Фракционирование тканей

Результаты, полученные при фракционировании тканей, удобнее всего оформлять в виде графиков. Так, при исследовании распределения ферментов в тканях данные лучше всего представлять в виде гистограмм, дающих возможность визуально оценить результаты проведенных экспериментов. [c.58]

Второй раздел практикума ставит своей целью познакомить студентов с особенностями выделения, фракционирования, идентификации и количественного определения различных природных азотсодержащих < оединений. белков, пептидов, аминокислот, нуклеиновых кислот, нуклеотидов и пр Предлагаемые экспериментальные работы включают аиболее широко используемые в лабораторной практике современные методы разделения и анализа этих соединений различные виды электрофореза, хроматографии, спектрофотометрии, колориметрии и др. Работа проводится как на готовых коммерческих препаратах высоко- и низкомолекулярных азотсодержащих соединений, так и на препаратах, выделяемых студентами из различных тканей лабораторных животных. [c.79]

Следует отметить, что единая схема, пригодная для выделения и фракционирования гемицеллюлоз из любой растительной ткани на отдельные полисахариды вряд ли возможна, поскольку каждая ткань имеет свои структурные особенности и разный состав полисахаридов. По этой причине при выделении полисахаридов чаще руководствуются различными приемами, ранее проверенными для аналогичных полисахаридов. При необходимости получения чистого 4-О-метилглюкуроноксилана в значительных количествах из лиственной древесины может быть рекомендован нижеприведенный метод. [c.39]

Исходным материалом при фракционировании может служить свежая ткань или осадок спрессованных клеток микроорганизма, обычно получаемый с помощью центрифугирования. [c.158]

При помощи метода фракционирования гомогенатов органов и тканей в центрифугах было показано, что ядерная фракция печени и почек содержит незначительное число ферментов, хотя известно, что в ядрах осуществляется синтез некоторых белков. Основное место синтеза белка, как теперь установлено,— фракция рибосом цитоплазмы. Показано, кроме [c.158]

Сита почвенные ТУ 46-47-885—73 — Фракционирование пробы Четыре сита из сетки проволочной тканой (0,1 0,25 0,5 1,0) и пять из пробивной (2 3 5 7 10) 600 Вт [c.339]

Следовательно, чем больше значение х, тем меньше граничное сопротивление и лучше фильтрующие свойства тканей. На примере выделения парафина из парафиновых дистиллятов с разным содержанием фракций, выкипающих до 350 °С, показано [178], каким важным фактором является четкость фракционирования сырья при выделении твердых углеводородов (табл. 2.10). При обезмасливании сырья более узкого фракционного состава выход парафина больше почти на 10% при меньшем содержании в нем масла. Однако различия в составе рас- [c.89]

Фракционирование белков мышечной ткани [c.249]

Настоящая книга, издаваемая в серии научных трудов ВИР, освещает методы и методики по определению содержания нуклеиновых кислот в растительных тканях и препаратах. В ней также изложены — идентификация и количественный учет свободных нуклеотидов выделение нативных РНК и ДНК из растений фракционирование их на колонках определение нуклеотидного состава РНК и ДНК методами колоночной и бумажной хроматографии изучение свойств макромолекул нуклеиновых кислот, обнаружение их в клетке, цитофотометрия, определение состояния ДНК и РНК в клетке. [c.2]

В результате фракционирования гомогенатов тканей получают фракции, в которых содержатся различные клеточные структуры. Ядра и хлоропласты осаждаются при ускорении до 1000 , митохондрии при 10 000—20 000, микросомы при 20 000— 140 000 Фракцию, не осаждаемую при 140 000 называют клеточным соком. [c.29]

К таким задачам относятся, например, обезвоживание коллоидных веществ, с трудом поддающихся фильтрованию очистка коллоидов от посторонних примесей, например очистка клея, желатины, растворов нитроцеллюлозы отделение водно-масляных эмульсий, фракционирование суспендированных коллоидов, осаждение каучука из латекса, пропитка тканей, дубление кожи, очистка глицерина, фруктовых соков, очистка воды и т. п. [c.170]

Обычно рибонуклеазу выделяют из свежей бычьей поджелудочной железы. Для этого ткань поджелудочной железы экстрагируют 0,25 п. серной кислотой, охлажденной на льду. Затем добавляют сернокислый аммоний до 0,6 насыщения, переводя в осадок трипсиноген, химотрипсиноген и дезоксирибонуклеазу. Рибонуклеазу осаждают из фильтрата, повышая концентрацию сернокислого аммония до 0,8 насыщения. Путем фракционированного осаждения сернокислым аммонием можно получить рибонуклеазу в чистом виде. Полученный фермент можно перекристаллизовать из этилового спирта. [c.85]

Де Дюв указывает, что любой эксперимент этого типа включает в себя три стадии 1) деструктивная стадия, в процессе которой суспензия ткани или клеток превращается в гомогенат 2) перераспределение компонентов гомогената по фракциям на основании их физических свойств (т. е. константы седиментации, плотности и т. д.) 3) анализ этих фракций. Для интерпретации полученных результатов необходимо в свою очередь провести три стадии реконструкции 1) определение морфологических и биохимических свойств выделенных фракций 2) переоценка данных, полученных на предыдущей стадии, применительно к компонентам исходного гомогената и методам фракционирования, использованным вначале, и, наконец, 3) отождествление компонентов гомогената с определенными внутриклеточными образованиями. [c.250]

Растворы НК используются в качестве клеев и для промазки тканей. Он не растворяется в воде, спиртах, ацетоне. Из растворов НК выпадает при добавлении спирта или ацетона, которые и применяются для его фракционирования. [c.29]

Принцип получения препарата Кейлина—Хартри состоит в экстракции измельченной ткани солевыми буферными растворами, разрушении ее с помощью абразивных материалов и фракционировании центрифугированием. [c.407]

Пищ. говяжьи и бараньи жиры, получаемые вытопкой, имеют высокую т-ру плавления и низкую усвояемость. Для использования их в пищу требуется разделение на две фракции - высокоплавкий стеарин и низкоплавкий олеомаргарин. Разделение достигается отверждением высокоплавкой фракции при 30-32 °С и ее отделением-либо прессованием через хл.-бум. ткань, либо сепарированием после добавления детергента. Последний способ позволяет проводить непрерывное фракционирование. В результате получают 65-67% олеомаргарина, являющегося осн. сырьем для маргариновой пром-сти, и 33-35% стеарина, применяемого для отверждения жиров, используемых в кулинарии. [c.158]

Результаты фракционирования свидетельствуют о том, что в состав арабогалактановой фракции лузги входят глюкуроноксилан, полисахарид, молекулы которого в основном построены из остатков L-арабинозы, и полисахарид, содержащей остатки D-галактозы. На основании приведенных выше данных пока нельзя сказать, в состав какого полисахарида входит L-рамноза, Содержание ее в исходной ткани мало, а в ряде фракций гемицеллюлоз хроматографически обнаруживаются только следы рамнозы. [c.259]

Ткань измельчают либо в мясорубке, либо, если нужна более мягкая обработка, в гомогенизаторе. Клетки микробов чаще всего разрушают с помощью ультразвука или продавливанием через пресс под высоким давлением. При фракционировании очень важно подобрать нужное значение pH и состав буфера, а при выделении субклеточных органелл— осмотическое давление. Для сохранения целостности органелл часто в качестве суспендирующей среды используют 0,25 М сахарозу, к которой добавляют Mg U, а также реагент, образующий комплекс с металлами, например этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) (табл. 4-2). Растворимые ферменты обычно экстрагируют без добавления сахарозы, но при этом используют восстановители — глутатион (дополнение 7-Б), меркаптоэтанол или дитиотреитол (разд. 3.3.а). [c.158]

Интересен процесс фракционирования углерода при биофотосинтезе, при котором углерод тканей растений, а затем и животных обогащается в основном легким изотопом В связи с этим вещество организмов и его производные (уголь, нефть, газ) имеют практически одинаковый и более легкий изотопный состав углерода по сравнению с карбонатным и эндогенным углеродом. Процессам фракционирования изотопов посвящены работы Э. М, Галимова, Э. Дегенса и др, [c.205]

Жирно-кислотные синтетазы делятся на 2 группы. К первой группе относятся полиэнзимные, не поддающиеся фракционированию комплексы с мол. м. порядка 500000, в которых все ивдиввдуальные энзимы собраны в компактную структуру. В частности, в эту группу входят жирно-кислот-ные синтетазы животных тканей и дрожжей. [c.383]

Фракционирование клеток легких крыс показало [239], что амин практически равномерно распределен во всех фракциях. Максимальная концентрация ацетамида сосредоточена в раотвори-мой и митохондриальной фракциях, где гетероциклические амины подвергаются действию ароматических N-ацетилтрансфераз. В клетках сердца нитразепам содержится в основном в обломках клеток и растворимой фракции, в то время как его метаболиты равномерно распределены во всех изучаемых органах. По-видимому, метаболиты нитразепама поступают в сердце из других органов и тканей, в которых возможны процессы восстановления и ацетилирования. Аналогично объясняется наличие амина в микросомах мозга. [c.207]

Кислые мукогюлисахариды в соединительной ткани связаны с белка- ми (см. стр. 602), поэтому для их выделения, как правило, проводят предварительное разрушение белков протеолитическими ферментами или расщепление углевод-белковых связей щелочами, после чего полисахариды экстрагируют растворами солей . Белки, также переходящие при этом в раствор, удаляют с помощью денатурирования. Смеси мукополисахаридов можно разделить на компоненты фракционированным осаждением спиртом в виде солей с различными катионами , но лучшие результаты дает фракционированное осаждение цетавлоном или ионообменная хроматография . Особенности химического поведения мукополисахаридов сделали чрезвычайно сложной задачу установления их строения. Даже идентификация моносахаридов после полного кислотного гидролиза (обычно одна из самых простых операций) является в мукополисахаридах трудной проблемой. Наличие в одной молекуле уроновых кислот и аминосахаров приводит к тому, что полисахариды гидролизуются лишь в жестких условиях, при которых освобождающиеся уроновые кислоты подвергаются интенсивному разрушению. Поэтому в последнее время работу по установлению строения этих веществ проводят на модифицированных полисахаридах, в которых сульфатные группы удалены, а все карбоксильные группы уроновых кислот восстановлены в первичноспиртовые. Ряд других классических методов установления строения полисахаридов применим к мукополисахаридам с трудом это относится к перйодат ному окислению, вызывающему разрушение остатков уроновых кислот вследствие сверхокисления, к метилированию, в применении которого успехи достигнуты сравнительно недавно. Основными методами, позволившими выяснить строение мукополисахаридов, послужили методы частичного гидролиза и частичного ферментативного расщепления. [c.541]

Гепарин Гепарин находится во многих тканях организма, но в наибольшем количестве содержится в печени (отсюда его название), легких, кышцах. Этот полисахарид обладает высокой специфической биологической активностью, являясь антикоагулянтом крови. В настоящее время разработан ряд методов получения гепарина (см., налример, ). Его окончательная очистка достигается обычно фракционированием цетавлоновых солей или с помощью ионообменной хроматографии Невысокий молекулярный вес гепарина (около 20 ООО) позволяет получать ряд его солей (например, бариевую ) в кристаллическом состоянии. [c.544]

Обычно миелин получают гемогенизацией нервной ткани с последующим фракционированием посредством центрифугирования в градиенте плотности. Его плотность составляет 1,08 г/мл, что позволяет применять изопикнические методы. Данные анализа, полученные различными исследователями, отличаются причиной могут быть примеси аксональной мембраны. [c.99]

В обзоре О. П. Грушникова и И. Н. Шорыгиной [6] отмечается, что в 60—70-е гг. большинство исследователей явно склонялись в пользу признания наличия химических лигноуглеводных связей в растительных тканях. В опубликованных в эти годы работах, посвященных фракционированию компонентов древесины в растворителях, особое внимание уделяется изучению влияния размола исходного материала на последующее фракционирование, Браунелл и Уэст (цит. по 6]) предлагают способ фракционирования древесины путем размола на ротационно-шаровой мельнице и последующей экстракции системой растворителей, состоящей из водного раствора тиоционата натрия, бензилового сиирта и ди-метилформамида. Выделенные ЛУК авторы изучали методами [c.165]

Мультиферментный синтетазный комплекс жирных кислот. Все ферменты биосинтеза жирных кислот образуют единый агрегат — мультиферментный комплекс, получивший название синтетазы жирных кислот. Комплекс синтетазы животных тканей и дрожжей — это димер, состоящий из двух идентичных мономеров, каждый из которых представляет полипептидную цепь, включающую шесть активных центров ферментов и ацил-переносящий белок (Н8-АПБ). Эти ферменты образуют настолько компактную структуру, что они не поддаются фракционированию и все попытки вьщелить их в индивидуальном виде не увенчались успехом. [c.342]

Высаливание белков концентрированными растворами ЫагЗО или (NH4)2S04 применяется при выделении ферментов из экстрактов тканей и является одним из методов фракционирования белковых смесей на альбумины и глобулины. Растворимость белков уменьшается также при добавлении дегидратирующих веществ (спирта, ацетона). [c.114]

Лецитины яйца были достаточно хорошо отделены от нейтральных липидов. Киселев [86] фракционировал липиды, содержащиеся в тканях мозга, на сефадексе LH-20. В смеси хлороформ—метанол (2 1) сефадекс вел себя как слабоосновный анионит, так что фосфолипиды разделялись в соответствии с их основными свойствами. Однако в смеси хлороформ—метанол— вода (65 35 8) сефадекс выступает в роли молекулярного сита, и поэтому вещества разделялись согласно их молекулярным массам. Использование метилированного сефадекса рассмотрено в обзоре [87] сефадекс G-25 был метилирован так, чтобы содержать 40% метоксигрупп липиды элюировали смесью хлороформ—метанол—вода (85 85 30). При этих условиях фосфолипиды элюировались в первой фракции наряду с липопептидами и глиголипидами. DEAE-целлюлоза оказалась полезна для фракционирования кислых липидов, содержащихся в Es heri hia соИ [88]. Фосфолипиды успешно были выведены также с помощью гель-хроматографии на сефадексе LH-20 [77, 89]. [c.208]

Для разделения сложных смесей, содержащих вещества разных классов (основания, нуклеозиды, нуклеотиды и их поли-фосфаты, олигонуклеотиды, включая олигонуклеотиды, различающиеся порядком основании, и т. п.), с которыми имеют дело, например, при выделении кислоторастворнмой части клеток или тканей или при анализе ферментативных гидролизатов нуклеиновых кислот, применяют исключительно ионообменную хроматографию. В случае необходимости дальнейшее фракционирование проводят по многостадийной схеме, с использованием указанных выше методик. При этом наблюдаются те же закономерности, что и при анализе нуклеотидов (см. предыдущий раздел), поэтому в дальнейшем будет приведено лишь несколько примеров. [c.58]

Б. обычно выделяют из тканей и органов, клеток и субклеточных элементов животных и растений, а также из микроорганизмов. Получение чистых лрепаратов Б. в большинстве случаев довольно трудная задача. Б. обычно экстрагируют разб. р-рами солей, к -т и щелочей. Получающиеся сложные смеси иодвергак1Т фракционированию. Широко применяется фракцион)юе осаждение (неорганич. солями, особенно сульфатом аммония, этанолом, ацетоном), изменение pH, ионной силы, темн-ры. Широко распространены методы хроматографии на ионообменных смолах (гл. обр. па целлюлозной основе), а также методы гель-фильтрации. Критериями чистоты Б. являются гомогештость при седиментации в ультрацентрифуге, электрофорезе и хроматографии. Нерастворимые Б. очищают от растворимых примесей водными р-рами солей, к-т, щелочей, органич. растворителями. [c.128]

Первые высокоочищенные препараты ацетилхолинэстеразы нервной ткани были получены Нахманзоном и Розенбергом [93]. Эти авторы использовали в качестве источника фермента наиболее богатую ацетилхолинэстеразой ткань электрического органа Е1е- trophorus ele tri us. Методом экстракции и фракционирования сульфатом аммония были получены препараты с выходом 15% и удельной активностью 2170 Е/мг. При ультрацентрифугировании раствора фермента удалось получить в три раза больший по активности препарат. [c.165]

Необходимая стадия прн выделении большинства Б.— механич, разрушение клеток и экстракция требуемого Б. Иногда экстракции предшествует фракционирование содержимого клетки но субклеточным фракциям с помощью препаративного ультрацентрифугиро-вания. Известны также методики выделения, согласно к-рым механич. разрушения клеток не происходит. Такие методики применяют обычно для выделения внеклеточных Б. (напр., протеолитич. ферментов, гормонов, белков, гликопротеидов и липопротеидов плазмы крови, гликопротеидов соединительной ткани). Именно этот класс Б. наиболее доступен. [c.129]

Рис. 13-24. Фракционирование клеточного экстракта методом дифференциального центрифугирования. Клеточная мембрана разрушается силами трения в гомогенизаторе с вращаю-ищмся поршнем. После удаления остатков соединительной ткани и обрывков кровеносных сосудов при помоцщ сита нз нержавеющей стали клеточный экстракт центрифугируют несколько раз, постепенно увеличивая скорость вращения ротора.

Р. может быть получен экстракцией измельченной ткани почек солевыми р-рами с последующим фракционированием NH4 I в кристаллич. виде Р. не выделен. Оптимум активности Р, лежит при pH 7,5—8,5. Активность препаратов Р. определяют по их способности повышать артериальное давление при впутри-венном введении за единицу принято количество Р., вызывающее повышение давления на 30 мм. [c.323]

РИБОНУКЛЕАЗЫ (РНК-азы) — ферменты, катализирующие гидролитич. расщепление рибонуклеиновых к-т на олиго- и мононуклеотиды. Р. широко распространены в природе и присутствуют во всех исследованных тканях. Наиболее изучена панкреатическая Р., секретируемая поджелудочной железой [систематич. название полирибонуклеотид — 2-олиго-нуклеотидо-трансфераза (циклизующая) шифр 2.7.7.16 — см. Номенклатура и классификация ферментов]. Р., выделенная в кристаллич. виде из поджелудочной железы быка экстракцией разведенной серной к-той с последующим фракционированием (NH4)2S04 — белок основного характера (р/ 7,8) с мол. в. 13 ООО. Установлена природа и последовательность аминокислотных остатков, входящих в состав Р., и выяснены существенные детали ее пространственной структуры, что дало возможность воссоздать трехмерную модель этого белка. Молекула панкреатич. Р. представляет собой одинарную полипептидиую цепь, состоящую из 124 аминокислотных остатков N-концевой аминокислотой в молекуле Р. является лизин, С-концевой — валин. [c.337]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология