Гель-хроматография в тонком слое

Хроматографические методы подразделяют также по способу выполнения. Различают плоскостные и колоночные методы. К плоскостным методам относятся бумажная и тонкослойная хроматография. Здесь разделение веществ происходит в весьма тонком плоском слое. В бумажной хроматографии это бумага, на волокнах которой имеется тонкий слой воды, играющий роль неподвижной фазы. Следовательно, бумажная хроматография относится к распределительной. В, тонкослойной хроматографии порошкообразная неподвижная фаза (адсорбент, ионит, гель) тонким слоем наносится на стеклянную пластинку. Подвижная фаза вместе с разделяемыми веществами перемещается в этом слое. [c.255]

Распределительная хроматография на бумаге, в тонком слое порошка целлюлозы, на колонке с инертным носителем, покрытым тонким слоем жидкости гель-фильтрация Жидкая Жидкая [c.29]

В табл. 1 дана классификация хроматографических методов анализа, основанная на этих показателях. Как видно изданных, приведенных в таблице, при хроматографическом анализе наиболее часто используется колоночная техника работы. Один и тот же метод хроматографического анализа может применяться в различных вариантах, например, осадочную хроматограмму можно получить в колонке с сорбентом, на бумаге или в гелях. Определенный принцип разделения, например, распределение молекул между двумя фазами, лежит в основе различных методов хроматографического анализа. Необходимо также отметить, что в методах тонкослойной хроматографии возможен практически любой принцип разделения — сорбционный, распределительный, ионообменный и т. д. Однако чаще всего разделение в тонких слоях сорбента используется в адсорбционной, распределительной и ионообменной хроматографии жидкостей. [c.7]

Газ-носитель подвижная фаза, В качестве газа-носителя применяют азот, воздух, гелий, водород и реже другие газы, не вступающие в реакцию с исследуемыми газами и наполняющими колонку сорбентом. В качестве наполнителя колонок (неподвижная фаза) могут быть применены указанные ранее адсорбенты — активированный уголь, молекулярные сита (искусственные цеолиты), силикагели, окись алюминия — или специальные жидкости типа высококипящих углеводородов, нанесенные на поверхность малоактивного адсорбента. В Советском Союзе в качестве такового применяют обычно измельченный инзенский кирпич, выпускавшийся ранее под маркой ИНЗ-600, или вновь разработанный диатомовый носитель марки ТНД-ТС-М. За рубежом выпускают аналогичные адсорбенты под различными марками (стерхамол, хромосорб и др.) Такие адсорбенты, на которые наносится тонкий слой жидкости, назьшают носителями (не смешивать с газом-носителем). Их роль состоит в том, чтобы создать большую поверхность для жидкости, являющейся активной неподвижной фазой. Применение в газовой хроматографии вместо активных адсорбентов жидкостей, обладающих различной растворяемостью газов, было предложено Джеймсом и Мартином в 1952 г., что резко увеличило возможности и улучшило метод газовой хроматографии. [c.67]

По оформлению хроматографию можно подразделить на колоночную и тонкослойную. Колонки сорбента могут состоять из активированного угля, хроматографической окиси алю.миния, пермутита, силикагеля, целлюлозы, ионообменных смол (катиониты и аниониты). Разделяемая смесь перемещается в колонке или сверху вниз, или снизу вверх (нисходящая хроматография, восходящая хроматография). В качестве сорбента или носителя используют бумагу, тонкие слои окиси алюминия, силикагеля, геля желатина. Тонкослойная хроматография, впервые предложенная Н. А. Измайловым и М. С. Шрайбер (1937). [c.140]

Те же опыты можно проводить в тонких слоях окиси алюминия, двуокиси кремния, порошка стекла и других носителей, заранее перемешанных с осадителем или смоченных им. В центр тонкого слоя порошка носителя помещают каплю разделяемой смеси. Этот метод называют тонкослойной осадочной хроматографией (Ф. М. Шемякин). Существует также метод капиллярной осадочной хроматографии в отсутствие геля. В капиллярные стеклянные трубки диаметром 0,5— [c.147]

Для практического осуществления хроматографического разделения используют различные устройства. В колоночной хроматографии это колонки, в которых находится неподвижная фаза. В бумажной хроматографии — полоски бумаги, по которым перемещается подвижная фаза. В тонкослойной хроматографии — полоски тонкого слоя адсорбента (ионита, геля). Схематически все эти устройства можно изобразить, как показано на рис. 61, а, где неподвижная фаза заштрихована. На нулевую линию устройства вводят смесь разделяемых веществ Sj и Sj. Потом дают подвижной фазе перемещаться от этой линии ко второму концу устройства, как это показано стрелкой. [c.256]

Смеси можно хроматографировать не только на колонках пористого геля, но и в однородном тонком слое адсорбента. Тонкослойная хроматография получила широкое распространение в современной лабораторной практике начиная с 1956—1958 гг. после того, как Сталь [16] описал простую стандартную методику приготовления тонкого слоя адсорбента. [c.231]

Большое распространение получил электрофорез в тонких слоях для разделения высокомолекулярных веществ на различных носителях, особенно на агаровом, крахмальном и полиакриламидном гелях. Благодаря замечательной разделительной способности этот метод нашел применение прежде всего в клинической биохимии. Напомним, что в подавляющем большинстве случаев разделение с помощью этого метода осуществляется на носителях, приготовленных в форме геля. Опыт, накопленный в области хроматографии в тонких слоях, показал, однако, что для разделения некоторых групп веществ, в первую очередь низкомолекулярных, можно с успехом применять и суспензии некоторых сорбентов. [c.160]

В большинстве случаев по окончании хроматографирования, после того как все низкомолекулярные компоненты (соли) прошли через хроматографический слой, он остается пригодным для последующего применения и регенерировать его не требуется. Это большое преимущество гель-хроматографии. Однако после длительного использования колонки может оказаться, что твердые частицы, содержавшиеся в пробах и не удаленные при фильтровании или центрифугировании перед вводом проб, задерживаются на поверхности геля. Это приводит к закупорке колонки и снижению скорости фильтрации. В таких случаях достаточно извлечь из колонки непосредственно тот тонкий слой, в котором находятся эти примеси. [c.374]

Результаты исследования химических процессов, протекающих в приповерхностном слое полистирола при облучении его светом, обсуждаются также в работах [87— 89]. С помощью УФ- и ИК-спектроскопии, люминесценции, гель-хроматографии и других методов анализа было показано, что при облучении тонких пленок (5—20 мкм) полистирола светом с длиной волны 254 мкм при интенсивности потока порядка 10 Е/(см2-мин) в среде кислорода образуется смесь различных продуктов, что свидетельствует о сложности процессов окисления полистирола, протекающих в условиях эксплуатации изделий из него. [c.99]

Во второй части книги (главы 10—13) рассматриваются вопросы селективности, эффективности и аналитического применения жидкостно-адсорбционной хроматографии. Жидкостная хроматография полимеров (ситовая или так называемая гель-фильтрационная хроматография) и жидкостная хроматография в тонких слоях, изложенные в ряде специальных монографий, не рассматриваются. [c.6]

Происходя из хроматографии на бумаге, хроматография в тонких слоях создала целую эпоху в жидкостной хроматографии. Гидродинамика перемещения жидкости в этом методе чрезвычайно своеобразна, и капиллярные силы в плоском слое волокон или высокодисперсного порошка чаще превалируют над гравитационными при обычной постановке анализа. Хроматография в тонких слоях, так же как и колоночная хроматография, благодаря широким возможностям выбора и подготовки сорбентов, в высшей степени универсальна. В сборнике представлен очерк об эволюции тонкослойной хроматографии, главным образом в области биохимии, биологии и исследования высокомолекулярных веществ. В последнем случае тонкослойный вариант развивает возможности колоночной гель-хроматографии, позволяющей, как известно, фракционировать смесь полимерных молекул в препаративных масштабах. [c.8]

В последнее время предпринимались попытки разделить хелаты методом гель-хроматографии на пластинках с тонкими слоями. Этот вариант разделения можно рассматривать как особый вид распределительной хроматографии. Первые успехи были достигнуты при разделении хелатных комплексов с 8-оксихинолином и р-дикетонами при применении органических растворителей в качестве подвижных фаз (см. табл. 3). [c.24]

Второй набор граничных условий для процесса диффузии относится к случаю, когда в начальный момент имеется тонкий слой растворенного вещества. Это может быть зона образца при любом методе разделения, например при гель-хроматографии вещества (гл. 12) или его седиментации (гл. И). В отсутствие каких-либо внешних сил слой размывается вследствие диффузии. Если в начальный момент слой растворенного вещества занимает положение х = О и содержит граммов растворенного вещества, то в момент времени ( = О граничным условием является с (рс, 0) = И р6(0), где 6(0) — дельта-функция Дирака, значение которой равно бесконечности, когда аргумент равен нулю, и нулю во всей остальной области значений аргумента (см. Дополнение 13.3). Уравнение диффузии для слоя с такими граничными условиями решают прямым способом, используя метод фурье-преобразования. Применяя оператор Фурье к обеим частям уравнения (10.50), получаем [c.213]

Чаще всего используют два типа распределительной хроматографии — хроматографию на бумаге и тонкослойную. В обоих случаях носитель содержит связанную жидкость молекулы воды связаны с целлюлозой при хроматографии на бумаге, а при тонкослойной хроматографии с носителем связан растворитель, используемый для получения тонкого слоя (см. разд. Тонкослойная хроматография ). (Эти методы иногда рассматривают как разновидность адсорбционной хроматографии, поскольку степень разделения зависит и от эффектов адсорбции, однако основным процессом здесь является распределение.) Другими примерами распределительной хроматографии служат газожидкостная и гель-проникающая хроматография, которые будут подробно рассмотрены ниже. [c.175]

Тонкослойная гель-проникающая хроматография напоминает тонкослойную хроматографию тем, что здесь материал также наносится тонким слоем на стеклянную пластинку, образец вводится в виде точки, а подвижная фаза движется вдоль слоя. Однако есть и существенные различия [c.205]

В гл. 24 дано широкое определение хроматографии как процесса разделения, в котором подвижная фаза является газом или жидкостью, а стационарная фаза — жидкостью или твердым телом. В обшем хроматография может быть газовой или жидкостной в соответствии с состоянием подвижной фазы. В газовой хроматографии неподвижная фаза представляет собой или тонкую пленку жидкости на носителе, или твердое тело с большой поверхностью. Жидкостная хроматография может быть нескольких видов ионообменная, в которой подвижная фаза — обычно жидкая, а стационарная фаза — нерастворимый полимер, содержащий ионные группы адсорбционная, в которой стационарная фаза — твердое тело с большой поверхностью жидкостно-жидкостная, в которой неподвижная фаза — тонкая пленка из одной несмешивающейся жидкости, нанесенной на твердое тело гель- или эксклюзионная, в которой неподвижная фаза — гель или другой пористый материал тонкослойная, в которой неподвижная фаза — жидкость, нанесенная на слой тонко измельченного твердого тела, или твердый адсорбент бумажная, в которой стационарная фаза — тонкая пленка жидкости на бумаге как носителе электрохроматография, в которой разделение проводят под влиянием электрического поля. [c.534]

Обзор по любому аспекту газожидкостной хроматографии (ГЖХ) значительно обогащается, если ему предшествует относительно короткая история предмета. В 1950 г. подобный обзор был бы совсем коротким. Он содержал бы единственную ссылку на утверждение Мартина и Синга, относящееся к 1941 г. Подвижная фаза не обязательно должна быть жидкостью, она может быть и паром... Можно, следовательно, осуществлять очень тонкие разделения летучих веществ в колонке, в которой сквозь слой геля, пропитанного нелетучим растворителем, течет постоянный поток газа... [1]. В 50-х годах произошло значительное развитие теории, методов и применений ГЖХ. Однако в статье, написанной в 1960 г., кроме того факта, что методы ГЖХ нашли широкое признание в анализе жирных кислот (и в гораздо меньшей степени при определении метилированных сахаров), содержалось бы относительно мало информации, которая могла бы возбудить повышенный интерес любого химика, кроме восприимчивых ко всему новому и полных воображения биохимика и химика-фармацевта . Оказалось, что больше всего усилий в развитии метода было приложено в области анализа углеводородов. Именно в 1960 г. была впервые продемонстрирована возможность успешного применения ГЖХ для анализа биологически активных соединений с большим молекулярным весом. Оказалось, что методы, созданные для анализа стероидов [3], применимы и для анализа алкалоидов [4]. Вследствие этого в течение последующих нескольких лет колонки с сорбентами, с небольшим содержанием высокотемпературной неподвижной фазы на дезактивированных носителях, а также с ионизационными детекторами высокой чувствительности применили для разделения большого числа разнообразных природных и синтетических веществ, представляющих интерес с точки зрения биологии. Среди исследованных веществ были аминокислоты, ароматические кислоты, витамины, растворимые в жирах и маслах, сахара, биогенные амины, различные лекарственные препараты и другие [5]. В последнее время благодаря применению реагентов, которые позволяют полу- [c.282]

Ход анализа. Анализируемый образец продукта оксиалкилирования тщательно смешивают с 4-кратным избытком Р2О5 или концентрированной Н3РО4 и навеску смеси около 5 мг тонким слоем наносят на спираль пиролизной приставки газо-жидкостного хроматографа. Пиролиз проводят при 500 °С в токе гелия в течение 4 с. Продукты пиролиза подаются током гелия через делитель потока в две стальные капиллярные колонки. Низкокипящая часть продуктов разделяется в колонке размером 50 мх0,25 (1)> а высококипящая часть — в колонке размером 100 мХ 0,8 мм (П), жидкая фаза — полифенил овый эфир. Температура в первой колонке 70 °С, во второй — температуру программируют со скоростью 5 °С/мин от 60 до 200 °С. Детектор применяют пламенно-ионизационный. [c.249]

При определении молекулярного веса техника эксперимента в сущности та же, что и при обычной гель-хроматографии. Необходимо лишь тщательно определять объемы выхода. Как правило, под объемом выхода подразумевают объем элюента, сошедшего с колонки с момента нанесения на нее вещества до появления фракции с максимальной концентрацией, которой на диаграмме соответствует вершина пика (см. гл. П1). Точность определения объема выхода тем выше, чем больше объем колонки (слой геля). Если же поперечное сечение слишком велико, то необходимо наносить больший объем раствора исследуемого вещества (или соответственно калибровочного вещества). Чтобы избежать работы с большими количествами веществ, для определения молекулярного веса необходимо применять по возможности длинные тонкие колонки. Например, Эндрюс [49, 56] использовал колонки размером 2,5 X 50 см, а Уитакер [54] —размером 1,1X200 см. Размеры колонок, применяемых большинством других авторов, находятся в этих пределах. Исключение составляют колонки со стираге- [c.166]

Нанесение слоя является достаточно простой операцией ее вполне можно выполнять с применением любого типа оборудования, выпускаемого для тонкослойной хроматографии. Благодаря хорошей адгезии между гелем и поверхностью стекла применение каких-либо связующих материалов здесь излишне. В сущности для нанесения слоя вообще не требуется дорогостоящего оборудования. Вполне удовлетворительные результаты получаются [12] по методике Барона и Экономидиса [11]. Вначале по краям вдоль пластинки закрепляют полоски из тонкой резины. Затем поперек пластинки наливают кашицу геля и выравнивают ее стеклянным стержнем, плавно прокатывая его по резиновым валикам. Автор использует для этой цели блок из плексигласа с щелью 0,5 мм. По-видимому, такая толщина слоя является оптимальной [7, 8] однако имеются указания на то, что удовлетворительные результаты получаются и при толщине слоя 0,25 мм [13] и даже 0,9 мм [9]. Судя по отзывам, тонкие слои геля (менее 0,5 мм) трудно готовить, тогда как при разделении на толстом слое (более 0,5 мм) получаются несколько расплывчатые зоны. [c.258]

Хроматографические материалы для гель-хроматографии, их назначение и структура подробно описаны в гл. 6. При соответствующей степени грануляции и применении надлежащей методики их также можно использовать для приготовления тонких слоев. Полная информация о декстрановых гелях марки сефадекс суперфайн , поставляемых фирмой Pharma ia, содержится в выпущенной этой фирмой рекламной брошюре [2]. Выбранный гель оставляют набухать в жидкой среде в течение рекомендованного промежутка времени, после чего суспензию геля наносят в виде слоев толщиной 0,5 мм с помощью соответствующего приспособления. Чтобы в системе установилось равновесие, пластинки с нанесенным слоем помещают в специальную камеру (рис. 9.6). В разд. 9.2.2 кратко изложен метод приведения системы в равновесие. В работе [66] описано разделение пуриновых и пиримидиновых оснований и нуклеотидов по упрощенной методике на смеси 16 г сефадекса G-10 с 4 г силикагеля GF254 или 4 г целлюлозы. Приготовленный слой сохраняет разделяющие свойства сефадекса, но прочность его повышается, становится примерно такой же, как у слоев силикагеля или целлюлозы. [c.109]

Рис, 9.14. Определение молекулярных масс аспарагиназы ме тодом гель-хроматографии на тонких слоях сефадекса G-200 [4]. Величина пути перемещения анализируемых соединений отнесена к величине пути пере яещения -глобулина, полученного из сыворотки крови человека. Разделение проведено по методу Радолы [54] (см. текст) с применением буферного раствора 0,05М трис(окси-метил)аминоэтан— НС1 (pH 7,5), 0,2М раствора КС и 0,001М раствора EDTA. [c.131]

Известны два гшда хроматографии газо-адсорбционная и газо-жидкостная. В [И рвом случае в качестве адсорбента применяют гели, активные у ли, молекулярные сита, пористые стекла, модифицированные сорбенты. Во втором — в качестве сорбента служит тонкая пленка растворителя, слой так назы-паемой неподвижной фазы, нанесенной на инертный твердый носитель. [c.171]

Для сиятеза 101-го элемента (названного впоследствии мен делевием) ионами гелия с энергией в 40 Мэе (искусственными к-частицами) облучалась тонкая золотая фольга с нанесенным на нее электролитическим путем слоем эйнштейния (2 Ез), содержащим всего лишь около 10 атомов. Продукты ядеряой реакции выбивались из фольги (ядра отдачи) и собирались сборником (коллектором) расположенным за мишенью. Химический анализ, проведенный с применением иояно-обменной хроматографии, позволил выделить ничтожные количества (в первых опытах всего лишь 17 атомов) нового элемента. [c.222]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология