Спектрофотометрия проведение определений

Методы количественного определения нуклеиновых кислот, основанные на спектрофотометрии в ультрафиолетовой области спектра, отличаются высокой чувствительностью и простотой проведения анализа. Необходимым этапом различных методов спектрофотометрического определения нуклеиновых кислот является их экстракция из биологического материала, сопряженная с ги"рол зом полинуклеотидов. В связи с этим следует иметь в виду, что из исследуемого материала предварительно необходимо удалить свободные нуклеотиды. [c.162]

Как при выделении и очистке биополимеров, так и при проведении разнообразных исследований необходимо количественное определение содержания биополимера в полученной фракции, в выделенном или исследуемом образце. Во введении к этой главе уже указывалось, что биохимические исследования проводятся, как правило, с очень небольшим количеством материала и поэтому требуют высокочувствительных методов детекции. Наиболее широко распространенные методы детекции основаны на измерении оптического поглощения (спектрофотометрия), радиоактивности (радиохимические методы) или свечения образцов (люминесцентные методы). [c.248]

Понятие об ошибке слежения или динамической точности относится к способности сервосистемы или пера самописца реагировать на сигнал приемника излучения. Так как все спектрофотометры имеют определенную постоянную времени, то реальная спектрограмма является только приближенным отражением сигнала спектрофотометра [89]. Ошибку слежения можно уменьшить за счет регулировки спектрофотометра и малых скоростей сканирования. При проведении анализа целесообразно сканировать аналитические полосы при нескольких скоростях. Оптическая плотность данной полосы будет зависеть от времени сканирования при больших скоростях, пока не будет найдена такая скорость, при которой оптическая плотность максимальна. Скорость, выбранная для анализа, должна быть еще меньше этой скорости. [c.256]

При использовании активационной методики чувствительность прямо пропорциональна интенсивности потока нейтронов, как это видно из табл. 41, причем уже при потоке —10 нейтрон/сек-см чувствительность достигает, и даже в отдельных случаях превышает чувствительность спектрального эмиссионного анализа. Кроме чрезвычайно высокой чувствительности метод имеет и другие достоинства. При активации смеси элементов нейтронами почти всегда удается обойти влияние элементов друг на друга, подобное взаимному влиянию компонентов в спектрофотометрии или флуорометрии, и при проведении анализа в комбинации с хроматографическим разделением радиоизотопов метод абсолютно универсален, хотя и уступает всем известным методам по продолжительности определения. [c.211]

При использовании спектрофотометра для определения металла по методу смешанных окрасок имеется обычно две возможности в выборе длины волны. Можно измерять поглощение света комплексом металла (что обычно предпочтительнее) или избытком дитизона, остающегося после проведения реакции. В четыреххлористом углероде приблизительные длины волн максимума поглощения (в м 1) дитизона или первичных дитизонатов некоторых [c.148]

В результате проведенной работы авторы пришли к выводу о возможности суммарного определения ароматических углеводородов, в бензинах с мало меняющимся соотношением содержания ароматических компонентов по поглош ению в ближайшей инфракрасной области. Для указанной цели пригоден упрощенный фильтровой спектрофотометр. Время анализа составляет несколько минут, что выгодно отличает этот метод от химических методов. В сочетании с непрерывной записью метод может быть использован для непрерывной регистрации выхода продуктов в процессе производства. [c.562]

Влияние спектрофотометрических ошибок на определение координат цвета и цветности может быть оценено эмпирически при проведении большого числа повторных измерений спектральных характеристик отражения или пропускания одного и того же образца с последующим расчетом соответствующих координат по спектральным данным. В результате измерений получается разброс данных вокруг среднего значения величина этого разброса будет являться мерой воспроизводимости измерений на данном спектрофотометре. Колориметрическое значение спектрофотометрических ошибок может быть изучено статистическими методами [93, 405, 409, 502, 504, 554]. [c.130]

Каждый из этих этапов одинаково важен в спектрофотометрии, так как от правильности выполнения всех операций на том или ином этапе и учета всех факторов, влияющих на точность спектрофотометрического определения, зависит конечный результат. Поэтому перед использованием той или иной реакции тщательно изучают оптимальные условия ее проведения. [c.46]

Далее, важна устойчивость образцов к воздействию светового и теплового излучений, так как в процессе измерений образцы подвергаются действию лучистой энергии в течение определенного, причем иногда довольно длительного периода времени. В зависимости от конструкции спектрофотометра или метода проведения измерений лучистый поток, падающий на образец, может быть либо ограничен узким спектральным интервалом, либо содержать все длины волн в спектре излучения встроенного источника света. Последний случай может оказаться неблагоприятным для образца, так как сфокусированный на нем пучок обычно обеспечивает высокую интенсивность облученности поверхности (как в видимом, так и инфракрасном диапазонах спектра), что вызывает нагрев образца и, возможно, изменение его спектральной характеристики до завершения измерений. Помимо нагрева падающий поток может также вызвать в процессе измерений обесцвечивание образца с последующим изменением спектральной характеристики. [c.126]

ХОЛИНЭСТЕРАЗА, см. Ацетилхолинэстераза. ХОЛОСТОЙ ОПЫТ (контрольный опыт), повторение процедуры хим. анализа в аналогич. условиях (с теми же реагентами, приборами и т. п.), но без анализируемого к ва. Проводят для определения поправки, к-рую необходимо вычесть из значения аналит. сигнала, измеренного при анализе исследуемого в-ва, чтобы получить правильный результат. Иногда поправку специально не определяют, а учитывают непосредственно в ходе измерений аналит. сигнала напр., в дифференц. спектрофотометрии р-р, полученный в X. о., используют в качестве р-ра сравнения. X. о., проведенный без анализируемого в-ва, не всегда позволяет найти правильное значение поправки, т. к. распределение определяемого компонента между фалами в разл. стадиях анализа может зависеть от содержания всех остальных компонентов. Флуктуации результатов X. о. определяют предел обнаружения вещества. Значения поправки X. о. зависят от чистоты реактивов и условий анализа. ХОНДРОИТИНСУЛЬФАТЫ, сульфатированные муко-полисахариды. Входят в состав соединит, тканн животных (хрящей, сухожилий). Углеводные цепи X. (см. ф-лу) по- [c.665]

Надежность данных, полученных с помощью этой методики, зависит от правильности, с которой устанавливается длина волны во время проведения анализа. Уайт и Баррет [266] устанавливали прибор, калиброванный по линиям спектра излучения паров ртути на длине волны 1,423 0,002 мкм. Была предложена конструкция кюветы (рис. 7-3), специально разработанной для приготовления стандартных растворов воды в азотной кислоте, содержащей пентоксид азота. Для измерений прямоугольную часть кюветы помещают в кюветное отделение спектрофотометра после каждого последовательного добавления определенной порции воды (с помощью шприца для подкожных инъекций). Перемешивание обычно проводят в герметизированном объеме кюветы, для чего ее содержимое аккуратно переносят несколько раз в боковой отросток без увлажнения пробки. [c.398]

Спектрофотометрню в ультрафиолетовой и видимой областях ие следует рассматривать как самостоятельный метод исследования комплексообразования. Обычно спектрофотометрический метод дополняет потенциометрический. В разд. 2.3 и 6.3 мы уже обсуждали преимущества спектрофотометрии по сравнению с потенциометрией при определении числа частиц в очень лoлi-ных системах. Более того, известны случаи, когда невозможно различить равновесные процессы на основании только потенциометрических результатов. При проведении потенциометрических исследований необходимо располагать соответствующими электродами, поэтому потенциометрический метод применим для изучения немногих реакций. Недавно вышел обзор [1], в котором обсуждается примепепие спектрофотометрии для определения констант устойчивости. Некоторые ограничения спектрофотометрического метода уже обсуждались в разд. 6.3 и 6.4. [c.132]

Определение кобальта в перегнанной азотной кислоте. Юг азотной кислоты упаривают в кварцевой чашке почти досуха. К остатку добавляют 10 мл фосфатного буфера (pH 6,10) ж 2 мл 0,02%-пого водного раствора Р-нитрозо-а-пафтола, предварительно перекристаллизованного из воды. Раствор нагревают почти до кипения, охлаждают и переносят в делительную воронку емкостью 100 мл. К полученному раствору приливают 5 мл хлороформа экстрагируют при механическом встряхивании раствора в течение 10 мин. водный слой отбирают пипеткой. Для реэкстракции реагента хлороформный раствор промывают при встряхивании в течение 20 мин. 4 N раствором щелочи. Последнюю операцию повторяют. Затем для разрушения комплексов меди и никеля раствор хлороформа промывают соляной кислотой. После этой операции экстракт еще содержит некоторое количество реактива, которое ранее было связано с медью и никелем, поэтому органическую фазу еще раз промывают раствором щелочи. Оптическую плотность экстракта измеряют на спектрофотометре при 307 ммк. Нулевым раствором служит раствор, проведенный через все стадии анализа, но не содержащий азотной кислоты. [c.301]

Рений. Наиболее избирательным является метод определения рения с дифенилкарбазидом [126—128]. Механизм реакции Re (VII) с дифенил-карбазидом заключается в восстановлении рения до Re (V) и окислении дифенилкарбазида до дифенилкарбазона. Продукты реакции, в свою очередь, образуют окрашенное в фиолетовый цвет комплексное соединение, состав которого отвечает соотношению компонентов 1 1 [128]. В условиях проведения реакции (8 N НС1) определению рения не мешают многие элементы, что позволяет проводить анализ практически любых объектов без отделения прочих элементов [128]. Чувствительность метода 0,1—0,2 мкг мл Re. Определению мешают окислители Си, Se, V и Мо влияние последних трех элементов устраняется применением метода дифференциальной спектрофотометрии. [c.136]

В результате проведенных в последние годы в ГЕОХИ АН СССР исследований были разработаны новые методы концентрирования, отделения от соседних элементов (рения, молибдена, рутения) и определения технеция с применением экстракции, хроматографии, спектрофотометрии, а также изучены его различные валентные состояния. В настоящей статье наряду с ранее опубликованными данными приводятся некоторые новые результаты по аналитической химии технеция. [c.327]

Колориметры и фотометры. В хорошо оборудованной лаборатории должен быть визуальный колориметр типа Дюбоска. Необходим также фотоколориметр. Если в лаборатории проводятся научные исследования, большую помощь II них может оказать и спектрофотометр. Здесь нет возможности подробно разобрать преимущества и недостатки всех имеющихся в продаже приборов этого типа, но на стр. 173 мы остановимся немного на общих принципах проведения фотометрических определений. [c.50]

Определение калия в минералах проводится по одному из методов, описанных для определения натрия. При этом, конечно, следует иметь в виду то, что сказано выше о характере влияния натрия и других металлов на интенсивность излучения калия в зависимости от температуры пламени. Приводим указания о проведении анализа при использовании спектрофотометра. [c.213]

Жигер [155] вновь проверил поглощение перекиси водорода в области, изученной Бейли и Гордоном, и расширил их исследование. Жидкую 99,5%-ную перекись водорода изучали в области 2—21 а, а пары (при 90° и давлении 5, 10 и 15 мм)—в области 1,4—15 и.. Жидкость исследовали в виде пленки, зажатой между пластинками из хлористого серебра, причем пришлось столкнуться с трудностями, обусловленными разложением. В абсорбционной трубке для паров окна также были сделаны из хлористого серебра. Для работ при длинах волн за пределами 15ц применяли спектрометр с оптикой из бромистого калия, причем для устранения помех от поглощения инфракрасного излучения водяным паром корпус спектрометра подвергали специальному обезвоживанию. В табл. 50 приведены значения частот в центрах полос поглощения и коэффициенты поглощения, определенные Жигером [155]. Для жидкости полоса поглощения при 18,3 i была мало четкой, а полоса при 2,1 i—очень слабой существование последней признано не вполне доказанным, поскольку она обнаружена ие на всех фотометрических кривых. Разрешающая способность спектрофотометра была достаточно высокой и позволила для пара четко обнаружить два максимума на полосе при 8 i, причем на некоторых фотометрических кривых обнаружено еще присутствие Q-ветви. Изучена также полоса 1,4 [г. Для пара в условиях высокой разрешающей способности идентифицированы отдельные частоты обеих составляющих полос и проведен анализ полосатой структуры. [c.234]

При проведении количественного анализа методом спектрофотометрии необходимо концентрацию анализируемого вещества подбирать с таким расчетом, чтобы величина оптической плотности находилась в пределах 0,2—0,8, так как при О с 0,2 и Д >0,8 резко возрастает ошибка определения. [c.433]

Полученный фотоотпечаток позволяет точно обнаружить и определить местоположение вещества на хроматограмме, предварительно оценить его содержание, проследить за полнотой элюции при количественном определении, так как при правильном проведении этой процедуры интенсивность фотоотпечатка совпадает с показаниями спектрофотометра. [c.45]

Из уравнения (II 1.9) следует, что для определения дозы при помощи окрашенных пленок из поливинилового спирта необходимо знать только степень их обесцвечивания, так как толщина пленки может быть стандартной. В связи с тем, что одна из полос поглощения поливинилового спирта, содержащего метиленовую голубую, находится в видимой части спектра, то для определения степени обесцвечивания пленок могут применяться не только спектрофотометры, но и фотоэлектроколориметры и колориметры различной конструкции, в том числе самые простейшие. Если известен интервал доз, в котором предполагается проводить измерения, то степень обесцвечивания, а следовательно, и величина дозы могут определяться визуально сравнением окраски пленок с цветной шкалой. Для проведения этих измерений не требуется никакой специальной подготовки оператора. Как известно, при хорошо подобранной цветной шкале погрешность измерений при визуальных определениях не превышает 5%. [c.59]

Одиако собствеиным поглощением в растворах в видимой части спек1ра обладает лишь ограниченное число веществ. Поэтому в спектрофотометрии используют различные химические реакции образования соединений, которые поглощают излучение. Чаще всего используются реакции комплексообразования. Определяя оптимальные условия проведения фотометрических реакций, химик-аналитик прежде всего вынужден изучить процессы комплексообразования. С этой целью может быть использован тот же метод спектрофотометрии. Таким образом, любое спектрофотометрическое определение состоит в основном из двух этапов а) проведения химических реакций для получения систем, удобных для фотометрирования (фотометрическая реакция) б) измерения поглощения приготовленного раствора. [c.460]

Проведение анализа. Берут точную навеску 0,1 мэкв образца в круглодонной колбе емкостью 25 мл и растворяют ее в 2,00 мл стандартного раствора этанола- Н. Добавляют в колбу 10 мл безводного толуола. Колбу соединяют через переходник с микро-перегонной колонкой и погружают ее в восковую баню с температурой 170Х. В течение 5 мин собирают 4—5 мл дистиллята, затем перегонную колонку отсоединяют от колбы, выждав 15—30 с для испарения этанола- Н из переходника. После этого быстро охлаждают остаток в колбе, доливают его примерно до 10 мл толуолом, переносят полученный раствор в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем раствора в колбе до метки спиртовым раствором сцинтиллятора. Для определения радиоактивности пробы измеряют радиоактивность четырех аликвотных порций полученного раствора с помощью жидкостного сцинтилляционного спектрофотометра. При необходимости определяют поправку на эффект тушения частиц методом внутреннего стандарта. Число п активных атомов водорода в молекуле вычисляют по формуле [c.248]

В аналитической химии полимеров широко применяют оба метода, иногда их сочетание, используя спектрофотометрию для предварительного изучения спектрофотометрических характеристик химических соединений при выборе условий количественного анализа, который затем выполняется фотометрическим методом с помощью фотоэлектроколориметров. Непосредственное определение веществ в растворах после проведения цветной реакции или без нее обычно осуществляют визуальным или фотоэлектрическим способом. Оба способа требуют сравнения интенсивности поглощения определяемого вещества с рядом этало- [c.23]

Техника, использованная для осуществления обсуждаемых в этой книге методов, проста и обычно для проведения анализа специального оборудования не требуется. Методы по своему характеру являются тптриметрическими или колориметрическими. Титриметрические методы имеют наибольшее значение для определения больших концентраций органических соединений, в то время как колориметрические методы рекомендуются для определения ультрамикроконцентраций. В данном руководстве указываются индикаторы для определения конечных точек практически всех титрований однако иногда рекомендуется потенциометрическое титрование, и в этих случаях необходимо использовать стандартные рН-метры. Для колориметрических методов требуется спектрофотометр с видимой частью спектра. [c.10]

Высокочувствительный метод определения малых количеств воды в уксусной кислоте основан на различии в УФ-поглощении уксусного ангидрида и уксусной кислоты. Брукенштейн [13] при проведении анализа добавлял к образцу избыток уксусного ангидрида и после завершения процесса гидролиза определял с помощью двухлучевого спектрофотометра количество непрореагировавшего уксусного ангидрида. Уксусный ангидрид поглощает в интервале длин волн 250—280 нм. При этих значениях длин волн закон [c.365]

Оборудование самой маленькой лаборатории водоочистной установки может состоять только из нефелометра, компаратора остаточного хлора, рН-метра и стеклянной посуды для определения жесткости и щелочности. Полностью оборудованная лаборатория для водопроводной станции, обслуживающей район какого-либо крупного города, включает инфракрасные, ультрафиолетовые и атомно-абсорбционные спектрофотометры, газовый хроматограф, амперометрический титратор и измеритель электропроводимости, а также лабораторные печи и стеклянную посуду. Для проведения бактериологических анализов необходимы термостаты, автоклавы, специальная посуда и среды для культур. Если выше по течению реки расположена атомная электростанция, возникает необходимость в радиохимическом надзоре и в приобретении некоторого специального оборудования. Лаборатории, обслуживающие крупные системы водоснабжения, обычно возглавляются химиком с университетским образованием или инженером-химиком. В штат лаборатории иногда входит еще несколько специалистов и два или три лаборанта (в зависимости от объема программы испытаний). Лабораторный персонал может также быть частично или полностью занят на очистных сооружениях, выполняя там функции контроля. Оменные операторы могут быть обучены проведению анализов, например на мутность, щелочность и остаточный хлор. Стандартный подсчет колиформ может также выполняться операторами, прошедшими соответствующее обучение. Преимущество обучения операторов лабораторным приемам состоит в том, что рабочая смена операторов продолжается целые сутки, тогда как лабораторный персонал работает только 8 ч в день. Круглосуточное наблюдение важно потому, что оно позволяет обнаружить внезапные изменения в качестве исходной воды. [c.234]

Чувствительность и воспроизводимость определения. Эти две важные характеристики зависят как от природы реагента, так и от условий проведения эксперимента, технических параметров ис-йользуемого флуориметра и т. д. В отличие от абсорбционной спектрофотометрии (где чувствительность пропорциональна максимальному значению е>,) чувствительность флуориметрического метода (в котором используется излучение, дающее более узкие полосы в спектре) пропорциональна суммарной энергии излучения, поглощенной данным веществом. Поэтому наиболее целесообразный прием достижения максимально возможной чувствительности должен опираться не на использование монохроматического излучения, а на применение возбуждающего света с более широкой полосой, отвечающей максимуму спектра поглощения (возбуждения) [204]. Однако такое повышение чувствительности обычно сопровождается снижением селективности определения. [c.379]