Хроматографирование для качественных методов

Для разделения аминокислот, образовавшихся в результате гидролиза полипептида, еще Э. Фишер предложил использовать фракционную вакуумную перегонку их эфиров. Этот метод требует сравнительно большого количества вещества. В самое последнее время он, однако, вновь становится очень актуальным, так как газовая хроматография позволяет разделить ничтожные количества смеси эфиров аминокислот. Широкое применение для разделения смесей аминокислот нашла за последние годы бумажная хроматография. Если требуется определить качественный состав смеси аминокислот, то проводят двухмерное хроматографирование на листе бумаги и проявляют хроматограмму нингидрином, причем каждая аминокислота дает окрашенное пятно. [c.384]

Качественные методы, предназначенные для определения наличия интересующих веществ в пробе с помощью хроматографии на бумаге, являются не только экспрессными, но и массовыми, позволяющими анализировать одновременно много проб. При анализе проб, отобранных на различных стадиях технологического процесса, качественный анализ становится полуколичест-венным. Сравнение интенсивностей окрасок пятен на хроматограммах проб, отобранных в различное время, дает возможность судить о скорости увеличения (при гидролизе) или уменьшения (при биохимических процессах) концентрации тех или иных сахаров. В зависимости от содержания редуцирующих веществ в пробе применяют хроматографирование на лопатках из хроматографической бумаги пли на полосках. [c.82]

Анализ хроматограммы. Заключительной стадией хроматографического анализа смеси веществ является качественный и количественный анализ полученной хроматограммы. Хроматограмма, полученная на адсорбенте белого цвета, представляет собой серию цветных зон, расположенных в определенном порядке. Визуальное исследование такой хроматограммы дает ориентировочное представление о составе исследуемой смеси. Если разделяемые вещества флоуресцируют в ультрафиолетовом свете, расположение зон в колонке можно определить при помощи облучения ее ультрафиолетовыми лучами. Выявление зон бесцветных веществ осуществляется методом проявления хроматограммы. Для этого через хроматографическую колонку пропускают раствор, который дает окрашивание невидимых зон, или адсорбент обрабатывается перед началом хроматографирования соответствующим индикатором, который изменяет свою окраску в зависимости от среды образовавшейся зоны. [c.316]

При электрофорезе с последующим хроматографированием на бумагу, пропитанную раствором электролита, наносят каплю анализируемого раствора и проводят электрофорез, подключая концы листа бумаги через электроды к источнику постоянного тока. После окончания электрофореза бумагу вынимают из прибора, сушат и переносят в камеру для хроматографирования по способу восходящей или нисходящей хроматографии. После окончания хроматографирования бумагу проявляют и проводят качественные и количественные определения. Метод раздельного электрофореза и хроматографирования позволяет проводить эти две операции при различных значениях pH, что улучшает возможности разделения. [c.220]

В практике качественного газохроматографического анализа используют следующие способы идентификации компонентов 1) сравнение параметров удерживания неизвестного вещества и эталонного соединения при идентичных условиях хроматографирования 2) применение графических или аналитических зависимостей между характеристиками удерживания и физико-химическими свойствами веществ (молекулярной массой, температурой кипения, числом углеродных атомов или функциональных групп и т. д.) 3) сочетание газовой хроматографии с другими инструментальными методами 4) применение селективных детекторов. [c.190]

Сущность работы. Применение ультрафиолетовой люминесценции расширяет возможности качественного определения веществ методом бумажной хроматографии. Если компоненты разделенной смеси обладают способностью люминесцировать под действием ультрафиолетового облучения, проявление бумажной хроматограммы осуществляется при освещении высушенной после хроматографирования бумажной полоски ультрафиолетовым светом. Освещение производится ртутно-кварцевой лампой через специальный фильтр, задерживающий видимые лучи. По цвету люминесценции можно судить о природе веществ, подвергшихся хроматографированию. Этот метод нашел применение в анализе тяжелых нефтепродуктов и битумов. [c.273]

Хроматографирование для качественных методов [c.82]

Полученные при хроматографировании качественные данные о наличии фенола совпадают с данными, представленными в таблице 1. Однако метод бумажной хроматографии позволил выявить более детальную картину окисления водного раствора феиола Ог воздуха в условиях высоких температур и дав/ений. [c.370]

При наличии литературных данных по индексам удерживания можно проводить качественный анализ без применения индивидуальных веществ. Определяя индексы удерживания вещества, надо исключить адсорбционное влияние твердого носителя. Это влияние особенно велико при хроматографировании полярных веществ на неполярных жидких фазах (образование хвостов, изменение порядка выхода компонентов, изменение времени удерживания). Поэтому необходимо применять наиболее инертные носители, например, широкопористое стекло, широкопористые силикагели, инзенский кирпич, обработанный триметилхлорсиланом, хромосорб и др. Результаты идентификации компонентов, полученные методом Ковача, должны быть про- [c.121]

Газовая хроматография (ГХ), широко применяемая для анализа смесей тех органических соединений, которые могут быть переведены в газовую фазу без заметного разложения, обеспечивает их разделение, детектирование и количественное определение. Несколько сложнее обстоит дело с определением качественного состава смеси. С помощью основной характеристики ГХ анализа — времени удерживания — нельзя надежно идентифицировать те многие сотни соединений, которые элюируются из колонки при хроматографировании сложной смеси. Использование нескольких стационарных фаз для получения разных индексов удерживания целесообразно лишь для простых смесей. Поэтому анализ сложных смесей предпочтительнее проводить, сочетая газовую хроматографию с другими методами. [c.101]

Применение радиоактивных изотопов, т. е. хроматографирование смеси, один или несколько компонентов которой являются радиоактивными, облегчает задачу качественного анализа. Пятно на хроматограмме, содержащее радиоактивный компонент, можно обнаружить счетчиком Гейгера— Мюллера, либо методом радиоавтографии. Этот метод заключается в том, что бумажная хроматограмма, содержащая радиоактивный изотоп, контактирует некоторое время со светочувствительной пленкой или бумагой, после проявления которых наличие радиоизотопа легко обнаруживается по почернению того места, которое соответствует положению пятна радиоизотопа на первичной хроматограмме. Методом радиоавтографии можно обнаруживать любое неорганическое или органическое вещество, молекула которого содержит радиоизотоп. [c.124]

Несмотря на ряд преимуществ метода бумажной хроматографии (возможность разделять чрезвычайно малые количества вещества, порядка 1—0,1 мкг, простота проведения опыта и пр.) область применения его все же ограничена. Недостатки метода заключаются в невозможности осуществления разделения больших количеств веществ, в длительности процессов разделения, в недостаточной точности, так как определения сводятся главным образом к качественным и полуколичественным. Поэтому в анализе получил широкое распространение метод, восполняющий недостатки метода распределительной хроматографии на бумажных полосах — хроматографирование на целлюлозных колонках. [c.331]

Количественный анализ в ТСХ состоит из нескольких этапов подготовка и нанесение пробы на тонкослойную пластинку, разделение (хроматографирование) и проявление компонентов смеси на тонком слое сорбента, качественная и количественная оценка результатов анализа. Количественное определение вещества в пятне может быть одностадийным (по величине пятен с помощью оптических, электрохимических или ядерно-физических методов) и двухстадийным (вещества сначала отделяют от слоя сорбента извлечением растворителями или переводят в газовую фазу, а затем определяют инструментальными методами). [c.33]

Растворитель помещают в ванночку, закрепленную внутри цилиндра. Воздух в цилиндре насыщают водой и закрывают герметично стеклом. Хроматографирование проводят при 15° С. Параллельно получают хроматограмму с раствором эталонов, или свидетелей , которые наносят на ту же полосу бумаги рядом с исследуемым образцом. В качестве эталонов берут отдельные катехины или стандартный препарат чайного таннина с заранее известным составом катехина. Этим методом получены довольно четкие хроматограммы индивидуальных веществ. Метод используют для качественного анализа. [c.208]

Адсорбционная хроматография. Как адсорбент применяется окись алюминия, иногда целлюлоза. Главное внимание обращалось на разработку. методов отделения кобальта от никеля, меди, железа, урана, молибдена, марганца, ванадия, хрома и некоторых других элементов. Характеристика предложенных методов приведена в табл. 17. Хроматографирование на окиси алюминия применяется для качественного анализа катионов метод основан на различной сорбируемости окисью алюминия [c.78]

Качественный анализ бумажных хроматограмм производится в основном такими же методами, что и анализ колоночных хроматограмм. Простым и убедительным способом анализа бумажных хроматограмм является так называемый способ свидетелей. Согласно этому способу на одной и той же полосе бумаги хроматографируют исследуемую смесь веществ и отдельно набор веществ, присутствие которых в исследуемой смеси предполагается. Растворы наносятся на бумагу в один ряд. После окончания хроматографирования и проявления зон производится визуальное сопоставление положения пятен известных веществ с положением пятен неизвестных веществ. [c.326]

В настоящей работе определены качественно и количественно главные индивидуальные соединения в сланцевом генераторном газовом бензине нри помощи методов ректификации, жидкостного и газожидкостного хроматографирования . [c.169]

Качественная идентификация и количественное определение бромофоса методом тонкослойной хроматографии. Пластинку с нанесенными пробой и стандартом помещат в хроматографическую камеру, содержащую подвижный растворитель [1, 2]. Условия хроматографирования приведены в таблице 20. [c.67]

Первый пример был опубликован недавно в работе [11]. Разбавленные растворы хинолина в додекане подвергались каталитическому гидрированию, и необходимо было определить, какие получились продукты. Основной интерес представляли ароматические азотсодержащие соединения. Общая концентрация азота в продуктах гидрирования колеблется в пределах от 1000 до менее чем 1 ч. на млн. На рис. 6.5 показаны основные интересующие нас продукты, хотя они не были известны в начале работы. Вначале был проведен качественный анализ основных продуктов образца. Начальное, поисковое разделение, цель которого—определить композиционный состав образца, целесообразно проводить методом градиентного элюирования. На рис. 6.6 показана хроматограмма, полученная при разделении типичных продуктов образца при градиентной подаче растворителя (ТЖХ). Основные компоненты (они перенумерованы) собираются в средней части хроматограммы, незначительное число углеводородов (т. е. соединений, не содержащих азота) вымывается в начале и незначительное количество более полярных соединений в конце хроматографирования. Основные [c.173]

Качественной характеристикой многих красителей может служить индивидуальность их красящего вещества — в противоположность смесовым красителям. Индивидуальность красителя наиболее хорошо определяется хроматографированием его раствора на бумаге, на окиси алюминия или же электрофорезом. Метод хроматографии можно рекомендовать для очистки красителя как от побочно образующегося красителя, так и частично от избытка азо- или диазосоставляющей. [c.346]

Таким образом, бумажная хроматография дает представление о качественном составе исследуемого 4-метилпиридина, а тонкослойная хроматография дает возможность количественно определить примесь 3-метилпиридина в 4-метилпиридине. Исходя из этого, мы применили параллельно оба метода. При подготовленной установке хроматографирование на бумаге занимает 3—5 минут, а на окиси алюминия около 10— 15 минут. Точность определения 2—5%. [c.162]

Качественный состав пробы в методе бумажной распределительной хроматографии может быть установлен или по специфической окраске отдельных пятен на хроматограмме, или по величине Rf каждого компонента. В результате хроматографирования получают чаще всего бесцветную хроматограмму, которую приходится проявлять путем обработки специальным реактивом, образующим окрашенное или люминесцирующее соединение с компонентами анализируемой смеси. Метод надежен и прост, особенно если применяемый реактив специфичен. Однако вследствие недостаточного выбора специфичных реактивов метод имеет ограниченное применение. [c.166]

Качественная идентификация компонентов осуществлялась по относительным удерживаемым объемам и добавлением к исследуемой пробе известных соединений. Количественный расчет хроматограмм проводили методом внутренней нормализации по площадям пиков с введением поправочных коэффициентов. Поправочные коэффициенты, полученные при хроматографировании искусственных смесей чистых веществ в условиях, аналогичных рабочим параметрам исследования, имел следующие величины [c.137]

Систему растворителей для проявления выбирают на основании предварительных данных по разделению методом качественной ТСХ (см. гл. 6). Как правило, применяют восходящую хроматографию, хотя в ряде случаев используется и нисходящая хроматография [23, 24]. Количество повторных проявлений зависит от подвижности компонентов смеси. Если хроматографирование проводится на силикагеле или окиси алюминия, обычно достаточно однократного проявления, в то время как в случае микрокристаллической целлюлозы часто требуется многократное проявление. [c.52]

Лаппин и Кларк успешно пользовались этим методом при определении карбонильных соединений в водном растворе с последующим хроматографированием, чтобы сконцентрировать гидразон, и элюированием его из колонки [87, 88] для идентификации альдегидов и кетонов в ходе качественного органического анализа (интенсивное окрашивание, обусловленное высокими концентрациями карбонильного соединения, позволяет различать визуально следы загрязнений и главный компонент) для определения числа карбонильных групп в соединении с известной молекулярной массой [88]. [c.124]

С целью быстрой качественно оценки природы неизвестных и.ли разделенных другими методами фракций жирных кислот могут быть также применены методы бумажной [224, 331 ] или тонкослойной хроматографии [224, 330 ] с использованием в качестве стационарной фазы слоя карбамида. Для проведения бумажного хроматографирования полосы целлюлозной бумаги (200x30 мм) пропитывают 20%-ным раствором карбамида в метаноле и высушивают на воздухе. После нанесения исследуемой смеси жирных кислот в свободном виде проводят элюирование обычным путем в камере с 20 /о-ным раствором карбамида. Для цветового проявления полосы опрыскивают этанольным раствором бромкрезолового пурпурного и выдерживают в парах аммиака, на голубовато-фиолетовом фоне проявляются желтые пятна. [c.151]

Для углубленного исследования состава товарных и отработанных (окисленных) пластичных смазок предложены схелш многоступенчатого препаративного разделения и анализа [541, 565—. 570 ], в основу которых входят препаративные методы — ионообменная и жидкостная адсорбционная хроматография, экстракция, а также аналитические методы, газо-жидкостной и тонкослойной хроматографии, ИК-спектроскопия. Сначала проводят качественный. анализ пластичных смазок неизвестного состава (см. разд. III.2.1). При обнаружении в пластичной смазке солей уксусной и других водорастворимых низших жирных кислот разделение и анализ осуществляют по схеме 4, предусматривающей выделение и количественное определение этих кислот. Методически проще проводить исследование пластичных смазок по схеме 5, которая в виде различных модификаций жидкостного хроматографирования на активном и неактивном силикагелях применяется также для определения [c.332]

Начиная с 1958 г. хроматография в тонком слое стала самым простым, дешевым и одним из наиболее эффективных методов, пригодных для разделения малолетучих компонентов органических смесей, Этот метод широко используется многими лабораториями при проведении научных исследований, а также для качественного контроля промышленных процессов оргатшческого синтеза. Позднее техника хроматографирования в колонке была радикально переосмыслена, и теперь этот метод мало отличается по легкости, эффективности и скорости разделения от газовой хроматографии. [c.11]

Применение других растворителей (метилбутил- и пропилкетонов, содержащих НС1) рассмотрено в работе [80]. О неирерьшном хроматографическом разделении Li и К см. [81]. Хроматография на бумаге нашла в основном применение для качественного анализа щелочных металлов и для приближенного количественного их определения. Описано выделение с ее помощью изотопа s - из хлорида бария, облученного нейтронами [77], и из азотнокислого раствора облученного урана [69], причем в последнем случае опыты могут проводиться на колонках из целлюлозы. Для качественного разделения смеси щелочных металлов наиболее пригодны смеси, содержащие фенол [64, 67], и, в частности, фенол-метанольная смесь с H L Недостатком метода хроматографирования на бумаге является то, что разделение может производиться с максимальным количеством (100— 200 мкг) металла. Чувствительность химических методов обнаружения редких щелочных металлов в зонах — 1 —5 мкг. Эти два обстоятельства су- [c.42]

Несмотря на широкое применение, практическую важность и перспективность этого метода разделенгтя углеводородных смесей, он остается в значительной мере еще эмпирическим. Это обт.ясняется главным образом отсутствием надежных сведений об адсорбционных свойствах углеводородов разного строения на адсорбентах разно11 природы и структуры. Адсорбция данного вещества сложным образом зависит от строения его молекулы, от химической природы и строения поверхности адсорбента, от структуры и размеров его пор, от природы и концентрации компонентов смеси. Для развития теоретических представлений об адсорбционном разделении углеводородных смесей необходима систематическая работа по изучению этих факторов, начиная с простейших систем й постепенно переходя к системам все более сложным. С другой стороны, следует систематизировать работы по хроматографическому разделению смесей чистых углеводородов, а также нефтей и нефтепродуктов с целью выявления общих, хотя бы качественных закономерностей, которые должны быть детально исследованы при помощи хроматографирования модельных систем. [c.35]

Для определения качественного и количественного состава аминокислот белка дрожжей, активного ила и других биомасс предназначен метод, основанный на колориметрическом определении количества каждой аминокислоты, выделенной хромато-графией на бумаге. Мономерные аминокислоты определяют после их экстракции из пробы горячей водой. Полимерные аминокислоты, составляющие макромолекулы белка, предварительно гидролизуют [75]. Для выделения аминокислот проводят нисходящее, многократное хроматографирование двумя растворителями. Проявителем служит слабокислый раствор нингид-рина, который с аминокислотами дает сине-фиолетовое соединение (ДИДА) по уравнению [c.217]

Для разделения бесцветных соединений методом хроматографии можно использовать превращение их в азокрасители. Амины можно подвергать диазотированию и сочетанию. Для открытия соединений, способных сочетаться с солями диазония, эта реакция может быть использована при хроматографировании с таким же успехом, как при колориметрировании. Этим способом можно качественно и количественно определять примесь а-нафтола к р-нафтолу, G-кнслоты к R-кислоте и изомерных и побочных продуктов ко многим другим промежуточным продуктам для красителей. Эстрон, эстрадиол и эстриол были разделены после сочетания с солью диазония. Для разделения сахаров (и стеринов) была использована хроматография эфиров п-фенилазобензойной кислоты. Метиловые эфиры аминокислот были разделены методом хроматографической адсорбции N-азобензол-п-сульфонильных производных на окиси алюминия, обработанной 10%-ным раствором уксусной кислоты в метиловом спирте. Холевая и дезоксихолевая кислоты были разделены после этерификации с помощью обром-я-метилазобензола. Этиловые эфиры аминокислот дают с азобензол- -изоцианатом окрашенные производные, разделяющиеся на окиси алюминия. [c.1505]

Справедливость ряда Челинцева была экспериментально проверена Кузнецовым для железа (9] и ванадия [10]. Представлялось интересным провести некоторые, хотя бы качественные, сопоставления для интерёсующего нас случая. Для этого была использована вышеописанная техника бумажной хроматографии. Условия хроматографирования выдерживались те же, что и раньше. Были исследованы представители разных классов соединений. В то время как в с 1учае экстракции не могут быть применены растворители, безгранично смешивающи я с водой, в методе бумажной хроматографии эти растворители могут быть использованы (см. ниже). Полученные данные приведены в табл. 1. [c.30]

Одним из известных методов качественного и количественного анализа высших жирных кислот является обращенно-фазовая распределительная хроматография на бумаге. Необходимая для этого метода гид-рофобизация бумаги осуществляется пропитыванием ее силиконовым и парафиновым маслом, раствором алюмокалиевых квасцов и другими гидрофобными агентами. Для идентификации кислот на хроматограмме используют их реакции по карбоксильной группе (образование окрашенных солей с металлами, изменение окраски индикаторов) и реакции присоединения и окисления по двойным связям. Количественный анализ кислот проводят фотометрированием пятен с помощью денситометра или экстракцией отдельных пятен различными растворителями и последующим количественным определением кислот в полученных элюатах обычными методами (титрование и т. д.). При хроматографировании на бумаге в обращенно-фазовой системе возможно разделение насыщенных [c.196]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология