гликозидов из растений, учитывая их растворимость, обычно осуществляют органическими растворителями — спиртами, ацетоном, этилацетатом, чаще с добавками в них воды. Очистку от хлорофиллов и смол проводят, как правило, адсорбцией их на оксиде алюминия из водно-спиртовых растворов. Выделение гликозидов в индивидуальном состоянии основано, главным образом, на хроматографии или противоточном распределении веществ в специально подобранных системах растворителей. [c.20]

Наряду со старыми, хорошо известными из практики методами — перекристаллизацией, перегонкой, возгонкой, экстракцией — химики получили в свое распоряжение целый ряд новых, эффективных методов очистки. Среди этих методов прежде всего различные виды хроматографии — метода, использующего различия в адсорбционных свойствах веществ. Впервые этот метод применил в 1903 г. русский ученый М. С. Цвет для разделения хлорофилла. [c.355]

Для выделения флавоноидов проводят экстракцию растительного материала, как правило, одним из низших спиртов. Спиртовое извлечение упаривают, к остатку добавляют горячую воду и после охлаждения удаляют неполярные соединения (хлорофилл, жирные масла, эфирные масла и др.) из водной фазы хлороформом или четыреххлористым углеродом. Флавоноиды из водной фазы извлекают последовательно этиловым эфиром (агликоны), этилацетатом (в основном монозиды) и бутанолом (биозиды, триозиды и т. д.). [c.85]

Возьмите квадратный листок бумаги и в середину капните исследуемый раствор, содержащий смесь окрашенных веществ. Это может быть спиртовая настойка какого-либо лекарства, например валерианы или календулы, или приготовленный вами экстракт хлорофилла (см. главу "Экстракция"), или смесь красителей, составленная специально для этого опыта. На бумаге образуется пятно. В центр его капните несколько капель растворителя в приведенных выше примерах растворителем должен служить спирт, причем одеколоном его заменить нельзя -в нем содержатся вещества, которые могут исказить ход опыта. Вместо этилового спирта можно взять изопропиловый - под названием ИПС его продают в хозяйственных магазинах как средство для мытья окон. [c.155]

Один из методов получения фитола из хлорофилла состоит в экстракции из крапивы сухим ацетоном липоидной фракции с последующим гидролизом заключающегося в ней хлорофилла твердым едким натром при этом исключается образование стойких эмульсий [174]. Из 1 кг муки сухой крапивы выделено 2,8—3,0 г фитола. Фитол —вязкое масло с т. кип. 145° С при 0,03 мм. [c.278]

Пробы растений. Для извлечения ОВ из свежих растений рекомендуется кратковременная экстракция петролейным эфиром без нагревания. Экстракция этиловым спиртом проводится на холоду в течение 1 мин. Так как при этом невозможно избежать растворения зеленого пигмента листьев — хлорофилла, то после этого требуется обесцвечивание активированным углем. [c.259]

Другая проблема очистки хлорофилла связана с удалением следов хлорофилла а из препаратов хлорофилла Ь. Цшейле считает, что предполагаемый чистый хлорофилл Ь, полученный многими прежними исследователями, содержал до 10% хлорофилла а. Его присутствие легко установить по увеличению поглощения света при 614 Ж(х. По данным Бирмахера [36], спектр флуоресценции хлорофилла Ь еще более чувствителен к загрязнениям хлорофиллом а, чем спектр поглощения (см. гл. XXIII, стр. 150). Бирмахер советует для окончательной очистки хлорофилла Ь применять экстракцию гексаном (который растворяет хлорофилл а значительно лучше, чем хлорофилл >). Экстракция повторяется до тех пор, пока спектр флуоресценции остатка уже не будет показывать полос хлорофилла а. [c.12]

В качестве растворителя обычно используют смесь ацетон— вода (85 15). Метанол или смесь метанол—петролейный эфир (т. кип. 40—60 или 20—40°С) (2 1) (для извлечения каротиноидов) используют при экстракции некоторых растений и морских водорослей, но, к сожалению, при этом возможна алломеризация хлорофилла. Присутствующие в гомогенате кислоты, которые могут изменить хлорофиллы в процессе экстракции, нейтрализуют небольшим количеством карбоната магния или несколькими каплями свежеперегнанного диметиланилина (этого недостаточно в случае сильных кислот). Хлорофиллазы и оксидазы инактивируют путем короткого (на 0,5—1 мин) погружения в кипящую нейтральную (pH 7,0) воду, после чего гомогенат быстро охлаждают, помещая в проточную воду или лед. [c.268]

Теоретический интерес, с точки зрения генезиса нефти, представляет обнаружение производных аминокислот (содержат карбоксильные и аминогруппы, являются исходным материалом в растениях при биосинтезе гормонов, витаминов, пигментов и др.) и порфиринов, входящих в состав гемоглобинов, хлорофиллов, витаминов и др., участвующих в биологических процессах. Порфирины содержат в молекуле четыре пиррольных кольца и встречаются в нефтях в виде комплексов металлов — ванадия и никеля. Установлено, что они обладают каталитической активностью, сравнительно легко выделяются из нефти экстракцией такими полярными растворителями, как ацетонитрил, пиридин, диметилформамид и др. [c.43]

Важное значение имеет накопление протопластами тяжелых металлов железа и меди, показанное в табл. 53. Мур [69] после экстракции хлорофилла спиртом окрашивал хлоропласты гематоксилином. Реакция с гематоксилином характерна для простых солей железа, и ее не дают комплексные органические соединения, например производные гемина. Таким образом, ему удалось доказать присутствие в хлоропластах железа. Ноак [78] нашел, что 6% железа в листе растворимо в воде и может быть обнаружено роданистым калием. [c.379]

Назовите методы ццентификации пигментов хлорофилла, выцеленных из листьев растений путем экстракции дизтиловым эфиром. [c.481]

Источником фитола, применяемого для синтеза токоферолов, служит хлорофилл, подвергаемый гидролизу (он может быть получен непосредственно из зеленой массы крапивы, люцерны и др.). Так, из 1 кгсухой крапивы экстракцией выделено 3 г фитола — вязкого масла с т. кип. 145° при 0,03 мм рт. ст. Экстракцию производят сухим ацетоном, с последующим гидролизом извлеченного из крапивы хлорофилла едким кали. [c.656]

Разработаны различные методы выделения фитола из растительных объектов. Все они сводятся к процессам экстракции хлорофилла, включая образующийся в процессе сушки феофитин, органическим растворителем, отгонка последнего, омыление кубового остатка и дистилляция неомыляемой части в глубоком вакууме. В качестве растворителя предложен ацетон и исходное сырье — листья крапивы [41], изопропиловый спирт и отходы перечной мяты [37—39]. Выход фитола из растительных объектов колеблется в пределах 0,11—0,30% к массе сухого сырья. Фитол, С20Н39ОН, молекулярная масса 296,52 df — 0,852 температура кипения 150—151° С (остаточное давление 0,06 мм рт. ст.), =1,4637 Яшах = =212 нм (спирт) хорошо растворяется в органических растворителях. [c.320]

Экстракцию сердечных гликозидов из растительного сырья чаще [ ( ггроводят метиловым или этиловым спиртами (концентрация НО %). Полученное спиртовое извлечение, содержащее сумму Дстых гликозидов, подвергают очистке от сопутствующих ве-С ш. Сопутствующими веществами бывают пигменты (хлорофилл, 1пм( )илл, каротиноиды), смолы и другие органические вещества, Тцоримые в спиртах. [c.31]

Экстракхо1я вещества растворителем из твердой фазы сложной смеси определяется химическим сродством растворителя к целевому продукту, концентрацией этого продукта в твердой фазе и условиями его внутренней диффузии. Этот ввд экстракции часто используется в органической химии для извлечения природных соединений из биологических объектов (хлорофилла и каротиноцдов из зеленого листа, кофеина из кофейной или чайной массы, алкалоидов из растительного сьфья и др.). В ряде случаев растворяют путем экстракции не целевой продукт, а содержащиеся в нем примеси. С этой целью берут экстрагент, который растворяет только примеси. Операции проводят либо в колбах, либо в специальных приборах для экстракции (экстрактор Сокслета и др.). Теория экстракции из твердой фазы базируется на явлениях растворимости, межмолекулярной ассоциации, диффузии и в общем виде недостаточно разработана. [c.95]

При выборе метода выделения фенола, встречающегося в природе, необходимо учитывать не только свойства соединения, как упоминалось выше, но также и химический состав биологического источника. Растительный материал состоит в основном из нерастворимой целлюлозы и лигнина, а в свежем виде может содержать также большое количество (70—80%) воды. Кроме того, могут присутствовать хлорофилл, воски, жиры, терпены, сложные эфиры, растворимые в воде соли, гемицеллюлозы, сахара и аминокислоты. Из свежего или сухого материала, как правило, сначала выделяют с помощью неполярного органического растворителя (например, петролейного эфира, гексана, бензола, хлороформа или эфира) нефенольные, неполярные вещества. Фенольные соединения можно затем выделить путем экстракции ацетоном, этанолом, метанолом или водой, причем выбор растворителя определяется числом гидроксильных групп и остатков сахара в молекуле. В некоторых случаях растительные материалы подвергаются непосредственной экстракции щелочью, но это не всегда приводит к хорошим результатам. Фенолы из растительного материала затем очищаются путем ряда экстракций и осаждений. С этой целью сырой материал переносят в несмешивающийся растворитель, такой, как эфир, бутанол или этилацетат, и смесь последовательно экстрагируют разбавленными растворами оснований в порядке возрастания активности сначала ацетатом натрия (для удаления сильных кислот), а затем бикарбонатом натрия, карбонатом натрия и едким натром. Водные экстракты, содержащие искомые продукты, подкисляют и вновь экстрагируют бутанолом, эфиром или этилаце-татом. Процедуру повторяют до получения кристаллического продукта. Подобное фракционирование в настоящее время осуществляется путем автоматической подачи несмешивающихся растворителей по принципу противотока (Хёрхаммер и Вагнер [9]). Фенолы можно отделять от других продуктов, содержащихся в растениях, путем осаждения с помощью нейтрального или основного ацетата свинца. Этим методом до некоторой степени отделяются о-диоксисоединения (дают осадок) от монозамещенных соединений (не дают осадка). Соли свинца разлагают серной кислотой, сероводородом или катионообменными смолами и свободные с )енолы элюируют из неорганических солей спиртом. [c.36]

Другие авторы также работавшие с метиллннолеатом, исследовали концентрированные гидроперекиси, полученные из оксидата с помощью противоточной экстракции. Каи и сотруд-ники окисляли этот эфир шестью различными методами, вос станавливали концентрат гидроперекисей хлористым оловом и разделяли полученные спирты с помощью хроматографии, В четырех случаях из шести- были получены смеси цис-транс- и гранс-гранс-конъюгированных продуктов, однако окисление в присутствии хлорофилла привело к неконъюгироваиному спирту, вероятно, олу-11. [c.69]

На ПЭЗ ВИЛАР проведена работа по выделению суммы гликозидов из наперстянки шерстистой. Сырьё экстрагировали этилацетатом, пасыщеппым для стабилизации водородного показателя 2,5% водным раствором бикарбоната натрия [2]. Данный экстрагент отличается избирательностью и не способствует фермептативпому гидролизу гликозидов [3]. Во время экстракций периодически ведётся рН-коптроль экстрагента. Наиболее приемлемым является pH от 6,0 до 7,0, что обеспечивает максимальный выход суммы гликозидов. Это объясняется тем, что снижение pH раствора ниже 5,0 приводит к разрушению гликозидов из-за их гидролиза в кислой среде. Повышение pH более 7,0 обусловливает меньший выход суммы гликозидов в связи с размыканием лактонного кольца и дезацетилированием [4]. Экстракты пропускали через окись алюминия с оптимальным размером частиц и проводили хроматографическую очистку лапатозидов АВС от балластных веществ, таких как флавоноиды, каротиноиды, хлорофиллы, смолы и др. ТСХ-контроль осуществляли на силуфоле в системе метанол- этилацетат (1 4), проявитель- пары соляной кислоты [5]. Фракции, содержащие сумму гликозидов объединяли для кристаллизации. [c.172]

Фиг. 110. Спектр поглощения целых клеток hlorella pyrenoidosa (l) u спектр поглощения вытяжки пигментов II), полученный путем сложения спектров поглощения хлорофилла и каротиноидов (кривые отдельных пигментов смещены вправо, чтобы компенсировать сдвиг в коротковолновую область, возникающий при экстракции). Показан также спектр процентного поглощения каротиноидов (Ш), полученный на основании измерений поглощения экстрагированных пигментов [84].

Полуцеллюлоза, древесная масса, содержащая по сравне1шю с целлюлозным материалом большие количества лигнина и других веществ используется в производстве бумаги, древесноволокнистых плит и тд. При химической переработке древесины могут быть получены различные продукты органического происхождения (фурфурол, многоатомные спирты, карбоновые кислоты и тд). Большое значение имею г экстрактивные вещества, выделяемые из древесины. Экстракцией из зеленой части растений можно выделить хлорофилл, фитостерины, витамины, парфюмерные материалы. [c.7]

Возможность разделения природных смесей пигментов, главным образом с целью их последующего спектроскопического определения, обычно зависит от различия в растворимости или в сорбционных свойствах, которые в свою очередь связаны с по-лярнос5тью самих пигментов. Как правило, фикобилины имеют наиболее полярный характер, каротины — наименее полярный, а некоторые хлорофиллы и определенные ксантофиллы обнаруживают одинаковую полярность. Все пигменты очень чувствительны к нагреванию, свету, кислороду и другим окислителям, поэтому экстракцию и выделение следует проводить при пониженной температуре ( 0°С), в атмосфере азота, при умеренном освещении и в нейтральных растворителях. [c.267]

После экстракции пигментов дополнительной порцией холодного растворителя и тГоследующего фильтрования через стеклянный фильтр или центрифугирования хлорофиллы и каротиноиды (вместе с другими экстрагированными веществами липидной природы) переводят в неполярный растворитель, обычно петролейный эфир (т. кип. 20—40°С), который добавляют к экстракту в делительной воронке вместе с избытком [c.268]

Для выделения природных фенольных ингибиторов зеленые листья (или другие растительные органы), растертые в жидком азоте, заливали 96%-ным этанолом, подогретым до 70°, и оставляли настаиваться в течение 2—3 дней, экстракт сливали, экстракцию повторяли до полного извлечения хлорофилла. Затем этанол выпаривали, водную фазу декантировали (освобождали от пигментов), а затем последовательно трехкратно экстрагировали эфиром, эти-лацетатом и н-бутанолом. Извлеченные фракции выпаривали досуха и растворяли в 70%-ном этаноле. Первое хроматографическое разделение фракции проводили на бумаге Ватман 3 ММ в одной из селективных смесей растворителей и с помощью цветных реакций и биотеста контролировали, в каку.о фракцию ингибитор перешел в наибольшем количестве. Для этих целей удобно использовать сопутст-34 [c.34]

Предложена модификация метода, которая позволяет сократить время анализа за счет одновременного проведения экстракции и гидролиза с смесью метанола, хлороформа и едкого бария. Холин выделяют из гидролизата адсорбцией на колонке с флоризилом. При пропускании рейнеката аммония через колонку получают рейнекат холина, который проявляется в виде розовой полосы, после того как избыток реактива вымывают. При наличии хлорофилла колонку до пропускания рейнеката аммония промывают метилацетатом. Рейнекат холина с флоризила элюируют ацетоном и измеряют оптическую плотность раствора при 526 нм 13, 42]. [c.205]

В последнее время теория растительного происхождения нефти получила новое, в высшей степени ценное подтверждение [7]. При исследовании вытяжек, полученных экстракцией сланца с верхнего Изара, месторождение которого расположено в доломитах верхнего альпийского триаса, установлено нахождение в этом горючем ископаемом порфирина — одного из ближайших производных характернейшего растительного пигмента, хлорофилла, с нахождением которого в зеленых частях растений, как известно, неразрывно связан основной процесс жизнедеятельности растительного организма — процесс усвоения углекислоты, иначе говоря, ассимиляция углерода. Очевидно, тем самым прежде всего [c.301]

Хлорофилл а-голохром весьма лабилен, в результате чего пигмент может быть легко экстрагирован из высушенных листьев спиртом или ацетоном. Метод экстракции в комбинации со спек-трофотометрией лежит в основе количественного определения [c.14]

Злаки, крапива и некоторые другие растения бедны хлорофиллазой и потому особенно удобны для экстракции неизмененного хлорофилла. [c.383]

Он указывал, что экстракты сохраняют в неизменном виде оптические свойства хлорофилла в листьях. Любименко [122, 128] нашел, что некоторые виды, нанример Aspidistra elatior и Funkia, особенно удобны для экстракции водой и дают устойчивые прозрачные растворы, не осаждаемые при центрифугировании. Спектр этих растворов оказывается идентичным спектру диета они устойчивы на солнечном свету, и ацетон иди спирт осаждает из них белково-хлорофильный комплекс и далее растворяет хлорофилл из осадка. Подобные экстракты, полученные из других растений, были мутны ж неустойчивы. [c.387]

Стрейн и Мэннинг [77] обнаружили в хромотограммах экстрактов высших зеленых растений и водорослей сопровождающие полосы к полосам хлорофи.илов а и 6, которые авторы приписали двум новым изомерным формам а и Ь. Спектры этих изомерных форм очень похожи на спектры обычных форм а и Ь, и, повидимому, они обратимо взаимно превращаются. В растворах пропилового спирта при 95—100° 80 /о изомеров а жЪ находятся в видимом равновесии с 20% изомеров а и Ъ. Быстрая экстракция при низких температурах (—80°) не давала следов изомеров а и V, поэтому возможно, что они не существуют как таковые в природе, но образуются из хлорофиллов а и 6 во время экстракции при обычной температуре. С другой стороны, легкость, с которой изомеры о и Ь могли превращаться in vitro в а и Ъ, говорит о возможности присутствия их в живых растениях, особенно при более высоких температурах. [c.405]

Предварительная экстракция липоидов петролейным эфиром не отражается ни на скорости выцветания, ни на поглощении кислорода. В этом Ноак видел доказательство того, что устойчивость хлорофилла в хлоронластах не обусловлена связью с липоидами. Обработка солями меди, ведущая к замене магния на медь, слегка увеличивала скорость поглощения кислорода. Этот опыт был проведен в связи с предположением Ноака, что медный феофитин, который не флуоресцирует и не действует как сенсибилизатор, будет менее подвержен фотохимическому самоокислению. [c.545]

Пигменты в живой клетке, конечно, более иди менее тесно связаны в структуры, заключающие в себе белки, липоиды и каротиноиды (см. главу XIV). Франк и Херцфельд [81] считали, что комплекс двуокись углерода — акцептор (СОд и его промежуточные продукты восстановления, H Og и прочие, также связываются с хлорофиллом (фиг. 20). Однако экстракция акцептора двуокиси углерода из клеток водой и возможная его локализация вне хлоропластов (см. главу VIII) делают невозможной устойчивую связь этого компонента с хлорофиллом. С другой стороны, хлорофилл может ассоциироваться с промежуточными катализаторами X или Y, которые сперва подвергаются фотохимическому гидрированию в фотосинтезе, а затем вызывают восстановление комплекса СОд в темновых реакциях. Окислители-заменители (Од, HNOg) также едва ли непосредственно связываются с хлорофиллом, но могут заменять двуокись углерода или комплекс СОд при кинетических взаимодействиях с восстановленным промежуточным продуктом НХ. [c.552]

Спектроскопически важным загрязнением, присутствующим, повидимому, во многих препаратах хлорофилла, является не содержащий магния феофитин, образующийся из хлорофилла во всех случаях, когда последний входит в соприкосновение с кислотами. Цшейле [43], наблюдая ранее слой феофитина на хроматограмме, ошибочно объяснял это явление наличием в экстрактах листа хлорофилла с (см. т. I, стр. 404). Удаление магния из хлорофилла может происходить даже в живых растениях (см. [17, 29, 30]). Так же легко оно может происходить при экстракции, когда пигменты подвергаются воздействию кислот, содержащихся в клеточном соке (чтобы нейтрализовать эти [c.11]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология