Хроматография коллекторы фракций

Денситометры, флюориметры и коллекторы фракций были описаны в гл. 3. Так как в случае ионообменной хроматографии объем препарата, особенно при градиентной элюции, может быть значительным, принято сбор и нумерацию фракций начинать с момента внесения препарата на колонку. [c.295]

Так, разделить большие количества на аналитическом хроматографе с колонкой диаметром 10—14 мм можно при увеличении продолжительности его работы, чего можно достигнуть путем автоматизации процесса ввода и сбора образца. Для этого хроматограф должен быть оснащен коллектором фракций, автоматическим устройством ввода пробы и компьютером, управляющим их работой. Для некоторых жидкостных насосов предусмотрена возможность установки специальных препаративных головок, иногда с рециклом разделенных фракций, позволяющих использовать эти насосы с колонками диаметром 20—25 мм (при производительности до 20—30 мл/мин) или 35—50 мм (до 100 мл/мин). Соответственно петлевой инжектор должен иметь достаточно широкие внутренние каналы и возможность установки петли размером до 10 мл. Конструкция и геометрия петли должны быть такими, чтобы обеспечивалось минимальное размывание образца при вводе пробы длинные петли малого диаметра без резких изменений геометрии потока предпочтительней коротких и большого диаметра. Нередко удается заметно улучшить разделение, одновременно уменьшив размывание образца при вводе пробы путем ввода пробы без инжектора, установив вместо него тройник малого Ир объема и вводя пробу вспомогательным насосом высокого ржавления, работающим короткий отрезок времени. Менее удобным способом, дающим сходный результат, является ввод больших проб на колонку шприцем с использованием инжектора с прокалываемой резиновой мембраной, или краном малого объема, однако при этом ввод пробы (из-за ограниченного давления, которое можно создать шприцем даже хорошего качества около 5 МПа для шприца емкостью 1 мл и около 1 МПа—для шприца емкостью 10 мл) осуществляют при остановке потока (выключении основного насоса). [c.60]

Так как колонку для ионообменной хроматографии обычно присоединяют к коллектору фракций или к установке для непрерывной регистрации, целесообразно придавать ей форму, показанную на рис. 492, б. Для отвода элюата удобно присоединить к выходному отверстию колонки капиллярные трубки из синтетических материалов (тефлона, полиэтилена, поливинил- [c.552]

Если разделяемые вещества окрашены, то удается без особого труда следить за их продвижением и отбирать отдельные фракции. Однако в большинстве случаев хроматографируемые вещества бесцветны. Практика показала, что для количественной оценки процесса разделения необходимо непрерывно собирать большое количество (несколько сот) относительно небольших фракций (0,5—20 мл). Поскольку процесс хроматографирования часто длится непрерывно несколько дней, ясно, что проведение такой операции без автоматизированной аппаратуры было бы связано с большими трудностями. Поэтому были сконструированы автоматические коллекторы фракций. Поскольку применение автоматических сборников имеет большое значение не только для всех процессов разделения на колонках, т. е. для адсорбционной, распределительной и ионообменной хроматографии, но и вообще для автоматизации многих обычных лабораторных операций, ниже приведено детальное описание такого типа приборов. [c.560]

Рис. 5.1. Блок-схема современного хроматографа ПР — узел подготовки растворителя ГУ — узел формирования градиента Н — насосы Д — дозатор АД — автоматический дозатор К — колонка Т — термостат Р — реактор ДТ — детекторы КЛ — коллектор фракций РОД — система регистрации и обработки данных СУ — система управления. Прямыми линиями обозначены гидравлические соединения узлов, волнистыми — электрические.

Если хроматограф используется для препаративных целей, в него входит узел 6 для сбора отдельных компонентов (коллектор фракций) [23]. Устройства для сбора отдельных фракций необходимы для того, чтобы мокно было определить растворенные составные части пробы. Однако при наличии современных чувствительных детекторов они практически не нужны только в особых случаях (например, при измерении радиоактивности и др.) собирают отдельные фракции, либо имеющие постоянный объем, либо собранные за определенный промежуток времени. [c.57]

Любой жидкостный хроматограф состоит из следующих частей (рис.1) 1 - насос, 2 - узел ввода пробы, 3 - хроматографическая колонка, 4 - детектор, 5 - регистратор (самописец, интегратор или компьютер) 6 - термостат колонок, 7 - узел подготовки элюента с емкостями для элюента, 8 - слив элюата или коллектор фракций. [c.8]

Автоматический коллектор фракций высокое давление на концах для капиллярной хроматографии температурный контроль циркулирующей жидкости независимый температурный контроль буфера и пробы графики подвижности алгоритм для расчетов 32 К программа (совмещенная платформа для ЖХ/КЭ) большой набор-химического оборудования и реактивов [c.355]

Хроматографию аминокислот проводят по схеме, аналогичной двухколоночному [11] или одноколоночному анализу [6] на аминокислотном анализаторе (см. стр. 319). Единственное отличие состоит в том, что элюат собирают по фракциям на коллекторе, снабженном счетчиком капель. Для удобства работы и сокращения мертвого объема колонку следует располагать в непосредственной близости от коллектора фракций. [c.314]

В высокоскоростной жидкостной хроматографии разделение с минимальным уширением хроматографической полосы обычно может быть достигнуто за несколько минут. В связи с этим пики удобно собирать вручную. Чтобы направлять подвижную фазу в пробирку коллектора, на выходе из детектора можно поставить простой трехходовой кран. Кран коллектора фракций должен хорошо промываться и иметь маленький внутренний объем. Трубка, [c.62]

Этот метод используется при разделении больших количеств исходной смеси. Иа выходе колонки помещают коллектор фракций, с помощью которого можно получать очень чистые (99,999%) индивидуальные вещества. Приемники коллектора связаны с программирующим устройством так, что отбор фракций происходит автоматически при регистрации пика того или иного компонента на ленте самописца. Методы препаративной газовой хроматографии широко применяются в промышленности, чаще всего для разделения двухкомпонентных систем, например для рекуперации паров летучих растворителей, для осушки воздуха, очистки мономеров и при других процессах. [c.281]

Описанию современной хрэматографической техники (колонок, насосов, детекторов, коллекторов фракций и др.) также посвящена отдельная глава. Наряду с рассмотрением принципов работы этих устройств сюда включены и сопоставляются данные каталогов по последним (на конец 1983 г.) моделям соответствующей аппаратуры, особенно многочисленным для высокоэффективной хроматографии при высоком давлении. В этой же главе приведены подробные рекомендации по общим для всех вариантов хроматографии методическим приемам подготовке колонок, внесению препаратов, осуществлению элюции, детектированию фракций и др. [c.4]

Иско — коллекторы фракций, спектрофотометрйческий детектор, микроколоночный хроматограф. [c.200]

В простейшем случае подача буферного раствора на колонку осуш,е-ствляется, как и при обычной хроматографии, при помош,и резервуара с постоянной высотой уровня жидкости, причем скорость тока регулируется краном на выходе из колонки. Для ускорения тока буфера можно создать некоторое избыточное давление по способу, показанному на рис. 419, стр. 454. Более целесообразно использовать специальные микронасосы, позволяюш,ие осуш,ествить элюирование с постоянной регулируемой скоростью. Так, например, поршневые насосы, сконструированные в экспериментальных мастерских Чехословацкой Академии наук [67], позволяют регулировать скорость потока в диапазоне от 5 до 500 мл/час (рис 494). Они имеют стеклянные клапаны или клапаны золотникового тйпа (нержа-веюш,ая сталь по тефлону) и снабжены специальным командным устройством, обеспечиваюш,им автоматическую смену буферов и работу коллектора фракций (см. разд. 5.2 и 6). Насос поддерживает строго постоянный ток буфера при давлении несколько атмосфер. [c.554]

Несмотря на то что каждому из вариантов ФПП соответствуют свои требования и ограничения в плане технического исполнения, принципиальное устройство более или менее неизменно. Прибор состоит из самого ФПП-канала, компонента, создающего поле или градиент, насосной системы для подачи раствора-носителя, соответствующего детектора и записьгаающего устройства, устрсйства для измерения потока и, если необходимо, коллектора фракций. Тевден1щи развития следуют за жидкостной хроматографией приборы для ФПП все больше контролируются компьютером, который также служит для сбора и обработки данных. Как показано на рнс. 5.6-1, чаще используют канал в виде ленты, а не трубчатый. Такой канал вырезается из пластикового или [c.310]

Рис. 10.2, Блок-схема системы ЯМР спектрометр - жидкостной хроматограф 1 - компрессор 2 - ВЭЖХ-компьютер 3 - колонка 4 - инжектор 5 -коллектор фракций 6 - детектор 7 - магнит 8 - ЯМР-спектрометр.

Разделение компонентов смеси в хроматографе осуществляется градиентным методом. Детектор хроматографа подключен к специальному аналого-цифровому модулю при появлении пика, обнаруженного детектором, поток элюента, выходящий из колонки, направляется в коллектор фракций для последующего исследования методом ЯМР. Специальный датчик ЯМР микропроточной конструкции имеет два стандартных устройства ввода пробы. Одно используется при ра- [c.261]

Распределительная хроматография. В отличие от адсорбционной твердая фаза служит только опорой (основой) для стационарной жидкоп фазы. Один из типов распределительной хроматографии, как и адсорбционная, осуществляется на колонках, в которых в качестве стационарной фазы применяют влажный крахмал или силикагель. Образец растворяют в подходящем растворителе, затем наносят на колонку разделяемые вещества, подвергающиеся многократному распределению между неподвижной стационарной фазой (водный слои) и движущейся фазой органического растворителя, с разной скоростью перемещаются ко дну колонки. Собранные при помощи коллектора фракции пробы, содержащие одно вещество, соединяют для выделения этого вещества в чистом виде. [c.28]

Соединение жидкостной хроматографии и масс спектрометрии было несбыточной мечтой многих исследователей с самого на чала работ по хромато масс спектрометрии С одной стороны, ЖХ незаменима при анализе многих биологических объектов, термически нестабильных и нелетучих соединений, которые не разделяются с помощью газовой хроматографии, с другой сто роны, обычные детекторы для ЖХ не обладают достаточной гибкостью и универсальностью Однако непосредственное соединение ЖХ с МС долгое время не удавалось, так как эти методы сочетаются гораздо труднее и возникающие проблемы на несколько порядков сложнее чем в ГХ—МС В то же время достаточно хорошие результаты получали при раздельном применении обоих методов с независимым отбором элюируемых фракций из ЖХ колонки, выпариванием растворителя и пере носом вещества в систему напуска масс спектрометра В этом случае жидкостной хроматограф и масс спектрометр работают независимо друг от друга в своем оптимальном режиме Мож но использовать любые ЖХ системы с любыми элюентами и специальные методы масс спектрометрии, разработанные для анализа малолетучих и термически нестабильных веществ такие как ПД, лазерная десорбция, ДХИ плазменная десорбция инициируемая продуктами распада i, масс спектрометрия вторичных ионов и др Отбор фракций и испарение раствори теля могут быть автоматизированы, труднее, правда, осуществить автоматический перенос их и ввод в масс спектрометр [44] Однако практически невозможно создать коллектор фракций для очень сложных смесей неизвестного состава таких, как биологические жидкости, природные масла нефтяные фракции и т п Отбор фракций невозможен и в случае быстро элюирующихся пиков, например, на современных колонках для ВЭЖХ с эффективным числом теоретических тарелок до 50000 Непосредственное соединение ЖХ с МС, аналогичное ГХ— МС, обеспечивает значительное сокращение времени анализа, позволяет осуществлять количественный анализ и селективное детектирование выбранных ионов, использовать математические методы обработки данных для разделения неразрешенных пи ков Поэтому поиск удовлетворительных интерфейсов для непосредственного соединения ЖХ и МС начался еще в 1960 х годах [c.33]

Высокочувствительные оптические ячейки самонастраивающиеся капиллярные картриджи высокое давление на концах для капиллярной хроматографии программа СЬетЗГаиоп автоматический коллектор фракций интегрированный КЭ/МС (квадрупольный и ионная ловушка масс-спектрометры) [c.355]

Метод осадительной хроматографии, предложенный Бейкером и Вильямсом, заключается в разделении полимера на фракции с разным МВ в ходе ряда последовательных равновесных растворений и осаждений, осуществляемых в колонке, заполненной инертной насадкой. Полимер, нанесенный на верхнюю часть насадки в виде тонкого слоя, непрерывно обрабатывают смесью растворителя с осадителем с постепенно возрастающей долей растворителя. При этом из полимера экстрагируются фракции с постепенно увеличивающимся МБ. Для улучшения разделени г-на фракции одновременно задают градиент температуры, нагревая верхнюю и охлаждая нижнюю часть колонки. С понижением температуры вдоль колонки из раствора полимера в первую очередь выделяются наиболее высокомолекулярные фракции, а в нижележащих, более холодных слоях осаждаются фракции с последовательно уменьшающимся МВ. При последующем увеличении содержания растворителя в смеси осажденные фракции растворяются, переносятся в нижние слои колонки и там снова осаждаются, причем происходит их дальнейшее разделение по МВ. Раствор, выходящий из колонки, обычно собирают по частям при помощи автоматического коллектора фракций. [c.155]

Основные научные работы Мура, которые он проводил совместно с У. X. Стайном, посвящены исследованию строения белков. Они разрабатывали точные аналитические методы для определения аминокислотного состава белков. Развили (1951) метод ионообменной хроматографии, который применили для выделения и очистки рибонуклеазы. Благодаря сочетанию хроматографических методов анализа, разработанных Муром и Стайном, с предложенным ими фотометрическим нингидринным методом и их же автоматическим коллектором фракций они создали методику, позволяющую анализировать белковый гидролизат в течение двух недель. Применение синтетических ионообменных смол (сульфокатионитов) позволило им сократить (1950-е) это время до недели. Затем (1958) процесс ими был автоматизирован, а время анализа уменьшено до нескольких часов. Мур и Стайн установили [c.347]

ХАвтоматизированную систему для серийных анализов ферментов можно применять и в колоночной хроматографии [47]. Схема прибора для обнаружения ферментов в элюатах приведена на рис. 36.2 [48, 49]. В этом приборе роль коллектора фракций выполняет сборник образцов. При помощи пробоотборников фермент и субстрат подаются в нужной пропорции в смеситель. На выходе из смесителя поток рассекается пузырьками воздуха на равные части и поступает в спираль, погруженную в реакционную баню. После смешивания с реагентом, останавливающим ферментативную реакцию, раствор поступает в деаэратор, а за- [c.12]

Еше сравнительно недавно оборудование для жидкостной хроматографии было относительно простым. Для уплотнения слоя неподвижной фазы в колонке-стеклянной трубке - использовался вибратор,для введения образца в верхнюю часть колонки, вероятно, применялся шприц, элюент на выходе из колонки собирался с помощью коллектора фракций. Совершенно иная картина наблюдается в наши дни. К концу 1970 г. в продаже появились комплектные жидкостные хроматографы стоимостью от 2 до 20 тыс. долл., цена которых отражает стоимость различных вновь разработанных и часто сложных узлов, входящих в современную совершенную систему жидкостното хроматографа. [c.189]

Вновь развивающаяся высокоэффективная хроматография, будучи в основном аналитическим методом, может быть полезной также для получения небольщих образцов, предназначенных для дальнейшего исследования. Поэтому можно предположить (хотя, насколько нам известно, в настоящее время такие устройства еше не разработаны), что скоро появятся коллекторы фракций, размеры которых будут намного меньше, чем у существующих моделей. Они будут разработаны специально для сбора фракций объемом 0,01-1,0 мп, и вместо очетчика капель или таймера ими будет управлять выходной сигнал детектора. Эти устройства будут похожи на системы сбора фракций, разработанные для препаративных газовых хроматографов, только в них не нужно будет вымораживать легкие фракции. [c.208]

Рис. 11.2. Схема высокоэффективного жидкостного хроматографа [7] 1,2 — насосы 3 — дозатор 4 — предколонка 5 — колонка 6 — термостат колонки 7 — детектор 8 — коллектор фракций 9 — блок управления коллектором 10 — интефатор 11 — регистратор 12 — блок регулирования температуры 13 — микропроцессор 14 — блок автоматики ввода пробы 15 — блок управления фадиентного элюирования 16,17 — резервуары с растворителем. Сплошная линия — электрический кабель, пунктирная — поток растворителя.

При использовании для идентификации загрязняющих веществ таких комбинаций, как ТСХ/ГХ, ТСХ/ИК, ТСХ/МС и др., разделенные вещества извлекают из сорбента на пластинке (см. выше). Однако возможен и непрерывный отбор элюата из ТСХ-системы, его испарение и последующий анализ методом газовой хроматографии. Схема такой комбинации представлена на рис. П.45. Элюат, отобранный из центра ТСХ-пластинки (6), испаряется в сборник фракций (8) за счет разряжения, создаваемого водоструйным насосом (12), подключенным к коллектору фракций через моностат. При анализе в этой системе линдана (популярный пестицид) одновременно происходит его концентрирование в 50 раз. Далее собранный линдан поступает из коллектора (8) в колонку газового хроматографа с ЭЗД (см. главу I). Этим методом можно надежно идентифицировать и опре- [c.192]

После полного гидролиза белка производится количественное онределе-ние каждой из аминокислот, присутствующих в гидролизате. Для разделения аминокислот чаще всего применяется метод ионообменной хроматографии. В качестве ионообменника обычно используют сульфополистирольный катионит. Смесь аминокислот вносится в верхнюю часть колонки при pH 3 в этих условиях индивидуальные аминокислоты полонштельно заряжены. Аминокислоты в форме катионов сорбируются на сульфополистирольной смоле (содержащей группы — SOg Na ), замещая часть ионов натрия, и удернги-ваются на материале колонки электростатическими силами. Очевидно, что прочность сорбции аминокислоты возрастает с увеличением ее основности. После внесения смеси начинается элюция аминокислот при постепенном увеличении pH и 1тонной силы буферных растворов, пропускаемых через колонку. В этих условиях положительный заряд на аминокислотах постепенно нейтрализуется и ионные взаимодействия ослабляются. Первыми с колонки снимаются кислые аминокислоты (глутаминовая и аспарагиновая кислота), затем нейтральные и, наконец, основные. С помощью этого метода можно разделять все аминокислоты, обычно встречающиеся в белках, поскольку прочность сорбции аминокислоты смолой зависит как от ионных, так и от неионных взаимодействий. Сульфополистирольный катион адсорбирует аминокислоты достаточно избирательно, так что все нейтральные аминокислоты, которые нельзя разделить с помощью ионного обмена, тем не менее элюируются с колонки в разных фракциях. Индивидуальные аминокислоты, элюируемые с колонки, собираются автоматическим коллектором фракций. Затем их количественно определяют путем измерения интенсивности окраски, возникающей при действии нингидрина. В настоящее время промышленность выпускает несколько типов автоматических амино- [c.57]

Соединения проходят через детектор в виде узких зон, и обычно отбор фракций осуществляется при ручном управлении трехходовым краном в соответствии с видом хроматограммы, записываемой самописцем. В препаративной жидкостной хроматографии важна дальнейшая аналитическая оценка разделенных компонентов, поэтому элюат собирают в виде отдельных фракций. Ход разделения записывается самописцем в виде хроматограммы, на которой отмечается каждая фракция. Некоторые коллекторы фракций работают по сигналу детектора, как, например, в хроматографе IS O, модель UA-2, фирмы Bio al. Фракции отбираются только в том случае, если величина поглощения превышает некоторое заданное значение. [c.79]

Хроматограф ХГ-1303 — новый тип многоколоночного (25 колонок) хроматографа с вращающимся коллектором фракций. Колонки диаметром 10 мм и длиной 3 м были заполнены набивкой из апиезона-Ь, нанесенного, в количестве 15% на носитель ТНДС фракции 0,5—1 мм. [c.24]

Как и в методе газовой хроматографии, иногда возникает потребность в колонках, конструкция которых позволяет вести как препаративное, так и аналитическое фракционирование. Аналитическую или несколько больших размеров колонку можно дополнительно оборудовать приспособлением для многократного введения образца и автоматическим коллектором фракций, что позволяет довольно быстро накопить достаточное для дальнейпшх исследований количество каждой фракции . [c.149]

Преимуществом электрофореза в колонках является простота выделения разделенных зон при помощи обычных приемов элюирования, применяемых при хроматографии на колонках. Используя коллектор фракций, можно анализировать элюат различными методами, отбирая аликвотные пробы. Технические стороны этого метода были разработаны преимущественно в Институте биохимии в Упсале Хаглундом и Тизелиусом [31], Поратом [32], Флодином и Купке [33] широко используется конструкция колонки, основанная на модели, описанной в 1957 г. Поратом [34] (фиг. 87). [c.260]

ОТ хроматографа и проводят измерение на спектрометре с жидким сцинтиллятором. Кроме силиконовой смазки, можно применять и другие неподвижные фазы, но эффективность счета будет не столь высокой. Такие ловушки вместе с коллектором фракций (фирмы Pa kard Instrument o. In . ) имеются в продаже. [c.127]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология