Хроматография определение углеводов,

Количественное определение углеводов методом нисходящей хроматографии на бумаге (по Г. Н. Зайцевой и Т. П. Афанасьевой). [c.157]

Дано количественное определение углеводов на хроматографе Цвет-3 . [c.79]

Камеры. Камерой для хроматографирования может служить эксикатор, банка с притертой крышкой, стеклянный колпак на шлифованном стекле и стеклянные камеры с каркасами из нержавеющей стали. Камеры должны герметически закрываться. Эксикатор применяют при хроматографировании на лопатках (рис. 22). Банку с притертой крышкой применяют при восходящей и многократной хроматографии (рис. 23). Стеклянный колпак, притертый к стеклу, применяют при восходящем или нисходящем хроматографировании на длинных лентах при количественном определении углеводов и других веществ (рис. 24). Камеры из стекла в каркасе из нержавеющей стали применяют для двумерной хроматографии (рис. 25). Хроматографирование проводят при температуре 18—22°, помещая камеры в специальные комнаты или в вытяжной шкаф. [c.74]

В книге освещаются методы анализа сырья, полупродуктов, готовой продукции, которые применяются на заводах. Особое внимание в книге уделено вопросам соблюдения санитарных правил при сбросе сточных вод в водоемы и методам анализа сточной воды на различных стадиях ее очистки. Второе издание значительно дополнено описанием новых методов анализа, появившимся в последние годы (определение углеводов, анализ этилового спирта методом газожидкостной хроматографии и др.) Первое издание книги вышло в 1969 году. [c.343]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ УГЛЕВОДОВ В ГЛИКОСФИНГОЛИПИДАХ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ [c.13]

Тонкослойная хроматография находит все большее применение для количественного определения углеводов. Этот метод чрезвычайно полезен при изучении кинетики реакций, исследовании их механизма и определении выхода продуктов, однако он применим лишь для анализа смесей, компоненты которых можно полностью разделить. Способы количественного определения делят на две большие группы а) прямое определение (установление количества вещества непосредственно на пластинке) б) косвенное определение (элюирование пятен вещества с последующим анализом элюата физическими методами) [1]. [c.46]

Разделение углеводов на примере сахаров методом тонкослойной хроматографии может быть осуществлено на таких сорбентах, как силикагель Г , окись алюминия. Сахара распределяются не по всей хроматограмме, а собираются группами в определенном интервале Rf в зависимости от их состава. На разделение сахаров влияет природа растворителя, поэтому растворитель подбирают в зависимости от цели эксперимента. [c.130]

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФОСФОРНЫХ ЭФИРОВ УГЛЕВОДОВ ПОСЛЕ РАЗДЕЛЕНИЯ МЕТОДОМ БУМАЖНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ [c.45]

При получении летучих производных моносахаридов, необходимых для газовой хроматографии, для каждого компонента теоретически возможно образование пяти форм сс-, р-пиранозы, а-, Р-фуранозы и. линейная форма. Однако в значительных количествах образуются лишь четыре из них. Смеси, состоящие из пяти компонентов, при газовой хроматографии дают большое количество пиков, которые часто перекрываются. Для количественной оценки углеводов на хроматограммах с перекрывающимися пиками необходимо довести состояние различных форм до равновесия, чтобы быть уверенным, что определенные формы моносахарида всегда содержатся в одинаковых соотношениях и для любого моносахарида отношение между разными площадями пиков остается постоянным. Это позволяет вычислять общее количество отдельного моносахарида лишь по одному пику. [c.82]

Лауриновую, миристиновую, пальмитиновую и стеариновую кислоты, каждая в количестве 40 мкг, разделяли методом хроматографии на бумаге с обращенными фазами. Для разделения использовали бумагу, пропитанную смесью низкомолекулярных углеводо-дов точность определения от —1,3 до +1,4% [119]. В этом методе [c.163]

Преимуществом колоночной хроматографии является возможность количественного фракционирования больших количеств веществ без превращения их в какие-либо производные. Однако хорошее разделение часто возможно лишь при малых скоростях элюирования, поэтому были разработаны новые виды колоночной хроматографии. Методы аффинной и адсорбционной хроматографии основаны на избирательной адсорбции молекул на нерастворимом адсорбенте, который содержит группы (молекулы), специфически взаимодействующие с молекулами подлежащих очистке соединений, например ингибиторы (для очистки ферментов) или антитела (для очистки антигенов) в настоящее время эти методы нашли широкое применение и для разделения углеводов. Невзаимодействующие с адсорбентом примеси удаляются, а связанный с адсорбентом сахар затем десорбируют способом, не приводящим к его разрушению. Десорбцию можно осуществить, изменяя pH, ионную силу среды или применяя соответствующий ингибитор взаимодействия, удерживающего вещество на адсорбенте. Для разделения ряда полисахаридов были использованы иммобилизованные формы (см. разд. 26.3.7.6) конканавалина А [40], являющегося фитогемагглютинином (лектином), который специфически взаимодействует с разветвленными полисахаридами определенного строения в настоящее время применяют и другие иммобилизованные фитогемагглютинины. Колоночная хроматография на носителях, покрытых полиароматическими соединениями [41], также находит применение для разделения полисахаридов. Благодаря достижениям в производстве носителей для жидкостной хроматографии под высоким давлением можно осуществить хроматографическое разделение быстро и избирательно описаны методы фракционирования небольших олигосахаридов, продолжающегося менее 1 ч [42]. [c.224]

Лауриновую, миристиновую, пальмитиновую и стеариновую кислоты, каждая в количестве 40 мкг, разделяли методом хроматографии на бумаге с обращенными фазами. Для разделения использовали бумагу, пропитанную смесью низкомолекулярных углеводо-дов точность определения от —1,3 до +1,4%) [119]. В этом методе ориентационную, калибровочную и основную хроматограммы проявляли и высушивали одновременно. После кондиционирования аммиаком в течение 6—8 ч ориентационную (калибровочную) хроматограмму погружали в 0,03%-ный водный раствор нерадиоактивного Со(ОАс)2 и проявляли хорошо разделенные пятна 1%-ным раствором сульфида аммония. Остальные хроматограммы после кондиционирования аммиаком разрезали на кусочки размером 3 см. Те кусочки, которые содержали часть идентифицированных одиночных пятен, погружали в раствор меченого реагента и промывали, в результате чего образовывался Со5. После этого определяли полную радиоактивность °Со5, полученного из каждой кислоты. Содержание каждой кислоты в пробе вычисляли по полной радиоактивности соответствующих пятен основной и калибровочной хроматограмм, принимая во внимание, что полная радиоактивность пропорциональна количеству данной кислоты в пробе. Во избежание ошибок необходимо строго контролировать величину pH раствора. При pH < 5,8 образование соли не является полным, а при pH > 6,0 на бумаге адсорбируются трудно десорбируемые ионы кобальта. [c.163]

Полный гидролиз полисахарида проводят для установления природы и соотношения составляющих его моносахаридных остатков. Качественный анализ гидролизата в настоящее время неизменно выполняют с помощью распределительной хроматографии на бумаге, что требует лишь микроколичеств сахаров и вместе с тем дает возможность идентифицировать присутствующие нейтральные, основные и кислые моносахариды. По хроматографии углеводов существует обширная литература [91, 97, 127, 131, 162]. Было испытано множество систем растворителей и много обнаруживающих реагентов как специфических, так и неспецифических, и составлены таблицы относительных скоростей движения сахаров на бумажных хроматограммах [131]. Для окончательной идентификации определенного сахара не достаточно одного только хроматографического анализа. [c.303]

Хроматографию на бумаге в сочетании с применением органических реактивов широко используют для разделения близких по свойствам соединений аминокислот, пептидов, нуклеиновых кислот, углеводов. Кроме того, ее применяют для определения следов хлорорганических, фосфорорганических и других пестицидов в пищевых продуктах и в биологическом материале. Этим методом также разделяют пигменты листьев. [c.460]

Способность многих соединений переходить в газовую фазу без разложения давно используется для их разделения и очистки методами дистилляции, отгонки и сублимации. За последние два десятилетия для разделения и аналитического определения летучих веществ все шире применяется также газовая хроматография,, которая благодаря ее универсальности, высокой разрешающей способности и чувствительности завоевала большую популярность среди химиков. Если прежде летучесть соединений для аналитика была чаще всего помехой и даже методы анализа газов обычно основывались на предварительном переводе их в нелетучие формы путем поглощения подходящим реагентом, то с появлением газовой хроматографии, наоборот, исследователи начали изыскивать способы перевода нелетучих соединений в летучие производные. Примером могут служить разработанные за последние годы газохроматографические методы анализа нелетучих жирных кислот, аминокислот и углеводов в виде летучих эфиров и других производных. Вполне естественно, что были предприняты попытки распространить этот метод также на такие, казалось бы, неподходящие объекты, как металлы. [c.4]

Углеводы. Методом жидкостной хроматографии углеводы анализируются непосредственно. Во многих случаях эти соединения можно хроматографировать на обоих типах жидко-жидкостных систем. На рис. 11.17 приведены хроматограммы карбамата и его основных продуктов разложения, полученные на колонках с р,р -оксидипропионитрилом и триметиленгликолем. Хотя разделение обеспечивают обе неподвижные фазы, триметиленгликоль более селективен по отношению к гидроксильным группам и обеспечивает гораздо лучшее разрешение между карбарилом и нафтолом-1. Фон от экстракта растения вымывается с фронтом растворителя и в обоих случаях не мешает определению карбарила или нафтола-1. [c.290]

Все методы анализа сырья с целью установления состава, строения и свойств полисахаридов основаны на определении отдельных компонентов, содержащихся в гидролизатах полисахаридов, полученных при различных условиях гидролиза. Наиболее полную информацию о составе моносахаридов, олигосахаридов и уроновых кислот, присутствующих в гидролизатах, получают тогда, когда делают анализ хроматографическим методом на бумаге. Этим методом сахара и другие вещества разделяют и выделяют из смеси с различными веществами в том виде в каком они присутствуют в гидролизатах без изменений, а затем определяют их количество. При анализе смесей углеводов ч помощью газожидкостной хроматографии сахара необходимо сначала превратить в летучие производные, а затем провести их разделение и определение. Без потерь перевести сахара в летучие производные невозможно, поэтому результаты анализов менее точны, но время, затрачиваемое на анализ этим методом, значительно меньше [14]. [c.24]

В книгу внесены следующие крупные изменения 1) сильно расширен отдел определения витаминов, 2) добавлено определение некоторых гормонов, 3) добавлено определение ряда ферментов, 4) совершенно переработана глава об определении белков сыворотки, 5) сильно расширена глава об определении пигментов и желчных кислот, 6) добавлено определение связанных углеводов крови, 7) добавлено описание хроматографии на бумаге и электрофореза на бумаге, 8) дано описание работы с некоторыми приборами (КОЛ-1, ФЭК, СФ-4, ЭФЗ и т. п.). Многие методики заменены другими — менее трудоемкими или более безопасными. Ввиду невозможности увеличения объема книги это сделано за счет более трудоемких методик, постепенно выходящих из употребления. [c.3]

Хроматография на бумаге при изучении антибиотиков очень часто применяется на ранних этапах исследования, когда отсутствуют данные о химической природе изучаемого вещества. Поэтому при использовании этого метода возникает много вопросов, которые обычно не встают перед исследователем при изучении определенных групп природных веществ, например белков, углеводов, стероидов и т. д. К числу таких вопросов относится классифицирование антибиотиков методом так называемых сборных хроматограмм , изучение однородности антибиотиков с использованием самых различных методов обнаружения их на хроматограммах и т. п. [c.21]

Сборник докладов по применению газовой хроматографии ддя анализа аминов, алкалоидов, аминокислот, стероидов, желчных кислот, углеводов, ароматических кислот мочи, жирных кислот и их производных, а также для определения летучих органических анестезирующих веществ. Приведены ссылки на литературу, таблицы значений времени удерживания, хроматограммы. [c.268]

Для количественного определения углеводов, разделенных хроматографией на бумаге, используют различные методы. Количество моносахарида можно определить непосредственно на хроматограммах измерением денситометром [53] интенсивности окраски пятен, полученных при проявлении, например, анилинфталатом [54] или азотнокислым серебром [55]. Ошибка прямого измерения интенсивности окраски пятен достигает Ю—15%, поскольку окраска часто бывает нестабильной и в сильной степени зависит от условий обработки хроматограмм перед измерением. Однако из-за быстроты определения этот метод находит применение. [c.76]

Сахара (Fis her und Doerfel, 1954). Одномерная нисходящая хроматография на ватманской фильтровальной бумаге № 1 (длиной 55 см) служит средством для качественного и количественного определения углеводов. Поскольку разделение осуществляется при одностороннем цикле, на один и тот же лист моншо нанести большое количество образцов и синтетических стандартов. Бумагу помещают в резервуар для хроматограмм и в течение 2 ч она приходит в равновесие с паровой фазой растворителя. Растворите.пь состоит из этилацетата, пиридина и воды в соотношении 40 11 6 (по объему). Разделение сахаров завершается через 16—18 ч при комнатной температуре. (25° С). Лист высушивают в вытяжном шкафу в течение 30 мин. [c.27]

Определение углеводов в гликолипидах и ганглиозидах с помощью газовой хроматографии. (Определение глюкозы, галактозы, га-лактозамина и сиалевой к-ты.) [c.139]

Количественное определение сахаров на хроматограмме можно провести методом денситометрии. Так, например, описан способ оценки содержания сахаров в клинических анализах крови и мочи при концентрациях до 10 мкг/мл с точностью 2—3,5% [394]. При препаративной хроматографии на бумаге зоны, соответствующие разделяемым соединениям, вырезают и элюируют водой или 50%-ным этанолом. В результаты любых определений углеводов, выделенных таким образом, следует вносить поправку на присутствие следов целлюлозного материала из бумаги, количество которого можно оценить после элюирования в тех же условиях пустого образца бумаги тех же размеров, что и хроматографическая зона. [c.62]

Синтез 0-триметилсилиловых эфиров проводят следующим образом [90]. Раствор, доведенный до pH 4 при помощи ионообменной смолы типа амберлит IR-45, концентрируют до небольшого объема. В круглодонную колбу емкостью 50 мл вносят 0,5 мл гидролизата, содержащего 10—15 мг углеводов, и 0,5 мл 0,2%-ного раствора эритрита, смесь перемешивают, выпаривают досуха н выдерживают на водяной бане 30 мин при 50° С под вакуумом. Остаток в колбе растворяют в сухом пиридине. К раствору добавляют 0,4 мл гексаметилдиси-лазана, 0,2 мл триметилхлорсилана и энергично встряхивают в течение 30 сек. Приготовленный раствор вводят в колонку хроматографа при помощи микрошприца. Для количественного определения строят стандартные графики для каждого сахара. Для этого хроматографируют смесь, содержащую исследуемый моносахарид и эритрит в различных соотношениях. Измеряют площади соответствующих пиков, отношения площадей пиков моносахарида и эритрита выражают в виде функций отношений соответствующих весовых количеств. [c.82]

Для идентификации сиаловых кислот применяется хроматография на бумаге в тонком слое силикагеля или электрофорез на бумаге Если хроматографические данные показывают, что новая сиаловая кислота отличается от всех других известных сиаловых кислот, ее выделяют и очищают методами, принятыми в химии углеводов, учитывая при этом особую неустойчивость сиаловых кислот по сравнению с другими моноса- харидами, а затем проводят функциональный анализ (в первую очередь, определение метоксильных, Н- и О-ацетильных групп). Положение заместителей в молекуле определяют обычными методами, прежде всего окислением перйодатом. [c.338]

В химии моносахаридов благодаря широкому развитию хроматографических методов многие вопросы выделения свелись в сущности лишь к. техническим задачам той или иной степени сложности, хотя в отдельных, случаях решение этих задач вызывает определенные трудности. Так, например, недостаточно эффективны имеющиеся в настоящее время методьс разделения таких соединений, как изомерные метилированные сахара. С широким введением в практику химии углеводов аналитической и препаративной газо-жидкостной хроматографии большинство стоящих сейчас проблем такого рода, по-видимому, найдет удовлетворительное разрешение для соединений небольшого молекулярного веса. [c.626]

Впервые хроматография на бумаге была предложена для качественного и количественного определения аминокислот и пептидов, полученных прн гидролизе белка. До настоящего времени этот способ пригодеь для разделения природных веществ — углеводов, липидов, нуклеотидов и др. [c.498]

Эти методы применяют для быстрой и селективной идентификации аскорбиновой кислоты в смеси витаминов. Количественное определение, как и в случае хроматографии на бумаге [34], следует проводить титрометрически или фотометрически после локализации пятна (непосредственной или с использованием метода направляЬзщей полосы), соскабливания и элюирования. Таким способом Штрогеккер [55] определил аскорбиновую кислоту в продуктах питания в смеси с растворимыми углеводами, соскабливая окрашенные в кирпично-красный цвет пятна динитрофенилгидразона аскорбиновой кислоты, элюируя 85 %-ным раствором серной кислоты, фильтруя и фото-метрируя. [c.247]

Метилированные сахара устойчивы к кислотам и щелочам. Гликозиды метилированных сахаров благодаря летучести в высоком вакууме уже использовались для фракционирования и определения строения углеводов. В настоящее время они используются для газб-жидкост-ной хроматографии и масс-спектрометрии. [c.139]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология