Олигосахариды ферментативный гидролиз

Ферментативный гидролиз крахмала и крахмалоподобных полисахаридов происходит под действием амилаз а-Амилаза превращает крахмал в декстрины (олигосахариды, содержащие 6-10 остатков /)-глюкозы) и небольшое количество мальтозы, разрывая 1,4-гликозидные связи в любом месте цепи, а не только у концов, но не затрагивая точек ветвления, то есть 1,6-гликозидные связи Эта стадия [c.789]

Простейшими и наиболее важными олигосахаридами являются дисахариды. При кислотном или ферментативном гидролизе дисахариды образуют моносахариды, которыми часто бывают гексозы. Гексозы соединены [c.559]

Конфигурацию гликозидных связей дисахаридов можно установить расчетом удельного вращения по правилу Кляйна [191]. Для определения конфигурации гликозидных связей в средних и высших олигосахаридах проводят их ступенчатое расщепление, а затем определяют конфигурацию гликозидных связей в отдельных звеньях, содержащих одну-две гликозидные связи. На основании полученных результатов вычисляют удельное вращение всего олигосахарида [99]. Определение конфигурации гликозидных связей может быть осуществлено также исследованием продуктов ферментативного гидролиза. Отношение данной гликозидной связи к ферменту с известной субстратной специфичностью позволяет сделать заключение о конфигурации этой связи. Сложность определения конфигурации связей этим методом состоит в трудности получения [c.126]

В последнее время получено много данных о тонкой структуре углеводной части веществ групп крови и о природе детерминантных группировок. Основными путями исследования явились изучение ингибирования агглютинации эритроцитов различными моно- и олигосахаридами, ферментативный гидролиз и, наконец, выделение и идентификация фрагментов с антигенной активностью, полученных частичным кислотным гидролизом веществ групп крови. [c.94]

Согласно этой схеме на первой (медленной) стадии происходит образование затравки по механизму диспропорционирования, на второй — трансгликозилирование с образованием мономера и олигосахарида с более высокой степенью полимеризации и на третьей стадии — относительно быстрый гидролиз олигосахарида. По-видимому, на третьей стадии может также происходить перенос гликоновой части субстрата на имеющийся в реакционной системе акцептор (G2, G3 или G4), что, в свою очередь, приведет к образованию продукта переноса еще более высокой степени полимеризации и т. д. В итоге в реакционной системе будет одновременно происходить множество самых разнообразных процессов ферментативного гидролиза и синтеза олигомеров с постепенной деструкцией их до мономера, конечного продукта гидролитической реакции. Медленный переход реакционной системы в подобный режим и должен характеризоваться индукционным периодом реакции. [c.189]

Второй вариант ферментативного гидролиза коротких субстратов через трансгликозилирование осушествляется при наличии затравки — более длинного олигосахарида [126] [c.190]

Определение конфигурации гликозидных связей в олигосахаридах является сложной задачей, общего решения которой до сих пор не предложено. Для этой цели применяют те же методы, что и для других гликозидов, т. е. расчет удельного вращения и ферментативный гидролиз. [c.445]

Ферментативное расщепление. Помимо химического гидролиза для частичного расщепления олигосахаридов применяют также ферменты, расщепляющие гликозидные связи — гликозидазы (см. стр. 399). Ферментативный гидролиз гликозидных связей протекает в чрезвычайно мягких (физиологических) условиях. Применение специфических гликозидаз позволяет производить избирательное расщепление олигосахаридов по вполне определенным типам связей. Кроме того, отношение данной гликозидной связи к ферменту, субстратная специфичность которого известна, позволяет сделать заключение о конфигурации этой связи, размере цикла моносахаридного остатка, его структуре и абсолютной конфигурации. Рассмотрим в качестве иллюстрации ферментативный гидролиз раффинозы. [c.449]

В настоящее время ряд гликозидаз производится промышленным путем, однако их число невелико. Сложность получения чистых ферментов и трудности достаточно полного изучения их субстратной специфичности сильно ограничивают возможности применения ферментативного гидролиза для исследования строения олигосахаридов. [c.450]

Полностью строение ганглиозида I было выяснено Куном . Посредством частичного кислотного гидролиза и ацетолиза из него выделены два дисахарида (один из них оказался лактозой), трисахарид и тетрасахарид. Строение этих олигосахаридов выяснено путем частичного кислотного и ферментативного гидролиза и периодатного окисления в частности. [c.588]

БИОСИНТЕЗ ОЛИГОСАХАРИДОВ ПУТЕМ ПЕРЕНОСА ГЛИКОЗИЛЬНЫХ ГРУПП от НЕФОСФОРИЛИРОВАННЫХ ПОЛИОЗИДОВ и НЕКОТОРЫЕ РЕАКЦИИ ФЕРМЕНТАТИВНОГО ГИДРОЛИЗА [c.36]

Перегруппировка открыта К. Фрисом в 1908. ФРУКТОЗА (плодовый, или фруктовый, сахар левулоза), моносахарид сладкого вкуса (слаще сахарозы в 1,5 раза). В природе распростр. D-Ф. для ее Р-аномера (ф-ла I) t A 102—104 С, [а]г1 —132°, равновесное [а]о —93°. Содержится в спелых фруктах, меде структурный фрагмент олигосахаридов (напр., сахарозы и раффинозы), полисахаридов (напр., инулина). Фосфаты Ф. — промежут. соед. в энергетич. обмене углеводов. Получ. мягким кислотным или ферментативным гидролизом сахарозы или фрук-танов. Усваивается больными диабетом лучше, чем глюкоза. [c.635]

Олигосахариды и полисахариды превращаются в моносахариды в результате кислотного или ферментативного гидролиза. [c.205]

Характерным для всех дисахаридов (как и олигосахаридов и полисахаридов вообще) является способность при кислотном или ферментативном гидролизе превращаться в моносахариды. [c.385]

Пример 9. В ранней работе Робита п Френча [11] степень множественной атаки о для действия а-амилаз различного происхождения на амилозу была рассчитана из отношения концентрации восстанавливающих групп ВСобщ, образующихся в ходе ферментативного гидролиза амилозы и принадлежащих как коротким, так и длинным олигосахаридам, к концентрации восстанавливаю-нщх групп ВСполиы, принадлежащих только длинным олигосахаридам (осаждаемым 67%-ным этанолом из реакционной системы) [c.89]

Изучение кинетики ферментативной деградации этих субстратов осложнено трангликолизированием и множественным характером связывания их в активном центре лизоцима [2]. Выше были приведены данные о том, что ферментативный гидролиз коротких олигосахаридов (Gl NA )2 и (Gl NA )3 осушествляется не прямым путем, а скорее через промежуточные стадии трансгликозилирования. Подробная сводка данных по взаимодействию фрагментов природных субстратов — хитина и бактериальной клеточной стенки — с активным центром лизоцима приведена в обзоре [2]. [c.195]

Другими словами, существуют две концепции, с противоположных (на первый взгляд) позиций объясняющие субстратную специфичность лизоцима (в отношении длины цепи олигосахаридных субстратов). Согласно первой концепции, при переходе от длинных олигосахаридов к коротким непропорционально возрастает константа ассоциации последних с ферментом за счет резкого увеличения степени непродуктивного (геометрически неправильного) связывания. В итоге константы ассоциации длинных и коротких олигосахаридов с ферментом оказываются одинаковыми Кт = = 10" М от тримера до гексамера, см. табл. 38), по эффективность каталитической деградации коротких олигосахаридов мала. Согласно второй концепции, ири переходе от коротких олнгоса-харидов к длинным последние пс реализуют потенциальные воз-можр[ости фермент-субстратных взаимодействий п комплексе Михаэлиса (что и приводит к их относнтельпо малым величинам констант ассоциации с активным центром), но полностью реализуют взаимодействия в переходном состоянии ферментативной реакции. Чем выше степень полимеризации субстрата (в пределах активного центра фермента), тем бoльнJe он резервирует возможностей для уменьшения свободной энергии переходного состояния реакции за счет дополнительных взаимодействий (по сравнению с взаимодействиями в комплексе Михаэлиса) и тем выше скорость ферментативного гидролиза. [c.196]

С.— твердые, оптически активные п-иа обладают пенообразующими св-вами. При кислотном или ферментативном гидролизе распадаются на сапогенин и олигосахарид, с высшими спиртами, а также с холестерином образуют устойчивые мол. комплексы. С. экстрагируют из корней диоскореи, наперстянки, аралии, сои и нек-рых др. растений водой или водными р-рами этанолгх. Примен. для получ. стероидных [c.516]

Различают два вида ферментативного гидролиза [15] 1) расщепление при прмощи эндоферментов гликозидных цепей посередине до образования олигосахаридов и 2) последовательное ступенчатое отщепление концевых остатков моноз экзоферментами. [c.122]

Весьма существенное значение имеет для установления структуры полисахаридов расщепление их до олигосахаридов частичный ферментативный гидролиз). Этим путем могут быть получены сведения о последовательности распределения моносахаридных остатков в полисахаридах ак, с помощью фермента пектиназы в результате гидролиза глюкуроноксилана белой березы [171] были получены ксилоза — 34%, нейтральные олигосахариды — 26% и кислые олигосахариды — 40%. Из кислых олигосахаридов была выделена альдопентауроновая кислота, г сследование продуктов гидролиза позволяет установить, из каких структурных единиц построена мо-.лекула полисахарида. Д [c.122]

При изучении структуры олигосахаридов сначала идентифицируют входящие в их состав моносахариды, которые образуются при Мягком кислотном или ферментативном гидролизе. С помощью ферментативного гидролиза часто можно получить дополнительную информацию относительно конфигурации (а- или р-) глико-зидноп связи. Выделяющиеся сахара могут быть идентифицированы методами хроматографии особенно ценные данные могут быть получены при применении метода ГЖХ [5]. Так, при мета-нолизе олигосахаридов получают по четыре возможных гликозида каждой обычной альдозы два пиранозида и два фуранозида. Их переводят в триметилсилильные эфиры и далее разделяют методом ГЖХ. Если вместо метанола для проведения гидролиза использовать хиральный спирт, например ( —)-бутанол-2, то можно различить О- и -энантиомеры альдоз 6]. [c.203]

Поскольку этот глюкан содержит р-1- -4-связи, как в целлюлозе, и р-1- З-связи, как в ламинарине, естественно было применить для исследования его структуры целлюлазу и ламинаразу. Оказалось, что ферментативный гидролиз полисахаридов такого типа приводит к смеси олигосахаридов, среди которых значительно преобладают трисахариды, указанные на схеме. Целлюлаза воздействует на участки структуры полисахаридной молекулы, строение которых совпадает со строением целлюлозы, так как она катализирует гидролиз Р-1-<>4-глюкозидных связей для тех моносахаридных остатков, которые сами имеют в положении 4 замести- [c.512]

Отдельные цепи расположены в форме пучков, создавая пространственную структуру целлюлозы, которая стабилизована за счет водородных связей. При кислотном или ферментативном гидролизе целлюлоза расщепляется с образованием )-глюкозы. Условия проведения реакций можно варьировать таким образом, что будут получаться преимущественно олигосахариды, например целлобиоза, целлотриоза, цел-лотетроза и т. д. Под действием фермента амилазы, который вызывает расщепление лишь сс-гликозидных связей, целлюлоза не расщепляется. Ферментов, способных вызвать расщепление р-гликозидных связей, в пии еварительном тракте человека нет. Поэтому человек в отличие от животных не может переваривать целлюлозу, но она является необходимым для нормального питания балластным веществом. [c.643]

Установление строения. Для установления строения гликозидов, содержащих один моносахаридный остаток, необходимо установить природу моносахарида, строение агликона, размер окисного цикла моносахаридного остатка и конфигурацию гликозидной связи. Для решения первой задачи проводят гидролиз гликозида, после чего идентифицируют образовавшийся моносахарид (см. гл. 14) и производят установление строения или идентификацию агликона методами, принятыми в соответствующих разделах органической химии. Для полифункциональных агликонов задача осложняется тем, что при этом возникает необходимость выяснения места присоединения углеводного остатка к агликону. Кроме того, некоторые природные агликоны (например, агликоны сердечных гликозидов) лабильны в кислой среде, что затрудняет получение неизмененного агликона при гидролизе. В таких случаях прибегают к ферментативному гидролизу (см. стр. 208) или используют некоторые специальные приемы (см., например, " ). Многие природные гликозиды содержат несколько моносахаридных остатков, соединенных друг с другом О-гликозидными связями. Установление строения таких соединений включает помимо решения перечисленных задач установление строения олигосахаридной цепи (или цепей) методами, применяемыми в химии олигосахаридов (см. гл. 16). Для определения размера окисного цикла моносахаридного остатка применяют два метода метилирование и перио-датное окисление. Первый метод заключается в получении метиловых эфиров гликозидов и их последующем гидролизе метилированию подвергаются все спиртовые гидроксилы моносахаридного остатка, за исключением того, который принимал участие в образовании окисного цикла исходного гликозида. Поэтому установление положения метоксильных групп в полученном при гидролизе метилированном моносахариде позволяет установить, который из спиртовых гидроксилов участвовал в образовании цикла. [c.206]

Ферментативный гидролиз гликозидных связей ш ьИго—о1ратимая реакции. Поэтому при использовании гликозидаз для частичного гидролиза необходимо исследовать синтетазную активность фермента и применять разбавленные растворы, что смещает равновесие в сторону гидролиза. В противном случае возможны серьезные ошибки, связанные с наличием в гидролизате олигосахаридов, образующихся синтетическим путем, которые можно принять за продукты деструкции исследуемого. [c.450]

Таким образом, ферментативный гидролиз в отличие от кислотного дает возможность выяснить положение остатков ,-арабинозы в молекуле этого полисахарида. Следует учитывать, однако, что неочищенные ферментные препараты иногда обладают кроме гидролизующего еще и син-тетазным действием. В этом случае применение их для расщепления полисахаридов может привести к образованию из продуктов гидролиза новых олигосахаридов, не имеющих отношения к структуре исходного полисахарида. [c.512]

Справедливость этой формулы подтверждается данными частичного кислотного и ферментативного гидролиза, а также ацетолиза " . Этими методами были получены наборы олигосахаридов (целлобиоза и ее олигомергомологи), состоящих только из р - 1- -4-связанных О-глюко-пираноз. При периодатном окислении целлюлоза поглощает 1 моль окислителя на моносахаридный остаток, причем разрушаются практически все моносахаридные остатки . Точность метода, достигнутая в настоящее время, позволяет утверждать, что другие типы связей в структуре целлюлозы могут встречаться не чаще, чем одна на 1000 остатков глюкозы. Определение молекулярного веса дает различные значения в зависимости от метода получения целлюлозы, так как вытянутые молекулы полисахарида сравнительно легко подвергаются деградации. Принято считать,, что степень полимеризации целлюлозы не ниже 3000 и может достигать 10 ООО, что соответствует молекулярным весам порядка 10 . [c.524]

Показано, что наилучшим способэм получения нейтральных дисахаридов из трагакантовой кислоты является ацетолиз с последующим дезацетилированием. Для выделения олигосахаридов, в состав которых входят остатки галактуроновой кислоты, был применен ферментативный гидролиз, причем оказалось, что пектиназа и гемицеллюлаза не действуют в заметной степени на трагакантовую кислоту, но легко гидролизуют расщепленные трагакантовые кислоты I и И [c.531]

В процессе работы был использован и ферментативный гидролиз. Ксилан обрабатывали ксиланазой гемицеллонигрин П-ЮХ . Глубина его распада достигала 90—92%. Применение этого фермента, а также эндо-1,4-р-ксиланазы позволило выделить олигосахариды. Их расшифровка дала основание предположить регулярное построение макромолекул ксиланов окопника, донника и др. [c.118]

Пэйнтер [160] получил высокие выходы олигосахаридов при ферментативном гидролизе полисахаридов с одновременным удалением образующихся низкомолекулярных сахаров диализом, что предотвращало их дальнейший распад. [c.303]

Строение Д. устанавливают идентификацией моносахаридов, образующихся при гидролизе определением формы (пиранозной или фуранозной), в виде к-рой моносахариды входят в Д., и положением гидроксилов, принимающих участие в образовании гликозидной связи. Конфигурацию полуацетальных гидроксилов, участвующих в образовании гликозидных связей, устанавливают ферментативным путем, с использованием а- и -гликозидаз. Д. получают из природных материалов, напр, сахарозу — из свеклы, лактозу — из молока. Многие Д. получают при неполном гидролизе природных полисахаридов, олигосахаридов и гликозидов, папр. при ферментативном гидролизе крахмала и гликогена — мальтозу, при гидролизе целлюлозы — целлобиозу, из трисахарида ген-циозы — генцибиозу и т. д. Синтетически Д. получают и 3 о м (> р и 3 а ц и е й Д., напр, при щелочной изомеризации лактозы получается пактулоза, из восстанавливающих Д. через гликали получают их эпимеры и т. д. конденсацией моносахаридов и др. [c.571]

Простейшими и наиболее важными олигосахаридами являются дисахариды. При кислотном или ферментативном гидролизе дисахариды образуют моносахариды, которыми часто бывают гексозы. Гексозы соединены между собой 0-глюкозидной связью, но в ее образовании обязательно участие только одного полуацетального гидроксила. Действительно, многие дисахариды обнаруживают восстанавливающие свойства, которые указывают на наличие в остатке сахара легко раскрывающейся полуацетальной функции. Однако в том случае, если в образовании связи участвуют аномерные углеродные атомы обеих гексоз, как в сахарозе, то сахар, подобно ме-тилгликозиду (ацеталю), не обладает восстанавливающими свойствами и не образует фенилозазона или других производных по карбонилу (если условия опыта не приводят к гидролизу ацетальной [c.27]

Ферментативный гидролиз. Наличие а- или Р-связей в олигосаха-ридах, как и в гликозидах, можно обнаружить при помощи специфических а- и р-гликозидаз. Так, содержащаяся в эмульсине горьких миндалей Р-гликозидаза расщепляет Р-гликозидные связи, а находящаяся в дрожжах а-гликозидаза — а-гликозидные связи. Ферментативный гидролиз значительно отличается от кислотного он протекает при низкой температуре (20, 30, 40°) легко расщепляющиеся кислотой фуранозидные связи не гидролизуются многими гликозидазами, за исключением специфичных к этим связям (как, например, инвертаза). Известные трудности применения ферментативного гидролиза связаны с тем, что в природных источниках часто содержатся одновременно как а-, так и Р-гликозидазы и необходима тщательная очистка ферментных препаратов. Приходится также считаться и с субстратной специфичностью иногда а-гликозидаза, легко расщепляющая один олигосахарид, не действует или медленно действует на другой, также содержащей а-гликозидные связи, но имеющий другое строение. При всех этих трудностях ферментативный гидролиз относится к надежным методам определения конфигурации гликозидных связей. [c.22]

В 1975—1976 гг. в нашей лаборатории получены принципиально новые данные о глюкоманнанах типа эремурана. Во-первых, удалось установить последовательность моносахаридных остатков в глюкоманнане из Ег. fus us. Для этого после ферментативного гидролиза препаратом целлюлазы были изолированы 10 олигосахаридов — ди-, три- и [c.157]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология