Флуоресценция кажущиеся

Спектры флуоресценции, получаемые в виде зависимости сигнала фотоумножителя от частоты, называются кажущимися спектрами флуоресценции. Необходимо вводить поправку к наблюдаемому сигналу фотоумножителя для получения величин, которые пропорциональны числу квантов в секунду. (Это является главной [c.268]

Истинные спектры флуоресценции (пропорциональные числу квантов на единичный интервал частоты) получают из кажущихся спектров, деля ординату, соответствующую каждому значению частоты, на коэффициент чувствительности детектирующей системы для этой частоты. [c.269]

Фотоэлектрическое поглощение рентгеновского излучения мертвым слоем кремния приводит к эмиссии 5 /С-рентгеновско-го излучения из этого слоя в активный объем детектора. Это рентгеновское излучение кремния, которое не идет от образца, появляется в спектре в виде небольшого пика кремния, так называемого пика внутренней флуоресценции кремн Ия. Пример такого эффекта показан на спектре чистого углерода (рис. 5.26), в котором имеется также заметный край поглощения кремния. Для различных случаев количественного анализа интенсивность этого флуоресцентного типа соответствует кажущейся концентрации в 0,2 вес. % или меньше 51 в образце. [c.223]

Кажущимся исключением из рассмотренного правила является флуоресценция нитросоединений с длинноволновой полосой поглощения, имеющей максимум в области до 500 нм. Это характерно для соединений, которые в возбужденном состоянии имеют иную конфигурацию, чем в основном. В новой конфигурации происходит снижение яя -уровня и вероятность безызлучательной конверсии резко уменьшается. [c.33]

Если монохроматор флуоресценции сканируется при постоянной ширине щели и постоянной чувствительности фотоумножителя, то получаемая кривая является кажущимся, или неисправленным, спектром испускания. Для определения истинного спектра на основе полученной кривой следует ввести поправку на три зависящие от волнового числа величины, а именно квантовую эффективность фотоумножителя, ширину полосы монохроматора и коэффициент пропускания монохроматора. Сигнал с фотоумножителя при волновом числе v, соответствующий [c.237]

Относительные квантовые выходы флуоресценции можно определить более точно, чем абсолютные величины, и, таким образом, если известны относительные значения, их можно коррелировать с известными абсолютными значениями и в конце концов исправлять последние, где возможно. Особенно необходимо исправлять абсолютные значения квантового выхода в случае, если вещество имеет кажущийся выход флуоресценции (измеренный по имеющемуся стандарту) значительно больше единицы. Хотя значения, измеренные для некоторых веществ при тех же условиях, сильно варьируют (табл. 25), маловероятно, что среднее значение для большинства измеренных соединений (например, бисульфата хинина или антрацена) имеет ошибку более 10%. Максимальное значение квантового выхода флуоресценции имеют 9,10-дифенилантрацен (0,76—1,0), щелочной раствор флуоресцеина (0,79—0,92) и перилен (0,87—0,98). Косвенным подтверждением таких высоких значений служат низкие выходы образования триплетов (см. разделы IV, А, 4—6). Например, низкий выход образования триплетов перилена соответствует его высокому квантовому выходу флуоресценции. [c.253]

В УФ спектрофотометрах кювета с раствором помещается обычно за выходной щелью монохроматора. При таком расположении уменьшается опасность разложения вещества под действием УФ лучей. Однако в этом случае возникает отклонение от закона Бугера — Ламберта — Бера вследствие флуоресценции вещества под действием УФ. Флуоресцентный свет, попадая на фотоэлектрический приемник, вызывает в нем дополнительный фототок, который создает кажущееся уменьшение абсорбционности. Если же кювета с веществом стоит перед входной щелью монохроматора, как это обычно бывает в ИК спектрофотометрах, флуоресцентный свет на приемник не попадает. [c.341]

На рис. П-2 было показано, что несмотря на различие в величине поглощенных квантов (т. е. при воздействии излучений различной. длины волны), возбужденные молекулы до начала излучения успевают растратить часть поглощенной энергии и все переходят в одинаковое состояние с распределением колебательной энергии, соответствующим данной температуре. Поэтому излучение всех молекул происходит с одного и того же электронного уровня и имеет одинаковый спектральный состав. Кажущееся отклонение от этого закона наблюдается в тех случаях, когда спектр флуоресценции вещества представляет собой суммарное излучение, состоящее из нескольких налагающихся друг на друга первичных полос, каждая из которых возбуждается при облучении соответственно различными длинами волн (или раствор содержит несколько флуоресцирующих веществ, различающихся по положению своих спектров возбуждения и излучения). В таких случаях в зависимости от спектрального состава (длины волны) возбуждающего потока в спектре излучения могут отсутствовать те или иные первичные полосы, и суммарный спектр флуоресценции (а следовательно, и ее цвет) будет соответственно изменяться. [c.40]

Сильное поглощение флуоресцентного излучения излучающим газом называется самопоглощением. В зтом случае какая-то доля квантов, прежде чем выйти из объема, будет поглощаться и затем вторично излучаться атомами, находящимися в данном объеме. Таким образом, излучение будет передаваться от атома к атому в произвольных направлениях, причем для таких сильных линий поглощения, как 1849 А, этот процесс произойдет многократно, перед тем как излучение выйдет из объема. Этот вопрос детально рассмотрен в работах [2, 5, 6]. Каждый атом, взаимодействующий с фотоном, в отсутствие постороннего газа имеет среднее время жизни около 10 с независимо от его предыстории, но кажущееся среднее время жизни будет зависеть от числа процессов, происшедших с. его участием с момента поглощения до выхода излучения из объема. Вполне естественно, что это число зависит от геометрии сосуда и падающего светового пучка. Наблюдаемая скорость спада флуоресценции не будет описываться простой экспоненциальной зависимостью, а кинетический механизм тушения в этом случае довольно сложен. [c.13]

Для вычисления (ф/)г необходимо знать относительное число квантов в секунду, испускаемых в виде флуоресценции стандартным и исследуемым соединениями. Геометрия облучаемого участка кюветы, площадь и положение щели спектрографа и оптика уменьшают число квантов в секунду, поступающих в систему детектора, до небольшой доли а от их общего числа, испускаемого раствором во всех направлениях. При условии, что стандартный и изучаемый растворы достаточно разбавлены, чтобы пренебречь реабсорбцией, доля а будет одинаковой для обоих растворов и отношение чисел квантов, испускаемых за секунду стандартным раствором и исследуемым раствором, которые попадают в приемник, равно отношению (7/)2/(//)1. Однако спектры флуоресценции двух соединений не будут идентичными, и чувствительность всей системы флуориметра, используемого для обнаружения флуоресценции, зависит от длины волны. Таким образом, получаемая на опыте зависимость сигнала фотоэлемента от частоты, называемая кажущимся спектром флуоресценции, не является прямой мерой числа квантов, испускаемых на каждой частоте в полосе флуоресценции. Эта зависимость должна быть исправлена для того, чтобы получить значения, пропорциональные числу квантов в секунду это одна из главных проблем при определении квантовых выходов флуоресценции. [c.638]

Определяют кажущиеся спектры флуоресценции обоих растворов при постоянной ширине щели спектрографа и постоянной интенсивности возбуждающего монохроматического света. Эти спектры представляют собой зависимость фототока приемного фотоэлемента от частоты флуоресценции. [c.639]

На основе иммобилизованных лигандов, комплексы которых флуоресцируют, автором и его коллегами [21, 25] разработаны сенсоры, чувствительные к ионам металлов. В общем случае в качестве индикатора в фазе реагента сенсора ионов металлов можно использовать любой лиганд, оптические свойства которого (либо окраска, либо флуоресценция) меняются при комплексообразовании. Точно так же, как рабочий диапазон рН-сенсора зависит от рХ иммобилизованного кислотно-основного индикатора, так и диапазон измеряемых с помощью иммобилизованного лиганда концентраций иона зависит от константы комплексообразования. Недостаток, присущий разрабатываемым сенсорам ионов металлов, состоит в том, что комплексо-образование нередко сопровождается вытеснением одного или нескольких протонов. В таком случае отклик сенсора зависит от кажущейся константы образования, зависящей в свою очередь от pH. Таким образом, при сенсорном определении ионов металлов требуется контроль pH. [c.485]

Излучательный н безызлучательный механизмы переноса различают по зависимости времени жизни флуоресценции донора от концентрации акцептора. При излучательном переносе время жизни флуоресценции донора не изменяется или слегка возрастает, при безыз-лучательном переносе — уменьшается. Из-за кажущейся простоты излучательного переноса энергии его иногда называют тривиальным . Скорость излучательного переноса Vrt в растворе можно представить следующим образом [c.133]

В таких опытах следует учитывать возможность кажущегося уменьшения числа взвешенных в воздухе частнц цинк кадмий сульфида с ростом расстояния от источника обнаруженного Эгглтоном н Томпсоном Этот эффект может быть результатом ослабления яркости флуоресценции частиц [c.288]

Точное исследование активных твердых веществ [203—206] достижимо при использовании рентгенографических и электронографических методов при помощи электронного микроскопа или путем калориметрических измерений. Кроме того, для дальнейшей характеристики веществ [207, 208] используют также такие свойства, как адсорбционная способность по отношению к растворенному органическому красителю (метиленовый голубой [209]) или газам (SO2, Н2О), каталитическая способность и избирательное дей- ствие при различных видах газовых реакций (распад N2O, СН3ОН [210] окисление СО, SO2 и т. п.), эманирующая способность, скорость растворения и растворимость в раз--личных кислотах, насыпной объем [211], кажущаяся и истинная плотность, окраска, флуоресценция, магнитная восприимчивость и т. д. [c.171]

Совершенно ясно, что соблюдение этого же правила позволит элиминировать кажущееся влияние растворителя, поскольку оно фактически обусловливается вышеуказанным различием цвета флуоресценции ионов н молекул. Однако бы.ио бы, разумеется, неправильным думать, что изме-11ение спектров флуоресценции при залюне одного растворителя другим обусловливается единственно толыш указанными колебаниями в степени диссоциации и гидролиза флуоресцирующих молекул. [c.44]

Определепие содержания 2-п итро нафталина в 1-н и т-ронафталино [97]. Нитронафталии сульфируют серной кислотой, восстанавливают (цинковой пылью или иным металлом), разбавляют до нужного объема и обязательно фильтруют, так как даже в растворах, кажущихся прозрачными, взвешенные частицы цинка влияют на интенсивность свечения pH раствора должен быть 4,6 в качестве буфера применяют уксуснокислый натрий. При возбуждении ближним ультрафиолетовым светом (365 ммк) -изомер ярко люминесцирует синим светом ( 450 ммк), а-изомер — зеленоватым ( 510 ммк) при измерении интенсивности флуоресценции -изомера зеленое свечение а-изомера ослабляют с помощью светофильтра. Кроме того, условия сульфирования подобраны так, что около 95—100% 1-питронафталина разрушаются, содержание же 2-нитропафталина остается неизменным этим повышается чувствительность метода. [c.213]

Посмотрите, как изменяется флуоресценция при изменении условий наблюдения при освещении сверху, сбоку, через линзу, при приближении и удалении от лампы (от светофильтра), прп помещении над объектом стеклянной пластинки. Сравните флуоресценцию объектов при их освещении только иевидимымн ультрафиолетовыми лучами и в том случае, когда на них попадает видимый свет. Как объяснить кажущееся изменение цвета свечения [c.393]

При измерениях быстрой флуоресценции и фосфоресценции в жидких растворах не требуется точно знать скорость поглощения Бозб.уждающего света, если только определение выходов флуоресценции не производится абсолютными методами и не изучаются фотохимические изменения. Однако интенсивность некоторых типов замедленной флуоресценции пропорциональна квадрату скорости поглощения света (т. е. квантовый выход пропорционален первой степени скорости поглощения света). Кажущиеся выходы быстрой флуоресценции и фосфоресценции также могут зависеть от интенсивности в твердых средах при низкой температуре, где времена жизни триплетов велики и большая доля растворенного вещества может находиться во время облучения в триплетном состоянии. Для проведения количественных исследований в таких системах необходимо точно измерить скорость поглощения света растворенным веществом. Для этой цели возбуждающий свет фокусируется на отверстие подходящей формы и размеров так, чтобы отверстие равномерно освещалось светом. Четкое изображение отверстия фокусируется затем на ту часть образца, где наблюдается люминесценция. Затем с помощью ферриоксалатного актинометра измеряется общий поток возбуждающего света, проходящий через отверстие. Измеряют площадь изображения отверстия и вычисляют интенсивность освещения образца (эйнштейн/см ). Зная эту величину и измерив оптическую плотность на 1 см при нужной длине волны, определяют скорость поглощения света. Необходимо учитывать эффект внутреннего фильтра, используя фактор (см. раз- [c.267]

Адзуми и Мак-Глинн [64] описали другие методы корректировки. Один из этих методов основан на том, что при довольно малой вязкости растворителя и большом времени испускания наблюдается полная вращательная деполяризация. Они измерили кажущуюся поляризацию флуоресценции 10 М раствора фенантрена в метилциклогексане и нашли, что Рц и / х меняются с изменением длины волны как монохроматора возбуждения, так и монохроматора люминесценции. Однако при постоянной длине волны монохроматора люминесценции отношение Яц/Я остается постоянным по всему спектру возбуждения. Они сделали вывод, что в действительности флуоресценция была не-поляризована и что изменение / ц и / х вызвано прибором. В этом случае отношение Я /Р равно требуемой величине Т. [c.283]

Новые стандарты спектрального излучения для ультрафиолетовой области, так же как и для видимой и близкой инфракрасной (2500—26 ООО А) областей, можно получить в Национальном бюро стандартов США. Это 1000-ваттные йодно-кварцевые лампы со спиралью из вольфрама, которые прокалиброваны по испусканию абсолютно черного тела [125]. Факторы чувствительности приемной системы в ультрафиолетовой области можно определить очень быстро с помощью этих ламп. С другой стороны, значения 8 можно оценить, определяя кажущийся спектр флуоресценции соединения и сравнивая его с истинным спектром флуоресценции, который можно найти [109в, 112, 114]. Менее удовлетворительным методом является вычисление факторов чувствительности прямо из соотношения 8 = и данных фирмы-изготовителя. [c.639]

Истинные спектры флуоресценции (пропорциональные числу квантов на единичный интервал частот) получают из кажущихся спектров делением ординат при каждой частоте кал<ущихся спектров на фактор чувствительности 5 , детектора для этой частоты 8 получен из данных стандартной лампы с использованием уравнения (7-27) или с помощью других измерений, описанных ранее). [c.639]

В реальных измерениях появление вынужденного излучения приводит к кажущемуся уменьшению поглощения в РЦ измеряющего света, что регистрируется как дополнительное фотовыцветание основной полосы поглощения. Можно, однако, проводить регистрацию вынужденного излучения и при других длинах волн в полосе флуоресценции, где нет перекрывания с длиной волны измерительного света. [c.343]

Уравнения (8.65)—(8.81) справе1шивы только пдя сферических молекул. Если последние по своей форме ближе к жесткому эллипсоиду, а не к сфере, результаты существенно усложняются. Коэффициент вращательной диффузии, входящий в уравнение (8.65), теперь становится тензором. Спад анизотропии флуоресценции описывается не уравнением (8.72) с одной экспонентой, а выражением, содержащим сумму до пяти экспонент. Эти экспоненты зависят не только от размеров и формы молекул, но также от ориентации моментов переходов хромофоров относительно осей эллипсоида. В принципе при наличии достаточно точных данных о зависимости спада степени анизотропии от времени можно было бы получить весьма полное представление о форме молекулы и способе связьшания с ней хромофора. На практике попытки описать полученные данные при помощи более чем двух экспонент обычно оказываются превышением точности эксперимента. В таком случае единственный выход состоит в построении более или менее правдоподобных моделей, удовлетворяющих данной структуре, и в установлении степени их соответствия экспериментальным данным. Одно можно утверждать несомненно для вытянутого эллипсоида кажущееся больше, чем для сферы. Следовательно, если известна молекулярная масса, как правило, можно получить некоторую информацию об отношении осей. [c.111]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология