Ж-II.a. Хроматография на бумаге из ионообменной целлюлозы

Хроматографические ионообменные бумаги изготовляют из волокнистой ионообменной целлюлозы (см. разд. 104) с добавлением, для прочности, обыкновенной целлюлозы. Хроматография на таких бумагах является вариантом тонкослойной хроматографии на пластинах с порошками целлюлоз-ионообменников (см. разд. 139). [c.245]

Ж.Ц.а. Хроматография на бумаге из ионообменной целлюлозы [c.320]

С использованием того же проявителя при pH 9 и на той же бумаге Rf для лизина равно 0,51, а для гистидина 0,72. Таким образом, эти три аминокислоты можно легко разделить. В тех же условиях, но при рП 3 удалось разделить свинец, висмут и ртуть. Это были первые случаи разделения методом хроматографии на бумаге из ионообменной целлюлозы. [c.321]

Успешное применение ионообменной целлюлозы для хроматографии на бумаге заставило Ледерера опробовать бумагу с ионообменными смолами. В 1955 г. после безуспешных попыток убедить английских и французских производителей бумаги изготовить такую бумагу, он приготовил ее сам, пропуская полосы бумаги ватман № 1 через водные суспензии из тщательно очищен -ных коллоидных агрегатов дауэкса-50 в ЫН4-форме [113]. Затем полосы просыхали в течение ночи при комнатной температуре на бумаге ватман № 1. На этих полосах удалось разделить иттрий, церий и лантан, проявляя их 3%-ным цитратом с pH 3. [c.323]

Введение азотсодержащих гетероциклов в молекулу целлюлозы представляет интерес для получения материалов, обладающих ионообменными свойствами и, в частности, бумаги для хроматографии. Эти производные целлюлозы могут быть синтезированы методами О-алкилиро-вания, нуклеофильного замещения и по реакции привитой сополимеризации. Путем О-алкилирования синтезирован [c.129]

Ионообменная бумага [33]. При проведении бумажной хроматографии на обычных сортах бумаги в щелочных средах процессы распределения перекрываются ионообменными процессами. Действие ионообменной бумаги основано на использовании процессов ионного обмена для разделения веществ. Ионообменную бумагу получают при дополнительной химической обработке карбокси-, сульфо-, аминогрупп целлюлозы или в процессе получения ионообменных смол, смешивая их с бумажной массой. Свойства такой бумаги подобны свойствам ионитов в зернах. Ионообменную бумагу можно применять для проведения быстрых прикидочных опытов в случае длительных разделений. [c.359]

Хроматография в тонких слоях. Одним из недостатков хроматографии на бумаге является зависимость процесса разделения от структуры и свойств бумаги. Эти качества довольно трудно воспроизводимы. Для разделения веществ затрачивается много времени. Метод хроматографии в тонком слое (ХТС), предложенный советскими учеными Н. А. Измайловым и М. С. Шрайбер (17], по технике выполнения являющийся новым вариантом распределительной хроматографии, устраняет многие из этих затруднений. Применение самых разнообразных материалов делает метод поистине универсальным. Вместо волокон целлюлозы в распоряжении исследователя находятся порошки различных сорбентов окись алюминия, силикагель, ионообменные смолы, обеспечивающие высокую скорость фильтрации растворов [18]. [c.80]

По оформлению хроматографию можно подразделить на колоночную и тонкослойную. Колонки сорбента могут состоять из активированного угля, хроматографической окиси алю.миния, пермутита, силикагеля, целлюлозы, ионообменных смол (катиониты и аниониты). Разделяемая смесь перемещается в колонке или сверху вниз, или снизу вверх (нисходящая хроматография, восходящая хроматография). В качестве сорбента или носителя используют бумагу, тонкие слои окиси алюминия, силикагеля, геля желатина. Тонкослойная хроматография, впервые предложенная Н. А. Измайловым и М. С. Шрайбер (1937). [c.140]

При выборе методов разделения пептидов учитывают физ.-хим. свойства, кол-во и длину молекул разделяемых соединений. Для первичного фракционирования смесей коротких пептидов, содержащих до 15-20 аминокислотных остатков, в большинстве случаев используют ионообменную хроматографию на катионитах. Дальнейшее разделение и очистку проводят с помощью хроматографии и электрофореза на бумаге или пластинках с тонким слоем целлюлозы или силикагеля. [c.251]

Распределительная хроматография на бумаге позволяет разделить смесь различных компонентов, но выделяемые при этом количества веществ часто бывают недостаточны для полной их характеристики. В этих случаях разделяют смесь на хроматографических колонках, применяя различные адсорбенты уголь, целлюлозу, ионообменные смолы [28, 33, 42]. [c.74]

Из реакционного раствора смесь моно-, ди- и трифосфатов тиамина выделяют ацетоном или спиртом. В небольших количествах это осуществляется хроматографией на бумаге [352] ТДФ выделяется через фосфорновольфрамовую соль [337, 3401. Для больших количеств предложены методы разделения хроматографией иа крах.мале, электрофорезом на колонках с порошкообразной целлюлозой или на ионообменных смолах 1313, 314, 353—355]. [c.419]

Использование ионообменной бумаги позволяет сочетать достоинства бумажной хроматографии и ионного обмена. Такую бумагу получают путем модификации целлюлозы за счет введения ионообменных группи- [c.522]

Поскольку в данной главе рассматриваются в основном липофильные вешества в неводных растворах, то мы не будем особо останавливаться на методике хроматографии на бумаге (или ее более современного аналога, использующего стекла, покрытые целлюлозой), для нормальной и обращенной распределительной, ионообменной, ситовой хроматографии, а также на разделении неорганических ионов. Достаточно сказать, что описанные аппаратура и методика в общем применимы во всех методах хроматографии в тонком слое, которые различаются только механизмом разделения. Мы не намеревались дать обзор всех работ в этой области (см. список дополнительной литературы). Вместо этого мы опишем методику адсорбционной хроматографии в тонком слое, широко используемую в лаборатории авторов с 1961 г., и обсудим ее некоторые усовершенствования. [c.133]

В последние годы широкое распространение получил метод хроматографического разделения веществ в тонком слое (0,1—0,5 мм) носителя, нанесенного на стеклянную пластинку. По способу проведения этот метод сходен с хроматографией на бумаге, однако вместо волокон целлюлозы в качестве носителя могут использоватьсй разнообразные сорбенты окись алюминия, активированный уголь, силикагель, ионообменные смолы, неорганические ионообменники и т. п. При разделении веществ в тонком слое в зависимости от поставленной задачи могут быть использованы принципы либо адсорбционной, либо распределительной, либо ионообменной хроматографии. По сравнению с бумажной хроматографией разделение в тонком слое в большинстве случаев проводится значительно быстрее. Например, методом тонкослойной хроматографии на смеси гипса и силикагеля отделение ионов 1102 + от смеси катионов Ре, ТЬ, АГ, Си и других было осуществлено за 10—1Б мин. [c.195]

В тонкослойной хроматографии неподвижная и подвижная фазы в основном те же, что и в жидкостной хроматографии. Так, в качестве неподвижных фаз применяют твердые адсорбенты, ионообменные смолы, пористые стеклянные гранулы с нанесенными на них жидкостями. Обычно неподвижной фазой служит или силикагель, или порошкообразная целлюлоза. Активированный диоксид кремния на воздухе поглощает воду и таким образом теряет активность. Хотя такой дезактивированный диоксид кремния пригоден для разделения полярных веществ, которые склонны сильно сорбироваться, в большинстве случаев он не является эффективным хроматографическим субстратом. Диоксид кремния можно активировать (увеличить его силу как адсорбента) нагреванием тонкослойных пластин до 110°С. Целлюлоза и бумага — относительно слабые адсорбенты, они предпочтительны для разделения высоко [c.551]

Использование ионообменной хроматографии на бумаге основано и а том, что некоторые сорта целлюлозы являются ионообмен-никами по карбоксильным и некоторым гидроксильным группам. Кроме того, бумага может быть пропитана химическими реагентами, обладающими ионогенными группами, способными вступать [c.193]

Распределительная хроматография в тонких слоях. Структура и свойства бумаги оказывают существенное влияние на процесс разделения. Использование тонких слоев различных материалов. (волокно, целлюлоза, АЬОз, силикагель, ионообменные смолы и пр.) устраняет этот недостаток. В методе тонкослойной распределительной хроматографии принцип разделения тот же, что и в бумажной, — подвижная фаза движется сквозь неподвижную в тонком слое, разделяемые компоненты перемещаются с подвижной фазой вдоль движущегося потока с различной скоростью, образуя раздельные зоны. [c.209]

Хроматография в тонком слое напоминает метод хроматографии на бумаге. Но вместо волокон целлюлозы как носителя в распоряжении исследователя имеются различные сорбенты окись алюминия, силикагель, ионообменные смолы и т. д. Перемещение жидкости в таких слоях происходит так же, как в слое носителя в колоночной хроматографии. Поэтому при разделении веществ в тонком слое носителя можно использовать принципы адсорбционной, распределительной и ионообменной хроматографии, механизм которых описан выше. [c.97]

Впервые химически модифицированные препараты целлюлозы, обладающие ионообменными свойствами, были использованы для изготовления бумаги, применяемой в хроматографии. Эти препараты, содержащие сульфогруппу или алифатическую аминогруппу, [c.159]

Иониты выпускаются различного зернения и с различной степенью сшивания, что отвечает изменению содержания дивинил-бензола. Кроме синтетических органических ионитов, для целей ионообменной хроматографии заслуживают внимания сульфо-уголь, катионообменная и анионообменная окись алюминия, целлюлозная пульпа, модифицированная целлюлоза и изготовленная из нее бумага. Фильтровальная бумага также обладает в известной степени способностью к ионному обмену, так как содержит карбоксильные гидроксильные группы. [c.118]

Целлюлоза служит носителем неподвижной фазы в бумажной и жидкостной распределительной хроматографии. Ее применяют также в качестве подложки для различных органических и неорганических твердых сорбентов. Ионообменную бумагу получают введением в целлюлозу в виде пудры или флоккул веществ с различными функциональными [c.95]

Ионообменные целлюлозы получают в виде порошков или в виде ионообменной бумаги. Фракционирование белков большей частью проводят методом колоночной хроматографии на порошковых ионообменных целлюлозах. Для препаративного выделения белков рекомендуются иониты с диаметром зерен 0.30—0.15 мм или 0.15—0.08 мм. Для аналитических работ лучше применять ионообменные целлюлозы с диаметром частиц 0.08—0.06 мм или меньше чем 0.05 мм [15]. Целлюлозные иониты, выпускаемые фирмой Serva, имеют диаметр частиц 15—20 мк, их длина больше в 2—5 раз. Распределение частиц по их длине показано на рис. 2. Насыпной вес ионообменных целлюлоз 0.1—0.2 г мл, влажность 10-15% [27]. [c.210]

Ионообменные целлюлозы как слабые кислоты или основания являются плохими сорбентами авлинокислот. КМ-целлюлоза в Н -форме задерживает яхшхь диаминокарбоновые кислоты, а ДЭАЭ-целлюлоза в ОН -форме — только моноаминодикарбоновые кислоты [37]. Большая часть аминокислот (14—15 из 18 ь общей смеси) разделяется при двухмерной хроматографии на ДЭАЭ-бумаге в ОН -форме. Смесь аминокислот сначала проявляют 0,02 М раствором ацетата натрия с pH 7,5, При этом аминокислоты разделяются в последовательности значений рК их аминогрупп. Затем проявляют насыщенным водой т-крезолом в атмосфере аммиака [35]. [c.214]

Ввиду специфики химической природы лиганда (к упомянутому выше следует добавить сплошной, без характеристических полос, спектр поглош ения, склонность к необратимой сорбции на ионообменных смолах, сложность выделения значительных количеств препарата из природных поверхностных вод) большинство физических и физико-химических методов не могли быть использованы при исследовании комплексообразования их с ионами металлов. Поэтому при изучении комплексообразования микрограм-мовых и субмикрограммовых количеств элементов с природными комплексообразующими веществами различными методами (модифицированными и специально разработанными физико-химиче-скими, в частности, методами фильтрации через сефадексы, хроматографии на ионообменной бумаге и в тонких слоях целлюлозы, кинетическими и хемилюминесцентными) получены данные о природе, составе и устойчивости комплексных соединений, образуемых неорганическими компонентами (Са, Зг, Си, Се, , Ре, Ки и др.) с фульвокислотами, поллфенолами и другими растворенными органическими веществами природных вод. [c.103]

Выдающиеся успехи, достигнутые в различных областях биохимии и особенно в области белковой химии, во многом обязаньЕ высокому методическому уровню проводимых исследований. За сравнительно короткий срок были разработаны и нашли широкое применение такие эффективные методы, как хроматография на бумаге, ионообменная хроматография на смолах и замещенных целлюлозах, различные методы электрофореза, определение Ы- и-С-концевых аминокислот в белках и т. п. При помощи этих методов многие белки и ферменты выделены в чистом виде, а в некоторых, из них определена последовательность аминокислот и полностью установлена первичная структура. В последние годы получены интересные данные о структуре пептидных цепей в активных центрах некоторых ферментов. Значение вышеуказанных методов для развития биохимии белков трудно переоценить. [c.5]

Схема разделения и очистки пептидов, описываемая ниже (включающая гельфильтрацию, хроматографию на ДЭАЭ-целлюлозе или дауэксе-50, высоковольтный электрофорез и хроматографию на бумаге), применима к белкам средней молекуляр-1ЮЙ массы (до 40 000). Крупные фрагмеггты, плохо разделяющиеся на бумаге и элюирующиеся с нее, первоначально отделяют гель-фильтрацией, а основную часть пептидов после фракцио- шрования на ионообменнике очищают окончательно хроматографией на бумаге. Однако эта схема применима далеко ие ко всем типам гидролизатов белков. Например, мембран11ые белки плохо расщепляются ферментами с высокой специфичностью, такими, как трипсин или стафилококковая протеаза гидрофобные пептиды склонны к образованию агрегатов при гель-фильтрации, осаждаются на ионообменных колонках и экстрагируются в охлаждающую среду при высоковольтном электрофорезе на бумаге и в органическую фазу при промывках в реакции Эдмана. Оптимальная схема анализа структуры мембранных белков включает их фрагментацию с помощью химических методов на небольшое число крупных пептидов, разделение в денатурирующих условиях на полиакриламидных гелях и определение аминокислотной последовательности автоматическим методом после присоединения пептида к твердой матрице. Альтернативный вариант основан на использовании протеаз с низкой специфичностью (таких, как пепсин или эластаза). При этом образуется значительное число коротких пептидов, которые [c.352]

Для разделения различных соединений с успехом применяется хроматография на ионообменной бумаге. Эту бумагу легко получить, химически модифицировав целлюлозу. Существуют следующие виды ионообменной бумаги ДЭЛЭ-целлюлозная (сильноосновная) И КМ-целлюлозная (слабокислая), а также фосфатно-целлюлозная (сильнокислая), цитратно-целлюлозная (слабокислая) и аминоэтил-целлюлозная (слабоосновная). В ряде случаев бумагу пропитывают ионообменной смолой (45% на вес смолы) такая бумага имеется в продаже, например амберлит SA-2 (сильнокислая) и амберлит SB-2 (сильноосновная). [c.92]

Наиболее популярны ионообменники, выпускаемые английской фирмой Wathman, американской Bio Rad и западногерманской Serva. Ионообменные целлюлозы получают в виде порошков или ионообменной бумаги. Для аналитического фракционирования рекомендуются иониты с диаметром частиц 0,06—0,08 мм. Для предаративного выделения лучше применять иониты с диаметром волокон 0Д5—0,30 мм. Коммерческие препараты целлюлоз имеют вид волокон с диаметром 15—30 мк. Длина варьирует от 20 до 300 мк. Удельный вес ионитов 1,45- 1, 52 г/см . Насыпной вес 0,1—0,2 г/мл, влажность 3—18% [201]. В таблице 9 даны характеристики основных типов ионообменных целлюлоз, применяемых для хроматографии. [c.110]

НОЧНОЙ хроматографии. Привитые и обращенные фазы не являются новинкой упомянем использование бумаги и слоев на основе ацетилированной целлюлозы, сефадекс Ш-20, хроматографию с высаливанием на ионообменной бумаге и слоях, применение полиамидных слоев [121]. К сожалению, все эти методы и теоретические обоснования протекающих процессов разработаны в основном специалистами, занимающимися ВЭЖХ, и тонкослойная хроматография буквально плетется в хвосте. Полезно было бы обратиться к старым публикациям, посвященным этим вопросам. [c.83]

Идентификацию и количественное определение сахаров можно осуществить различными хроматографическими методами хроматографией на бумаге [202, 204, 213, стандарт TAPPI Т 250 рт-7Ъ тонкослойной хроматографией [235] газовой хроматографией частично в комбинации с масс-спектроскопией [18, 102, 204, 244, стандарт TAPPI Т 249 ргп-75]. Позднее для определения полисахаридного состава древесины и технических целлюлоз применили автоматизированный анализ сахаров методом ионообменной хроматографии через боратные комплексы [73, 75, 76, 200]. Описан быстрый спектроскопический метод определения сахаров [192, 193, 194], основанный на измерении поглощения при 322 и 380 нм продуктов дегидратации сахаров (производных фурана), образовавшихся после полного гидролиза древесины или технической целлюлозы. [c.30]

При разделении менее сложных смесей (10—15 пептидоа) часто опускается стадия ионообменной хроматографии. Выбор схемы разделения проаодится на основании анализа так называемых пептидных карт. Для получения пептидной карты (рис. 10) смесь пептидоа, образовавшаяся в результате ферментативного или химического гидролиза белка, наносится в анде небольшой полоски на лист хроматографической бумаги или пластинки с тонким слоем целлюлозы и подвергается электрофорезу или хроматографии во взаимно перпендикулярных направлениях. После проявления пептидной карты специфичным реактивом иа бумаге или пластинке образуется характерный для данного белка набор пятен, их взаимное расположение позволяет оценить эффективность использованных методов разделения и выбрать оптимальный вариант. [c.53]

Предлагаемая книга предусматривает, в основном, использование синтетических ионообменных смол, хотя для сравнения приведены некоторые случаи применения неорганических ионитов. Такие органические иониты, как, например, производные целлюлозы, име-юш ие большое значение в биологии, в этой книге упоминаются лишь кратко. Разделения на бумаге, содержащей ионообменные смолы, описаны в монографиях, посвященных бумажно хроматографии, и поэтому здесь не рассматриваются. Применение так называемых ясидких ионитов относится к экстракции и в этой книге также не освещается. [c.16]

Успешное применение в хроматографии на бумаге целлюлозы с ионогенньши заместителями (разд. Ж.И.а) подало мысль Соберу и Петерсону [147] использовать замещенную целлюлозу в виде хлопьев или порошка в качестве неподвижной фазы в ионообменной колоночной хроматографии. Из-за крупнопористой структуры целлюлозы даже очень большие ионы, как, например, белка, быстро диффундируют внутрь целлюлозных ионообменников, а поэтому и обмен происходит быстро. Наоборот, ионы такого же размера не могут проникнуть в обыкновенные смолы или неорганические ионообменники. Собер и Петерсон описывают разделе-ление 270 мг диализованных, лиофилизованных белков почки на колонке с 5 г диэтиламиноэтилцеллюлозы при вымывании 0,005 М раствором фосфата с pH 7,0, который постепенно понижался вследствие замены этого раствора на 0,1 М ЫазНР04 в 0,5 М хлориде натрия. На выходной кривой хорошо различаются три пика. [c.331]

В современной технологии выделения н анализа природных алкалоидов хроматография занимает важное место. В тонкослойной хроматографии используются окись алюминия, целлюлоза, силикагель [32], а для препаративного выделения преимущественно ионообменные смолы. Ионообменная хроматография алкалоидов используется не только в лабораторном масштабе, но и в промышленности, например, при производстве морфиновых алкалоидов, эфедрина, анабазина и т. д. [59, 188, 251]. Контроль за составом растительных экстрактов и на различных стадиях производства осуществляется хроматографией на бумаге и связан с большими затратами времени. В связи с этим появление работ по хроматографическому анализу алкалоидов на полиамиде раскрывает новые возможности в этой области. [c.108]

Впервые модифицированные препараты целлюлозы, обладающие ионообменными свойствами, применены для изготовления специальных бумаг, предназначенных для хроматографии. Эти материалы, содержащие сульфогруп-пу или ароматическую аминогруппу, получают в сравнительно небольших количествах. [c.152]

Параллельно с исследованиями Эллиотта были проведены работы по выделению и очистке брадикинина, образующегося из бычьей плазмы при действии змеиного яда. С этой целью Прадо и сотр. [1764], а также Андраде и сотр. [54] использовали хроматографию на колонке с окисью алюминия и целлюлозой, а Андраде и Роша э Сильва [55] — ионообменную хроматографию на колонке с амберлитом ЩС-50 (ХЕ-64). Наибольшего успеха достигли Хамберг и сотр. [921, 926, 927], применявшие хроматографию на колонке с амберлитом ШС-50 (pH 5), препаративный электрофорез и хроматографию на бумаге. Аминокислотный анализ выделенного таким образом чистого полипептида показал, что последний содержит те же аминокислоты и в таких же соотношениях, что и трипсиновый брадикинин. Тщательное сравнение фармакологических свойств показало, что оба брадикинина, образующиеся при гидролизе белков как змеиным ядом, так и трипсином, идентичны синтетическому бради-кинину. Сообщение о выделении брадикинина из продуктов инкубации бычьей плазмы со змеиным ядом было опубликовано также Зубером и Жаком [2680]. [c.106]

Разделение может быть достигнуто путем образования неустойчивого соединения из устойчивого рацемата и устойчивого оптически активного разделяющего агента [52]. Можно привести следующие примеры разделения этого типа разделение основания Трегера путем хроматографирования па колонке с лактозой [61] разделение миндальной кислоты на колонках с амилозой или крахмалом [62], металлоценов на колонке с ацетилцеллюлозой [63], разделение аминокислот хроматографией на целлюлозе бумаги [64], гликолей путем экстракции хиральными растворителями [65], аминокислот на хиральных ионообменных смолах [66] и трифтор-ацетильных производных аминокислот с помощью газо-жидкостной хроматографии на хира.льпой стационарной фазе [67]. [c.29]

Методика работы при использовании жидких ионообменных смол аналогична используемой при экстракции [960] (стр. 129). Преимущество экстракционного варианта состоит в его быстроте, недостаток — в том, что реализуется однократное распределение между водной н органической фазами, так что полное разделение возможно только в системах с сильно различающимися коэффициентами распределения. Ионы с близким химическим поведением, например ионы редкоземельных элементов [2159], можно разделить, используя раопределительную хроматографию в этом случае жидкий ионообменник наносят на инертный носитель, например целлюлозу. Бумагу, пропитанную жидким ионооб-менником, можно использовать для разделения металлов методом хроматографии на бумаге [392, 2158]. [c.26]

При применении этого метода разделения чаще всего используются колонки, заполненные ионообменными смолами. Эти смолы обладают способностью заменять свои катионы или анионы на соответствующие ионы из раствора. Эта способность объясняется тем, что при определенных условиях ионы, находящиеся в растворе, имеют большее сродство к иониту, чем ионы, принадлежавшие первоначально этому иониту. Твердый остов катионообменпика или анионообменника является как бы большим анионом или катионом, связывающим с разной силой ионы обратного знака. При хроматографии на бумаге карбоксильные группы окисленной целлюлозы могут вести себя как катионообменнпки (см., например, Шуте). Если целлюлозу подвергнуть различной химической обработке, из нее можно приготовить более сильные катиониты или аниониты. Кроме того, бумагу можно непосредственно пропитывать ионообменными смолами. Во всех случаях разделения с использованием осаждения фактически мы имеем дело с обменом ионов между веществами, находящимися в растворе, и солями, закрепленными на носителе. [c.40]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология