Спектрофотометрические методы их ограничения

Из различных спектрофотометрических методов, которые могут быть использованы для определения количества белка, входящего в состав веществ биологического происхождения, наиболее подходящим является биуретовый метод [25]. Этот метод не очень чувствителен и, как показывает опыт, его применение связано с рядом ограничений. Белок обладает способностью осаждаться совместно с гидратом окиси меди. На этом основан классический метод определения белка [26], согласно которому раствор белка [c.315]

Образование в растворах нескольких комплексных соединений значительно усложняет применение спектрофотометрического метода. Описанные выше приемы в рассматриваемом случае могут быть использованы только тогда, когда возможно создать условия, обеспечивающие доминирование одного из комплексов ряда. Это достигается, например, если ступенчатые константы нестойкости различаются не менее чем на 3 порядка. В общем случае метод Остромысленского — Жоба не может применяться для установления состава последовательно образующихся комплексов [65]. Следует, однако, отметить, что при обнаружении в растворах ступенчатого комплексообразования вопрос об определении состава таких комплексов не имеет решающего значения, так как в настоящее время большинство исследователей постулирует принципиальную возможность образования всех комплексов в пределах координационного числа данного иона металла. Важнейшей задачей в этом случае является определение максимального значения координационного числа, а также коэффициентов молярного поглощения комплексов и их констант нестойкости. В литературе описаны многие частные приемы, основанные на последовательном изучении равновесий в растворах, содержащих ограниченное число образующихся комплексов. [c.176]

Экстракционные методы отделения платиновых металлов и золота от других сопутствующих им элементов, а также отделение благородных металлов друг от друга широко используются главным образом для разделения микроколичеств элементов и сочетаются обычно со спектрофотометрическими методами их определения. Для разделения больших количеств этих металлов существует ограниченное число экстракционных методов. [c.233]

Реально (в эксперименте) может наблюдаться меньшее число экспоненциальных членов. Это прежде всего связано с методическими особенностями регистрации кинетической кривой. Так, при использовании наиболее распространенного спектрофотометрического метода необходимы заметные спектральные различия компонентов реакции. Кроме того, существенные ограничения накладывает временная разрешающая способность установки. Экспериментально определить характеристическое время можно лишь при условии, что оно превышает мертвое время используемой аппаратуры. Эти ограничения приводят к тому, что наблюдаемое на опыте число экспоненциальных членов позволяет оценить лишь минимальное число промежуточных соединений, принимающих участие в реакции. [c.204]

Некоторые спектрофотометрические методы определения бромида основаны на его предварительном окислении до брома. Такие методы в основном ограниченно селективны. В некоторых условиях хлориды не окисляются. Более того, иодиды могут окисляться Fe" до иода, который можно удалить кипячением, что позволяет проводить определение бромидов в присутствии иодидов. Хлорамин Т часто используют для окисления бромида до брома. После окисления образующийся бром можно определить любым удобным методом. Бром реагирует с метиловым оранжевым с образованием бесцветного продукта реакции. С хлором [c.268]

Зависимость величины относительной ошибки определения следов воды при оптимальных условиях для ряда растворителей показана на рис. 68. Интервал концентраций воды, допускающих определения по поглощению в области основных частот валентных колебаний ОН-групп при неизменной величине АО/О, ограничен, с одной стороны, точностью изготовления кювет (большие концентрации воды), с другой — собственным поглощением растворителя (малые концентрации воды). Наиболее благоприятным для большинства растворителей является интервал концентраций 0,1—1,0%. Градуировочные графики для этого интервала, построенные в координатах оптическая плотность — содержание воды в растворе, прямолинейны. Результаты определения спектрофотометрическими методами хорошо совпадают с данными дру- [c.156]

Как показано в работе [Ю], наименьшее значение константы устойчивости комплекса, образованного донором и акцептором электронов, которое можно определить спектрофотометрическим методом, равно 0,21 моль . Причиной такого ограничения являются изменения электронного спектра вследствие дисперсионных сил, всегда возникающих при сближении молекул донора и акцептора в растворе в отсутствие мешающего эффекта растворителя. Следовательно, константы устойчивости, полученные спектрофотометрическим методом, значения которых не превышают 0,21 МОЛЬ , могут отражать только дисперсионное взаимодействие, а не образование ковалентной связи между донором и акцептором. [c.111]

Правильность количественного спектрофотометрического анализа любой конкретной смеси основного вещества и примеси зависит прежде всего от строгости, с которой соблюдаются лежащие в основе используемого метода условия или ограничения. [c.115]

Наиболее часто встречаюш,ейся ошибкой является применение спектрофотометрического метода в случае, когда вполне достаточно применения более быстрого потенциометрического метода (ограничения применимости потенциометрического метода титрования со стеклянным электродом указаны на стр. 29). Полученную ошибку в серии результатов можно обычно отнести за счет одной из следующих причин [c.77]

Спектрофотометрический метод, основанный на экстракции этого ионного ассоциата, ограниченно селективен, определению мешают фталат, бромид, монофторфосфат (слегка), нитрат, нитрит, перйодат, роданид. Ацетат натрия до концентрации 0,5 мМ не мешает определению, а ацетат аммония мешает даже в малых концентрациях. [c.421]

Опытный аналитик после полного отделения рутения может с успехом применять каталитический метод. Авторы метода рекомендуют его только для определения количеств, не доступных ни одному из спектрофотометрических методов. Обычно его применяют как для анализа материалов, содержащих менее 1 мкг мл рутения, так и для анализа более богатых проб при ограниченной величине навески. [c.144]

Спектрофотометрический метод анализа с применением дифениламина имеет некоторые ограничения при анализе токсафена. Во-первых, при анализе препаратов вследствие большого фактора разбавления при небольших ошибках в спектрофотометрических определениях получаются большие ошибки в результатах анализа. Во-вторых, при анализе остаточных количеств следы некоторых, экстрагированных из растительной или животной ткани веществ могут создавать значительную фоновую окраску раствора, уменьшая тем самым чувствительность и специфичность метода. [c.442]

Спектрофотометрню в ультрафиолетовой и видимой областях ие следует рассматривать как самостоятельный метод исследования комплексообразования. Обычно спектрофотометрический метод дополняет потенциометрический. В разд. 2.3 и 6.3 мы уже обсуждали преимущества спектрофотометрии по сравнению с потенциометрией при определении числа частиц в очень лoлi-ных системах. Более того, известны случаи, когда невозможно различить равновесные процессы на основании только потенциометрических результатов. При проведении потенциометрических исследований необходимо располагать соответствующими электродами, поэтому потенциометрический метод применим для изучения немногих реакций. Недавно вышел обзор [1], в котором обсуждается примепепие спектрофотометрии для определения констант устойчивости. Некоторые ограничения спектрофотометрического метода уже обсуждались в разд. 6.3 и 6.4. [c.132]

Основные методы определения константы электролитической диссоциации обычно сводятся к кондукто- либо потенциометрическим методикам и приложимы лишь к весьма разбавленным растворам (см. гл. X). Другие методы. определения констант диссоциации (например, спектрофотометрические) имеют ограниченное применение. [c.114]

Значительное преимущество метода температурного скачка заключается в том, что его можно объединить со спектрофотометрической регистрацией, что позволит идентифицировать различные химические вещества и реакции. До сих пор этот метод применяли только к растворам, содержащим ионы, но это ограничение можно устранить, используя поглощение микроволн, в результате чего метод становится достаточно широко применимым. В настоящее время минимальное наблюдаемое время составляет примерно 10 сек и, по-видимому, вскоре его можно будет уменьшить до 10 сек можно использовать низкие концентрации реагирующих веществ и определять константы скорости до 101 л- моль - сек . Этот метод не ограничивается только очень высокими скоростями. Он не требует больших объемов раствора. Однако для него необходимо специальное электрическое оборудование. [c.85]

Следует особо отметить, что в наших научных организациях, в том числе и в Академии наук СССР, при исследовании реакций нитрования и хлорирования углеводородов еще очень ограниченно используются такие мощные средства исследования механизма реакции, как меченые атомы также явно недостаточно используются физические и физикохимические методы изучения состава продуктов реакции (спектрофотометрические, полярографические и др.). [c.287]

ОТ X, численно равен площади, ограниченной осью абсцисс, частью графика у = (х) и двумя прямыми, параллельными оси ординат и проходящими через точки х = а п х = Ъ. В задачах спектрофотометрического анализа функция у = f (х) представляет собой обычно зависимость оптической плотности (или м. к. э.) от длины волны и чаще всего задается не аналитически, а в виде графика или таблицы. Поэтому наиболее употребительны приближенные методы вычисления определенного интеграла, основанные на его замене конечной суммой. Весь интервал [а, Ъ разбивают на п равных частей и находят значения у , г/а,. . ., Уп-1, Уп-, отвечающие точкам деления Хх, Хз,. . ., х , после чего искомый определенный [c.217]

В обычном спектрофотометрическом методе анализа раствор сравнения практически не поглощает при той длине волны, при которой проводят измерение. Этот метод измерения называют методом абсолютной или непосредственной спектрофотометрии. Точность определения концентраций при таком методе измерений невелика, что не позволяет проводить оиределение компонентов, содержащихся в пробе в высоком процентном отношении. Кроме того, интервал оптических плотностей, а следовательно, и определяемых концентраций, которые люгут быть измерены методом непосредственной спектрофотометрии с достаточной точностью, ограничен (см. стр. 32). Для расширения этого интервала и повышения точности измерений может быть использован дифферешщальный способ измерений [8]-[22]. [c.65]

ПГХ имеет существенные преимущества по сравнению с химическим и спектрофотометрическим методами маленькая навеска (около 1 мг), возможность анализа образца без предварительной экстракции, малая продолжительность анализа (с программированием весь анализ можно сократить до 20 мин), больн1ая чувствительность и точность [2% (абс.) и менее]. Однако ПГХ имеет и ряд ограничений. ПГХ не позволяет в настоящее время различить натуральный и синтетический полиизопреновые каучуки (в смеси их друг с другом), бутадиенстирольный каучук, полученный полимеризацией в эмульсии или растворе (метод дает информацию о соотношении мономеров), бутадиеновые каучуки различной микроструктуры (кроме однозначного ответа на преимущественное содержание винильной группы), хлоропреновые каучуки различной природы, этиленпропиленовые каучуки с различным соотношением мономеров, а также сополимеры родственных терпо-лимеров, бутилкаучук и родственные хлорированные и бромиро ванные полимеры. Не определяются также метилвинилпиридино-вые, карбоксилатные каучуки. Поэтому резины на основе нескольких полимеров целесообразно анализировать, сочетая ПГХ с методами химическим и ИК-спектроскопическим [10. [c.29]

Спектрофотометрические методы исследования комплексных соединений развивались многими исследователями [253—310]. В последнее время Бабко [253] предложил металл-индикатор-ный метод определения прочности комплексов в ряду различных ионов металлов, образующих комплексы с одним и тем же лигандом. Основным ограничением этого метода являются различные побочные реакции. Например, система Т1(1У)—Н2О2 является хорошим индикатором для изучения фторидных комплексов многих металлов, однако она непригодна для фторидных комплексов циркония, так как последний взаимодействует с Н2О2. В работах [254, 255] этот метод применен для исследования диантипирилметановых комплексов циркония, а также различных комплексов ниобия. [c.509]

Таким образом, ограничение интервала значений D, Т, в котором можно измерить эти величины с достаточной точностью, вызывает в свою очередь ограничение интервала концентраций, которые могут определяться фотометрическиг. методом. Поэтому спектрофотометрический метод нельзя использовать для определения больших концентраций вешеств, хотя его применение в значительной степени ускорило бы проведение анализа. В связи с этим в последнее время полу- [c.29]

Определение теллура основано на экстракции диэтилдитиокарбами-пата теллура органическим растворителем при pH 8 в присутствии сегнетовой соли и спектрофотометрическом определении теллура при 405 ммк. Чувствительность определения 1 10 % при относительной ошибке - 20%. Метод ограничен устойчивостью окраски в течение 2 час. Для определения никеля может быть предложен экстракционно-фотометрический метод с а-фурилдиоксимом. Чувствительность метода 1 10 -мкг1мл [1]. [c.248]

Уровень концентраций этой группы металлов в силикатных породах не позволяет проводить определения спектрофотометрическими и спектрохимическими методами, поэтому необходимо применять более чувствительные методы, такие, как нейтронноактивационный анализ [13, 14]. Для определения родия и рутения в обычных силикатных породах недостаточна даже чувствительность нейтронно-активационного анализа, к остальным металлам он применим, хотя и с определенными ограничениями. Для анализа руд, содержащих серебро, золото и платиновые металлы, обычно применяют методы пробирного анализа [15]. Пользуясь методами пробирного анализа для выделения благородных металлов из породообразующих минералов, можно несколько повысить чувствительность путем сочетания определений со спектрохимическими или спектрофотометрическими методами. Такая техника описана Шоу с сотр. [16]. Кислоторастворимый палладий в концентрациях порядка п-10 % определяли Гримальди и Шнепфе [17], используя навеску 10 г, экстракцию царской водкой, соосаждение с добавками платины и теллура и. [c.385]

Описанный выше индикаторный метод был предложен Уоллингом [1], Вейль-Мальхербе и Вейсом [4], а также Икебе и др. [5] и широко использовался во многих исследованиях. Сила кислотных центров некоторых адсорбентов, определенная этим методом, приведена в табл.4 [6-9]. Преимущество метода, несмотря на некоторые обсуждаемые ниже ограничения, заключается в возможности сравнительно просто определить относительную силу кислотных центров. Трудности в определении изменения цвета для окрашенных или темных образцов можно преодолеть, используя смесь исследуемого образца и белого вещества с известной кислотностью (разд. 2.2.2 ) или спектрофотометрический метод регистрации, описанный в следующем разделе. [c.14]

НИИ спектрофотометрического метода регистрации необходимы заметные спектральные различия компонентов реакции. Существенные ограничения накладывает также временная разрещаюЩая способность установки. Экспериментально определить характеристическое время можно, если оно превышает мертвое время используемой аппаратуры. Эти ограничения приводят к тому, что наблюдаемое на опыте число экспоненциальных членов позволяет оценить лишь минимальное число промежуточных соединений, принимающих участие в реакции. [c.75]

Растворы солей лантана, церия (III), гадолиния, тербия и иттрия бесцветны и почти не поглощают свет в пределах 350—1000 mf. Остальные элементы показывают более или менее сильные абсорбционные полосы в этих пределах (см. рис. 5, стр. 48) и, таким образом, их можно определить спежтрофото-метрически. Необходимо пользоваться светом в очень узких пределах длин волн, так как максимумы абсорбции растворов солей редких земель очень резки. К сожалению, чувствительность определения невысока, так что метод имеет ограниченное значение в анализе следов. Если этот метод применяют к веществам с низким содержанием редких земель, то необходимо брать большие навески образцов. Спектрофотометрический метод был подробно изучен на растворах нитратов редких земель (табл. 46) . В общем, наблюдается подчинение закону Бера. Отклонения, которые отмечены при празеодиме и самарии, могут быть следствием того, что свет был недостаточно монохроматичен. Слабую абсорбцию других редких земель при длине волны, при которой определяемый элемент показывает сильную абсорбцию, можно корректировать, определяя количество мешающего элемента по поглощению света при длине волны минимальной прозрачности для этого элемента . [c.391]

Трудности при работе с образцами, практически невидимыми, упоминались ранее. В некоторых случаях были получены удовлетворительные результаты при работе с образцами 15 мкг и меньше. Если бы вес образца можно было оценить другим методом —не взвешиванием (в некоторых случаях это, вероятно, возможно), не представило бы большой трудности еще уменьшить количество анализируемого образца. Но в этих случаях некоторые ограничения накладывались бы на титриметрические методы, поскольку практически существует предел уменьшения объема или разбавления раствора. Использование спектрофотометрических методов неизбежно привело бы к снижению точности. В некоторых случаях это может быть допустимо. Полезно обратить внимание на модификацию спектрофотометрических методов с целью их применения к количествам вещества, используемым в субмикроанализе. [c.12]

Определение констант кислотно-основного равновесия проводили спектрофотометрическим методом в О,1 М ацетатных буферных растворах с различными pH на приборе > Рвгк1п-Е1шег 402" при 20+1 °С. Для соединений Ш,1У из-за их ограниченной растворимости использовали буферные растворы, содержащие 30% об. [c.110]

По площади, ограниченной кинетической кривой и прямой, характеризующей концентрацию озона на входе в реактор, рассчитывали количество озона, идущего на окисление ТЭС гщ > моль). Анализ озона осуществляли спектрофотометрическим методом в точке максимума полосы поглощения озона (А,=254 нм). Зная количество взятого для анализа ТЭС (пгэс, моль) легко рассчитать стехиометрию реакции 5=/10з/Лтэс [c.62]

Одиако собствеиным поглощением в растворах в видимой части спек1ра обладает лишь ограниченное число веществ. Поэтому в спектрофотометрии используют различные химические реакции образования соединений, которые поглощают излучение. Чаще всего используются реакции комплексообразования. Определяя оптимальные условия проведения фотометрических реакций, химик-аналитик прежде всего вынужден изучить процессы комплексообразования. С этой целью может быть использован тот же метод спектрофотометрии. Таким образом, любое спектрофотометрическое определение состоит в основном из двух этапов а) проведения химических реакций для получения систем, удобных для фотометрирования (фотометрическая реакция) б) измерения поглощения приготовленного раствора. [c.460]

В настоящее время метод остановленной струи широко приме-ляется для решения многих задач химической кинетики установление механизмов химической реакции, определение стадий, лимитирующих протекание реакции обнаружение промежуточных комплексов, определение кинетики ферментативных реакций, установление числа и концентрации активных центров фермента, изучение быстрых конформационны5( переходов в белках и нуклеиновых кислотах. Метод требует быстрой регистрации это единственное существенное ограничение его применимости. Особое внимание при применении метода остановленной струи необходимо уделять тер-мостатированию, так как разница в температурах в кювете наблюдения и растворе смеси реагентов может привести к большим оптическим ошибкам, затрудняющим установление механизма наблюдаемой реакции. Точность определения констант скоростей данным методом примерно такая, как и при обычных спектрофотометрических измерениях кинетики химических реакций. [c.28]

Методы абсорбционной спектроскопии ввиду их большой чувствительности и избирательности широко применяются при решении многих задач аналитической химии. Эти методы используют при контроле производства и анализе готовой продукции ряда отраслей промышленности химической, металлургической, металлообрабагы-ваюш,ей, в почвенном, биохимическом анализе, а также для определения малых и ультрамалых количеств примесей в веществах особой чистоты (10 —10" %). Для определения больших количеств веществ с точностью, не уступающей гравиметрическим и тит-риметрическим методам, а также при анализе многокомпонентных систем применяют различные варианты дифференциальной спектро-фотометрии. При автоматизации контроля производства рационально использовать метод спектрофотометрического титрования. Методы абсорбционной спектроскопии остаются труднозаменимыми при анализе объектов, содержащих ядовитые летучие соединения, что делает ограниченным применение атомно-абсорбционного метода и методов эмиссионной спектроскопии. Особенно большое значение имеют методы абсорбционной спектроскопии для исследования процессов комплексообразования и получения количественных характеристик комплексных соединений. [c.3]

В ходе оптимизации аналитического процесса или прибора возможен з чет лишь ограниченного числа факторов. Часто выбор наиболее важных факторов не представляет труда и диктуется просто природой изучаемого явления. Например, при разработке новой спектрофотометрической методики такими факторами служат величины pH и концентраций реагентов, в методе ВЭЖХ важнейшие факторы связаны с качественным и количественным составом подвижной фазы и т. д. [c.495]

Некоторые химические (комплексопометрическое титрование) и физико-химические (спектрофотометрические, кинетические, полярографические) методы имеют ограниченное применение для определения хрома нли требуют специальных условий для проведения анализа. Это обусловлено кинетической инертностью ак-вокомплекса Сг(1П). В книге детально рассматриваются вопросы состояния и состава комплексных соединений хрома в растворах, кинетики обмена между молекулами и ионами, входящими в состав внутренней координационной сферы комплексных соедине-11ИЙ. Эти процессы определяют не только чувствительность и воспроизводимость многих методов анализа, но и эффективность хроматографических и экстракционных методов отделения хрома от других элементов. [c.6]

Рассматриваемый метод называют спектрофотометрическим. Однако в практическом химическом анализе спектр поглощения измеряют не столь часто. Более того, наиболее распространенными приборами, применяемыми в этом методе, являются фотоэлектроколориметры. В соответствии с нашей классификащ1ей эти приборы по сути неспектральные. В них применяют достаточно ограниченный набор сменных широкополосных (20 нм и больше) стеклянных светофильтров Враттена, пригодных для измерения оптических плотностей в видимой и ближней УФ (до 30 нм) областях спектра. [c.279]

Рассмотренный метод позволяет удачно обойти трудности, обычно сопровождающие спектрофотометрические исследования. Однако существует ряд ограничений, связанных с конкурирующими реакциями такого типа. Эти ограничения отчетливо видны из рис. 8.5. Во-первых, наиболее точные значения отношения Л набл/Л тах соответствуют интсрвалу 0,1—0,9. Этот интервал в свою очередь определяет диапазон, в котором может изменять- [c.143]

Реакции типов 1 и 2 могут быть исследованы методом молярных отношений только в том случае, если удается соответственно изменить свойства системы путем замены растворителя. Реакции типа 3 требуют для спектрофотометрического исследования применения кювет с чрезвычайно малой толщиной слоя, так как в обычных кюветах толщина слоя не позволяет проводить измерения при необходимых концентрациях. В этом случае может быть применен дифференциальный метод. Измеряют Е раствора с отношением у + Ау по сравнению со стандартным раствором с отношением у. Таким путем можно проводить измерения и при высоких концентрациях. Хотя с помощью дифференциального метода и можно определить стехиометрический состав комплекса, однако соответствующие кривые поглощения получаются с некоторыми ограничениями. Наблюдаемые при этом соотношения (отклонения от закона Бэра) были рассмотрены Хискеем и Юнгом [Anal. hem., 28, 1196 (1951)]. [c.292]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология