Обнаружение при хроматографировании на бумаге

Поскольку при хроматографировании происходит разделение компонентов анализируемой смеси, то в ряде случаев обычные качественные реакции на ионы неорганических соединений в условиях получения осадочных хроматограмм становятся высоко селективными. Например, обнаружение ионов Hg2+ в виде иодида ртути красного цвета на колонке или бумаге, содержащей иодид калия в качестве осадителя, является абсолютно селективным. Такая же высокая селективность характерна для обнаружения ионов по реакции с диметилглиоксимом на хроматографической бумаге. [c.231]

Обнаружение при хроматографировании на бумаге [c.462]

После проявления бумагу сушат и обрызгивают веществом для обнаружения. Отдельные пятна идентифицируют по значениям Rf или же параллельным хроматографированием контрольного образца. Если неизвестное вещество и контрольный образец перемещаются на одно и то же расстояние на нескольких хроматограммах в разных системах растворителей, то весьма вероятно, что эти вещества идентичны. При расшифровке двумерных хроматограмм руководствуются не столько отдельными значениями Rjy сколько общим расположением пятен. [c.469]

Если хроматограмма предназначена для элюирования, то проведение хроматографирования зависит от способа обнаружения. В тех случаях, когда разделяемые вещества окрашены или имеют характеристическую флуоресценцию в ультрафиолетовом свете, пятна после определения их местонахождения на бумаге можно вымывать сразу. Так, компоненты нуклеиновых кислот, флавины и т. д. обнаруживают благодаря их отчетливой флуоресценции. Другие соединения, пятна которых при дневном освещении едва заметны, могут вызывать заметное тушение слабой флуорес- [c.476]

Если вещества, подвергаемые хроматографированию на бумаге, бесцветны, то для обнаружения образовавшихся зон следует, после высушивания хроматограммы, применить соответствующий реагент, раствором которого обрызгивают бумагу при помощи пульверизатора. В случае хроматографирования смеси аминокислот обычно применяют нингидрин, вещества кислотного или основного характера обнаруживают соответствующим индикатором, иногда пользуются разбавленным раствором перманганата и т. п. Нередко лучшие результаты можно получить при рассматривании хроматограммы в ультрафиолетовом свете. [c.303]

Такая двоякая роль подвижной фазы затрудняет ее выбор и часто заставляет определять условия разделения экспериментальным путем. В монографиях по бумажной хроматографии приводятся таблицы, облегчающие выбор соответствующих систем. В этих таблицах даются значения Rf для большого числа неорганических и органических веществ при использовании нескольких различных типов подвижной фазы. Кроме состава подвижной фазы в таблицах указаны типы бумаги, методики хроматографирования и реагенты, необходимые для обнаружения выделенных компонентов. [c.521]

КИСЛОТ [79]. Метод хроматографирования на бумаге применен для обнаружения присутствия адреналина (10 мг и меньше) [80], для изучения производных никотиновой кислоты [81], аденозин фосфорных кислот [82]. аминокислот [83] и т. д. [c.210]

Принцип метода. Метод основан на хроматографировании исследуемых кислот на бумаге после перевода их в аммонийные соли с последующим обнаружением зон локализации раствором метилового красного в боратно-фосфатном буфере. [c.186]

Восходящее хроматографирование происходит немного медленнее, но растворитель в этих условиях не может стечь с хроматограммы. Когда фронт растворителя достигает верхнего края бумаги, он останавливается, если камера герметически закрыта, а атмосфера в ней насыщена парами если эти условия не выполнены, то растворитель испаряется с верхней части бумаги внутрь камеры и при этом вещество постепенно накапливается вблизи и на линии фронта растворителя. Одновременно из-за диффузии пятна расплываются, так что их диаметр увеличивается и в результате ухудшается и разделение, и эффективность обнаружения. [c.93]

Хроматографирование заканчивают, когда растворитель приблизился к противоположному концу бумаги. Полученную хроматограмму вынимают из камеры, отмечают положение растворителя и подсушивают. Высушенную хроматограмму проявляют соответствуюш,им реактивом. Проявление производят путем опрыскивания из пульверизатора. Обнаруженные пятна очерчивают карандашом и хроматограмму снова подсушивают. [c.51]

При разделении смеси бесцветных веществ для обнаружения их на бумаге хроматограмму проявляют, обрабатывая ее раствором вещества (проявителем), дающего окрашенное соединение с разделенными веществами. По проявленной хроматограмме определяют наличие интересующих компонентов и степень их разделения. Отношение длины пути, который прошло вещество по бумаге, к длине пути, который прошел растворитель по бумаге за то же время в стандартных условиях хроматографирования, есть величина постоянная, специфичная для каждого [c.73]

Смесь ионов бария, кальция и стронция разделяют на бумаге в восходящем токе подвижного растворителя — 4 %-го раствора роданида калия в пиридине. После окончания хроматографирования и высушивания хроматограмму проявляют, опрыскивая полоски бумаги для обнаружения ионов Ва + и 5г + раствором родизоната натрия, для обнаружения иона Са +— спиртовым раствором ализарина. Порядок движения ионов Ва2+, 8г2+, Са2+. [c.340]

В каждом конкретном случае выбор системы растворителей для разделения ДНФ-аминокислот на бумаге в значительной мере определяется особенностями решаемого вопроса. Чтобы получить хорошее разделение, необходимо соблюдать в основном те же предосторожности, о которых уже упоминалось в связи с хроматографированием самих аминокислот. Кроме того, существует одно весьма важное условие разделение ДНФ-аминокислот необходимо проводить в темноте. Большое значение имеет также предварительное приведение бумаги в равновесие с парами растворителя и поддержание постоянной температуры. Многие из испытанных сортов бумаги оказались в равной мере подходящими для хроматографии обнаружение разделенных компонентов после хроматографирования является простой задачей. Для локализации полезно использовать сильное поглощение ДНФ-аминокислот в ультрафиолете. [c.152]

Часто в качественном анализе хроматографии используют способность хроматографируемых веществ поглощать ультрафиолетовые лучи или флуоресцировать в них. Чтобы идентифицировать анализируемую смесь катионов, прибегают к свидетелям , т. е. на полоску бумаги наносят не только каплю исследуемого раствора, но и каплю раствора, в котором содержатся такие же катионы. После хроматографирования и проявления хроматограммы проводят сопоставление положения пятен исследуемого раствора и свидетеля . На основании этого сопоставления делают вывод о присутствии или отсутствии катионов в исследуемом растворе. Очень важно, чтобы свидетель -раствор содержал все катионы, имеющиеся в исследуемом растворе. Это является недостатком способа обнаружения катионов. [c.89]

Хроматография на бумаге является простым и эффективным средством обнаружения ионов в многокомпонентных смесях. Зная для определенной системы растворителей и характерную окраску пятен, можно идентифицировать исследуемые вещества. Идентификацию элементов можно осуществлять с помощью хроматографирования стандартного раствора- свидетеля и исследуемого раствора на одинаковых полосках бумаги в одной и той же смеси растворителей. Важно, чтобы раствор- свидетель содержал все ионы, содержащиеся в исследуемом растворе. [c.170]

Монография охватывает многие стороны приложения бумажной хроматографии к изучению антибиотиков специальные вопросы техники бумажной хроматографии в изучении антибиотиков, классификация антибиотиков и выяснение их новизны, количественный анализ многокомпонентных антибиотических смесей, изучение путей биосинтеза и превращений антибиотиков в организме человека, животных, растений, в микроорганизмах и почве и другие вопросы, разрешаемые с помощью хроматографии на бумаге. Систематизированы данные об условиях хроматографирования и способах обнаружения около 800 антибиотиков. Книга написана на основе критического обобщения более 1700 работ и большого личного опыта. [c.4]

В экстрактах растений при хроматографировании на бумаге можно обнаружить различные соединения, содержащие Неизмененный диаллат, меченный среди них не обнаружен. [c.222]

После хроматографирования бумага разрезалась на 4 сектора. Один сектор проявлялся соответствующими реактивами для обнаружения зон расположения катионов, другие 3 сектора использовались для количественного определения таллия. Для этого в каждом из 3 секторов вырезалась зона таллия, помещалась в стаканчик и кипятилась 2—3 мин с 25 жл 0,4 н. раствора соляной кислоты. По ле остывания раствор отфильтровывался в мерную колбуТ доводился до метки 0,4 н. раствором соляной -кислоты. Отбиралась аликвотная порция, в которой содержание таллия определялось колориметрическим метилфиолетовым ме-зодом- [c.55]

Хроматографирование проводили в 5-камере на пластинках размером 20Х20 см, причем в правой части пластинки хроматографировали стандартный образец кортикостерона. Сначала хроматограмму два раза элюировали в мало-полярной системе в одном направлении. При этом балластные вещества группировались на фронте растворителя. Контроль подвижности кортикостерона осуществляли следующим образом всю пластинку, за исключением правой части, куда был нанесен стандартный раствор кортикостерона, закрывали пластиной лз плексигласа кортикостерон обнаруживали парами иода. Затем удаляли силикагель с той части слоя, в которой не было кортикостерона, т. е. от фронта растворителя до предполагаемого положения кортикостерона (установленного с помощью описанного выше обнаружения стандартного образца). Вместо удаленного силикагеля к хроматограмме прикладывали полоску фильтровальной бумаги, предварительно смоченную растворителем, поворачивали хроматограмму на 180° II элюировали в направлении, противоположном двум первым (растворитель проникает в слой силикагеля через фильтровальную бумагу). После обнаружения хроматограммы можно увидеть кортикостерон, очищенный от балластных веществ, и произвести его количественное определение. [c.98]

Отмечена флуоресценция сульфида кадмия, осажденного в микропробирке в присутствии цианида открываемый минимум 0,02 мкг СА мл, как при реакции с пиридином [393, стр. 236]. Предложено определение С(18 в присутствии меди и по вызываемому им тушению свечения флуоресцеина на фильтровальной бумаге при соотношении Си С(1 = 100 1 чувствительность обнаружения последнего соответствует рО около 5,2 (С = 6 мкг мл) [392, стр. 195]. На бумажных хроматограммах кадмий можно открывать по люминесценции в присутствии других катионов смесью 8-оксихи-нолина, кверцетина и салицилаламина [106] или 8-оксихинолина с койевой кислотой (открываемый минимум — 0,05 мкг) [45, стр. 148] используют также хроматографирование на бумаге, пропитанной одним 8-оксихинолином [149]. Из других люминесцентных реакций описано открытие от 0,01 мкг d в кристаллофосфорах на основе ТЬОг при их облучении конденсированной искрой между вольфрамовыми электродами [45, стр. 138]. Вольфрамат кадмия дает ярко-желтую, а его нитрат фиолетово-синюю флуоресценцию [539]. [c.47]

Бенеш и др. [34] успешно использовали N-этилимид малеиновой кислоты для обнаружения тиолов и сложных эфиров тиолов в методе хроматографирования на бумаге в неводной сильно ш.е-лочной среде. В нейтральной водной среде сложные эфиры тиолов и эрготионеин не реагируют с N-этилимидом малеиновой кислоты. [c.568]

Хроматографирование ведут на полосках хроматографической бумаги шириной 2 см в цилиндрических сосудах с притертыми крышками, на которых имеются крючки для подвешивания хроматохрамм. Подвижную фазу наливают на дно цилиндра. Пробу наносят 2-3 раза, каждый раз высушивая пятно. Положение пятна отмечают карандашом. Максимальная длина хроматограмм — 30 см. Минимальная высота поднятия фронта растворителя — 10 см. Пятно пробы не должно погружаться в растворитель. Перед проявлением хроматограмму высушивают. По величинам Луи измеренному пути, который прошел фронт растворителя, рассчитывают положение зон каждого компонента смеси. Для обнаружения ионов хроматограмму обрабатывают растворами органических и неорганических реагентов проявителей в местах ожидаемого нахождения каждого компонента. [c.146]

Методы определения. В воздухе. Хроматографический метод на бумаге, основанный на переводе С. в нелетучее ртуть-органическое производное при взаимодействии с ацетатом ртути и выделении полученного соединения с применением способа нисходящей хроматографии минимально определяемое количество 1 мкг ( Тех. уел... ). Колориметрическое определение по образованию окрашенного в желтый цвет продукта реакции С. с концентрированной Н2504 сравнение интенсивности желтой окраски со стандартной шкалой [47]. Метод ТСХ с применением отражательной спектрофотометр и и основан на переведении С. в ртутьорганическое соединение при взаимодействии с ацетатом ртути в среде этанола и последующем хроматографировании предел обнаружения в анализируемом объеме пробы 1 мкг, в воздухе 1 мг/м (при отборе 3 л воздуха) погрешность определения 10 %, диапазон измеряемых концентраций 1—10 мг/м [411. Метод ГЖХ отбор проб без концентрирования предел обнаружения в анализируемом объеме пробы 0,004 мкг диапазон измеряемых концентраций 1,7—17,0 мг/м [41]. В почве. Метод ГЖХ на приборе с пламенно-иониЗационным детектором — чувствительность 0,05 мкг— или с детектором по теплопроводности — чувствительность 0,01 мг (Даукаева). В к р о в и, Масс спектрометрический метод определяемые количества 0,5— 1 млн" (Вгос Ьег1). В биологических жидкостях. ГХ метод определения С., миндальной и фенилглиоксиловой кислот (Муравьева, Смоляр) чувствительность определения для фенилглиоксиловой кислоты 0,1 мг в 10 мл мочи и 0,25 мг в 1 мл крови для миндальной кислоты — 0,2 мг в 10 мл мочи и 0,5 мг в 1 мл крови предел обнаружения С. в крови 0,03 мкг, погрешность 1—3 %. Обзор методов определения С. в воздухе, определения С. и его метаболитов в биологических пробах ( Гиг. критерии... ). См. также Ксилолы. [c.199]

Во многих случаях необходимо не только визуально фиксировать пятна разделенных на бумаге веществ и измерить их величину Rf, но и подвергнуть эти вещества дальнейшей обработ-. ке. Например, может понадобиться экстрагировать пятно с бумаги, чтобы провести колориметрический анализ, подвергнуть элюат масс-спектр а л ьному исследованию или провести микрохимическую реакцию и т. п. Положение пятна, если оно бесцветно, определяют путем обнаружения на контрольной полоске, содержащей вещество-стандарт и подвергнутой хроматографированию на том же листе и в тех же условиях, что и анализируемый образец. Обнаруженное пятно вырезают вместе с участком окружающей бумаги (рис. 3.13) и обрабатывают, как указано ниже. [c.96]

Порфиромицин (метилмитомицин С) отличается от митомицина С несколько большей подвижностью при хроматографировании на бумаге [137] (см. табл. 40). Методы обнаружения на хроматограммах те же, что и для митомицина С. [c.207]

Пиридомицин характеризуется величиной Rf около 0,9 при хроматографировании всистеме н-бутанол — уксусная кислота — вода (4 1 1), тестом для обнаружения служила культура микобактерии № 607. Хроматографией на бумаге в культуральной жидкости продуцента обнаружено несколько веществ — пред-щественников пиридомицина при его биосинтезе. [c.208]

Для обнаружения соединений применяют ряд специальных реакций. Так, например, пластинки опрыскивают 1 %-ным раствором анисового альдегида в 2 %-ном растворе концентрированной серной кислоты в ледяной уксусной кислоте, после чего 12—15 мин нагревают пластинки при 95—100°С. Для обнаружения 17- и 3-оксостероидов применяют реакцию Циммермана опрыскивают хроматографическую пластинку свежеприготовленной смесью 2 %-ного этанольного раствора и-динитробен-зола и 1,25 и. этанольного раствора гидроксида калия (1 1). Синие пятна 3-оксостероидов появляются сразу при нагревании в токе горячего воздуха, а 17-оксостероиды (если заместитель в положении 16 отсутствует) дают фиолетовую окраску через 3—6 мин. Для идентификации этиохоланона-11 и андроста-нона-11 используют реактив Драгендорфа. Этот реактив окрашивает пятна А -З-оксостероидов в оранжевый цвет, но его надо заново готовить каждые два дня и хранить при низкой температуре (4°С). Стероидные спирты можно обнаружить, опрыскивая пластинки 0,25 %-ным раствором ангидрида хромовой кислоты в ледяной уксусной кислоте и затем нагревая их 15 мин при 90—95°С. Образовавшийся при этом оксостероид обнаруживают с помощью реакции Циммермана. Семнадцать ацетатов стероидов анализировали методом ТСХ, элюируя пробу смесью этилацетат—циклогексан (1 1), однако в этой системе результаты разделения были менее удовлетворительны, чем при хроматографировании на бумаге. [c.314]

Уа11тхауз и др. [243] изучали применение иода для обнаружения стероидов при хроматографировании на бумаге, а Мэттьюс [244] исследовал цветные реакции на тонкослойных хроматограммах под действием раствора ванилина в смеси серная кислота—этанол. В последнем случае чувствительность определения 36 изученных стероидов достигала по крайней мере 5 мкг/см . Вечей и др. [245] добились увеличения чувствительности обнаружения кортикостероидов тетразолиевым реактивом на слоях силикагеля. С этой целью неносредственно в суспензию силикагеля, предназначенную для приготовления пластинок, вводят 100—2ОО мг тетразолиевого синего приготовленные пластинки сушат при комнатной температуре 24 ч. Элюирующие растворители, в частности смеси хлороформ—этанол (9 1), дихлорметан—бензол—ацетон—этанол (75 10 10 5), не растворяют цветные обнаруживающие реактивы, введенные в слой силикагеля. Чтобы пятна окрасились, хроматограммы опрыскивают метанольным раствором гидроксида натрия (Юг щелочи на 100 мл 60 %-ного метанола). Реакцию можно остановить в желаемый момент, если опрыскать пластинку раствором 2 мл муравьиной кислоты в 100 мл метанола. Чтобы закрепить полностью обработанную хроматограмму, ее опрыскивают раствором пластика. [c.333]

Очистка бумаги. В наиболее широко применяемом методе обнаружения хлорированных пестицидов на бумажных хроматограммах используется опрыскивание раствором нитрата серебра Для эффективного применения этого реактива необходимо уда.яить из бумаги вещества, реагирующие с серебром, до ее использования для хроматографирования. [c.69]

Применение других растворителей (метилбутил- и пропилкетонов, содержащих НС1) рассмотрено в работе [80]. О неирерьшном хроматографическом разделении Li и К см. [81]. Хроматография на бумаге нашла в основном применение для качественного анализа щелочных металлов и для приближенного количественного их определения. Описано выделение с ее помощью изотопа s - из хлорида бария, облученного нейтронами [77], и из азотнокислого раствора облученного урана [69], причем в последнем случае опыты могут проводиться на колонках из целлюлозы. Для качественного разделения смеси щелочных металлов наиболее пригодны смеси, содержащие фенол [64, 67], и, в частности, фенол-метанольная смесь с H L Недостатком метода хроматографирования на бумаге является то, что разделение может производиться с максимальным количеством (100— 200 мкг) металла. Чувствительность химических методов обнаружения редких щелочных металлов в зонах — 1 —5 мкг. Эти два обстоятельства су- [c.42]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология