Применение флуориметрии

Значительно более совершенным является метод, основанный на денситометрии и флуориметрии пятен. Хотя метод требует применения специальных приборов — денситометров и флуориметров, его достоинствами являются высокая скорость измерений, отсутствие дополнительных операций и относительно высокая точность. Следует, однако, иметь в виду, что на воспроизводимость резуль-тов измерений сильно влияют характер и интенсивность окраски пятен. Относительная ошибка определения лежит где-то в пределах 5—8%. В существенной степени точность определения зависит от толщины слоя сорбента (табл. IV.2). Поэтому измерения при калибровке должны проводиться на тех же толщинах слоя, что и в последующих опытах. [c.150]

Применение методов денситометрии, флуориметрии и спектро-фотометрии для количественного определения компонентов смесей различных органических соединений, разделенных тонкослойной хроматографией, хорошо освещено в обзорных работах [252, 263, 272, 276, 278]. [c.158]

Вызывает удивление, что флуориметрические методы анализа растворов до сих пор используются относительно мало. Одним из наиболее известных применений флуориметрии является анализ для определения урана, выполняемый, однако, не в растворе. Пробу сплавляют с фторидом натрия в твердый перл и в нем определяют содержание урана. Напротив, бериллий в силикатных породах определяют в растворах [4], используя образующийся комплекс с мори-ном (пентаоксифлавоном). Подобным же образом определяют следовые количества галлия в породах, используя желтую флуоресценцию комплекса с 8-оксихинолином. Метод сочетает простоту с воспроизводимостью и точностью. [c.256]

Применение флуориметров дало возможность более детально выяснить влияние примесей на свечение урана. Желто-зеленая флуоресценция расплава фтористого натрия (главный максимум спектра излучения — 555 ту.) при возбуждении X 365 ш[А характерна для урана. Подобный цвет флуоресценции имеет ниобий (в расплаве КаГ), но только при возбуждении X 253,7 шр.. [c.179]

При применении флуориметров со скрещенными светофильтрами в качестве первичного используют указанный выше светофильтр, а в качестве вторичного — 10%-ный раствор бихромата калия. Хорошие результаты получены при применении лампы УФ0-4А и вышеуказанных скрещенных светофильтров. Достигнутая чувствительность реакции как на монохроматоре УМ-2, так я с применением флуориметра составляет 0,02 мкг/5 мл. [c.125]

При применении флуориметров со скрещенными свето-фильтра.ми в качестве первичного светофильтра используют указанный выше светофильтр, а в качестве вторичного — 10%-ный раствор бихромата калия. Хорошие результаты получены при применении лампы УФ0-4А и вышеуказанных [c.77]

Люминесцирующие производные антрахинона нашли применение в качестве преобразователей энергии для активных лазерных сред в перестраиваемых лазерах на красителях. Растворы таких соединений подвергают облучению светом с длиной волны, близкой максимуму длинноволнового поглощения, а излучают свет с длиной волны, соответствующей полосе люминесценции [57]. Применение различных типов световой накачки - непрерывными или импульсными лампами, импульсными лазерами, использование красителей, обладающих полосами поглощения и люминесценции в различных областях спектра, позволили создать лазеры с разнообразным режимом работы. Лазеры на красителях дают возможность получать перестраиваемое излучение в широком диапазоне длин волн - от УФ до ИК области спектра. На их основе создано уникальное контрольно-измерительное технологическое оборудование, например, флуориметры, атомно-флуоресцентные спектрофотометры, предназначенные для научных исследований и использования в электронной промышленности, цветной металлургии, биотехнологии, экологического контроля окружающей среды. Перестраиваемые лазеры на красителях используют в медицине для диагностики и фотодинамической терапии рака [57]. У этой бурно развивающейся отрасли приборостроения большое будущее. [c.35]

Рассматриваемый ниже ход анализа основан на методике, разработанной для определения галлия в силикатных породах Он имеет общую применимость, за исключением того случая, когда в образце в большом количестве присутствует молибден (допустимо не более 30 у), который мешает, вероятно, потому, что до некоторой степени экстрагируется эфиром и образует на конечной стадии растворимый в хлороформе оксихинолят. Небольшие количества железа(П1), экстрагируемые эфиром вместе с галлием, обезвреживаются солянокислым гидроксиламином. Первоначально методика предусматривала визуальное сравнение интенсивностей флуоресценции анализируемого и стандартного растворов, но применение флуориметра, несомненно, обеспечит большую точность и чувствительность. [c.429]

В загрязненной атмосфере ПА присутствуют в адсорбированном виде на частицах пыли и в виде аэрозолей. Для идентификации ПА в воздухе, так же как и в обычном анализе, применяют сочетание методов газовой хроматофафии и масс-спектрометрии, жидкостной и тонкослойной хроматофафии. Для одновременного обнаружения ряда ПА (флуорена, аценафтена, хризена и бенз-а-антрацена) успешно применен метод поляризационной флуориметрии в сочетании с жидкостной хроматографией [284] способ пригоден для определения названных ПА в атмосферном воздухе и в морских отложениях. [c.100]

Лабораторный электронный флуориметр ЭФ-ЗМ, предназначенный для количественного анализа витаминов и других флуоресцирующих веществ в растворе, с успехом может быть применен в различных отраслях пищевой промышленности, в сельском хозяйстве, медицине, в научно-исследовательских и лечебных учреждениях, в производственных и заводских лабораториях. При соответствующем подборе светофильтров область применения прибора может быть значительно расширена. [c.154]

ПРИМЕНЕНИЕ СВЕЧЕНИЯ ДИСКРЕТНЫХ ЦЕНТРОВ. ФЛУОРИМЕТРИЯ [c.81]

При анализе нефтепродуктов в пробах воды метод лазерной флуориметрии может быть применен или непосредственно к исходной пробе воды, или к гексановому экстракту. [c.172]

Применение флуориметрического метода к диагностике фитопланктона оказалось чрезвычайно плодотворным. Первые результаты по дистанционной лазерной флуориметрии фитопланктона с борта самолета были опубликованы в 1973 г. 71. Источником возбуждения служил лазер на красителях с ламповой накачкой, генерирующий излучение с длиной волны 590 нм. Эхо-сигнал выделяли интерференционным фильтром с центральной длиной волны Х = 685 нм и детектировали с помощью фотоэлектронного умножителя (ФЭУ). В последнее время за рубежом появились работы по дистанционному (с борта самолета) количественному определению хлорофилла а с использованием калибровки по комбинационному рассеянию воды. В работе [8] в качестве источника излучения использовали лазер на красителе с ламповой накачкой мощностью 200 кВт и генерацией на 470 нм. Эхо-сигналы КР воды (560 нм) и флуоресценции фитопланктона (685 нм) разделяли полупрозрачными фильтрами на соответствующие ФЭУ. В работе [9] использовали лазер Nd + AИГ с длиной волны генерации 532 нм и дифракционный спектрометр с приемником параллельного детектирования, включающим в себя сорок ФЭУ. Система проводит не только спектральные измерения, но и стратификацию распределения фитопланктона, [c.177]

Изучена возможность применения фильтрового флуориметра для определения европия и тербия. Использованы реакции с теноилтрифторацетоном и фенантролином на европий и 4-сульфофенил-З-метил-пиразолоном-5 на тербий. Чувствительность определения 0,003% ТЬ и 0,008% Ей. В присутствии самария чувствительность равна 0,02% для Ей. [c.207]

Рассмотренный метод лазерной флуориметрии может быть применен не только к водной среде, но и к экстрактам. Методика приготовления ацетоновых экстрактов пигментов фитопланктона подробно описана в работе [16]. Там же показано, что, используя лазерный спектрофлуориметр, можно вести измерения концентраций хлорофилла а и феофитина в исходных пробах природной воды и в экстрактах с погрешностью меньше 20% в районах с крайне низким содержанием фитопланктона. Чувствительность лазерной флуориметрии при зондировании хлорофилла а в пробах воды 0,1 мкг/л, в экстрактах 0,002 мкг/л. При этом для приготовления экстракта достаточно фильтровать только 2 л природной воды (стандартные методы потребовали бы более чем столитрового объема). [c.182]

Наиболее часто используемые виды флуоресцентного анализа с применением люминофоров — флуориметрия (прямое измерение интенсивности флуоресценции анализируемых растворов), титрование с флуорес центными индикаторами, изменяющими в точке эквивалентности цвет (в некоторых случаях — интенсивность) свечения титруемого раствора [1, 3, 6, 7] и хемилюминесцентные определения. [c.276]

Флуориметрия находит важные применения в аналитической химии благодаря высокой чувствительности, особенно при определении следовых количеств элементов. Пределы обнаружения. [c.379]

Люминесцентный анализ (флуориметрия). Применение метода (см. также гл. 1, раздел 1.2) в качественном анализе основано на регистрации люминесцентного излучения (свечения), испускаемого веществом, энергетически возбужденным вследс гвие поглощения электромагнитного излучения, за счет энергии электрического разряда, химических реакций, при термическом возбуждении и г. д. Поглощая энергию (например, световую в видимой области или УФ-области спектра), вещество переходит из основного (невозбужденного) электронного состояния в некоторое возбужденное электронно-колебательное состояние. Затем очень быстро часть поглощенной энергии теряется (безызлучательные потери энергии), а оставшаяся — испускается в виде люминесцентного свечения. Длительность т такого свечения весьма мала. При спонтанной люминесцен- [c.590]

Для быстроты предварительного анализа в ИК-спектро-метрическом методе предложено использовать люминесцентный метод. Созданный на основе фотолюминесцентного метода флуориметр "Квант" прост в обслуживании, с его применением разработаны и внедрены инструментальные методики определения нефтепродуктов в промышленных сточных водах. [c.147]

Из областей применений факторных методов в химии будут расширяться аналитические методы, дающие сложные спектры, такие, как спектроскопия (от УФ- до ИК-Диапазонов), спектро-флуориметрия, твердофазная ЯМР-спектроскопия и другие, в которых используется незначительная часть имеющейся информации. Факторный анализ можно применять [c.235]

Метод с успехом также может быть применен для исследования пустынь и ледовых полей. В первом случае пески будут адсорбировать большинство флуоресцирующих соединений, которые мигрируют из нефтяных залежей, и позволят улетучиться наиболее легким углеводородам. Во втором случае нефть, проникая через ледяной покров, будет разделяться на фракции пробы воды можно идентифицировать по чрезвычайно низким концентрациям при помощи чувствительного флуориметра, подобного показанному на рис. 82. [c.257]

Из проб пород и подпочв извлекали углеводороды, экстрагируя их тройным растворителем (равные части спирта, ацетона и бензола) посредством ультразвукового зонда. Таким способом углеводороды были диспергированы количественно в растворитель. Применяя стандартный раствор основного типа нефти этого месторождения, получали значение флуоресценции органических экстрактов. После нанесения данных на карту и проведения изофлуоресцентных линий получили модель, соответствующую положению нефти на глубине более 450 м. Из-за направленной диффузии углеводородов, которые мигрируют вверх от нефтенесущих антиклиналей, флуоресцентные аномалии были отчасти расплывчаты. Тем пе мепее этот пример иллюстрирует применение флуориметрии как быстрого метода исследования больших площадей возможного накопления нефти. [c.257]

Авторы одной из работ (Neurath, Stri k, 1981) сообщают о том, что замена хромогенного субстрата на флуорогенный позволяет повысить чувствительность определения -галактозидазы на три порядка. Теоретически это должно означать, что применение флуориметрии вместо колориметрии при проведении ИФА с использованием -галактозидазы в качестве индикаторного фермента может в тысячу раз снизить предел обнаружения антигена. В действительности несмотря на то, что флуориметрический вариант ИФА, который авторы использовали для обнаружения поверхностного антигена вируса гепатита В человека, был примерно на два порядка более чувствительным, чем РИА, им не удалось достичь предельной чувствительности, предсказанной на основании данных по предельной чувствительности определения самого фермента. Оказалось, что чувствительность ограничивается фоновой флуоресценцией, наблюдаемой для образцов, не содержащих антигена. Фоновая флуоресценция может быть вызвана неспецифическим связыванием использованных антител. В таком случае повышения чувствительности можно достичь, только повышая специфичность собственно иммунохимических компонентов системы. Другое возможное объяснение связывает фоновую флуоресценцию с присутствием в реакционной смеси флуоресцирующих примесей. В этом случае следует использовать более чистые реагенты и (или) проводить окончательные измерения флуорес- [c.289]

Известны две работы, в которых прямо сравнивают колориметрический и флуориметрический варианты ИФА с использованием одних и тех же методик и реагентов, за исключением субстратов и систем детектирования. В одной из них (Yolken, Stopa, 1979) показано, что при тестировании ротовируса человека в образцах кала флуориметрический метод оказывается в 100 раз более чувствительным, чем РИА или колориметрический ИФА. Во второй работе (АН, АН, 1983) сообщается о 16-кратном повышении чувствительности при переходе от колориметрического к флуориметрическому методу ИФА антител против ДНК, являющихся маркером системной красной волчанки. В обоих случаях выявленные преимущества применения флуориметрии позволили значительно повысить эффективность клинического тестирования. [c.292]

Флуориметрия применяется для определения ГИНК в сыворотке крови в виде цинкокомплексного соединения его гидра-зона с пентан-2,4-дионом [27]. В практике находит применение разновидность методов с использованием салицилового альдегида для связывания ГИНК. В числе электрохимических методов, использующихся для определения концентрации ГИНК, применяются переменнотоковая полярография, кондуктомет-рическое, кулонометрическое и амперометрическое титрование [27]. [c.358]

Количественный люминесцентный анализ (или так называемая флуориметрия) основан на предполагаемой зависимости между интенсивностью люминесценции и концентрацией анализируемого вещества. При флуориметрических определениях исходят из пропорциональности интеноивности люминесценции количеству поглощающих и излучающих центров и доле поглощенного света. Флуориметрические методы принципиально не отличаются от фотометрических и являются разновидностью оптических методов анализа, хотя и имеют свои специфические особенности. Как правило, чувствительность флуориметрических методов значительно выше фотометрических. Главным условием успешного применения люминесцентных реакций для количественного анализа является достаточно полное превращение поглощенной энергии в люминесцентное излучение. Флуориметрические измерения выполняются как визуально, так и с помощью объективных методов регистрации возникающего излучения. [c.150]

В отличие от абсорбционных методов в флуориметрии и фосфориметрии непосредственно измеряют сигнал излучения. Хотя и возможно компенсировать дрейфы таких параметров, как мощность источника и положение кюветы в абсорбционной спектрофотометрии, такая компенсация не всегда удобна для люминесцентного метода. Например, любой дрейф или изменение мощности первичного источника излучения при разных длинах волн отражается соответствующим дрейфом в мощности люминесценции. В большинстве высококачественных люминесцентных спектрометров эти трудности преодолеваются либо путем соответствующей стабилизации мощности источника излучения, либо контролированием мощности источника и применения соответствующих поправок. [c.660]

Экстрогены могут быть определены на основе измерения их УФ-спектров поглощения при 280 нм (в спиртовом растворе) или же флуориметрией [50, 51]. Для колориметрии производных экстрогенов может быть использован метод с применением реактивов Кобера (фенолы в серной кислоте) с нагреванием [52]. Авторы приводят следующую методику 1 г гидрохинона растворяют в 14 мл дистиллированной воды, в которую добавлено 35 мл 98%-ной серной кислоты. Желательно ежедневно приготовлять свежий реактив. [c.224]

Чувствительность и воспроизводимость определения. Эти две важные характеристики зависят как от природы реагента, так и от условий проведения эксперимента, технических параметров ис-йользуемого флуориметра и т. д. В отличие от абсорбционной спектрофотометрии (где чувствительность пропорциональна максимальному значению е>,) чувствительность флуориметрического метода (в котором используется излучение, дающее более узкие полосы в спектре) пропорциональна суммарной энергии излучения, поглощенной данным веществом. Поэтому наиболее целесообразный прием достижения максимально возможной чувствительности должен опираться не на использование монохроматического излучения, а на применение возбуждающего света с более широкой полосой, отвечающей максимуму спектра поглощения (возбуждения) [204]. Однако такое повышение чувствительности обычно сопровождается снижением селективности определения. [c.379]

Нужно упомянуть, что при необходимости можно также применять интерференционные фильтры. Иногда наблюдается пик, который появляется и исчезает при отрицательном отклонении самописца. Такое поведение указывает па то, что эмиссионный пик соединения совпадает с граничной линией пропускания фильтра. Типичными примерами являются оптические осветлители (brighteпers), флуоресцирующие около 400 нм. Они могут быть сканированы с использованием коротковолновой ультрафиолетовой лампы в сочетании с вторичным фильтром, оптически прозрачным ниже 400 нм. В таком случае экспериментатор может отмечать гашение флуоресценции под действием ультрафиолетовой лампы при условии, что был применен адсорбент марки Р, в то время как флуориметр регистрирует флуоресценцию в диапазоне длин волн, невидимых для глаза. [c.113]

В отличие от флуориметра Turner (см. гл. 5) спектрофотометр для хроматограмм подходит как для флуоресцентных, так и для абсорбционных измерений. Спектры возбуждения и флуоресценции могут быть получены раздельно, как уже указывалось. Подобные эксперименты выполнены Зайлером и др. [7]иСавицки и др. [8—10]. Такое применение эквивалентно качественному и количествепному определениям. Оценка поглощения флуоресценции слоями сорбента может быть выполнена на установке, сконструированной почти таким же образом. [c.120]

Меньше применяют в флуориметрия люминофорй с пятичленным гетероциклом (некоторые азолы) и соединения с СО-группой — ароматические альдегиды, кетоны, кислоты, флавоны и др. В качестве флуоресцентных индикаторов нашли применение преимущественно полициклические соединения различных классов. Можно полагать, что введение соле- и комплексообразующих групп в некоторые из рассмотренных в предыдущих главах люминофоров значительно увеличит число ценных флуориметрических реагентов. [c.277]

Кальций определяют прямым комплексонометрическим титрованием с применением в качестве металлиндикаторов мурексида [112], кальциона [113] и др. [114—117] описано фотометрическое определение точки эквивалентности [118—120], а также флуориметри-ческое определение кальция в присутствии флуорексона [121]. Предложено амперометрическое [122, 123] и кулонометрическое [124] титрование кальция. [c.296]

Еще в 1935 г. Цшайле [316] применил для измерения спектров флуоресценции хлорофиллов а и Ь фотоэлектрический спектрофотометр, а в 1943 г. описал усовершенствованный прибор с вакуумным рубидиевым фотоэлементом [317]. С появлением чувствительных фотоумножителей фотоэлектрическая регистрация спектров флуоресценции оттеснила на второй план менее чувствительную фотографическую запись, которая к тому же менее удобна и не столь точна. Начиная с этого периода и вплоть до 1955 г. в литературе был описан ряд таких устройств [318— 326]. Со времени публикации статьи Боумана, Колфилда и Юден-френда [127], описывающей прибор с двумя монохроматорами, методика флуориметрии была усовершенствована настолько, что, имея даже небольшое количество вещества, исследователь легко может получить автоматическую запись полного спектра флуоресценции и возбуждения. При правильном применении такие измерения фотолюминесценции являются мощным методом химического анализа, как качественного, так и количественного, [c.377]

Прямое количественное обнаружение на хроматограмме можно проводить, измеряя площадь пятна или определяя интенсивность его окраски, но такое определение сопряжено со значительными экспериментальными погрешностями и поэтому пригодно только для ориентировочных измерений. Более точные методы определения содержания соединений непосредственно в слое требуют применения специальных приборов. Все методы этой группы основаны на принципах фотометрии, причем чаще всего применяют денситометрию, затем спектрофотомет-рию, флуориметрию и авторадиографию. Тем читателям, которых интересуют указанные методы обнаружения, следует обратиться к отличной обзорной статье Иорка и Крауса [24] или монографии Тачстона [67]. [c.121]

Выпущенная недавно книга Д. П. Щербова Флуориметрия в химическом анализе минерального сырья является руководством, определяющим применение люминесцентного анализа в практике анализа и поисков полезных ископаемых. [c.3]