Буфер- -Ш ный метод определения и буферные растворы

По вопросу влияния ионизационных помех в пламени на определение натрия единого мнения нет. В ряде работ отмечено взаимное влияние натрия и калия, причиной которого является смещение равновесия ионизации [419, 938, 991]. Показано, что при введении сульфата калия в качестве буфера в растворы хлорида натрия в пламенах ацетилен—воздух и пропан—воздух повышается интенсивность излучения натрия (использован пламенный фотометр фирмы К. Цейсс [326]. Предложено уравнение, учитывающее влияние ионизации при определении интенсивности излучения натрия в зависимости от концентрации натрия [1244]. Отмечено взаимное влияние калия и натрия в пламени аммиак—воздух и аммиак—кислород [419]. Рассмотрены преимущества низкотемпературного пламени водород—воздух в снижении ионизационных помех [1107]. Отмечено, что литий стабилизирует равновесие ионизации атомов натрия и что интенсивность излучения натрия не изменяется в присутствии элементов с низким потенциалом ионизации [324]. В то же время авторы работы пришли к выводу, что при определении натрия в пламени ацетилен—воздух сульфат калия не является буферным раствором. Расчетным методом показано, что при концентрации натрия в растворе 10 —10 М равновесие ионизации натрия в пламени смещено влево [401]. Логарифм константы ионизации равен —11,38 и —9,0 в пламенах светильный газ—воздух (1970 К) и ацетилен—воздух (2360 К) соответственно. [c.119]

Хотя в настоящее время существуют методы определения изоэлектрической точки исследуемых белков с достаточной точностью (например, изоэлектрическое фокусирование в градиенте плотности сахарозы), знание изоточки вовсе не обязательно для выбора ионообменника. Пригодность того или иного ионита легко определить по степени связывания белка в статических условиях. В случае анионита смолу приводят в равновесие с буферным раствором, pH которого соответствует верхней границе области устойчивости исследуемого белка. В случае катионита pH буфера будет соответствовать нижней границе этой области. Обессоленный белок растворяют в соответствующем буфере, осторожно (избегая вспенивания) перемешивают с порцией ионита, отделяют надосадочную жидкость. По концентрации белка в надосадочной жидкости судят о степени связывания его с соответствующим ионообменником. [c.431]

Отметим, что активность ферментов необходимо определять при постоянной температуре и оптимальном значении pH. Следует указать, что состав буферного раствора может влиять на определение активности ферментного препарата. Вследствие этого следует для любого из принятых методов определения активности ферментов применять одинаковый состав буфера. [c.27]

Буферные растворы используются не только для получения стандартов прн колориметрическом методе определения pH. Буферами пользуются также чрезвычайно широко для изгото Вления биологических сред. Дело в том, что ряд биохимических процессов идет в среде с определенным pH. Поэтому, пользуясь основным правилом буферных смесей, экспериментатор изготовляет среду с таким pH, который наиболее благоприятствовал бы течению тех или иных процессов, воспроизводимых и изучаемых исследователем в условиях опыта. [c.176]

Электрометрические методы измерение АрН) - В этих методах изменение pH, вызываемое выделяющейся кислотой, измеряется по истечении определенного времени рН-метром. При этом используется специально разработанный Михелем буфер с исходным pH 8,0, буферные свойства которого обеспечивают линейную зависимость между активностью фермента и изменением pH. Другим преимуществом метода является возможность параллельно проводить измерения в нескольких пробах По полученным значениям АрН можно определить число микромолей разложившегося ацетилхолина. Для этого прибавляют стандартный раствор кислоты к смеси буфер — фермент и измеряют уменьшение значения pH при определенных количествах кислоты. Используя эти величины, строят калибровочную кривую, по которой устанавливают количество разложившегося субстрата. [c.168]

Одним из вариантов метода постоянной ионной силы является метод буферных растворов. Растворы сильных электролитов, применяемые для разбавления при получении стандартной серии, могут быть заменены так называемыми буферными растворами для регулирования общей ионной силы (БРОИС) или, иначе говоря, рХ-буфер-ными растворами (X — определенный вид ионов). Действие рХ-буфера обеспечивается соответствующими равновесиями, устанавливающимися в реакциях осаждения или комплексообразования. Например, р1- или pAg-буфер может быть приготовлен на основе раствора, насыщенного относительно Agi или КС1, для которого справедливо следующее равновесие с константой K = aija [c.113]

Определение перйодата может быть проведено а) восстановлением перйодата и иодата до иода обработкой пробы избытком подкисленного иодистого калия [140] и титрованием выделившегося иода стандартным раствором тиосульфата натрия б) восстановлением перйодата до яодата и иода действием на пробу иодистым калием в буферном растворе с pH 7 [216] и титрованием выделившегося иода стандартным раствором тиосульфата в) восстановлением перйодата до иодата избытком титрованного раствора арсенита в бикарбонатном буфере с последующим обратным титрованием стандартным раствором иода [60] г) удалением перйодата и иодата с помощью анионообменной смолы, из которой затем эти ионы элюируют и определяют одним из описанных выше методов [193] д) в микромасштабе спектрофотометрически [11], в ультрафиолетовой области спектра при 222,5 ммк (максимум поглощения перйодата). [c.314]

ТОД широко применяют для обнаружения в элюатах белков и крупных пептидов, но он недостаточно универсален. Более общим методом анализа, не зависящим от аминокислотного состава пептидов, является измерение поглощения в области 180— 220 нм, где пептиды и белки характеризуются высокими коэффициентами поглощения [1] (например, поглощение при 210 нм в 10—20 раз выше, чем при 280 нм). Однако здесь имеются определенные технические трудности. Кроме того, в этой области интенсивным поглощением обладают почти все известные буферные растворы исключение составляют нелетучие буферы на основе неорганических солей. Можно также вести анализ по флуоресценции ароматических группировок. Этот метод обладает более высокой чувствительностью по сравнению со спек-трофотометрией при 280 нм, но область его применения также ограниченна. [c.391]

Экстракция пиридилазонафтолата индия нашла применение для экстракционно-фотометрического определения этого элемента, растворителем служит хлороформ. По литературным данным, соотношение 1п ПАН в комплексе равно 1 1 или 1 2. Тш,атедь-ная проверка состава различными методами показала, что соотношение составляет 1 1. ПАН — одноосновный реагент, поэтому было неясно, в каком же виде индий экстрагируется. Исследование позволило установить, что экстракция зависит от типа буферного раствора при использовании бифталатных, цитратных или уро-тропиновых буферов извлечение плохое, при использовании ацетатного — хорошее. Логично было предположить, что в состав экстрагирующегося комплекса входит ацетат, компенсирующий заряд и входящий, вероятно, во внутреннюю сферу. Действительно, ацетат был найден в комплексе. Таким образом, экстрагируется смешанный комплекс. [c.122]

Рассмотрим метод определения фтора, предложенный Павелом и др. [183]. Органическое вещество (1,5 — 4 мг), содержащее 0,5 — 2 мг фтора, взвешивают в платиновой лодочке. Пустую трубку для сжигания помещают в печь на 3—4 мин для предварительного прогрева. Прилив в трубке заполняют 2 мл воды, после чего трубку продувают кислородом. Далее держатель пробы (с лодочкой) быстро вносят в трубку и закрывают стальной крышкой. После того как проба сгорела, трубку вынимают из печи, охлаждают, при тщательном перемешивании вливают в нее 4 мл 0,05 М КОН (чтобы отмыть внутреннюю поверхность). Затем содержимое трубки вымывают специальным буферным раствором TISAB (буфер с известной ионной силой) так, чтобы общий объем анализируемого раствора составил 50 мл. Полученный раствор сохраняют для дальнейшего анализа в полиэтиленовом сосуде. Стандартные растворы приготовляют следующим образо.м. В 6 мл воды растворяют 1 —4 мг NaF, после чего доводят объем раствора до 50 мл, приливая буфер TISAB. Э.д.с. измеряют через [c.63]

Индикаторами при титровании служат органические соединения, дающие характерное окрашивание в присутствии определяемого иона, например хромоген черный ЕТ-00 (эриохром черный Т) — органический краситель, относящийся к классу азокрао1телей. Это соединение образует с катионами многих металлов комплексы, окрашенные в винно-красный цвет. Раствор самого индикатора при pH от 7 до 10 - синий. Пока в растворе имеются ионы определяемого металла, раствор окрашен в красный цвет. По мере титрования трилоном Б ионы металла связьшаются, концентрация их в растворе уменьшается и в точке эквивалентности, когда связаны все ионы, цвет раствора изменяется в ганий. Следует обратить внимание учацщхся на то, что комплексонометрическое титрование ведут при определенном значении pH анализируемого раствора, которое достигается использованием соответствующего буфера. Например, для титрования трилоном Б буферный раствор готовят, растворяя 54 г хлорида аммония в 350 мл концентрированного раствора аммиака, затем разбавляют водой до общего обьема 1 л. Приемы титрования по комплексонометрическому методу те же, что при обычном титровании с цветным индикатором в колбу титрования помещают точно отмеренный объем анализируемого раствора, добавляют буферный раствор, индикатор, перемешивают и титруют раствором трилона Б до изменения окраски раствора. Для расчета результатов анализа пользуются обычно формулой для прямого титрования. [c.129]

Букер и Хаслам [53] модифицировали метод Нойбекера и Речница [51 ] и применили электрод с иммобилизованной уреазой для оценки активности аргиназы. Процедура определения заключалась в следующем 1 мл раствора аргиназы впрыскивали в буферный раствор (0,1 М трис-буфер, pH = 7,5), содержащий аргинин, и следили за изменением во времени потенциала уреазного электрода, включенного против НКЭ. Если построить график зависимости начальных значений углового коэффициента (AE/At) или AElAt после 30 с от концентрации энзима или субстрата, получаются прямые линии. Этот потенциометрический метод определения аргиназы предпочтительнее спектрофотометрического, несмотря на большую чувствительность последнего. [c.339]

Использование буферных растворов с фиксированным pH (обычно 3,25 и 4,25 для кислых и нейтральных аминокислот и 5,28 для основных аминокислот) имеет определенные недостатки. На разделение за д рачивается много времени, поскольку создание оптимальных условий для разрешения аминокислот, которые элюируются непосредственно друг за другом, приводит к длительным промежуткам времени между пиками других аминокислот. При фиксированном режиме колонки и постоянной скорости потока элюента качество разрешения смежных амк. нокислот и общее время анализа являются функцией pH буфера и его изменения в процессе разделения. Поэтому следует обратить внимание на методы получения заданного непрерывного изменения pH вте кающего буферного раствора. [c.293]

Восстановление большого числа антрахинонов в различных буферных растворах исследовали полярографически Фурман и Стон . Было обнаружено, что природа буфера играет значительную роль в процессе восстановления. В некоторых буферах образуется семихинон. В бо-ратных и фосфатных буферах образуются комплексы с некоторыми окси-антрахинонами. Как показала К). И. Вайнштейн , антрахинон дает четкую волну в 80%-ном растворе метанола, содержащем 0,1 н. серную кислоту с потенциалом полуволны, равным —0,36 в. Высота волны антрахино-на строго пропорциональна его концентрации в растворе. Это позволило разработать метод определения антрахинона и бензантрона при их совместном присутствии. [c.447]

Этот метод пригоден для прямого определения алюминия Он основан на экстракции оксихинолята алюминия хлороформом с последующим фотометрированием полученного желтого экстракта. Раствор оксихинолята алюминия в хлороформе наиболее сильно поглощает приблизительно при 395 ж л, раствор же 8-оксихинолина в хлороформе сильно поглощает при длине волны менее 370 л ц. Впервые этот метод был систематически исследован Джентри и Шеррингтоном которые дали приводимые ниже указания. Алюминий полностью извлекается при встряхивании 50 мл буферного раствора (pH 8,9) с 10 мл 1%-ного раствора 8-оксихинолина в хлороформе при концентрации 8-оксихинолина менее 0,5% алюминий за одну экстракцию полностью не извлекается. Что касается pH, то алюминий полностью экстрагируется 1 %-ным раствором 8-оксихинолина в хлороформе в интерва-вале pH 4,5—около 6,5 (ацетатный буфер) и приблизительно 8—11,5 (аммонийный буфер). В интервале pH 6,8—8 алюминий извлекается не полностью, так как образуется гидроокись алюминия, прежде чем ион алюминия успеет прореагировать с 8-оксихинолином, растворенным в хлороформе 8-Оксихинолин максимально экстрагируется при pH, близком к 7. Найдено, что при pH 9 ошибка определения 10—50 у алюминия составляет 0,5 у. [c.203]

По мнению Л. Муря н соавторов, полярографический метод является наиболее быстрым и точным по сравнению с другими (ацидиметрией, иодометрией, фотометрией) методами определения витамина РР, причем никотинамид может быть определен в присутствии никотиновой кислоты. Хорошо выраженные поляризационные кривые никотиновой кислогы получены в буферном растворе Бриттона — Робинсона (рН=8,0—9,0), в буфере Кольтгофа (рН=8,6 1/2= —1,6 в). При увеличении pH высота волны уменьшается, и при рН>10 волна полностью исчезает. Определению витамина РР в поливитаминных препаратах мешают тиамин и никотинамид, имеющие близкие значения 1/2. Но так как содержание витамина РР значительно выше, то их можно определять в буферно1.м растворе Кольтгофа. [c.205]

Кривые титрования, полученные этим методом, свидетельствуют о возможности количественного определения Е. histolyti a в диапазоне от 20 до 5-10 клеток/мл, хотя рассматриваются анализируемые образцы могут по-разному влиять на связанные минимальной регистрируемой дозы с использованием шести надежных отрицательных контролей в каждом анализе. Сами анализируемые образцы могут по-разному влиять на связанные с носителем антитела, иногда вызывая их высвобождение в жидкую фазу. При исследовании влияния состава буферного раствора на стадии инкубации с сывороткой было найдено, что введение в состав буфера от 5 до 50% овечьей сыворотки наиболее эффективно предотвращает неблагоприятное воздействие анализируемых образцов на слой адсорбированных иммуноглобулинов (Grundy et al., 1985). При замене ФСБ—Т на ФСБ— ТХ удавалось также значительно повысить чувствительность за. счет подавления неспецифических взаимодействий между связанными антителами и конъюгатами, что указывает на гидрофобную природу этих взаимодействий. [c.381]

Согласно одному из вариантов дифференциального метода, называемого иногда ЛЕ или Ае методом, измерение проводится путем сра1внения неизвестного вещества при определенной величине pH к той же концентрации вещества, но при другой, отличной от первой, величине pH. Например, для определения фенолов разводят часть раствора щелочным, буфером, а другую часть кислотным буфером. Измеряют поглощение более щелочного раствора, используя для сравнения кислотный раствор. Рассчитывают содержание фенолов, применяя А Е значение, найденное для чистого вещества в той же паре буферных растворов. [c.192]

Известно, что вдоль трехфазной линии давление зависит только от температуры, и это обстоятельство можно использовать для получения пара с хорошо определенным парциальным давлением какого-либо компонента и без помощи газового буфера. Например, твердые растворы в системе титан — кислород с известной активностью кислорода удавалось приготовить путем приведения титана в равновесие со смесью кальция и окиси кальция [31]. Вместо трехфазных равновесий в специально создаваемой буферной системе иногда используют и соответствующие равновесия в самой исследуемой системе. Например, образцы закиси меди с недостатком кислорода были получены путем нагревания закиси меди в контакте с медью [32]. Аналогичным образом пяти-окись ниобия с недостатком кислорода была приготовлена нагреванием образца в закрытом контейнере в присутствии смеси МЬгОд + ЫЬаОз [33]. Теллурид и селенид свинца, состав которых отвечал границе области гомогенности, получены отжигом монокристаллов с порошком такого состава, что при температуре опыта исследуемая смесь частично плавилась [34]. Во всех случаях температура образца и регулирующей системы была одинакова, что очень важно для легко сублимирующихся кристаллов. Если использовать двухтемпературный метод, то при этом состав кристаллов должен соответствовать двухфазной области, ограниченной трехфазной линией. [c.81]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология