Получение элюента

Градиент может создаваться либо со стороны насоса, где имеется низкое давление, либо с другой стороны, с высоким давлением. Если два или три растворителя для получения элюента смешиваются со стороны всасывания насоса, речь идет о градиенте низкого давления. [c.268]

Определение компонентного состава битумов. В зависимости от выбора экстрагентов для осаждения, элюентов и адсорбентов для хроматографирования результаты определения могут быть неодинаковыми, что и наблюдается в работах разных авторов. Наибольшее применение при исследовании компонентного состава битумов у нас в стране нашли лишь несколько методик. Они отличаются в основном аппаратурным оформлением, но не полученными результатами. [c.8]

Метод был усовершенствован применением фронтального варианта [162]. Разделение стереоизомеров проводилось в колонке, заполненной смесью тиомочевины и толченого кварца, в качестве растворителя и элюента использовали 5 % раствор метанола в бензоле. Соотношение тиомочевины и разделяемой смеси составляло л 120 1, продолжительность опыта 100—120 ч. Переход к фронтальному варианту привел к повышению выхода индивидуальных стереоизомеров с 7—20 до 80 % и степени чистоты с 98 до 99,8 7о, как показано на примере разделения 1-метил-4-трег-бутилциклогексанов [163]. Важными преимуществами фронтального варианта являются возможность работы с малым количеством смеси (0,2 г вместо нескольких десятков граммов), применимость метода даже при д 1 5 и для стереоизомеров, аддукты которых нестойки в сухом виде, если только их устойчивости под слоем растворителя достаточно отличаются друг от друга. В работе [164] фронтальный тиомочевинный метод успешно применен для разделения экзо- и эндо-1,3-диметил бицикло [2,2,1]геп-танов. При разделении этой пары углеводородов, как и в ряду диалкилциклогексанов [165] в качестве общей закономерности отмечается, что низкокипящие стереоизомеры, независимо от их конфигурации, образуют менее устой чивые аддукты. В работе [166] определены с помощью моделей Стюарта — Бриглеба поперечные сечения молекул стереоизомерных диалкилциклогексанов и сопоставлены полученные данные с устойчивостью аддуктов с тиомочевиной. [c.78]

Если разделению подвергалась смесь неокрашенных веществ, то поступают следующим образом отбирают равные по объему (или по весу) фракции элюента, из каждой фракции отгоняют растворитель и строят выходную кривую, характеризующую содержание остатка в каждой фракции (рис. 58). Для определения содержания вещества в полученных фракциях применяют и другие методы анализа, например измерение показателя преломления, вытекающего из колонки элюента. [c.49]

Хроматографическое разделение монофосфата, дифосфата и трицикло-фосфата. При охлаждении в смеси поваренной соли со льдом готовят растворы следующих веществ (по 40 мг) в 5 мл воды монофосфат, пирофосфат и триметафосфат. Часть этих растворов смешивают. Следует познакомиться с методикой работы методом хроматографии на бумаге (разд. 38.3.6). При помощи стеклянной палочки или микропипетки отбирают по капле каждого из четырех полученных таким образом растворов и наносят их на бумагу. Используют метод восходящей хроматографии. Для приготовления элюента смешивают 120 мл метанола, 10 мл разбавленной уксусной кислоты (2 мл ледяной уксусной кислоты и 8 мл воды) и 30 мл буферного раствора. Готовят в колбе на 1 л смеси из 133,3 г трихлоруксусной кислоты и 30 мл 25%-ного раствора NH3 и разбавляют дистиллированной водой до метки. [c.552]

К моменту полного насыщения адсорбента вытеснителем детектор запишет ступенчатую выходную кривую, отличающуюся от фронтальной кривой тем, что каждая ступень соответствует чистому компоненту. Высота ступени характеризует компонент с качественной стороны, а длина ступени пропорциональна содержанию данного компонента в исследуемой смеси. Обязательным условием для хорошего разделения, в противоположность элюент-ному способу, является резко выраженная выпуклая форма изотерм адсорбции разделяемых компонентов и вытеснителя. А это условие выполнимо лишь в случае применения высокоактивных адсорбентов активированных углей (березового БАУ, каменноугольного антрацита АГ-2, норита), силикагелей различных марок и др. Трудность выбора концентрации вытеснителя в проявителе, взаимная диффузия на границе зон, препятствующая получению на выходе из колонки достаточно чистых компонентов разделяемой смеси, а также длительность процесса разделения затрудняют [c.16]

Примесь воды в неполярном или слабополярном элюенте приводит к уменьшению удерживания и влияет на селективность разделения на полярных адсорбентах, в частности, на силикагеле с гидроксилированной поверхностью. Для получения воспроизводимых результатов необходимо поддерживать постоянную концентрацию воды в элюенте. Вместе с тем, изменяя концентрацию воды в элюенте, можно регулировать удерживание и селективность, а экранированием особо активных мест поверхности приблизить начальную часть изотермы адсорбции к линейной, т. е. получать симметричные пики при небольших дозах. Однако на практике трудно поддерживать постоянную концентрацию воды в элюенте, так как, во-первых, практически все элюенты, даже алканы, в той или иной мере содержат примесь воды, содержание которой изменяется в зависимости от влажности воздуха и, во-вторых, изменения температуры и состава элюента приводят [c.297]

Эти результаты аналогичны полученным при разделении на полярном адсорбенте — силикагеле с гидроксилированной поверхностью при элюировании неполярным элюентом н-гексаном моно-н-алкилзамещенных бензолов (см. рис. 16.2 и 16.3). В обоих случаях в гомологических рядах соответствующих семейств (молекулы каждого семейства имеют одинаковую жесткую часть) удерживание уменьшается при усилении межмолекулярного взаимодействия лиофильного хвоста молекулы с элюентом. Таким образом, в этих столь, казалось бы, несходных случаях наблюдается аналогичное влияние межмолекулярных взаимодействий дозируемое вещество— адсорбент, дозируемое вещество — элюент и элюент — [c.319]

Элюентный анализ. Получение хроматограмм в элюентном анализе, т. е. растворение сорбируемых веществ при обработке их новыми порциями растворителя, широко применяют в аналитической практике. Растворитель может оказывать влияние на значения констант в изотермах адсорбции [ср. уравнения (7.1.12 и 7.1.13)]. В качестве элюента (элюирование = раство- [c.344]

В этой книге приводится несколько гель-хроматограмм, полученных на самодельном приборе с дифференциальным рефрактометром колонки были заполнены носителем на основе поливинилацетата в качестве элюента применяли диметилформамид [21]. [c.99]

Результаты, полученные методом ТСХ (а особенно — их воспроизводимость), очень зависят от неизменности толщины слоя и распределения размеров гранул, поскольку эти параметры сильно влияют на скорости течения элюента и миграции веществ. Вот почему в исследовательской практике предпочитают, если это возможно, пользоваться готовыми пластинками, промышленное производство которых хорошо стандартизовано. Если же возникает необходимость изготовления пластинок в лаборатории, то надо принять все меры для достижения однородности слоя сорбента. В качестве подложек для самодельных пластинок используют зеркальное стекло с гладкими краями. Перед нанесением слоя оно должно быть тщательно промыто детергентом и хромовой смесью. Способы приготовления и гомогенизации суспензий сорбентов указаны в предыдущем разделе. Важно иметь в виду, что при стоянии частицы суспензий незаметно для глаза оседают, так что распределение их размеров по объему становится неоднородным, поэтому наносить суспензию на пластинку надо сразу же после окончания гомогенизации. В простейшем варианте эту операцию можно осуществить с помощью пипетки с расширенным отверстием. В нее набирают заранее рассчитанный объем суспензии, быстро и более или менее равномерно распределяют его по поверхности пластинки, двумя-тремя покачиваниями во взаимно перпендикулярных направлениях обеспечивают надежное покрытие всей поверхности пластинки, а затем кладут ее на установленный строго горизонтально (по уровню) стол. С этого момента в течение получаса пластинку не следует трогать с места, но можно прикрыть ее от пыли коробкой из плексигласа. После предварительного подсушивания пластинки можно [c.466]

На разделение в ТСХ влияет ряд факторов-состав и св-ва элюента, природа, дисперсность и пористость сорбента, т-ра, влажность, размеры и толщина слоя сорбента, размеры камеры. Поэтому для получения воспроизводимых результатов необходимо тщательно стандартизовать условия опыта. Соблюдение этого требования позволяет устанавливать R с относит, стандартным отклонением 0,03. В стандартных условиях Кг постоянна для данного в-ва и используется для идентификации последнего. [c.609]

Для получения молекулярновесового распределения из собранных фракций элюента выделяют полимер, определяют его количество и молекулярный вес для каждой фракции и строят на основании таких данных кривые интегрального и дифференциального распределения. [c.81]

Влияние характера разделения смол но описанной выше методике видно из данных, приведенных в табл. 17. При хроматографическом разделении смол, выделенных из сырых нефтей и твердых природных битумов, наблюдаются следующие закономерности в изменении элементного состава фракций смол, полученных десорбцией с силикагеля в следующем ряду элюентов четырххло-ристый углерод—бензол—ацетон—спирто-бензольная смесь. Фракция смолы, извлекаемая четыреххлористым углеродом, характеризуется минимальным содержанием гетероатомов (S, О, N) обычно в пределах 3—5%, лишь в отдельных случаях до 5—8,5%. Весовое отношение С/Н колеблется в пределах 8—8,6. Это фракция [c.61]

Б качестве эталонных веществ для получения сопоставительных величин удерживания в области фракционирования использовались полистирол с ММ=300000 (для фиксирования свободного объема колонки и нижней границы удерживания на колонке с гелем) и сквалан с Ш=423 (как метка для верхней границы удерживания). Разделяемые компоненты будут иметь объемы удерживания между этими двумя метками. Наличие меток позволяет проводить корректировку на неучитываемое изменение условий разделения, связанное с изменением скорости элюента (проницаемости колонки), температуры окружаицей среды и т.п. Приведенные к сдинаковш условиям хроматограммы исследованных продуктов и эт<злонов приведены на рис.З. [c.55]

Для получения хирального адсорбента можно воспользоваться не только описанной выше химической, но и сорбционной иммобилизацией соответствующего лиганда. Для усиления сорбции в этом случае надо, с одной стороны, ввести в лиганд достаточно длинную н-алкильную цепь (например, использовать М-алкилзамещенную -аминокислоту), а с другой стороны, использовать силикагель с химически привитыми к его поверхности также длинными н-ал-кильными цепями, например по рассмотренной схеме (5.10) реакции силанольных -групп поверхности кремнезема с монохлордиме-тил-н-октадецилсиланом. В результате конформационной подвижности н-алкильные цепи лиганда проникают в слой н-алкильных же подвижных цепей, привитых к поверхности кремнезема, и достаточно прочно удерживают лиганд. Комплексообразующие ионы меди в этом случае должны находиться в элюенте и образовывать комплексы с одной стороны с иммобилизованными лигандами и, с другой стороны, с лигандами, содержащимися во вводимой смеси. Так, например, силикагель с химически привитыми н-алкильными цепями сорбирует У-гептил-1-гидроксипролин (С7-1.-Нур). На рис. 5.12 приведена схема полученного так хирального лигандообмен- [c.107]

Рис. 5.13. Хроматограмма рацематов а-аминокислот, полученная при 293 К на колонне, заполненной силикагелем с привитыми октадецильными группами, сорбировавшими Н-гептил- 1-гидроксипролин элюент —смесь метанола с водой (15 85 по объему) с добавлением 10 моль/л Си(СНзСОО)2 при pH 5.0. (В. А. Даванков и др., 1980)

На рис. 14.13 представлены хроматограммы четырех малых доз растворов цимарина в элюенте этанол — вода, концентрация цимарина в которых изменялась в пределах от 0,0646 до 0,4400 мг/см . Пики в этой области остаются симметричными и положение их максимума не изменяется. Из определения времени удерживания цимарина и практически неадсорбируемого на гидрофобизирован-ной поверхности из водных растворов компонента (весьма гидрофильной галловой кислоты) при независимости времени удерживания от размеров частиц адсорбента для оптимальной скорости потока при разных длинах колонн был получен удерживаемый объем на 1 г адсорбента = = 4,9 смз/г (здесь J — соответствующая константа Генри для адсорбции цимарина на силанизи-рованном силикагеле из водно-этанольного элюента). [c.263]

Определение гиббсовской адсорбции статическим методом производилось по формуле (14.2), причем концентрации цимаринав исходном и в равновесном растворе над адсорбентом находили методом жидкостной хроматографии на вспомогательной колонне. На рис. 14.15 показана изотерма, определенная в статических условиях при более высоких (приблизительно на два порядка), чем на рис. 14.14, концентрациях. Зкстраполяция наклона этой изотермы к с=0 дает =5,0 см /г, что также практически совпадает со значениями, полученными из хроматограмм. Таким образом, прямой метод жидкостной хроматографии (из анализа формы пиков) позволяет в этом случае слабой адсорбции найти правильное (равновесное) значение константы Генри и оп-Рис. 14.13. Хромато- ределить недоступную для статических измере-граммы на силикаге- ний начальную часть изотермы адсорбции. Так ле, силанизированном как элюент здесь СОСТОИТ из смеси этанола (30%) и воды (70%), а адсорбентом служит гидрофобизированный силикагель, то попадание в элюент влаги из воздуха не может повлиять на величины а , и п . [c.264]

При осуществлении элюентной хроматографии в верхнюю часть хроматографической колонки, наполненной, например, катионитом в водородной форме (Н-ф9рме), вводится смесь разделяемых ионов. Для получения компонентов в чистом виде элюирование проводят раствором кислоты или другим элюентом при постепенно возрастающей его концентрации (градиентное элюирование). Если исследуют смесь элементов разных групп периодической системы, то разделение при помощи элюирования растворами электролитов облегчается тем, что элементы разной валентности обладают различным сродством к иониту. Сорбируемость ионов возрастает от одновалентных к двух- и трехвалентным. Приблизительную закономерность сорбируемости ионов с одинаковой валентностью MOHiHO представить в виде сорбционных рядов [c.285]

В простейшем варианте хроматографирование осуществляют на колонках, в которые помещают сорбент, служащий стационарной фазой. Раствор, содержащий смесь веществ, которые надо разделить, пропускают через колонку. Компоненты анализируемой смеси перемещаются через стационарную фазу вместе с подвижной фазой под действием силы тяжести или под давлением. Разделение осуществляется благодаря перемещению компонентов смеси с различной скоростью вследствие их взаимодействия с сорбентом. В результате вещества распределяются на сорбенте, образуя адсорбционные слои, называемые зонами. В зависимости от целей разделения или анализа могут быть разные варианты последующей обработки. Наиболее распространенный способ — элюирование. Через колонку с адсорбированными на ней веществами пропускают подходящий растворитель — элюент, который вымывает из колонки один или несколько сорбированных компонентов их затем можно определить в полученном растворе — элюате. Можно пропустить через колонку реагент-проявитель, благодаря которому сорбированные вещества становятся видимыми, т. е. слой сорбен- [c.107]

Сорбенты, применяющиеся в ГПХ, имеют различные свойства. Как правило, их подразделяют на мягкие, полужесткие и жесткие гели. К мягким относят гели, приготовленные на основе полисахаридов (крахмал, декстран, целлюлоза). Мягкие гели не устойчивы к давлению и при высоких скоростях движения элюента деформируются. Такие гели невозможно использовать в современной ВЖХ. Полужесткие ге.ли получают сополимеризацией стирола и дивинилбензола (стирогели) или полимеризацией випплацетата. Сорбенты, полученные на основе этих гелей, способны выдерживать высокое давление и применяются в ВЖХ. Такие гели в отличие от гидрофильных мягких могут быть использованы с органическими растворителями. Жесткие гели представляют собой стекла или силикагели, имеющие фиксированные размеры пор Недостатком этих материалов является их высокая адсорбционная способность. Для подавления активности их предварительно обрабатывают специальными химическими веществами. [c.610]

Хроматографическая бумага должна быть чистой, однородной по плотности, структуре и ориентации во-Л01ЮН. В наиболее простом случае используют плотные сорта фильтровальной бумаги. Обычная бумага гидрофильна и содержит до 20 % влаги, что является вполне достаточным количеством в том случае, когда НФ служит вода, а ПФ — несмешивающийся с водой органический растворитель. В хроматографии на бумаге можно реализовать обращенно-фазовый вариант. В этом случае бумагу предварительно пропитывают гидрофобным веществами (парафин, каучук и др.), либо подвергают специальной химической обработке, устраняя гидроксильные группы ,еллюлозы. Подвижной фазой в обращенно-фазовом варианте служат вода и смеси воды с полярными органическими растворителями. В хроматографии на бумаге, как и в других видах хроматографии, большое значение имеет правильный выбор неподвижной и подвижной фаз. Используемые фазы ие должны смешиваться друг с другом. Анализируемые вепгества должны растворяться в НФ луч не, чем в ПФ, иначе они будут двигаться со скоростью движения фронта элюента. В настоящее-время в качестве ПФ индивидуальные растворители используют, как правило, реД со. Чаще применяют смеси эмпирически подобранных компонентов. Хроматограмма аналогична полученной в методе ТСХ и имеет вид пятен более или менее отделенных друг от друга. Для проявления пятеп пригодны методы, описанные для ТСХ. [c.615]

Гидрирование проводят в установке, показанной на рис. 1.3. Подготовительные операции аналогичны описанным при получении гидрокоричной кислоты. В реакционную колбу помещают раствор 4,4 г (0,03 моль) неочищенного 5,8-дигидро-1-нафтола (получение см. 3.8) в 20 мл этилацетата и 0,3 г катализатора. После поглощения рассчитанного количества водорода катализатор отфильтровывают, растворитель удаляют в вакууме. Остаток быстро затвердевает. Перекристаллизацией его из петролейного эфира (т. КИП- 40-60 °С) получают 3,7 г (84 %) почти бесцветных кристаллов т. пл. 68-69 °С. При необходимости может быть проведена их дополнительная очистка методом вакуумной сублимации при температуре 100 °С и давлении 4 мм рт. ст. Хроматография элюент - хлороформ 0,5. Спектральные характеристики приведены на рис. 1.5. [c.84]

Процедура гидрирования бензальацетофенона аналогична описанной для получения гидрокоричной кислоты. Реакционная смесь состоит из 5,2 г (0,025 моль) бензальацетофенона, 20 мл этилацетата и небольшого количества скелетного никеля реакцию проводят при комнатной температуре. После поглощения рассчитанного количества водорода рекомендуется провести контроль полноты реакции методом ТСХ. Элюент - хлороформ Я/ бензальацетофенона 0,7, Я/ бензилацетофенона 0,8. После завершения процесса гидрирования реакционную смесь фильтруют, этилацетат частично удаляют. При охлаждении раствора происходит кристаллизация бензилацетофенона. Т. пл. 69-71 °С, выход 5 г (95 %). Спектральные характеристики приведены на рис. 1,7. [c.87]

Колонку элюируют смесью дихлорметан — гексан (3 1), вымывая всю фиолетовую зону (прим. 4), на что идет —800 мл элюента. Красно-фиолетовый элюат упаривают до объема 30—40 мл. Выпавшие фиолетовые кристаллы отфильтровывают, промывают гек-саном. Выход сырого продукта 1,22 г (52,5%). По данным тонкослойной хроматографии (силикагель, H2 I2 — петролейный эфир, 1 1) полученный продукт (Rf 0,29) содержит лишь незначительную примесь с R/ 0,40. Ее можно отделить перекристаллизацией вещества нз смеси дихлорметана с метанолом. [c.141]

Запишем некоторые вытекающие из полученного заключения следствия. Время, необходпмое для того, чтобы передний фронт элюента дошел до конца колонки ( о), очевидно, можно подсчитать по скорости элюции п длине колонки =. Ыи. Сопоставляя это с вглражением (5), найдем, что время элюции зоны д в (1 + К) раз больше, чем [c.28]

Рассмотрению возможностей обратнофазовой гидрофобной хроматографии белков в основном посвящен сравнительно недавно опубликованный обзор [Rubinstein, 1979]. Основные его выводы совпадают с тем, что было сказано выше при рассмотрении обратнофазовой гидрофобной хроматографии пептидов. Для белков с молекулярной массой в интервале 12—30 тыс. Дальтон автор отдает предпочтение силикагелям, модифицированным октилсиланом (Са). В качестве органического компонента элюента, по его мнению, следует предпочесть градиент концентрации пропанола, вплоть до 40%-ной концентрации, если позволяет растворимость белка. Для получения узких пиков рекомендуется в качестве водного компонента использовать буфер высокой (примерно 1 М) концентрации, подавляющий ионное взаимодействие белка с силанольными группами матрицы. При pH 5—6 разрешение получается обычно хуже, чем при pH 4 (формиатно-пиридиновый буфер) или 7,5 (Na-ацетатный буфер). Существенно указание на то, что скорость элюции следует снизить до 60—90 мл/см Ч. Продолжительность фракционирования белков при этом остается относительно небольшой — 1—3 ч. Белки целесообразно разделить предварительно на группы [c.210]

Декстран ( Sephadex ) — очень гидрофильный материал. Присоединение ионогенных групп происходит также по гидроксилалг полисахарида. Пористость и жесткость матриц на основе сефадексов зависит от процентного содержания сшивки (эпихлоргидрина). Модифицированные сефадексы для ионообменной хроматографии выпускаются на основе только двух типов сефадексов G-25 и G-50. Размеры пор у модифицированных сефадексов значительно выше, чем у двух исходных типов матриц, за счет уже знакомого нам эффекта расталкивания одноименно заряженных ионогенных групп. Ионообменные сефадексы соответственно и менее жестки их объемы тоже могут изменяться в зависимости от pH и ионной силы элюента. Особенно сильно это выражено у ионообменников, полученных на основе сефадекса G-50. Рабочий диапазон pH 2—12. [c.251]

ИЗОТОПНЫЕ ГЕНЕРАтОРЫ, устройства для получения короткоживущих радионуклидов. Обычно представляют собой хроматографич. колонку с поглощенным на сорбенте материнским сравнительно долгоживущим радионуклидом, при радиоактивном распаде к-рого образуется (генерируется) дочерний короткозкивущий радионуклид. Иногда И. г. иаз. сам долгоживущий материнский радионуклид. С помощью подходящего элюента (напр., р-ра комплексона) или экстрагента из И. г. можно в любое время вьщелить короткоживущий радионуклид (в спец. лит. отделение радионуклида из И. г. часто наз. доением ). Др. важное достоинство И. г.-возможность получать радионуклиды без носителей, т. е. не содержащие в заметных кол-вах стабильных изотопов данного элемента. В табл. приведены обычно используемые в И. г. пары материнских и дочерних радионуклидов. [c.196]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология