Хроматография на бумаге пигментов

ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДА ХРОМАТОГРАФИИ НА БУМАГЕ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ СОСТАВА АНТИБИОТИКОВ-ПИГМЕНТОВ ИЗ АКТИНОМИЦЕТОВ [c.126]

Метод хроматографического адсорбционного анализа ( Ал сорбция в главе VI Белки ) был разработан в 1903—1906 гг. русским исследователем М. С. Цветом. В настоящее время этот метод применяется при разделении сложных смесей различных биологических соединений пигментов, аминокислот, антибиотиков, витаминов, энзимов, гормонов. Метод М. С. Цвета дает возможность использовать распределительную хроматографию на фильтровальной бумаге. [c.90]

Взаимоотношение между жидкостями, движущимися пр волокнистой структуре бумаги или по тонкой пленке порошка, удерживаемой плоской поверхностью стекла, является функцией взаимодействия коэффициентов адсорбции и распределения, вовлеченных в процесс диффузии. В простейшем виде разделение пигментов чернильного пятна, распространяющегося по фильтровальной бумаге, иллюстрирует ту роль, которую играют эти коэффициенты при образовании диффузионного пятна. Образование таких пятен с применением специально подобранной бумаги или тонкопленочных адсорбентов составляет основу хроматографии этого типа. Применение бумажной и тонкослойной хроматографии позволяет работать с веществами, которые нельзя разделить и очистить другими способами. До сих пор не выявлены полностью возможности этого метода для качественного анализа пород и минералов. [c.263]

Хроматографию на бумаге в сочетании с применением органических реактивов широко используют для разделения близких по свойствам соединений аминокислот, пептидов, нуклеиновых кислот, углеводов. Кроме того, ее применяют для определения следов хлорорганических, фосфорорганических и других пестицидов в пищевых продуктах и в биологическом материале. Этим методом также разделяют пигменты листьев. [c.460]

В книгу внесены следующие крупные изменения 1) сильно расширен отдел определения витаминов, 2) добавлено определение некоторых гормонов, 3) добавлено определение ряда ферментов, 4) совершенно переработана глава об определении белков сыворотки, 5) сильно расширена глава об определении пигментов и желчных кислот, 6) добавлено определение связанных углеводов крови, 7) добавлено описание хроматографии на бумаге и электрофореза на бумаге, 8) дано описание работы с некоторыми приборами (КОЛ-1, ФЭК, СФ-4, ЭФЗ и т. п.). Многие методики заменены другими — менее трудоемкими или более безопасными. Ввиду невозможности увеличения объема книги это сделано за счет более трудоемких методик, постепенно выходящих из употребления. [c.3]

Перспективной областью использования хроматографии на бумаге является систематика микроорганизмов. В ходе поисков новых антибиотиков накопился большой материал о связи систематического положения продуцента и образуемых им метаболитов, Многие микроорганизмы были описаны в качестве самостоятельных таксономических единиц именно в связи с образованием нового антибиотика. Однако все данные такого рода нуждаются в тщательной проверке. В настоящее время назрела необходимость изучения в одних и тех же условиях всех микроорганизмов, описанных под одинаковыми названиями. В таких обобщающих исследованиях бумажная хроматография может быть использована как метод идентификации антибиотиков и сопровождающих их веществ (пигментов и т. д.). [c.300]

После отделения достаточного количества пигментов проводят их идентификацию, используя методы, применяющиеся для анализа красителей, например ИК-спектроскопию и препаративную слойную хроматографию (см. гл. 16). Описаны цветные реакции для идентификации некоторых классов пигментов и их индивидуальных представителей [15]. Так фталоцианины приобретают фиолетовую окраску при кипячении в yV-метилпирролидоне в присутствии 1 и. едкого натра и дитионита. Такое же изменение цвета фталоцианиновых зеленых имеет место при использовании в качестве растворителя ДМФ. Синие пигменты становятся фиолетовыми при нанесении на них капли концентрированной азотной кислоты (проба проводится на фильтровальной бумаге). Если добавить раствор хлорида олова, то регенерируется первоначальная зеленовато-синяя окраска. При кипячении с концентрированной азотной кислотой синие пигменты обесцвечиваются и разрушаются, а зеленые не претерпевают никаких изменений. [c.422]

Методом распределительной хроматографии на бумаге были разделены сахара. Для их идентификации они были превращены нагреванием с кислотой в производные фурфурола, после чего была применена цветная реакция с нафторезорцином. Этим методом были разделены сотни веществ других классов, в том числе алкалоиды, порфирины и птерины, пенициллины, природные и синтетические пигменты антрахинонового ряда, антоцианидины, глюкозиды флаванолов, продукты алкилирования 3,5-динитроанилина, фенолы и фенолокислоты в связи с исследованием ферментативного окисления ароматических соединений, алифатические кислоты и неорганические соединения. В условиях распределительной хроматографии на бумаге фенолокислоты адсорбируются слабее, чем соответствующие амиды. [c.1513]

Разделение пигментов зеленых листьев. Можно осуществлять разделение пигментов зеленых листьев методом капиллярного анализа а разделение каротиноидов и хлорофиллов — при помощи хроматографии на бумаге 29 или адсорбционной хроматографии. [c.900]

Первые методики хроматографии фенольных соединений были разработаны Каррером и Стронгом [1], которые еще в 1930 г. описали разделение смесей антоцианов на колонках с сульфатом кальция и оксидом алюминия. Однако в данной области исследований хроматографические методы завоевали достаточно прочные позиции лишь после 1948 г., когда Бейт- Смит [2] для разделения этих пигментов использовал распределительную хроматографию на бумаге. Пожалуй, нельзя назвать ни одного другого такого класса природных соединений, за исключением аминокислот и сахаров, которые можно было бы столь же легко разделить и идентифицировать с помощью бумажной хроматографии. Отчасти это обусловлено хорошей растворимостью полифенолов, а отчасти тем, что для обнаружения большинства из них не нужны окрашивающие реагенты. В последние годы в практику исследований введены и другие методы хроматографии, однако по-прежнему, наиболее важным методом разделения этих соединений остается бумажная хроматография. [c.242]

Как уже отмечалось выше, бумажная хроматография является идеальным методом разделения флавоноидных пигментов. Кроме того, подвижность флавоноидов на бумаге подчиняется строгим закономерностям, что позволяет с помощью соответствующих корреляционных уравнений описать связь между хроматографическими свойствами и химической структурой этих соединений. Можно вычислить значения Ям для известных веществ и использовать эти значения для предсказания [c.245]

При нисходящей хроматографии верхний конец бумажной полосы со смесью пигментов, нанесенных недалеко от кромки бумаги, закрепляют в лотке, который размещают в верхней части камеры. Нижний конец бумаги располагают так, чтобы он ие касался налитого на дно камеры растворителя. В результате действия ка- [c.98]

Рпс. 17. Разделение пигментов а — нанесение вытяжки па хроматографическую бумагу 1 — хроматографическая бумага 2 — место нанесения смеси пигментов 3 — стеклянные пластинки б — общий вид сосуда для восходящей хроматографии 1 — корковая пробка 2—-нитка 3 — стеклянный сосуд [c.101]

Хроматография на бумаге. — Этот метод, введенный Мартином и Синджем в 1944 г., используемый теперь iBo всех областях химии, применим, в частности, для идентификации компонентов смеси аминокислот с ди- и трипептидами, получаемой при частичном гидролизе белков и полипептидов. Компоненты гидролизата распределяются между одой, адсорбированной на целлюлозе и являющейся неподвижной фазой, и органическим растворителем, подвижной фазой (например, водный этиловый спирт, бутиловый спирт, фенол), которая движется вдоль листа вверх или вниз, — восходящий или нисходящий способы. Более липофильные аминокислоты сильнее увлекаются органическим растворителем, более гидрофильные —проявляют большую тенденцию связываться с неподвижной водной фазой. Гомологичные соединения, отличающиеся даже на одно метиленовое звено, движутся с различной скоростью и легко могут быть разделены. По окончании хроматографии бумагу высушивают н опрыскивают нин-гидрином для проявления аминокислот в виде окрашенных пятен. Нингидрин (2-гидрат индантриона-1,2,3) окисляет аминокислоты до R HO, NHa и СОг. Образующееся дигидросоединение при взаимодействии с аммиаком образует соответствующий пигмент [c.636]

НИТРО-2-АМИНОАНИЗОЛ (азоамин розовый О), светло-желтые крист. fn.i 139—140 °С не раств. в воде. Получ. взаимод. о-анизидина с и-толуолсульфохлоридом в присут. Na2 03 с послед, нитрованием смесью HNO3 и НгЗО , гидролизом серной к-той и нейтрализацией аммиачной водой. Примен. в произ-ве прямых, кислотных красителей, диазолей и пигментов реагент для обнаружения флавоноидов хроматографией на бумаге. Раздражает кожу. 5-НИТРО-2-АМИНОАНИЗОЛ-4-СУЛЬФОКИСЛОТА, желто-зеленые крист. плохо растворяется в воде. [c.382]

Изучение первых хроматографических работ Цвета позволяет достаточно четко представить себе основные этапы открытия им проявительного варианта хроматографии. Вначале Цвет проводил статические опыты по поглощению пигментов из раствора фильтровальной бумагой. Изменяя растворитель и смещая адсорбционные равновесия, - Цвет последовательно переводил вновь в раствор различные пигменты смеси- Затем вместо фильтровальной бумаги он использовал порошок адсорбента. Поскольку порошок надо было фильтровать, М. С.- Цвет стал помещать его в воронку с фильтром и постепенно перешел к использованию динамического режима, совместив операции фильтрования и адсорбции, и стал осуществлять разделение сначала по чисто фронтальному варианту. Поскольку в статических опытах Цвет использовал промывание растворителем фильтровальной бумаги с пигментом для отмывки от каротина, ученый после частичного разделения окрашенных слоев стал проводить промывку растворителем в динамических условиях и получил про-явительный вариант жидкостной хроматографии, сразу отметив преимущества этого варианта по четкости разделения по сравнению с фронтальным вариантом. [c.12]

Д ИАМ И НО-3,3 -ДИ М ЕТО КСИ ДИ ФЕН ИЛ (3,3 -дп-мегоксибензидин, 3,3 -дианизидин), белые крист., OKpaj ющиеся на воздухе в фиолетовый цвет пл 137 С не раств. в воде, легко раств. в СП., эф., бензоле, хлороформе, ацетоне. Получается восст. о-нитроанизола цинком в щел. среде с послед, перегруппировкой гидразосоединения в кислой среде. Примен. в произ-ве азокрасителей и пигментов реагент для обнаружения витаминов группы Е хроматографией на бумаге. [c.158]

Начало хроматографии было положено, по-видимому, в 1850 г. в работе немецкого химика, специалиста в области производства красителей Рупге, который описал процесс разделения веществ, известный в настоящее время как бумажная хроматография или хроматография на бумаге. В 1906 г. Цвет [48] описал первый метод колоночной хроматографии, в настоящее время называемой сорбционной проявительной хроматографией, которую он применил для разделения пигментов растений. В это время и появился термин хроматография (в буквальном переводе с греческого цвето-писание ). Конечно, со времени открытия Цвета хроматография очень широко применялась к бесцветным материалам, так что, этот термин находится в некотором противоречии с современным содержанием выражаемого им понятия. За работой Цвета с адсорбционными колонками последовали многочисленные работы по усовершенствованию этого метода. К их числу относятся работы Винтерштейна и сотрудников [34] и Цехмейстера [52 ]. Эти исследователи применили жидкостно-адсорбционный метод длл разделения сложных смесей терпенов и каротенов. В результате этих первоначальных работ с природными материалами жидкостноадсорбционная хроматография стала во многих лабораториях органической химии обычным методом разделения реакционных смесей и очистки продуктов. [c.25]

К слабо изученной группе соединений зверобоя обыкновенного относятся желтые пигменты флавоноидной природы, изучение которых началось сравнительно недавно. В 1937 г. был выделен гиперин, а в 1961 г.—рутин. Позже при помощи хроматографии на бумаге было показано присутствие в зверобое еще двух флавоноидов кверцетина и кверцитрина [9]. [c.244]

Пользуясь хроматографией на бумаге, можно разделить и идентифицировать пигменты типа оксиантрахинонов. Ацетоновый раствор смеси таких пигментов наносят на полоску высушенной фильтровальной бумаги размером 20x400 мм. Для проявления хроматограммы применяют петролейный эфир (темп. кип. 45—70°), насыщенный 97%-ным метиловым спиртом при 19°. Проявление проводят в хорошо закрытом стеклянном цилиндре высота 500 мм, диаметр 120 мм) при восходящем токе проявителя в течение 5—6 час. и при температуре 24—25° при этом фронт растворителя должен продвинуться приблизительно на 300 мм. После проявления бумажную полоску высушивают на воздухе, обрызгивают из пульверизатора 0,5%-ным раствором ацетата магния в метиловом спирте и нагревают при 90° в течение 5 мин. Этим реактивом проявляются производные антрахинона, содержащие хотя бы одну гидроксильную группу в а-положении. В зависимости от положения гидроксильных групп в антра-хиноновом ядре, появляются оранжевые, пурпурные или фиолетовые пятна. [c.317]

Бейт-Смит (Bate-Smith, 1948), применил бумажную распределительную хроматографию для разделения извлекаемых из цветов различных антоциановых пигментов. На бумаге хроматографировались спиртовые экстракты цветов различных растений. Зоны антоциановых пигментов обнаруживались при фотографировании хроматограммы в ультрафиолетовых лучах. [c.170]

Препаративную хроматографию па бумаге часто применяют на начальных этапах работы, когда препарат имеется в небольших количествах, а другие методы фракционирования еще не разработаны или не дают хороших результатов. В частности, этот метод использовали при изучении антибиотиков, выделенных из растений [307—310], некоторых антибиотиков из грибов — ци-клопенина [311], хинонов [312], п-аминобензилпеницнллина [313] и других антибиотических препаратов [13, 185, 226, 314]. Препаративная хроматография на бумаге очень удобна при очистке радиоактивных антибиотиков [271, 315—317] и окрашенных веществ этот метод применяли при фракционировании антибиотиков-пигментов [126, 305, 306, 318—324], актиномицинов [325, 326]. [c.35]

Хроматография на бумаге позволяет легко идентифицировать пигментные антибиотики группы гризеородина, даже в том случае, если изучаемые вещества не получены в чистом виде. Было проведено обследование пигментов, образуемых большой группой фиолетовых актиномицетов, характеризовавшихся отсутствием растворимого пигмента на твердых средах. При этом было показано, что пигменты всех изученных актиномицетов близки гризеородинам и среди них обнаружены новые антибиотики группы гризеородинов [601, 816]. [c.145]

Антибиотики группы антоцианов. Ряд антоцианов (пеларгони-дин-З-моноглюкозид, дельфинидин-З-моноглюкозид, апигенидин), его производные обладают антибактериальным действием [151, 1026]. Разработаны условия хроматографирования на бумаге названных пигментов [151, 169, 308, 859, 865, 1027—1029]. Бумажною хроматографию применяли для препаративного выделения [308, 1027], при определении УФ-спектров [1030]. [c.167]

Как уже указывалось, наибольшее значение приобретают такие методы, которые пригодны для анализа целых групп пестицидов. В число этих методов входят хроматография на бумаге для определения хлорированных пестицидов, газовая хроматография и биоанализ . Для этих методов требуются экстракты, полностью освобожденные от мешающих веществ. Для очистки экстрактов, содержапщх большинство пестицидов, удовлетворительными являются два способа, подробно описываемые далее их можно также сочетать, чтобы получить экстракт, совершенно свободный от пигментов, жиров и восков. При этом пробы сначала обрабатывают по способу влажного бензола (Кассил и др., 1960 г.), а затем пропускают через колонку с полиэтиленом на окиси алюминия. [c.22]

Более простым является колориметрический метод определения п-нитрофенола после щелочного гидролиза тиофоса . Помехи от растительных пигментов устраняются в процессе гидролиза окислением их перекисью водорода. Метод рекомендуется для определения остатков паратиона и метилпаратиона на фруктах и овощах (яблоки, салат капуста) . Инсектициды извлекают КЗ растительной массы ацетонитрилом, затем экстракт очищают на колонке, заполненной АЦОд и полиэтиленом. Дальнейшее определение можно проводить колориметрически после щелочного гидролиза и методом хроматографии на бумаге с применением в качестве неподвижной фазы раствора силиконового масла 550 в эфире и подвижной фазы—смеси ацетон этанол вода (1 1 2). Высушенные хроматограммы обрабатывают парами брома и едким кали. Проявленные желтые пятна вырезают, экстрагируют щелочью и паратион определяют спектрофотометрически при длине волны 400 [c.105]

Флавоноидные пигменты. Исследование флавоноидных пигментов было проведено методом хроматографии на бумаге с применением люминесцентного анализа. Исследованы следующие пигменты кверцитрин, рутин, робинии, нарингин, ксанторамнин, рамнетин, гомоэриодигтиол, кверцитин, изокверцитрин и найдены для них значения величины R , (см. стр. 154) в хлороформе, этилацетате, феноле и в смеси н-бутилового спирта и уксусной кислоты. [c.188]

Проведено разделение смегей, содержащих от четырех до шести пигментов методом одномерной хроматографии на бумаге. Для каждого пигмента затем изучалась люминесценция непосредственно на полосках фильтровальной бумаги. Окраска зон пигментов в ультрафиолетовом свете дает возможность идентифицировать их на проявленной хроматограмме. Были также проведены соответствующие капельные качественные реакции с рядом реактивов, как, например, углекислым натрием, аммиаком, спиртовыми растворами хлорного железа, хлористого алюминия, едкого кали, ацетатом свинца. [c.188]

Измельчите несколько листьев крапивы Urti a dioi a) или шпината в гомогенизаторе (или просто разрежьте их ножом на мелкие кусочки). Разотрите листья с 90% ацетоном в ступке. Профильтруйте экстракт через воронку Бюхнера и делительную воронку. Добавьте равный объем петролейного эфира. Энергично встряхните смесь. Несколько раз промойте смесь водой, каждый раз удаляя водную фазу с ее содержимым. Растворитель для хроматографии состоит из 100 частей петролейного эфира и 12 частей 90% ацетона. Закрепите хроматографическую бумагу в пробирке так же, как это бьшо описано в приведенной выше методике, затем, также, как в предьщущем случае, проведите карандашом линию на расстоянии 1 см от нижнего края бумаги. Небольшим отрезком капиллярной трубки нанесите смесь пигментов посередине карандашной линии. Налейте в пробирку растворитель слоем толщиной в 2 см, затем закрепите пробку и бумагу в пробирке. Дайте растворителю подняться по бумаге почти до пробки. Это должно занять около 1—2 ч. На это время поместите пробирку в слабо освещенное место. [c.376]

Хроматография основана на том, что растворенные вещества отстают от фронта растворителя по мере его продвижения по носителю. Название хроматография (от греч. hroma — цвет и grapho—пишу) было впервые использовано для описания разделения природных пигментов в результате разной степени их задержки на листе фильтровальной бумаги (рис. 11.6). Этот принцип до сих пор широко используется и может быть назван одномерной хроматографией, так как лист бумаги практически не имеет толщины. Второе измерение появляется при использовании колонки с носителем, что может быть приравнено к стопке из многих полосок бумаги, как показано на рис. 1.6, S. Теперь образец на старте представляет собой диск или цилиндр, а не тонкую линию. По мере прохождения растворителя по колонке вещества, содержащиеся в образце, распределяются следующим образом. Вещества, полностью извлеченные растворителем, движутся вместе с фронтом растворителя ( /=1) и очень быстро вымываются. Вещества, полностью адсорбированные носителем (/ = 0), останутся на старте. [c.19]

Хроматографирование иа бумаге выполняют восходящим и нисходящим способами. При восходящей хроматографии бумажную полосу подвешивают вертикально при этом нижний ее конец, на который нанесена смесь пигментов, погрулсают в растворитель. По мере двилсения растворителя иод действием капиллярных сил вертикально вверх происходит разделение растворенных веществ. [c.98]

Одной из основных задач биохимии является разделение и идентификация химических соединений. Хроматография — очень эффективный метод для достижения этой цели. Общеизвестно, что метод был разработан в 1906 г. русским ботаником Михаилом Цветом, который разделял растительные пигменты (отсюда и название) однако следует отметить, что в 1855 г. немецкий химик Карл Рунге применил хроматографию на бумаге для разделения неорганических веществ. Более того. Плиний Старший сообщал о разделении красителей на папирусе и существовании хроматографического теста на железо с использованием папируса. Все же хроматография стала по-настоящему серьезным методом только в 1944 г., после работ Арчера Мартина и Джона Синд-жа, получивших Нобелевскую премию за разработку методологии распределительной хроматографии. [c.172]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология