Экстинкция, измерение

Возможно прямое определение белка путем измерения оптической плотности (поглощения) при 280 нм, основанное иа присутствии в белке остатков тирозина и триптофана. Зная удельный коэффициент экстинкции е (оптическая плотность 1%-иого раствора белка при 280 им и длине оптического пути 1 см), можно, исходя из измеренной экстинкции раствора белка неизвестной концентрации, установить содержание белка (в мг/1 мл). [c.356]

Люминесцентный метод характеризуется исключительно ВЫСОКОЙ чувствительностью и специфичностью. Для веществ с высоким коэффициентом экстинкции (е 10 ) и большим квантовым выходом флуоресценции (около 1) можно обнаружить до 10 ° М этих веществ, Поскольку часто спектры флуоресценции растворов органических веществ представляют собой размытые широкие полосы, то для увеличения информации, получаемой из спектров флуоресценции, проводят измерения в парах. В этом случае спектры имеют определенную структуру, т. е. содержат узкие характерные полосы. [c.161]

VII1.2.3. Вычислить время половинной коагуляции й по результатам измерения экстинкции коллоидных растворов и суспензий поглощающих частнц через указанное время t от начала коагуляции, [c.261]

После того как установлено расположение пятен, бумагу разрезают на куски, каждый из которых соответствует определенному пятну. Из этих кусков бумаги основание или нуклеотид элюируют кислотой. Коли- д-чество каждого основания можно определить по оптической плотности кислого экстракта в соответствующей области (О ультрафиолетовой части спектра, если известны молярные коэффипиенты экстинкции. Измерения производят при помощи подходящего спектрофотометра. Таким путем определяют от 5 до 40 мкг адсорбированных на бумаге веществ. [c.31]

Если круговой дихроизм мал, то коэффициент экстинкции, измеренный с помощью спектрофотометра, можно считать равным среднему коэффициенту экстинкции, так как [c.43]

Величина е, характеризующая способность вещества к поглощению света определенной длины волны, называется молярным коэффициентом экстинкции. Если длина измеряется в см, а концентрация — в молях на литр, то единицей измерений для коэффициента экстинкции является л/моль см. Поскольку число молей в литре равно числу ммолей в мл, т. е. в 1 см , то можно ту же единицу записать в виде см /ммоль. Нетрудно убедиться, что молярный коэффициент экстинкции есть число, показывающее, на какой площади нужно разместить 1 ммоль (6,02 10 молекул) вещества, чтобы при прохождении излучения через такую поверхность интенсивность излучения упала бы в 10 раз. [c.148]

При больших коэффициентах экстинкции измерения пропускания становятся трудоемкими, и на практике в таких случаях исследуют отражение среды. [c.237]

Измеряя оптическую плотность раствора, содержащего вещество с известным спектром поглощения, т. е. известной зависимостью коэффициента экстинкции е от длины волны X, нетрудно определить его концентрацию в растворе. Для этого достаточно измерить оптическую плотность при одной длине волны [обычно для этого проводят измерение при длине волны, соответствующей максимуму на кривой е( 1)1 в кювете известной толщины. Соотношение (10.6) сразу же дает неизвестную нам величину концентрации С. В связи с этим спектроскопия в видимой и ультрафиолетовой области является важным методом определения концентраций веществ (количественного анализа). [c.153]

В данном случае /Сь — кажущаяся константа диссоциации (влияния, которые объясняются коэффициентами активности, входят в К, как обычно). Если г — экстинкция, измеренная при концентрации полимера [Р] (рис. 8), — экстинкция для правой части кривой, где весь краситель связан в комплексы, и — экстинкция для левой части, где комплексообразования фактически не происходит, тогда для величин, которые могут быть измерены экспериментально, можно написать следующее [c.88]

Проблема измерения кругового дихроизма, т. е. измерение Де = 8г—Ёг, состоит в том, что эксперимент проводится в области полосы поглощения, а отношение Де/е (е — коэффициент экстинкции)— очень малая величина. Для выполнения эксперимента необходимо формирование лучей с круговой поляризацией для заданной длины волны. [c.197]

Пояснение, как использовалась та или иная методика, с приведением количественных данных, например концентрация вводимых реагентов, условий контроля (отношение сигнал/шум), длин волн и коэффициентов экстинкции в спектрометрических измерениях, а для фотохимии и радиационной химии — спектров геометрии пучка радиации и скорости введения энергии. [c.337]

Коэффициент экстинкции триплет-триплетного поглощения можно определить путем измерения оптической плотности триплет-триплетного поглощения при различных длинах волн в области поглощения молекул, находящихся в основном состоянии. Оптическая плотность триплет-триплетного поглощения определяется следующим выражением [c.288]

Ввиду использования высоких концентраций НАДН, имеющих оптическую плотность выше 1,5 ед. при 340 нм, измерения проводят не в максимуме поглощения НАДН, а при другой длине волны. Для этого обращаются к спектру поглощения НАДН, приведенному в приложении на с. 501. Пользуясь тем, что коэффициент молярной экстинкции НАДН при 340 нм равен 6,22-10 см рассчитывают его значение при других длинах волн. Для измерения активности ЛДГ выбирают длину волны, при которой поглощение раствора не превышает 0,6. [c.388]

Концентрацию двух компонентов можно определить, если известны четыре значения коэффициента молярной экстинкции и измерения проведены при двух длинах волн [c.223]

В Си после РКУ-прессования были также исследованы закономерности эволюции структуры при отжиге [81, 228, 232]. Для этого параллельно использовали методы измерения скорости распространения ультразвуковых волн и внутреннего трения. Полученные результаты укладываются в схему, описанную выше. Отжиг привел к формированию зерен, не содержащих контуров экстинкции и разделенных границами зерен, которые, как представляется, стали равновесными. Температура рекристаллизации, равная 448 К, как и ожидалось, оказалась выше в менее чистой Си (99,98 %) по сравнению с более чистой Си (99,997 %), где она равнялась 398 К. Эти изменения в структуре получили отражение в изменении измеренных свойств. При этом скорости распространения ультразвуковых волн, а следовательно, и упругие модули резко возросли. Рекристаллизованные зерна при более высоких температурах продолжали далее расти в размерах. При этом, однако, каких-либо значительных изменений в скорости распространения ультразвуковых волн не произошло. [c.130]

При определении кобальта, никеля и меди при их совместном присутствии измерения экстинкции на спектрофотометре проводят при pH 9 0,3. Буферный боратный раствор готовят смешиванием 85,6 мл 0,65 М раствора тетрабората натрия с 14,4 мл 0,1 М раствора соляной кислоты. [c.197]

При измерении экстинкции фракции, содержащейся в пробирке № 4, получено значение 0,246. Для того чтобы сравнить теоретическую кривую, которая дает доли общего количества вещества, принятого за единицу, с экспериментальной кривой, показывающей значения экстинкции исходной навески (80 мг), необходимо [c.432]

Теперь перейдем к вопросу измерения интенсивности поглощаемого света. В принципе необходимо знать интенсивность света, падающего на переднюю поверхность поглощающего вещества, а также долю поглощенного света. Доля поглощен ного света может быть фактически прямо рассчитана по измеряемой концентрации и известному коэффициенту молярной экстинкции поглотителя с помощью закона Ламберта — Бера (разд. 2.4). Другая возможность заключается в использовании детектора, пригодного для измерений интенсивности света (см. рис. 7.1 и последующий абзац), для определения относительных интенсивностей прощедщего через кювету света в отсутст- [c.186]

Таким образом, интенсивность света уменьшается экспоненциально как с толщиной слоя х, так и с концентрацией, N. Первое положенйЬ, которое на опыте подтверждается очень точно, носит название закона Ламберта. Второе, выполняющееся приближенно — закона Бера. Общее выражение (XII.1) называется законом Ламберта—Бера.- Коэффициент пропорциональности а зависит от единиц измерения N и х. Если концентрация N измеряется числом частиц в 1 см , а толщина слоя газа х в см, то а имеет размерность см и- называется с е ч е.н и е м. В этом случае оно обычно обозначается через а. Если N измеряется в мол/см то коэффициент пропорциональности, обозначаемый через и, имеет размерность см /моль и называется коэффициентом экстинкции. [c.301]

В книге применяются также и другие обозначения. Важным полупродуктам, широко используемым в синтезе макроциклических соедииений, присвоены номера, приводимые после буквы Р Формулы этих промежуточных соединений или их полные названия даны в тексте в месте первого упоминания. При приведении спектральных параметров, необходимых для идентификации синтезированного соединения, после общепринятого обозначения вида спектра (ИК, ЯМР) указан способ изготовления образца (например, таблетки с КВг) или состав растворителя. Для спектров ЯМР приведена шкала измерения химических сдвигов. Единицы измерения спектральных параметров даны после приведения последней характеристики. Коэффициенты экстинкции указаны в скобках. [c.247]

Для регистрации стабильных карбокатионов используются разнообразные физико-химические методы спектроскопические (ароматические карбокатионы обладают высоким коэффициентом экстинкции вплоть до 10 л/(моль-см)], ЯМР-спектроскопия, методы измерения электропроводности и числа [c.297]

Если предстоит измерение и обработка основных пиков на хроматограмме, масса соответствующих компонентов, вводимых в колонку, не должна выходить за пределы линейности детектора. Максимальное с этой точки зрения количество вещества при детектировании по УФ-поглощению зависит в первую очередь от коэффициента экстинкции сорбата и его удерживания. В качестве ориентировочных пределов для соединений с молярным коэффициентом экстинкции порядка 10 можно назвать [c.225]

Обсуждение результатов измерений равновесия в растворах. Равновесные растворы встряхивали в течение времени, указанного в табл. 786, затем отфильтровывали уголь и анализировали фиксированные равновесные растворы. В табл. 786 Ссо (оптич.) и Ссо (электр.) соответствуют общим концентрациям кобальта, установленным оптически или электролитически. ае(550) и (Хб (590) — доли общего количества кобальта, присутствующего в виде лутео-ионов, вычисленные из экспериментальных значений экстинкции при данных длинах волн. Кроме пяти первых растворов, в которых концентрация аммиака 0,1 и., наблюдается вообще очень хорошее соответствие между концентрациями кобальта, установленными двумя разными способами, и значениями ае, вычисленными при разных длинах волн. Этот факт непосредственно указывает на то, что в равновесных растворах с концентрацией аммонийной соли более чем 0,1 н., кроме лутео-ионов, содержатся только гидроксопентаммин-ионы. При малых концентрациях аммонийной соли в растворе, по-видимому, присутствует небольшое количество третьего соединения. С точки зрения вышеуказанного непрерывного изменения растворов гидроксопентаммин-соединений с малым содержанием аммония целесообразно предположить, что этим соединением является дигидроксотетраммин-комплекс. Чтобы полностью использовать полученные результаты, было вычислено среднее значение ае для всех исследованных растворов независимо от этого комплекса, причем экстинкции, измеренные при 550 M. v, были приравнены удвоенной величине экстинкции при 590 [c.270]

При искусственном введении микропримесей в мономер установлено, что ЦГЛ и ЦГО не влияют на изменение экстинкции при длине волны 290 ммк. Добавки, содержащие ЦГА и АН, в указанных выше концентрациях, незначительно изменяют величину экстинкции. Наличие ОГФ, имеющего в районе Еолны длиной 290 ммк сильную полосу поглощения, приводит к увеличению экстинкции пропорционально концентрации ОГФ в капролактаме. При совместном присутствии других соединений с ОГФ экстинкция практически не повышается. Ни одна из систем добавок вышеуказанных примесей не влияет на изменение экстинкции, измеренной при длине волны 260. имк. [c.52]

Тиоцикланы. Насыщенные циклические сульфиды поглощают в той же области, что алкилмеркаптаны и диалкилсульфиды, экстинкции в измеренной области спектра имеют тот же порядок. Соединения содержат С—5—С-группу, и в них поглощение вызывается переходами п- а2 5, но положение полос зависит от числа звеньев [c.167]

Если концентрацию с выразить в единицах моль/л, а толщину поглощающего слоя / — в см, то будет выражаться в едишщах моль л-см". В таком случае величину е называют молярным коэффициентом погашения или молярным коэффициентом экстинкции. В спектрофотометрическом анализе используют для измерений полосы поглощения, у которых молярный коэффициент экстинкции лежит в пределах е = 10 —10 моль л-см". [c.526]

Для измерений малых интенсивностей света (<5-10 эйнштейн-с ) в области длин волн 250— 330 нм хорошим актинометром является спиртовый раствор лейкоцианида малахитового зеленого, подкисленный соляной кислотой до pH 2. При фотолизе лейкоцианида малахитового зеленого образуется окрашенный ион, который стабилен в кислом спиртовом растворе и имеет максимум поглощения при Я = 620 нм. Концентрация раствора выбирается такнм образом, чтобы поглощение его в кювете на актииометрируемой длине волны было полным. Определенный объем V актинометра помещают в кювету и подвергают фотолизу в течение различных промежутков времени. Время облучения выбирается так, чтобы оптическая плотность при Я = 620 нм не превыщала 0,15, поскольку образующиеся ионы поглощают ультрафиолетовый свет и могут действовать как внутренний фильтр. Это приводит к заниженным результатам. После облучения измеряют оптическую плотность при 1 = 620 нм и строят график ее зависимости от времени фотолиза. Интенсивность света определяют по формуле (5.34), где V — объем облучаемого раствора актинометра О — оптическая плотность в максимуме поглощения красителя нри Х = 620 нм е — коэффициент экстинкции иона при 620 нм, равный 9,49-10 М" -см Ф — квантовый выход фотолиза, равный 1. [c.259]

Измерение сукцинатдегидрогеназной активности. В кювете спектрофотометра составляют смесь, состоящую из 0,1 М фосфатного буфера (pH 7,8), 10 мМ сукцината, бычьего сывороточного альбумина (1 мг/мл) и 2 мМ феррицианида калия. Регистрируют оптическую плотность при 420 нм (коэффициент молярной экстинкции феррицианида равен ЫО М.- -см ). В кювету добавляют раствор фермента (около 0,1 мл) и регистрируют сукцинат феррицианид-редуктазную активность, отмечая показания спектрофотометра через каждые 30 с. [c.418]

В ходе реакции Q2 постоянно регенерируется и его концентрация остается постоянной. Окисленная форма СВ окрашена в фиолетовый цвет и имеет максимум поглощения при 612 нм (коэффициент молярной экстинкции — 12 000 М см ). Восстановленная форма СВ бесцветна. Таким образом, реакцию, катализируемую СУР, можно измерить спектрофотометрически при 612 нм по падению оптической плотности раствора СВ. Перед измерением активности препарат СУР размораживают и разводят в 50 раз буфером V. Фермент инкубируют при [c.425]

Регистрация активности. А. Кювету спектрофотометра заполняют раствором, содержащим 25 мМ фосфатный буфер, 0,1 мМ ЭДТА, 20 мМ сукцинат калия и 40 мкМ цитохром с, pH 7,4. Устанавливают длину волны регистрации 550 нм, как описано на с. 412. Реакцию начинают внесением активированного препарата ( 2—10 мкг/мл среды измерения) фермента и рассчитывают его активность в микромолях окисленного сукцината за 1 мин на 1 мг белка. Коэффициент молярной экстинкции для восстановленного цитохрома с (vlsso— 55о)= 18. Б. В связи с тем что цитохром с служит акцептором электронов, но не протонов, сукцинат цитохром с-редуктазная активность при pH>6 может быть записана в виде [c.428]

Титрование остатков тирозина в белке можно провести спектрофотометрически. а. Объясните, как это можно сделать, б. При какой длине волиы (или длинах воли) вы стали бы проводить измерения в. Покажите, что для соединения с одной диссоциирующей группой и значениями коэффициентов молярной экстинкции енл и А для недиссоциированной и диссоциированной форм соответственно выполняется следующее соотношение (е — кажущаяся молярная экстинкция при данном pH) [c.75]

Эйб и Янагисава [36] изучали изменение кристалличности полипропилена по соотношению экстинкций полос поглощения ооо 976 и величину этого соотношения предложили оценивать как степень кристалличности. Одновременно они приводят иное соотношение )7о )15э, которое также может служить для измерения степени кристалличности. В последнем случае, однако, довольно трудно четко различить интенсивность названных полос. Полосы поглощения 976 или 1153 см интенсивность которых зависит только от толщины образца (или от произведения толщины на плотность [37]), используются в качестве внутреннего стандарта, благодаря чему нет необходимости определять толщину образца. Метод применим при условии, что оптическая плотность образца, отнесенная к единице толщины, прямо пропорциональна степени кристалличности. Гейне [38] определил степень кристалличности по соотношению экстинкций полос поглощения Ема Eim и установил линег ную зависимость мел<ду соотношением экстинкций EmQ-.Ewri и удельным объемом. [c.71]

В другом твердом растворе А1-1,5 %Mg на основе Л1 после ИПД кручением обнаружена структура, очень схожая с той, что сформировалась в вьш1еописанном сплаве Al- u-Zг, однако с меньщим размером зерен (0,15 мкм вместо 0,2 мкм) [243]. Отжиг вплоть до 373 К не привел к изменениям в размере зерен. При 393 К имело место исчезновение контуров экстинкции, ранее существо-вавщих в теле кристаллитов. Размер зерен немного увеличился до 0,18 мкм и примерно в половине зерен появился полосчатый контраст. При более высоких температурах наблюдался рост зерен. Измерения микротвердости показали, что ее значения оказались максимальными после отжига при 373 К. При более высоких температурах произошло уменьшение микротвердости, связанное с ростом зерен, в соответствии с соотношением Холла-Петча. [c.139]

Положение, форма и интенсивность инфракрасных полос поглощения. Основные параметры, используемые для определения полосы, даны на рис. 4.4. Хотя многие спектрофотометры регистрируют пропускание, ИК-спектр иногда представляют в виде зависимости от коэффициента экстинкции 8а [2]. В инфракрасной области трудно получить точные данные по интенсивности, так как излучение, попадаюш,ее на детектор, никогда не является истинно монохроматическим (из-за недостаточного разрешения и наличия рассеянного света), а сами полосы значительно уже, чем в ультрафиолетовой области. Положение усугубляется трудностями, которые возникают при подготовке образца (весьма малые объемы растворов и тонкая, легко разрушаемая кювета, в которой производятся измерения). [c.125]

В конце концов получается, что данные по коэффициенту экстинкции 8макс невоспроизводимы И С трудом переносятся с одного прибора на другой. Поэтому коэффициенты экстинкции рассматриваются как кажуш,иеся 8 , хотя на одном и том же приборе они часто воспроизводятся в пределах нескольких процентов. Следует руководствоваться тем, что полоса становится шире (Avf/g увеличивается) и меньше по интенсивности (8а уменьшается) при использовании прибора с более низкой разрешаюш,ей способностью. Так, полоса поглощения карбонильной группы [v( O) = 1735 см Ц метилового эфира бензойной кислоты в гексане имеет Avf/2 = = 6,5 см и 8а = 1040 единиц при измерении на приборе с дифракционной решеткой и Avf = 9 см , 8а = 745 единиц при измерении на приборе с призмой. Площадь А) полосы меняется намного меньше в зависимости от разрешающей способности, и она рассматривается как более надежный критерий интенсивности, но подобные измерения очень утомительны и выполняются не часто. [c.125]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология