Глутатион определение

Биологические вещества, например цистеин (см. № 22), глутатион (определение меркаптогрупп) (см. № 22) [c.318]

Согласно Майстеру, глутатион играет определенную роль в транспорте аминокислот через мембраны. Детали обсуждаются в гл. 14 (раздел Б, 3) в связи с рассмотрением пути биосинтеза глутатиона. [c.179]

Высоты первого и второго пиков на ДИП 2-10- М растворов глутатиона приблизительно равны. Наклон графика зависимости На от концентрации у первого пика постепенно несколько увеличивается, а у второго — постепенно несколько уменьшается. Сн при определении глутатиона по ДИП составляет 0,3 мг/дм . [c.222]

Цистеин (см. № 29) глутатион (см. № 24) формальдегид (см. № 91) аскорбиновая кислота (см. № 32) Пшеничная клейковина, определение меркапто-групп (испытано с глута-тионом и 2-меркаптоэтанолом) [c.284]

Реакция титрования и титруемые вещества. Применение указанного реагента основано на реакциях присоединения групп —СН = СН—, например при определении содержания витамина А а также присоединения меркаптогрупп при определении актина, миозина и глутатиона (для стандартизации растворов) [c.312]

Аминокислоты пептиды протеины, например цистеин (см. № 22), глутатион (см. № 22), цистин (см. № 32), определение меркаптогрупп (см. № 25) [c.324]

Цистеин (см. № 44), глутатион (см. № 53), тиогликолевая кислота (см. № 114), 2-меркаптоэтанол (см. № 13), определение меркаптогрупп (см. № 32) [c.435]

Иодометрический метод, основанный па окислении группы —5Н до дн-сульфидной группы, изложен на стр. 277 при описании методов анализа глутатиона. Для колориметрического определения рекомендуется использовать окраску, которую сульфгидрильные соединения и дисульфиды дают в кислых растворах с солянокислым диметил-я-фенилендиамином в присутствии железоаммонийных квасцов [8]. [c.312]

В некоторых случаях реакция протекает количественно лишь при 0°С или при близкой к нулю температуре 22, Большие затруднения встречаются при титровании цистеина, так как на результаты титрования оказывают влияние концентрации цистеина и иода. Однако при косвенном определении (титровании избытка иода) при 0°С в 1 н. растворе соляной кислоты, содержащем 0,5% иодида калия, получаются удовлетворительные результаты. Аналогично ведет себя глутатион . Установлено что в приблизительно 80%-ной уксусной кислоте при комнатной температуре цистеин можно определять прямым титрованием иодом. Меркаптокарбоновую кислоту можно также титровать подом в среде 50%-ной уксусной кислоты [c.587]

Около 90% ГЛЮКОЗЫ, усваиваемой эритроцитами, превращается в процессе гликолиза в лактат, но - 10% окисляется (через образование глюкозо-6-фосфата) в 6-фосфоглюконат. Это окисление (реакция а) катализируется глюкозо-6-фос-фат — дегидрогеназой [уравнение (8-42)] с участием NADP+. Именно эта реакция в основном обеспечивает эритроциты необходимым количеством NADPH, используемым для восстановления глутатиона (дополнение 7-Ж) в ходе реакции б. Глюкозо-6-фосфат—дегидрогеназа имеет очень важное значение, и все же свыше 100 млн. человек, особенно в тропических и средиземноморских странах, имеют наследственный недостаток этого фермента. Как оказалось, генетически эти нарушения весьма разнородны — обнаружено уже по меньшей мере 22 типа такого рода нарушений. Установлено, что отсутствие этого фермента приводит к весьма серьезным последствиям при некоторых заболеваниях, а также в ответ на введение определенных лекарственных препаратов наблюдается разрушение большого количества эритроцитов. Выживаемость дефектных генов, как и в случае серповидноклеточной анемии (дополнение 4-Г), по-видимому, обусловлена повышенной сопротивляемооью людей, имеющих такие гены, к малярии. [c.371]

Общее содержание аминокислот в ткани мозга человека в 8 раз превышает концентрацию их в крови. Аминокислотный состав мозга отличается определенной специфичностью. Так, концентрация свободной глутаминовой кислоты в мозге выше, чем в любом другом органе млекопитающих (10 мкмоль/г). На долю глутаминовой кислоты вместе с ее амидом глутамином и трипептидом глутатионом приходится более 50% а-аминоазота головного мозга. В мозге содержится ряд свободных аминокислот, которые лишь в незначительных количествах обнаруживаются в других тканях млекопитающих. Это у-амино масляная кислота, К-ацетиласпарагиновая кислота и цистатионин (см. главу 1). [c.634]

Определение 5Н-групп. Приблизительно 0,02 н. раствор стандартизуют иодометрическн и используют в слабощелочном растворе для опредепения цистеина, глутатиона и сульс[)гпдрилы-1ых групп в белках [31. [c.56]

Относительное снижение поглощения N-этилимида малеиновой кислоты в результате реакции его с глутатионом в различных концентрациях точно равно отношению концентраций глутатиона и N-этилимида малеиновой кислоты. Подобные же результаты в пределах погрешности опыта были получены для гомоцистеина, меркаптоэтанола, цистеина и тиогликолевой кислоты. На результат определения не влияет присутствие 18 различных аминокислот, дюпонола (Дюпон), аскорбиновой кислоты, глюкозы и вер-сена. [c.566]

В табл. 18.12 приведены результаты определения тиольной группы в депротеинированной вытяжке печени крысы. Содержание тиольной группы в 2 мл вытяжки вдвое больше, чем в 1 мл (опыты 1—3), что согласуется с законом Ламберта — Бера. Предварительная обработка вытяжки п-хлормеркурибензоатом натрия в течение 10 мин подавляет полностью реакцию с N-этилимидом малеиновой кислоты, указывая на то, что этот реактив реагирует в вытяжке только с тиольными группами. При добавлении к вытяжке глутатиона (опыты 6 и 7) он определяется количе- [c.566]

Коулт [48] описал определение аминокислот, содержащих сульфгидрильные и дисульфидные группы — цистеина, цистина, глутатиона, гомоцистеина и гомоци-стина, — в 0,05 н. НС1, используя катодно-лучевой полярограф. [c.392]

Цистеин не может быть оттитрован меркуриметрически в смесях с глутатионом или белком. Сульфит также мешает определению, и поэтому титрование дисульфида в присутствии сульфита нужно проводить на КРЭ. Вообще меркуриметрическое титрование дает более крутые линии, соответствующие избытку реагента, и, следовательно, более четкие конечные точки, чем аргентометрическое титрование. Меркуриметрическое титрование особенно удобно для определения восстановленного глутатиона, где аргентометрическое титрование дает заниженные результаты, а также для определения биологических материалов, когда необходимо избежать денатурации. [c.393]

Полярографическое определение цистина и окисленного глутатиона в присутствии друг друга основано на том факте, что такие поверхностно-активные вещества, как тимол, при соответствующей концентрации смещают волну цистина к более отрицательным потенциалам, в то время как на пептидную волну они практически не влияют [250]. В полярографическую ячейку вводят 2 мл 1 М уксусной кислоты и 2 мл 1 М раствора КС1. В ячейку вводят также образец, содержащий дисульфиды с общей концентрацией 0,0005—0,015 М, и приливают воду до общего объема 20 мл. К освобожденному от воздуха раствору добавляют 0,6—0,7 мл насыщенного раствора тимола и с помощью КРЭ определяют диффузионные токи при —0,5 и —0,9 в. По величинам iJ , измеренным при —0,9 в для окисленного глутатиона и цистина, и по величинам тока, измеренным в смеси при —0,5 и —0,9 в, можно вычислить концентрации пептида и цистина с точностью до 3—6%. Отношение окисленного глутатиона и цистина может изменяться от 0,1 до 2,4. Эта методика особенно пригодна для определения дисульфидсодержащих пептидов и цистина в растворах частично гидролизованных белков. Она имеет большое значение при исследованиях скорости гидролиза и денатурации белка в биологических материалах, таких, как сыворотка крови. [c.394]

Другой часто встречаемый тип активации состоит в устранении возможного ингибироваиия фермента в результате добавления определенных веществ. Многие ферменты теряют свою активность при мягком окислении, например кислородом воздуха в присутствии случайно находящихся следов ионов тяжелых металлов. К ним относятся папаин, катепсин и янтарная дегидраза. Ферментативная активность возвращается, однако, под влияиием таких восстановительных агентов, как восстановленный глутатион, цистеин или даже На8 или НСМ. Последние являются именно характерными реактивами превращения групп 8—8 в 8Н. Таким образом, кажется вероятным, что для проявления активности фермента необходимо наличие грунн 8Н, нрнчем их исчезновение в результате окисления в мягких условиях сопровождается потерей ферментативной активности. [c.803]

Вейганд и сотр. [17] предлагали проводить десульфирование путем нагревания пептидов с никелем Ренея в 90%-ном метаноле, в результате чего из каждого остатка цистеина образуются производные аланина. Все другие серусодержащие аминокислоты также претерпевают элиминирование серы метионин, например, превращается в а-аминомасляную кислоту. Другим примером из работы Вейганда и сотр. [17] является определение последовательности глутатиона. Тетраэтиловый эфир дисульфида ди-Н-ТФА-глутатиона сначала десульфировали, а затем после частичного гидролиза, метилирования и трифторацетили- [c.148]

Глутатион и цистеин благодаря присутствию у них сульфгидрильных групп являются сильными восстановителями и активаторами некоторых ферментов. Они активируют, в частности, деятельность протеолитического фермента папаина, расщепляющего изоэлектрические белки. Папаин может проявлять свою активность только в восстановленном состоянии, в которое он переходит под влиянием сульфгидрильных групп глутатиона и цистеина. Глутатион играет, кроме того, определенную роль в дыхании растений, так как сульфгидрильная груцпа его является активной группой фермента трио-зофосфатдегидрогеназы, катализирующего окисление 3-фосфороглицерино-вого альдегида, который образуется на первых стадиях распада углеводов в процессе дыхания. Сера входит также в состав витаминов тиамина (В1) и биотина, имеющих важное значение в обмене веществ у растений. [c.179]

Хотя цитохром 2 катализирует разложение и других субстратов (а-окси-н-бутиратов, а-окси-н-капроатов, а-оксиизокапроатов), их концентрация в биогологических средах на несколько порядков ниже, чем концентрация молочной кислоты, поэтому мешающее влияние пренебрежимо мало. Ингибиторы ферментативной активности цитохрома 2. находятся в биологических средах также в очень низкой концентрации [485, 486] и мало влияют на нее. Большое число метаболитов с восстановительными свойствами, напримф мочевая кислота, глутатион, цистеин, адреналин, аскорбиновая кислота, р-аланин, окисляются или [Fe( N)g] , или на платиновом электроде, и их ток окисления складывается с током, соответствующим окислению молочной кислоты. Поэтому в присутствии этих метаболитов проводить определение молочной кислоты нежелательно. [c.169]

Газохроматографический метод определения ртутноорганических соединений в биологических объектах разработан также в Японии [413а]. В данном случае для связывания пестицидов применяют глутатион, а быстрое хроматографирование соединений, содержащих ртуть, достигается на коротких колонках с ПЭГ. Из неподвижных фаз эффективным оказался ДЭГС. На этой фазе нам удалось разделить метил- и этилмеркурхлорид. Использовали колонку 30 сл X 3 мм, заполненную силанизированным целитом 545 (80—100 меш) с 30% ДЭГС, а хроматографирование веществ проводили при температуре 150—160°. Однако время удерживания фенилмеркурацетата достигало 30 мин. даже при температуре колонки 180°. Менее эффективными были фазы SE-30 и ПЭГ с молекулярным весом 6000. В последнем слзгчае пики исследуемых соединений были ассиметричны, наблюдалось хвостование . [c.146]

Каталитический ток восстановления кобальта(II) в системе кобальт(II)—лиганд применяли для определения лигандов-катализаторов глутатиона [223], цистеина [224], сульфгидриль-ных групп [225], а также для оценки активности дрожжей [226]. Каталитическая волна в системе германий (IV)—лиганд была использована для высокочувствительного определения гидрохинона и резорцина [227] и хлорогеновых кислот [228]. Органические кислоты определяли по каталитическому току восстановления олова (IV) до олова(II) в присутствии этих кислот [229]. [c.106]

Возможно, что определение содержания цистеина и глутатиона в тканевых экстрактах облегчится, если превращать их в 5-сульфо-наты и хроматографировать на основной смоле. В одном таком опыте образец, содержащий 3 мг глутатиона и 0,5 мг цистеина, обрабатывали 2 мл 0,2 М. фосфатного буфера с pH 7,2, 2 мл 0,1 М сульфита натрия с pH 7,0 и далее 0,4 мл 0,5 М. о-иодозобензоата калия (см. стр. 106). Полученную смесь в течение 30 мин выдерживают при комнатной температуре, затем часть смеси хроматографируют на колонке размером 0,9x5,О сж с набивкой из дауэкс 1-Х8 в хлорацетат-ной форме элюирование проводят 0,1 М раствором хло-рацетата натрия при pH 3,1. Полученная хроматограмма изображена ка фиг. 38. Интенсивность окраски цистеин-5-сульфоновой кислоты с нингидрином в буфере с pH 3,1 по отношению к окраске лейцина составляет 0,83 [22]. [c.86]

Интересно отметить, что при меркуриметрическом титровании восстановленный глутатион и гидрохлорид цистеина вели себя совершенно нормально, в то время как результаты, полученные при иодометрическом титровании последнего соединения, были завышены вдвое по сравнению с теоретическими (стр. 211). Единственное соединение, которое вызвало затруднения, был 2-меркаптоимидазол он давал очень замедленный переход к конечной точке. Однако после увеличения продолжительности титрования до 3—5 мин были получены удовлетворительные результаты. Анализ соединений, которые наряду с тиольной группой содержали сульфидную серу (например, 2-меркаптобензтиазол), дал правильное содержание — 5Н-группы, что подтверждает тот вывод, что сульфидная сера не мешает определению меркаптанов. Это было проверено также путем добавления к меркаптанам соединений, содержащих только сульфидную серу. Единстбенное осложнение при этом сводилось к тому, что конечная точка иногда оказывалась немного менее четкой, однако это никогда не влияло существенно на точность определения. [c.214]

Фермент глутатион-5-трансфераза кукурузы может разлагать тиокарбаматсульфоксид только при условии искусственного повышения содержания концентрации глутатиона и глутатион-5-транс-феразы. Именно так действуют антидоты, активирующие защитные системы кукурузы. Антидот М,М-диаллилдихлорацетамид в концентрации 0,01—0,3 мг/л в два раза повышает содержание глутатиона в молодых растениях кукурузы, а активность глутатион-5-трансферазы увеличивает в 9 раз. В однодольных сорняках такая защитная система не действует, и они погибают. На какие же физиологические механизмы действуют тиокарбаматы Прежде всего соединения этой группы подавляют митоз. Наиболее характерный симптом их действия — подавление роста проростков и деформация верхушек побегов. Как могут быть связаны между собой карба-моилирование 5Н-групп и процесс клеточного деления Известно, что при формировании митотического аппарата нити веретена образуются из белкового компонента, в функционировании которого участвуют 5Н-группы. (В метафазе хромосомы связываются с этими нитями и определенным образом ориентируются). При участии глутатиона 5Н-группы окисляются, образуя мостики — 5—5. [c.34]

Стриккс и Чакраварти описали методику амперометрического титрования для определения меркапто-групп в биологических материалах с использованием этилмеркурхлорида в качестве титранта. Было показано, что этот реагент лучше хлорида ртути(II), так как последний образует комплекс с глутатионом. [c.301]

Глутатион был выделен Гопкинсом в 1921 г. На основе определения аминного азота по Ван Слайку, данных элементарного анализа и гидролиза глутатиону первоначально было приписано строение дипептида, состоящего из остатков глутаминовой кислоты и цистеина [1062]. Однако через восемь лет эти данные были опровергнуты и было показано, что глутатион является трипептидом, а именно глутамил-у-цистеинилглицином [843, 1063, 1208, 1209, 1620, 1778]. [c.336]

Цистеин (см. № 44) глутатион (см. № 53) (определение меркаптогрупп) Тетраэтиламмонийбромид [c.433]

Найдено, что в уксуснокислых растворах дегидрирование сульфгидриль-пых соединений при действии иода протекает быстро и в точных стехиометрических соотношениях [218]. В этих условиях становится излишним удаление кислорода воздуха. Теоретические величины для г. утатиона, тиомолочной кислоты и цистеина были получены практически только в растворе 70-процентной уксусной кислоты. При микроопределении применяют навески сульфгидриль-ного соединения от 0,2 до 0,5 лгг и двойное по сравнению с вычисленным количество 0,004 н. раствора иода в уксусной кислоте реакционную смесь оставляют па 1 мин. при 20°, разбавляют равным объемом воды и титруют остаток иода 0,004 п. раствором тиосульфата. Для количественного определения глутатиона, кроме того, рекомендуется метод, основатный на осаждении его в виде нерастворимого кадмиевого соединения, образующегося при действии лактата кадмия [219]. Синяя окраска, которую дает глутатион с фосфориовольфрамовой кислотой, использована в колориметрическом методе определения глутатиона. [c.277]

На способность меркаптанов восстанавливать ФВК в значительной степени влияет значение pH раствора . В то время как изоцистеин и тиогликолевая кислота полностью окисляются уже при pH 5, цистеин окисляется полностью при pH несколько выше 5, а тиогидракриловая кислота и глутатион — лишь при pH 6. Таким образом, для установления условий определения каждого нового вещества требуется предварительно определить зависимость коэффициента поглощения раствора от значения pH и выбрать такое минимальное значение pH, при котором интенсивность синей окраски будет максимальной. Однако следует иметь в виду, что интенсивность окраски в некоторой степени зависит также от состава буфера. [c.592]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология