Разделение углеводов

Разделение углеводов на примере сахаров методом тонкослойной хроматографии может быть осуществлено на таких сорбентах, как силикагель Г , окись алюминия. Сахара распределяются не по всей хроматограмме, а собираются группами в определенном интервале Rf в зависимости от их состава. На разделение сахаров влияет природа растворителя, поэтому растворитель подбирают в зависимости от цели эксперимента. [c.130]

Преимуществом колоночной хроматографии является возможность количественного фракционирования больших количеств веществ без превращения их в какие-либо производные. Однако хорошее разделение часто возможно лишь при малых скоростях элюирования, поэтому были разработаны новые виды колоночной хроматографии. Методы аффинной и адсорбционной хроматографии основаны на избирательной адсорбции молекул на нерастворимом адсорбенте, который содержит группы (молекулы), специфически взаимодействующие с молекулами подлежащих очистке соединений, например ингибиторы (для очистки ферментов) или антитела (для очистки антигенов) в настоящее время эти методы нашли широкое применение и для разделения углеводов. Невзаимодействующие с адсорбентом примеси удаляются, а связанный с адсорбентом сахар затем десорбируют способом, не приводящим к его разрушению. Десорбцию можно осуществить, изменяя pH, ионную силу среды или применяя соответствующий ингибитор взаимодействия, удерживающего вещество на адсорбенте. Для разделения ряда полисахаридов были использованы иммобилизованные формы (см. разд. 26.3.7.6) конканавалина А [40], являющегося фитогемагглютинином (лектином), который специфически взаимодействует с разветвленными полисахаридами определенного строения в настоящее время применяют и другие иммобилизованные фитогемагглютинины. Колоночная хроматография на носителях, покрытых полиароматическими соединениями [41], также находит применение для разделения полисахаридов. Благодаря достижениям в производстве носителей для жидкостной хроматографии под высоким давлением можно осуществить хроматографическое разделение быстро и избирательно описаны методы фракционирования небольших олигосахаридов, продолжающегося менее 1 ч [42]. [c.224]

Пасту силикагеля, приготовляемую смешением его с 0,1 н. раствором борной кислоты, наносят на пластинки аналогичным образом [65]. Разделение углеводов в слое силикагеля имеет некоторые преимущества перед разделением в слое кизельгура. Разделение в слое кизельгура происходит главным образом за счет процессов распределения и на пластинки можно наносить не более 5 мкг моносахарида, что затрудняет идентификацию углеводов. Наряду с процессами распределения в слоях силикагеля протекают и адсорбционные процессы, поэтому на слой силикагеля можно наносить в 0 раз большие количества моносахарида [33]. [c.78]

Целесообразным является разделение углеводов на [c.414]

Адсорбционный способ иммобилизации Ь-пролина для разделения рацемических смесей аминокислот на их оптические антиподы, по существу, сходен с описанным в лекции 16 адсорбционным модифицированием диаминами [см. формулу (16.4)], примененным для разделения углеводов (см, рис. 16.14 и табл. 16.1). [c.331]

Системы растворителей для хроматографического разделения углеводов [c.71]

Растворитель (8) этилацетат—уксусная кислота—муравьиная кислота—вода / (18 4 1 3) приготовляют, смешивая в делительной воронке 360 мл этилацетата,, 80 мл уксусной кислоты, 20 мл муравьиной кислоты и 60 мл воды. Полученный раствор используют для разделения углеводов восходящей хроматографией. Часто используют также растворитель (10) н-бутанол—уксусная кислота— вода (4 1 5). Его приготовляют смешиванием 400 мл к-бутанола, 100 мл ледяной уксусной кислоты и 500 Л1л воды. После отстаивания смесь разделяют на две фазы, нижнюю сливают и отбрасывают. Если оставшийся растворитель мутнеет, к нему добавляют несколько капель уксусной кислоты для осветления. Прн длительном стоянии отстаивается в нижней части раствора водный слой, его удаляют. Этот растворитель применяется для восходящей хроматографии. [c.71]

Хроматография на бумаге является одной из форм распределительной хроматографии, где бумага играет роль носителя неподвижной фазы — воды, сорбированной на целлюлозе. В качестве подвижной фазы используют различные смеси органических растворителей с водой. Для разделения углеводов применяют следующие растворители [c.186]

Разделение углеводов. Для разделения углеводов используют в основном те же растворители, что и для разделения аминокислот. Среди этих растворителей следует отметить смесь фенол—вода, коллидин, смесь н-бутилового спирта, уксусной кислоты и воды в тех же соотношениях, что и для разделения аминокислот-этилацетат, пиридин, вода в соотношении 2 1 2 (по объему) и этилацетат, уксусная кислота, вода в соотношении 3 1 3 (пз объему). [c.128]

Использование метода распределительной хроматографии на бумаге для разделения углеводов имеет ряд преимуществ перед, другими способами, так как дает возможность в небольшой пробе провести анализ сложной смеси сахаров. [c.155]

Бумага. Наилучшие результаты при хроматографическом разделении углеводов получаются на плотных сортах фильтровальной бумаги ( медленная № 4). При элюации сахаров следует по [c.155]

ЧИХ органических веществ, проводятся предварительные исследования по разделению углеводов [42]. В настоящее время ставится задача разработки методов разделения ферментов, антибиотиков, гормонов, углеводных полимеров и т. д. [c.401]

Некоторые исследователи термин полисахариды применяют для обозначения только высших полисахаридов, и все углеводы делят на три группы моносахариды, олигосахариды и полисахариды. Нам (как -и ряду других авторов) представляется целесообразным разделение углеводов на две группы моно- и полисахаридов, различающихся по неспособности или способности гидролизоваться, с последующим разделением полисахаридов на олигосахариды и высшие полиозы. [c.6]

Н. А. Туркельтауб, Б. И. Анваер и другие исследователи изучали влияние природы неподвижной фазы при разделении углеводо- [c.28]

Хроматографическая бумага. При выборе сорта хроматографической бумаги для разделения углеводов, аминокислот и других веществ руководствуются результатами ее испытания, которое проводят на чистых растворах смесей интересующих веществ, применяя соответствующие растворители. Скорость разделения смесей веществ зависит не только от сорта хроматографической бумаги, но также и от направления в ней волокон целлюлозы. Полоска хроматографической бумаги во время анализа играет роль колонки из набухших волокон целлюлозы. Между волокнами во время хроматографирования движется растворитель с анализируемой смесью веществ. Волокна целлюлозы в листе бумаги расположены в определенном порядке, поэтому в полоске бумаги их расположение зависит от того, как она вырезана. Если полоска вырезана так, что направление волокон в ней продольное, т. е. совпадает с направлением движения растворителя, то скорость движения растворителя, а следовательно, и скорость разделения анализируемой смеси веществ на этой полоске будет больше, чем на полоске с поперечным расположением волокон. Площадь, занимаемая веществом, выделенным во время хроматографирования, будет больше, если разделение проводят на полоске с продольным расположением волокон. Это влияние структуры бумаги необходимо учитывать при хроматографических анализах и особенно при количественном определении компонентов. [c.76]

Для разделения углеводов предложено много разных смесей органических растворителей с водой. В табл, 3 приведены Rf и Ях по глюкозе, т. е. Ятл для различных веществ при употреблении различных растворителей. Чем больше отличаются значения Rf или / гл различных веществ, тем быстрее и лучше проходит их разделение при хроматографировании. [c.77]

В курсе приведены многочисленные примеры практического применения главным образом газовой и молекулярной жидкостной хроматографии на адсорбци-онно или химически модифицированных адсорбентах для анализа углеводородов, их производных и гетероциклических соединений. Особое внимание уделено анализу вредных примесей, разделению углеводов, стероидов, гликозидов, азолов, азинов, а также таких важных галогенпроизводных, как фреоны и пестициды. Адсорбция микотоксинов, представляющих собой одну из серьезнейших пищевых и кормовых проблем, рассматривается как в аспекте хроматографического их анализа, так и в аспекте хроматоскопического исслв1Дования структуры их молекул. В конце курса приведены примеры адсорбции и хроматографии синтетических и природных макромолекул. Здесь рассматривается иммобилизация некоторых ферментов и клеток (например, для осахарнвания крахмала, изомеризации глюкозы, для решения проблем искусственной почки), а также вопросы хроматографической очистки вирусов, в частности, вирусов гриппа и ящура. [c.4]

Более четкое разделение углеводов достигается при использовании модифицированных слоев адсорбента [74]. В случае применения слоя кизельгур-гипса, пропитанного 0,02 М раствором уксуснокислого натрия, растворителем служит этилацетат— 65%-ный изопропанол (65 35). Разделение ведут в камере, насыщенной парами растворителя. Углеводы на пластинку наносят в растворе пиридина, проявляют опрыскиванием свежеприготовленным раствором конц. серной кислоты и анисового альдегида (0,5 мл H2SO4 и 0,5 мл аиисового альдегида ъ 9 мл 95%-ного этанола). При использовании слоя кизельгур-гипса, пропитанного борной кислотой (на 4 г силикагеля 6 мл О,i н. раствора борной кислоты) растворителем служат бензол — метанол — уксусная кислота (1 3 1) и метилэтилкетон— метанол — уксусная кислота (3 1 1). Разделенные моносахариды на пластинках проявляют смесью, состоящей из 20%-ного раствора серной кислоты и 0,2%-ного раствора нафторезорцина в этаноле. Пластинки высушивают при 105° С. [c.78]

Электрофоретическое разделение углеводов проводят на бумажных полосах, длина которых определяется рамкой прибора для электрофореза. При работе на приборе ЭФА-1 ленты (2,5X40 см) смачивают боратным буферным раствором с pH 9,2 и помещают на рамку прибора. Смесь углеводов наносят на полоски хроматографической бумаги (3X15 мм), которые помещают на ленты. Электрофорез проводят в боратном буферном растворе с pH 9,2. [c.86]

Для разделения различных форм витамина Ва в эмбрионах цыпленка была использована ПТСХ [62], Обзор применений ПТСХ для разделения углеводов представлен Вингом и БеМиллером 63]. Вангом [64] составлен обзор применений полиамидных слоев в ПТСХ. [c.149]

Баленович и Турина [62] показали, что уравнение (49г) справедливо для тонкослойного хроматографического разделения углеводов (для применения сильно гидрофильных растворителей при работе с различными типами сорбентов оксидом алюминия, силикагелем или целлюлозой). [c.183]

Кдатраты. Синтин и бензиновые фракции нефти состоят из смесей углеводородов нормального строения и с разветвленными цепями. Найден эффективный метод разделения органических соединений с нормальными цепями и разветвленными, получивший в общем случае название метода клатратного разделения. Для разделения углевод оро до в была использована мочевина. Кристаллы мочевины построены таким образом, что внутри кристаллов имеются узкие шестигранные каналы. Диаметр этих каналов таков, что внутрь их может пройти и задержаться за счет адсорбционных сил только углеводород нормального строения. Поэтому при обработке смеси органических соединений мочевиной (или некоторыми другими соединениями) вещества с нормальной цепью углеродных атомов кристаллизуются вместе с ней в виде комплексов. Этот метод будет иметь, безусловно, очень большое будущее, когда будет найдено большее число эффективных клатратообразователей. [c.161]

Кеслер [45], сравнивая три анионообменные смолы в форме боратов, нашел, что для разделения углеводов техникон 3/28/VI значительно эффективнее, чем дауэкс 1-Х8 (200— 400 меш) и биорад АС 1-ХВ (30—40 мкм). При использовании смолы с более низкой степенью поперечной сшивки, например дауэкс 1-Х4, следует учитывать равновесие, которое достигается при увеличенных скоростях кроме того, значительно улучшается хроматографический режим разделения ди- и трисахаридов [47] (о методе такого разделения см. в разд. П1, В, Хроматография на ионообменной смоле в боратной форме). При использовании смолы с более мелкими и более однородными по величине частицами также увеличивается разделяющая способность, однако наиболее критическим параметром, влияющим на разделяющую способность, является, вероятно, ионная сила проявляющего буферного раствора [48, 49]. [c.69]

Сравнение разделяющей способности сульфатной и хлоридной форм сильноосновных анионообменников по отношению к моносахаридам и дезоксисахарам проведено в работе [28]. В другой работе этих же авторов [64] сообщается о применении сульфированных сополимеров стирола и дивинилбензола в литиевой, натриевой и калиевой формах для разделения углеводов. В табл. 22.2 приведены полученные авторами коэффициенты объемного распределения сахаридов, которые можно использовать для выбора соответствующей формы смолы. При проведении работы авторы применяли растворы этанола различной концентрации. Изучаемые смеси сахаров включали альдитолы и некоторые простые алифатические карбонильные соединения [27]. [c.85]

В литературе имеется довольно мало работ относительно применения гель-хроматографии к этому классу веществ (среди них два обзора Граната [89, 90], а также несколько работ, котррые мы уже упоминали в разделе о распределении по молекулярному весу (см. стр. 179). Возможно, это обусловлено опасениями загрязнить углеводы следами декстрана, который постоянно вымывается из сефадекса (см. стр. 49). В связи с этим для разделения углеводов (главным образом при количественной оценке), по-видимому, более предпочтителен не содержащий углеводов полиакриламидный гель (биогель) [91]. [c.224]

На рис. 3.8 мы также видели, что умеренно полярные неподвижные фазы, по-видимому, наиболее пригодны для ОФЖХ очень полярных образцов, которые почти не удерживаются на алкильных обращенных фазах. Наглядный пример — разделение углеводов на аминофазе. [c.97]

Недавно Шоу и Уолтоном была предпринята первая попытка лигандообменного разделения углеводов на макропористой катионообменной смоле Амберлит-15 в Рез+-форме [132]. [c.29]

Для получения концентрированной этиленовой фракции или выоококонцентриро ванного этилена в настоящее время в промышленности применяются следующие методы разделения углеводО родных газов [1—7] [c.175]

В числе прочих адсорбентов, на которых проводилось разделение углеводов, следует назвать гипс, на котором Жданов и др. [49] хроматографировали углеводы, применяя различные смеси хлороформа и метанола. Аффонсо [50] за 30 мин разделил глюкозу, фруктозу, арабинозу, лактозу, ксилозу и маннозу на полосках алебастра, элюируя пробы смесью ацетон— бутанол—хлороформ—ацетатный буферный раствор, pH 3,6 (5 4 1 1). Гессе и Александер [51] для разделения смеси из [c.557]

Для улучшения разделения углеводов пользуются двумерной ТСХ. На слоях силикагеля в одном направлении разделение проводят смесью хлороформ—метанол—вода (16 9 2), а в другом [63] — смесью этилацетат—метанол—уксусная кислота—вода (6 3 3 2) можно также дважды элюировать пробу смесью бутанол—этанол—вода (5 1 4) и затем при 90°С смесью бутанол—уксусная кислота—эфир—вода (9 6 3 1) [64]. При двумерном разделении успешно применяют также пропитанные слои. На слоях силикагеля и кизельгура, пропп-танных солями борной кислоты, разделение проводят смесями изобутанол—уксусная кислота—вода (5 4 1) в одном направлении и н-пропанол—вода (8,5 1,5) или н-пропанол—диметил- [c.558]

НП-ЗООА, НСКТ 25-100 и др.) по термической устойчивости и разделяющей способности не уступают лучшим зарубежным образцам. В последне время замет ю активизировались работы по синтезу новых полярных ИФ. Разработан. метод получения поли-л-феноксиленов [22]. Аналоги такого полимера— полифениловые эфиры с 5, 6 и 7 бензольными кольцами— уже показали свою эффективность при анализе соединений различных классов. По свс й термической стойкости поли-л-феноксилен существенно превосходит 0V-1. После кондиционирования колонок с обеими фазами в течение 16 час при 400° время удерживания 1,3,5-трифенилбензола на пс ли-л -фен0ксилене не изменилось, а на 0V-1 уменьшилось в 3 раза. Синтезированные полиамиды [16] оказались также устойчивыми к высоким температурам. По селективности разделения углеводов и аминокислот полиамиды близки к ХЕ-60. Полиимиды [17] с предельной рабочей температурой 325° рекомендуются для анализа стероидов. Как полиамиды, так и полиимиды хорошо наносятся на капиллярные колонки. Предложен интересный способ повышения термостойкости SE-52 окислением этой фазы воздухом [23]. При работе с окисленным полимером при программировании температуры от 200 до 350° в течение 8 месяцев не было отмечено ухудшения разделения. Ранее испытанные термостабильные природные продукты, не имеющие постоянного состава асфальтены, продукты молекулярной перегонки микро-восков, полифениловые смолы [18—21]—не нашли широкого- применения. [c.85]