Хроматограмма нисходящая

Методики получения распределительных хроматограмм на бумаге. Методика проведения анализа на бумаге аналогична методике, применяемой в тонкослойной хроматографии и описанной в гл. IV. Анализ может выполняться восходящим или нисходящим способом на полосках специальной бумаги. Кроме того, исходная смесь может наноситься в центр круга и далее распределяться концентрическими кольцами от центра к периферии. В этом случае получают круговую хроматограмму. Прибор для получения круговой хроматограммы изображен на рис. 11.2, а приспособление крз жка бумаги для получения круговой хроматограммы — на рис. 11.3. Для подачи подвижной фазы в центр круга в бумаге вырезается фитиль, как показано на рис. 11.3. Конец фитиля опускается в сосуд с подвижной фазой. При нисходящей хроматографии пользуются прибором, изображенным на рис. 11.4. Стартовая линии а этом случае находится в верхней части полоски бумаги. [c.219]

Различают два различных приема бумажной хроматографии. При одном из них разделение веществ вызывается спускающимся в бумаге растворителем (нисходящая хроматограмма). При другом растворитель всасывается в бумагу снизу (восходящая хроматограмма). Нисходящая хроматография имеет некоторые преимущества, главное из которых — возможность применения очень длинных полос бумаги, а поэтому возможность большего разделения отдельных компонентов. Восходящая хроматография имеет преимущество чрезвычайной простоты, не требует почти никакого оборудования и применима в самых примитивных условиях вместе с тем, достигаемое ею разделение зачастую соверщенно достаточно. [c.107]

Рис. VII.4. Схема камеры для получения нисходящей хроматограммы

Бумажная хроматография. Метод прост по аппаратуре и чрезвычайно эффективен для аналитических целей, что приводит к его использованию практически во всех химических лабораториях. Для получения бумажной хроматограммы небольшое количество раствора (1—3 мм ) исследуемой смеси наносят в виде пятна на расстоянии см от конца полоски хроматографической бумаги, которую затем этим концом опускают в специальный подвижный растворитель. В зависимости от применяемого метода подвижный растворитель может поступать сверху или снизу (нисходящая и восходящая бумажная хроматография). Время развития хроматограммы составляет, как правило, 8—20 мин. Бумага может быть расположена горизонтально, как, например, при использовании круглых фильтров. При этом раствор и подвижный растворитель помещаются в центр фильтра, а хроматографические зоны располагаются в виде концентрических кругов. Бумага должна нахо- [c.245]

По другому способу препаративного выделения разделяемых веществ промыванием хроматограмм (нисходящий метод) на стеклянную пластинку с адсорбентом, помещенную в камеру, растворитель при помощи бумажного фитиля поступает из сосуда, расположенного в верхней части камеры. Нижний край пластинки опускают в узкий стеклянный желоб, из которого пипеткой собирают фракции растворителя для анализа. [c.36]

Для получения хроматограммы нисходящим методом служит камера (кристаллизатор диаметром 34 см и высотой 10 см), в которую помещен сосуд с растворителем на подставке (высотой 4 см) (рис. 57). Пластинку на специальной раме помещают в камеру так, чтобы верхний ее конец с нанесенной пробой находился в резервуаре с растворителем, а нижний — на дне камеры. Растворитель из резервуара подается на пластинку при помощи бумажной полоски, затем он проходит вниз через пластинку и стекает на дно камеры. После хроматографирования смеси проводят анализ хроматограммы. [c.122]

Требования к пробе. Проба должна содержать около 1 % каждого из определяемых веществ. Эта концентрация является контрольной. На бумагу наносят 5—50 мкг, т. е. 0,5—5 мкл пробы. В работе применяют микропипетки для качественного анализа лучше пользоваться тонкими капельницами или трубочками, применяемыми для определения температуры плавления веществ. Пробу наносят на бумагу в заранее отмеченное место, находящееся на расстоянии около 2 см от нижнего (или верхнего при получении нисходящей хроматограммы) края, в виде точек или полос. Иногда при проведении количественного анализа предпочитают наносить пробу в виде полос. Перед проведением хроматографии необходимо удалить растворитель, нанесенный вместе с определяемыми веществами, высушивая бумагу горячим, воздухом. [c.354]

Как и Б случае бумажной хроматографии, положение пятна на тонкослойной хроматограмме характеризуется фактором замедления Я/. Слой сорбента может быть закреплен на пластинке при помощи вяжущих веществ. Такую пластинку с закрепленным слоем можно использовать не только для восходящей, но и для нисходящей хроматографии. [c.51]

Рис. 40. Прибор для получения одномерной нисходящей хроматограммы на бумаге

В колоночной хроматографии проводят разделение макроколичеств веществ, при этом пробу в виде раствора отмеряют обычной мерной посудой. Подвижную фазу вводят в верхний конец колонки из резервуара, используя способ нисходящей хроматографии, при которой подвижная фаза движется под действием поля земного притяжения. При небольшой скорости передвижения жидкости в колонке продолжительность анализа сокращают, повышая давление. Обычно непродолжительным считают разделение со скоростью 1—20 мм мин- или 1—10 мл-мин . При проведении градиентного элюирования или при проявлении хроматограммы (см. стр. 344) применяют простую установку, приведенную на рис. 7.9. Она состоит из двух склянок с тубусами. В сосуд А вводят чистый растворитель Ьд, в сосуд Б — растворитель Ьб- При переходе растворителя Ьд в сосуд Б с одновременным переходом подвижной фазы из сосуда Б в разделительную колонку концентрация вещества А в подвижной фазе постоянно возрастает. [c.352]

Аппаратура для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, сосуды для элюента, лампы для облучения хроматограмм и др. Хроматографические камеры значительно различаются по форме и размерам, и это в большой степени зависит от характера процесса хроматографирования (восходящее, нисходящее, круговое, двумерное, препаративное), На рис. 9.15 изображена камера для восходящей хроматографии, на рис. 9.16 — аппаратура для нисходящей бумажной хроматографии. [c.239]

По. методу получения различают следующие распределительные хроматограммы на бумаге одномерные н двумерные (восходящие и нисходящие), круговые, электрофоретические. [c.284]

Для одномерных хроматограмм используют бумажные полосы шириной 4,5—5 см и длиной 30—50 см. Для получения двумерной хроматограммы применяют листы бумаги размером примерно 20 X 25— 40 X 45 см. Восходящие хроматограммы получают при перемещении подвижного растворителя через норы бумаги снизу вверх, а нисходящие— сверху вниз. [c.284]

Рис. 43. Установка для получения бумажной хроматограммы по нисходящему методу

Рис. 40. Камеры для получения нисходящих хроматограмм а — общий вид камеры для получения одной хроматограммы (/ — стеклянный цилиндр 2 — крышка 3 — сосуд с подвижным растворителем 4 — бумага 5 — грузик б — сосуд с неподвижным растворителем) б — поперечный разрез кюветы для одновременного получения нескольких хроматограмм — сосуд с растворителем 2 — стеклянные палочки 3 — листы бумаги).

Рис 17. Камеры для получения восходящей (Л) и нисходящей (Б) хроматограмм, /—камера 2—бумага, 5 —крышка камеры — подставка для ванночки (лодочки) 5 —лодочка 5 — чашка с водой или растворителем [c.128]

Получение одномерной нисходящей хроматограммы. Полоску бумаги с нанесенными на нее пробами вносят верхним концом в сосуд с подвижной фазой, которая постепенно просачивается вниз по бумаге. В качестве камеры используют стеклянный цилиндр емкостью 100—500 мл. Хроматограмму получают на ленте фильтровальной бумаги длиной 25—70 см, шириной 1,5—2 см (рис. 40, а). На дно сосуда помещают бюкс с неподвижным растворителем, насыщенным подвижным, для создания в цилиндре атмосферы насыщенных паров, предотвращающей испарение растворителя с бумаги. [c.116]

Для одновременного получения нисходящих хроматограмм нескольких растворов часто используют кювету, показанную на рис. 40, б. [c.117]

Существуют следующие виды и способы получения распределительных хроматограмм одномерные и двумерные (восходящие, нисходящие) [21], круговые [22], электрофоретические [23]. [c.81]

Рис. 26. Камера для получения нисходящей хроматограммы на узкой полосе бумаги

Рис. 27. Кювета для получения нисходящих хроматограмм на широкой полосе бумаги (вид сверху)

Рис. 28. Поперечный разрез кюветы (см. рис. 27), приспособленной для одновременного получения нескольких нисходящих хроматограмм

Хроматограмму получают нисходящим или восходящим способом. Через 12—18 ч хроматограмму вынимают, подсушивают на воздухе и сразу же проявляют реактивами, приведенными в табл. 5. Проявление основано на сильной восстановительной способности аскорбиновой кислоты. Качественно определяют кислоту либо по окраске пятна, либо по величине Rf. [c.120]

Получение хроматограммы. Растворитель постепенно стекает под действием капиллярных сил в толще хроматографической бумаги в направлении сверху вниз (нисходящая хроматография). Одновременно передвигается по бумаге на определенное расстояние для каждого компонента разделяемой смеси и содержимое нанесенных капель (пятен) как исследуемого, так и стандартных веществ, образуя новые пятна (до проявления практически не всегда различимых глазом). Расстояния, на которые перемещаются пятна, зависят от химического состава и строения компонентов исследуемой смеси. Продолжительность опыта обычно 12—24 ч в зависимости от длины куска бумаги и состава разделяемой смеси. Полученную первичную хроматограмму вынимают из камеры и помещают в сушильный шкаф на 15—20 мин при соответствующей температуре. [c.523]

По способу для разделения примесей пробу раствора дифенилолпропана в этаноле наносили на лист ватмана № 1, пропитанный водой в качестве растворителя использовали четыреххлористый углерод, насыщенный муравьиной кислотой. Хроматографирование вели нисходящим способом для проявления хроматограммы использовали свежеприготовленную смесь водных растворов феррицианида калия и хлорного железа. Количественное определение проводили с помощью хроматометра Ланге (хроматограмму парафинировали, а затем измеряли интенсивность окраски пятен и сравнивали с калибровочным графиком). Применяли также и более простой метод, не требующий указанного прибора — метод сравнения интенсивности окраски в исследуемой и эталонной пробах. Помимо орто-пара-изомера дифенилолпропана, соединения Дианина и трис-фенола I удалось обнаружить 10 неидентифицированных примесей. На основании величины авторы предполагают, что три компонента из десяти являются фенолами с одной группой —ОН. [c.187]

Хроматограмму укрепляют в лодочке для нисходящей хроматографии и помещают в хроматографическую камеру (рис. 17), предварительно насыщенную парами воды и органического растворителя. [c.128]

Для редко используемых систем растворителей или при выборе новых оптимальных условий разделения удобно использовать обычные цилиндры с притертой крышкой. В таком цилиндре можно осуществить как восходящую (рис. 423), так и нисходящую хроматографию (рис. 424). Если определенный растворитель используют для получения большой серии хроматограмм, то удобно пользоваться хроматографическими камерами (рис. 425). то застекленные шкафы с каркасом из нержавеющей стали и с крышкой, снабженной каучуковым уплотнением. Обычно они снабжаются тремя лодочками, т. е. рассчитаны на шесть квадратных хроматограмм. [c.457]

Полученные экстракты подвергали хроматографическому разделению с помощью бумажно хроматографии [бумага леппи-градская медленная растворитель н-бутаиол—уксусная кислота (ледяная)—вода, 4 1 5, органическая фаза хроматограмма нисходящая]. В качество свидетелей наносили хлорогеновую и кофейную кислоты. [c.127]

Одномерную нисходящую хроматограмму можно получить, несколько изменив методику выполнения опыта. Подвижный растворитель, насыщенный неподвижным, наливают в небольшую кювету, закрепленную в верхней части камеры. На дно этой камеры помещают бкркс с неподвижным растворителем, насыщенным подвижным, для создания в камере атмосферы насыщенных паров, предотвращающей испарение растворителя с бумаги (рис. 40). На полоску бумаги на расстоянии 5 см от верхнего края наносят каплю исследуемого раствора. После высушивания пятна этот край полоски погружают в кювету с растворителем (подвижная фаза), который под действием капиллярных сил и сил тяжести перемещается вниз по бумаге. Хроматографирование заканчивается, когда фронт растворителя почти достигает нижнего края бумаги. Проявление хроматограммы осуществляют, как описано выше. [c.160]

Для бумажной хроматографии применяют специальные установки. Простейшая установка представляет собой стеклянный цилиндр, в который помещают кювету с растворителем, опустив в нее один конец полосы фильтровальной бумаги. Чаще всего кювету, содержащую растворитель, располагают так, чтобы вер.хний край бумажной хроматограммы находился в этой кювете, т. е. используют нисходящий поток растворителя. Однако применяют и восходящий поток растворителя. [c.293]

Техника проявления. По технике проявления различают следующие методы хроматографии восходящий, нисходящий и горизонтальный. Наиболее часто применяют мётбц восходящих хроматограмм, для чего бумагу при по- [c.356]

Принцип выполнения одномерной нисходящей хроматограммы легко понять из рис. 43. На конец полоски хроматографической бумаги, как и в предыдущем случае, микропипеткой наносят каплю испытуемого раствора. Полоска бумаги опускается верхним концом (тем самым, где нанесена капля) в лоток с растворителем и свободно свисает вниз. Растворитель впитывается бумагой и опускается по полоске вниз, смывая нанесенную пробу вещества. Разделение компонентов и дальнейшая обработка хроматограммы проводятся так же, как и при получении хроматограммы восходящим методом. [c.160]

Получение нисходящих одномерных хроматограмм. Используют камеру, представляющую собой цилиндр емкостью 100—500 мл, или стеклянную ванночку (45X25X30 мм). Хроматограмму получают на узкой ленте фильтровальной бумаги длиной 25—30 см, шириной 1,5—2 см (рис. 23). При использовании других камер применяют более широкие листы бумаги, форма которых показана на рис. 24. [c.81]

Техника выполнения хроматографии на бумаге может быть различной (табл. 5.5). Каплю исследуемого раствора наносят на фильтровальную бумагу, подсушивают, далее бумагу подвешивают вертикально в сосуде с растворителем. Растворитель может либо стекать сверху (нисходящая хроматограмма), либо подниматься вверх по бумаге, нижний конец которой опущен в растворитель. Радиальная хроматограмма получается при нанесении капли испытуемого раствора в центр круглого листа хроматографирующей бумаги. Растворитель в этом случае подается по фити- [c.112]

Нередко применяют друмерную бумажную хроматографию проведя разделение способом, например, нисходящей хроматографии, лист бумаги поворачивают на 90° и повторяют разделение, но с другими растворителями (в этом случае разделяемые вещества будут характеризоваться уже другими значениями Rf). В результате после фиксации и окраски специфическими красителями получают хроматограммы (рис. 59), на которых пятна соответствуют каждому из разделяемых веществ. Для идентифицирования пятен обычно рядом со смесью разделяемых веществ наносят отдельно капельки чистых компонентов смеси (так называемые свидетели ) при сравнении их расположения [c.147]

ТСХ с нисходящим элюированием применяют для анализа проб, компоненты которых очень медленно движутся по слою. Элюент в. этом случае подают иа пластину из специального устройства сверху. К, капиллярным силам добавляется сила гравитации. Таким образом в некоторых случаях удается дост (чь лучшего разделения по сравнению с первым вариантом. Для горизонтального элюирования используют пластины с незакрепленным слоем сорбента. Г1.яа-стину при этом закрепляют горизонтально, а растворитель подают с помощью фитиля из мягкой ткакк. Во всех случаях хроматограмма имеет нпд окрашенных пятен (рис. 28.10). [c.611]

Чистоту препарата определяют по прозрачности водного раствора, потере в весе не более 0,5% при высушивании, отсутствию примеси нор-морфина (111) (0,004 мл 10%-ного раствора налорфина наносят микропипеткой на полоску бумаги для хроматографирования и после высушивания пятно на бумаге обрызгивают буферным раствором с pH 7. После высушивания проводят хроматографирование нисходящим методом в системе н-бутиловыи спирт — вода (1 1). Хроматографирование ведут 5—6 ч (фронт растворителя проходит на 15 см от линии старта). Хроматограмму высушивают и проявляют 0,1 н. раствором йода. Йод отмывают водой и пятна обводят карандашом. Не должно быть пятна между линией старта и пятном самого налорфина. [c.477]

Разделение оснований ДНК проводят методом нисходящей хроматографии (с. 126). Растворитель заливают в камеру и оставляют на ночь для насыщения. На линию старта наносят по 0,05—0,1 мл гидролизата ДНК. На эту же хроматограмму наносят растворы оснований- свидетелей в количестве 0,05—0,07 мкмоль. Процесс разделения длится от 20 до 40 ч. Локализацию азотистых оснований проводят в ультрахемископе. Расположение оснований в порядке удаления от [c.178]

При гидролизе 4-0-метилглюкуроноксиланов образуются D-кси-лоза, 4-0-метил- )-глюкуроновая кислота, нейтральные и кислые олигосахариды. Такие смеси разделяют на колонках с анионитом [131, 182], углем [184], порошкообразной целлюлозой [183, 185]. Более совершенное разделение компонентов достигается хроматографией на бумаге. Этим методом осуществляется также предварительная идентификация разделенных веществ. Для исследования продуктов гидролиза на ленты (1—2X48 ai) хроматографической бумаги наносят 0,02—0,05 мл гидролизата, содержащего 1—3% редуцирующих веществ, и разделяют его нисходящим потоком растворителя этилацетат—пиридин — вода (5 1 5), контролируя разделение проявлением одной из параллельных лент. После отделения моносахаридов участки хроматограмм, содержащие олигосахариды, отрезают и элюируют [c.129]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология