Целлюлоза в хроматографии ионообменная

Область применения тонкослойной хроматографии практически безгранична, что объясняется возможностью большого выбора слоев различных сорбентов. Для разделения полярных веществ применяют слои адсорбентов, для гидрофильных — распределительную хроматографию на целлюлозе или силикагеле, для гидрофобных — импрегнированные слои (обращенные фазы). Можно применять также ионообменную или гель-хроматографию в тонком слое. Метод тонкослойной хроматографии в настоящее время применяют в основном для целей качественного анализа. Количественное определение возможно в такой же степени, как и в бумажной хроматографии. При проведении определений можно работать с очень небольшими количествами веществ, разделение проходит быстро и с умеренными затратами. Тонкослойную хроматографию в связи с этим можно применять для предварительных опытов по выбору фаз для разделения больших количеств веществ методом колоночной хроматографии. [c.361]

См. лит. при ст. Радиационная химия, Радшгционно-химиче ская технология. Радиоактивность. А. X. Брегер. ИОНИТЫ (ионообменники, ионообменные сорбенты), вещества, способные к ионному обмену при контакте с р-рами электролитов. Большинство И.— твердые, нерастворимые, ограниченно набухающие в-ва. Состоят из каркаса (матрицы), несущего положит, или отрицат. заряд, и подвижных противоионов, к-рые компенсируют своими зарядами заряд каркаса и стехиометрически обмениваются на противоио-ны р-ра электролита. По знаку заряда обменивающихся ионов И. делят на катиониты, аниониты и амфолиты, по хим. природе каркаса — на неорг., орг. и минер.-органические. Неорг. и орг. И. могут быть природными (напр., цеолиты, целлюлоза, древесина, торф) и синтетическими (силикагель, АЬОз, сульфоуголь и наиб, важные — ионообменные смолы). Минер.-орг. состоят из орг. полиэлектролита на минер, носителе или неорг. И., диспергированного в полимерном связующем. Выпускаются в виде зерен сферич. или неправильной формы, порошков, волокон, тканей, паст и изделий (напр., мембран ионитовых). Примен. для очистки, разделения и концентрирования в-в из водных, орг. и газообразных сред, напр, для очистки сточных вод, лек. ср-в, сахара, выделения ценных металлов, при водоподго-товке носители в хроматографии гетерог. катализаторы. [c.224]

Для анализа методом ионообменной хроматографии в тонких слоях на пластинку наносят соответствующие ионообменники. Однако широко распространенные ионообменные синтетические смолы редко применяют в ТСХ, так как они способны к сильному набуханию, вызывающему при сушке слоя растрескивание. Для ионного обмена в тонких слоях применяют жидкие ионообменники, нанося их на поверхность зерненого носителя, смеси ионитов с порошками целлюлозы, специальные сорта целлюлозы, а также минерально-органические иониты. [c.130]

Ионообменные сорбенты органического происхождения представляют собой либо продукты химической переработки угля, лигнина или целлюлозы, либо синтетическим путем полученные высокомолекулярные органические соединения, содержащие ионообменные группы. Последние широко применяются в ионообменной хроматографии. [c.52]

Ионообменная хроматография. Ионообменные смолы являются полимерными органическими соединениями, содержащими функциональные группы, способные вовлекаться в ионный обмен. Различают положительно заряженные анионообменники, представленные органическими основаниями и аминами, и отрицательно заряженные катионообменники, содержащие фенольные, сульфо- или карбоксильные группы. Из сильно- и слабоосновных анионообменников чаще используют производные полистирола и целлюлозы, несущие функциональные группы [c.29]

После первых попыток разделить полисахариды, используя общие сорбенты, такие, как целлюлоза, окись алюминия, силикагель и карбонат кальция [2], сейчас в основном используются два типа колоночной хроматографии ионообменная хроматография для разделения кислых и нейтральных полисахаридов и для выделения их боратных комплексов и гель-проникающая хроматография для разделения соединений в соответствии с величиной их молекулярной массы. [c.129]

Вторая трудность связана с пористой природой многих материалов, используемых в хроматографии. При использовании таких материалов, как древесный уголь, силикагель, крахмал, целлюлоза или ионообменные [c.322]

В качестве сорбентов для тонкослойной хроматографии азотсодержащих соединений (амины, аминокислоты и их производные, белки) используют производные целлюлозы, обладающие ионообменными свойствами, сефадексы, гидроксилапатит, силикагель, порошки целлюлозы. [c.111]

Хроматографические ионообменные бумаги изготовляют из волокнистой ионообменной целлюлозы (см. разд. 104) с добавлением, для прочности, обыкновенной целлюлозы. Хроматография на таких бумагах является вариантом тонкослойной хроматографии на пластинах с порошками целлюлоз-ионообменников (см. разд. 139). [c.245]

Использование ионообменной хроматографии на бумаге основано и а том, что некоторые сорта целлюлозы являются ионообмен-никами по карбоксильным и некоторым гидроксильным группам. Кроме того, бумага может быть пропитана химическими реагентами, обладающими ионогенными группами, способными вступать [c.193]

Наиболее часто используемыми неорганическими ионитами являются окись алюминия для хроматографии , пермутит, фосфат циркония и др. В качестве органических ионитов применяют целлюлозу, сульфо-уголь и синтетические высокомолекулярные вещества — ионообменные смолы. [c.285]

Из таких предварительно сшитых целлюлоз были получены КМ- и ДЭАЭ-целлюлозы с обменной емкостью, соответственно 1,9 и 4,10—4,56 мг-экв г, пригодные для колоночной хроматографии [28]. По-видимому, сшивкой макромолекул целлюлозы при взаимодействии с полифункциональными кислотами следует объяснить возможность получения цитрат- и фосфат-целлюлоз с ионообменной емкостью до 2,4—3,7 мг-экв г. [c.211]

Ионообменная бумага [33]. При проведении бумажной хроматографии на обычных сортах бумаги в щелочных средах процессы распределения перекрываются ионообменными процессами. Действие ионообменной бумаги основано на использовании процессов ионного обмена для разделения веществ. Ионообменную бумагу получают при дополнительной химической обработке карбокси-, сульфо-, аминогрупп целлюлозы или в процессе получения ионообменных смол, смешивая их с бумажной массой. Свойства такой бумаги подобны свойствам ионитов в зернах. Ионообменную бумагу можно применять для проведения быстрых прикидочных опытов в случае длительных разделений. [c.359]

Впервые химически модифицированные препараты целлюлозы, обладающие ионообменными свойствами, были использованы для изготовления бумаги, применяемой в хроматографии. Эти препараты, содержащие сульфогруппу или алифатическую аминогруппу, [c.159]

ПОЛУЧЕНИЕ ПОРОШКОВОЙ ЦЕЛЛЮЛОЗЫ И ИОНООБМЕННЫХ МАТЕРИАЛОВ НА ЕЕ ОСНОВЕ ДЛЯ КОЛОНОЧНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ [c.270]

В качестве гидрофильного носителя неподвижной фазы для хроматографии неорганических веществ применяются главным образом целлюлоза, силикагель и, в определенных условиях, ионообменные смолы. [c.150]

Хроматография в тонких слоях. Одним из недостатков хроматографии на бумаге является зависимость процесса разделения от структуры и свойств бумаги. Эти качества довольно трудно воспроизводимы. Для разделения веществ затрачивается много времени. Метод хроматографии в тонком слое (ХТС), предложенный советскими учеными Н. А. Измайловым и М. С. Шрайбер (17], по технике выполнения являющийся новым вариантом распределительной хроматографии, устраняет многие из этих затруднений. Применение самых разнообразных материалов делает метод поистине универсальным. Вместо волокон целлюлозы в распоряжении исследователя находятся порошки различных сорбентов окись алюминия, силикагель, ионообменные смолы, обеспечивающие высокую скорость фильтрации растворов [18]. [c.80]

К насыщенному раствору (NH4)2S04 добавляют 2 н. NaOH и доводят pH до 7,8. При постоянном перемешивании медленно, по каплям к 50 мл сыворотки кролика добавляют 80 мл насыщенного раствора сульфата аммония (pH 7,8) и перемешивают в течение 2—3 ч. Центрифугируют суспензию при комнатной температуре 30 мин при 1500 g. Первый осадок содержит все -у-глобулины, другие глобулины и следы альбумина. Растворяют осадок в дистиллированной воде до начального объема сыворотки (50 мл). Очищают фракцию у-глобули-нов вторым и третьим осаждениями. После третьего осаждения растворяют осадок в боратном буфере (pH 8,45) до конечного объема 20— 25 мл. Удаляют сульфат аммония диализом при 4°С против боратного буфера в течение 2—3 дней со сменой буфера утром и вечером. Полученный после диализа препарат иммуноглобулинов обычно содержит небольшой осадок денатурированного белка и слегка опалесцирует. Центрифугируют при 4° С в течение 30 мин при 1400 s. В полученном препарате проверяют содержание белка и титров антител. Определяют белковый состав методом электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии ДСН (с. 119). Если полученный препарат у-глобулинов не отвечает требованиям эксперимента по стоте, проводят дальнейшую очистку с применением ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе. [c.308]

По оформлению хроматографию можно подразделить на колоночную и тонкослойную. Колонки сорбента могут состоять из активированного угля, хроматографической окиси алю.миния, пермутита, силикагеля, целлюлозы, ионообменных смол (катиониты и аниониты). Разделяемая смесь перемещается в колонке или сверху вниз, или снизу вверх (нисходящая хроматография, восходящая хроматография). В качестве сорбента или носителя используют бумагу, тонкие слои окиси алюминия, силикагеля, геля желатина. Тонкослойная хроматография, впервые предложенная Н. А. Измайловым и М. С. Шрайбер (1937). [c.140]

При получении ионообменных целлюлоз реакции проводят в мягких условиях, так как сильно деструктирован-ные целлюлозы с высоким содержанием ионогенных групп растворяются в слабых кислотах и щелочах и не пригодны для колоночной хроматографии. Исходным материалом для синтеза является обычно сульфитная древесная целлюлоза, более реакционноспособная, чем хлопковая. [c.61]

При выборе методов разделения пептидов учитывают физ.-хим. свойства, кол-во и длину молекул разделяемых соединений. Для первичного фракционирования смесей коротких пептидов, содержащих до 15-20 аминокислотных остатков, в большинстве случаев используют ионообменную хроматографию на катионитах. Дальнейшее разделение и очистку проводят с помощью хроматографии и электрофореза на бумаге или пластинках с тонким слоем целлюлозы или силикагеля. [c.251]

После завершения реакции защитные группы можно удалить в мягких условиях, не затрагивающих фосфодиэфирной связи. На этом основан фосфодиэфирный метод синтеза полинуклеотидов. Продукт реакции — фосфодиэфир со свободной, потенциально уязвимой для воздействия, отрицательно заряженной группой. Далее, с увеличением длины полинуклеотидной цепи число отрицательных зарядов в соединении также будет увеличиваться. Поэтому в зависимости от условий реакции эти потенциально нуклеофильные центры могут участвовать в нежелательных побочных реакциях. Кроме того, такое многозарядное соединение слищком полярно, чтобы можно было проводить его очистку обычными методами органической химии, например с помощью хроматографии на силикагеле. Вместо этого необходимо использовать хроматографию на ионообменных носителях, обладающих меньшей емкостью (например, на ДЭАЭ-целлюлозе). Фосфодиэфирный метод пригоден для получения веществ лишь в небольших количествах. Однако нейтрализация зарядов путем этерифи-кации подходящими защитными группами перед фосфорилирова-нием нуклеозидов устраняет проблемы, упомянутые выше. В этом случае продуктом реакции конденсации является фосфотриэфир. Фосфотриэфирный метод позволяет работать с большими количествами веществ. Ниже описаны некоторые защитные группы, используемые для блокирования фосфата. [c.167]

Что касается самого процесса ТСХ, то здесь можно усмотреть далеко идущую аналогию с жидкостной хроматографией на колонках. Неподвижную фазу образует н идкость, связанная со слоем фиксированного на подложке гранулированного сорбента, свойства и характеристики которого близки, а иногда даже идентичны таковым для материалов, используемых в качестве носителей неподвижной фазы в колоночной хроматографии. Здесь используются те же производные целлюлозы или силикагеля, к которым надо добавить только полоски ацетилцеллюлозы. Подвижную фазу образует жидкий элюент с аналогичными, рассмотренным ранее свойствами. Неизменной остается и сущность хроматографического процесса, базирующегося на равновесном распределении вещества между неподвижной и подвижной фазами. Как и в любом хроматографическом процессе (гель-фильтрация в тонком слое была рассмотрена в гл. 4), для целей хроматографического фракционирования это распределение должно быть сильно сдвинуто в пользу неподвижной фазы. Из всех вариантов хроматографпп для разделения компонентов белков и нуклеиновых кислот методом ТСХ (сами биополимеры очень редко выступают здесь в качестве объектов) практически пспользуют только два нормальнофазовую распределительную и ионообменную. [c.458]

Распределительная хроматография на бумаге позволяет разделить смесь различных компонентов, но выделяемые при этом количества веществ часто бывают недостаточны для полной их характеристики. В этих случаях разделяют смесь на хроматографических колонках, применяя различные адсорбенты уголь, целлюлозу, ионообменные смолы [28, 33, 42]. [c.74]

Для разделения используют практически все виды хроматографии. Чаще всего применяют колонки с А Оз или ионообменными смолами. Так, при помощи хроматографии были разделены цис-и транс-изомеры [(N143)гВгг] и [Р1(Г Нз)212]- Для разделения оптических изомеров применяют наполнитель из оптически активного вещества. Из водных растворов сорбируют на О- или А-кварце или на ионообменной целлюлозе, из неводных — на О-вин-ной кислоте, О-лактозе (в воде эти наполнители растворяются). [c.418]

Для разделения аминокислот (гидролизата белка) методом тонкослойной хроматографии широкое применение находят пластинки, покрытые тонким слоем ионообменной смолы полистирольной природы с сульфокислотными группировками (типа Дауэкс 50X8 ) или ионообменной целлюлозой. Такие пластинки выпускаются промышленностью, например Фиксион 50x8 (Венгрия), или могут быть приготовлены в лаборатории. В этих пластинках катионообменная смола находится в Na-форме. Пластинки стабильны в водных и органических растворителях, инертны по отношению к окислителям и восстановителям, но подвергаются воздействию щелочей и концентрированных кислот. [c.133]

Неподвижной может быть как водная, так и органическая фаза (в последнем случае говорят о хроматографии с обращенными фазами ). Возможность осуществления того или inroro варианта в значительной мере определяется наличием подходящих инертных носителей. Для экстракции внутрикомплексных соединений более удобна распределительная хроматография с обращенными фазами, поскольку в этом случае легче изменять состав водной фазы. В качестве носителей для органических фаз используют тефлон (фторопласт-4), спликонированный силикагель и некоторые другие. Водные фазы хорошо удерживаются силикагелем, целлюлозой, синтетическими ионообменными смолами. [c.218]

Кроме колоночной хроматографии, ионообменные целлюлозы применяют для сорбции и десорбции белков в статических условиях. Хорошие результаты дает сочетание динамических и статических методов разделения. Интересный пример в этом отношении представляет выделение экзопротеаз Asp. oryzae [41]. Хроматографией на ДЭАЭ-целлюлозе было установлено наличие трех протеаз, которые получены в частично очищенном виде. Изучена сорбция этих протеаз при разных pH на КМ-целлюлозе (рис. 5). Препаративное выделение протеаз осуществлено но следующей схеме протеазы в статических условиях сорбируют на КМ-целлюлозе последовательно при pH 5,5 4,5 3,0. Каждую протеазу элюиюруют при pH 7,0 и частично очищенные препараты хроматографируют на ДЭАЭ-целлюлозе. [c.229]

Так, при очистке так называемого маннитол-специфичного фермента II Е. oli (входящего в состав системы фосфорилирования сахаров, переносимых через мембрану) для извлечения фермента из мембраны использовали 0,5%-ный раствор ДОХ. В его присутствии фермент сажали на колонку гексилагарозы. При элюции в раствор ДОХ добавляли еще и Луброл РХ до 0,5%. Этот детергент не только способствует элюции, но и необходим для проявления активности фермента, поэтому дальнейшую очистку — путем ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе — вели тоже в присутствии [c.185]

Впервые модифицированные препараты целлюлозы, обладающие ионообменными свойствами, применены для изготовления специальных бумаг, предназначенных для хроматографии. Эти материалы, содержащие сульфогруп-пу или ароматическую аминогруппу, получают в сравнительно небольших количествах. [c.152]

Довольно успешно ионообменную хроматографию применяют и для фракционирования белков рибосом. Большинство этих белков также имеет щелочной характер, но они крупнее гистонов, поэтому здесь предпочтение отдается СМ-целлюлозе. Белки рибосом весьма склонны к агрегации, что заставляет вести их хроматографическое фракционирование в присутствии 6 М мочевины. [c.311]

Очистка препарата тяжелого меромиозина с помощью ионообменной хроматографии. Для очистки фермента можно также воспользоваться методом колоночной хроматографии. Для этого супернатант после осаждения миозина и легкого меромиозина (15—30 мл) наносят на колонку (2x11 см) с ДЭАЭ-целлюлозой (ДЭАЭ-52, ватман), уравновешенную 50 мМ трис-НС1 буфером pH 7,9. После нанесения белка колонку промывают двумя объемами того же буфера. Белок элюируют линейным градиентом КС1 от О до 0,5 М (2x250 мл). [c.395]

Р-римые П. можно осадить из водных р-ров смеишваю-щимися с водой орг. р-рителями (напр., этанолом, метанолом, ацетоном). Р-римость конкретного П. определяет методику выделения его из прир. объекта. Так, целлюлозу и хитин получают, отмывая подходящими реагентами все сопутствующие в-ва, тогда как прочие полисахариды вначале переводят в р-р и вьщеляют затем фракционным осаждением р-рителями, с помощью образования нерастворимых ко.мплексов или солей, ионообменной хроматографией и т.д. [c.22]

Ионообменная хроматография. Колонку (40x2,5 см), заполненную КМ-целлюлозой (с. 109), уравновешивают 30 мМ К-фосфатным буфером, pH 6,0, содержащим 10 мМ 2-меркаптоэтанол. Пер1 д нанесением на колонку раствор белка диализуют против уравновешивающего буфера до полного удаления сульфата аммония. На колонку можно нанести до 500 мг белка. После нанесения белка колонку промывают уравновешивающим буфером (примерно 75 мл). Для элюции фермента используют линейный градиент концентрации КС1 от О до [c.272]