Разделение на модифицированной целлюлозе

Биологические дисперсии обычно содержат частицы размером примерно от 0,2.10 до 10+ мкм. Используемые для разделения таких тонкодисперсных суспензий мембраны изготовляют из полисульфона, полиамидов, полиэфиров, модифицированной целлюлозы. Обычно мембраны имеют двухслойную структуру, состоящую из плотного ультратонкого сепарирующего слоя толщиной примерно 0,2 мкм и крупнопористого несущего подслоя толщиной около 100 мкм. [c.63]

РАЗДЕЛЕНИЕ НА МОДИФИЦИРОВАННОЙ ЦЕЛЛЮЛОЗЕ [c.122]

Какие белки синтезируются во время дробления Относительно немногие. На рис. 15-8 показаны профили растворимых белков зародышей морского ежа на двух стадиях развития. Растворимые экстракты наносят на цилиндрическую колонку, содержащую мелкие частички химически модифицированной целлюлозы (ДЭАЭ-целлюлозы). Белки адсорбируются в верхней части колонии. После этого начинают медленно и осторожно добавлять сверху раствор, постепенно увеличивая концентрацию соли, и собирают фракции после прохождения раствора через колонку. При использовании раствора соли низкой концентрации практически все белки остаются связанными с целлюлозой. В растворе соли высокой концентрации (около 1 М) связи разрушаются и все белки вымываются. (Принято говорить, что белки элюируют с колонки.) При промежуточных концентрациях одни белки вымываются, а другие пет, в зависимости от размера и электрического заряда. Это стандартный метод разделения белков. [c.277]

Целлюлозу высокого выхода получают модифицированными сульфитными и сульфатными методами, отличающимися от аналогичных методов варки целлюлозы меньшим расходом химикатов и (или) снижением продолжительности и температуры варки, а-также наличием ступени размола после варки. Сульфитную ЦВВ можно получить сульфитной (кислой), бисульфитной (гидросульфитной) и щелочно-сульфитной варками (см. табл. 16.2). При получении ЦВВ сульфитной (кислой) варкой (на кальциевом, магниевом или натриевом основании) скорость реакции делигнификации меньше из-за более низкой температуры (120— 130 С) и меньшей кислотности варочного раствора, т. е. меньшей концентрации диоксида серы, чем при варке целлюлозы. Для разделения на волокна по сравнению с полуцеллюлозой требуется меньше энергии, если выход ЦВВ не превышает 70—80 % [345]. Обычно выход небеленого полуфабриката лежит между 60 и 70 %. Сульфитную ЦВВ часто производят на сульфитцеллюлозных заводах, вырабатывающих газетную бумагу, причем по сравнению с сульфитной целлюлозой экономится до 30 % древесины [257]. [c.346]

Фракционное разделение. Различие в плотности сополимеров целлюлозы и смесей целлюлозы и гомополимеров (табл. 3) позволяет отделить их друг от друга. Привитой сополимер с самым высоким содержанием полиакрилонитрила характеризуется самым низким значением плотности. Значения плотностей для сополимеров довольно хорошо соответствуют значениям, рассчитанным по аддитивной схеме из известных плотностей целлюлозы и полиакрилонитрила. Увеличение концентрации аморфного полиакрилонитрила и уменьшение плотности сополимера оказывают незначительное влияние на разрывную прочность модифицированных волокон [13]. [c.225]

При хроматографировании на ионитах скорость элюирования обычно значительно меньше, чем при адсорбционной хроматографии. При препаративном разделении на синтетических ионитах объем буферного раствора, протекающего через колонку за 1 час, приблизительно равен 20—50 (> объема колонки. При хроматографии высокомолекулярных веществ на модифицированной целлюлозе скорость протекания элюата составляет приблизительно 5 мл1час на каждый сечения колонки. Более мед- [c.556]

Моно- и дифосфаты являются кислыми соединениями, и их кислотная природа предопределяет использование ионообменной хроматографии для их выделения и разделения. Адсорбция смеси фосфатов на аниообменной смоле с последующей элюцией их возрастающей концентрацией кислоты или соли является стандартным приёмом для выделения и анализа нуклеотидов, Особенно удобны ддя этих целей модифицированные целлюлозы и декстраны, обеспечивающие наибольшую селективность. Нуклеотиды обладают сильным поглощением в ультрафиолетовой части спектра за счёт гетероциклических соединений, благодаря чему могут быть легко обнаружены в элюате и количественно оценены. [c.114]

Хроматографическое поведение различных продуктов расш епления нуклеиновых кислот в данном растворителе можно предсказать с некоторой точностью из физических данных. Рандерат [73] считает это суш ественным преимуш еством аналитической ионообменной хроматографии в тонком слое по сравнению с распределительной и адсорбционной хроматографией. Рандерат [73] указал на то, что метод ХТС на модифицированной целлюлозе можно также использовать для микропрепаративного разделения. [c.447]

Для оптимального разделения продуктов гидролиза нуклеиновых кислот на колонках с ионообменными смолами необходим градиент элюирования, т. е. непрерывное или ступенчатое изменение концентрации ионов или pH вымываюш его раствора или того и другого. Рандерат [73] сообш ает, что на ионообменном слое из модифицированной целлюлозы (эктеола или ДЭАЭ) можно добиться разделения, наблюдаемого на колонках с ионообменной смолой (дауэкс) только при применении градиента элюирования. Этот автор предполагает, что при использовании метода ХТС вследствие фронтального разделения растворителя на слое возникает градиент, которым и объясняется хорошее разделение . [c.447]

Для разделения в препаративных целях преобладающим методом является жидкостная колоночная хроматография, а для нестабильных веществ она является единственным методом, помимо тонкослойной хроматографии. Классическими адсорбентами для колоночной хроматографии являются силикагель, окись алюминия и кремневая кислота, позднее стали использоваться также силикагель и окись алюминия, пропитанная раствором нитрата серебра, и менее часто флорисил и древесный уголь. Для разделения терпеновых метаболитов и сильнополярных тер-пеновых веществ используются также различные типы ионообменных смол, сефадексы и модифицированные целлюлозы. Несмотря на то что вплоть до настоящего времени терпеновые вещества разделялись преимущественно методами. [c.249]

При фракционировании белков обычно применяют иониты, содержащие карбоксиметильную и диэтиламиноэтильную функциональные группировки, однако эти иониты не вполне подходят для разделения пептидов. Как правило, почти все кислотные пептиды адсорбируются на катионите при pH 3,0—3,5 в буфер ном растворе с низкой ионной силой, откуда могут быть элюи рованы при рн 6—9 и при более высокой ионной силе. Карбо ксилсодержащие иониты слабо диссоциированы при pH 3, и следовательно, обладают пониженной емкостью. Кроме того в разбавленных электролитах, т. е. в условиях проведения сорб ции, слишком велика буферная емкость ионита. Скачкообразное изменение pH элюента приводит на практике к одновременному элюированию группы пептидов. Аналогичные недостатки свойственны ионитам с ВЕАЕ-группой, особенно при работе с летучими буферными растворами. Изменение ионной силы и значения pH во время элюирования вызывает сжатие столбика сорбента, нарушение скорости потока и искажение профиля элюирования. В наибольшей степени этот эффект выражен у ионитов на основе слабосшитых гелей, однако в какой-то степени это свойство характерно и для модифицированных целлюлоз. И тем не менее некоторые типы ионитов на основе целлюлозы находят применение для разделения небольших пептидов. К ним относятся фосфоцеллюлоза, ЗЕ-целлюлоза, 8Р-целлюлоза и РАЕ-сефадекс. [c.411]

Х8 [74, 80]. Для разделения изомеров метилтетрагидроптери-динов применяют катионит дауэкс 50 [81] или СМ-сефадекс [70]. Из модифицированных целлюлоз для этих целей используют также E TEOLA-целлюлозу [73, 74]. [c.196]

Для разделения этих веществ используются преимущественно аниониты, поскольку как нуклеотиды, так и нуклеиновые кислоты содержат остатки сильной фосфорной кислоты. Для такого разделения пригодны многие готовые иониты, но большинство исследователей пользуется лишь немногими из них. Это прежде всего аниониты на основе полистирола (дауэкс 1 и 2), модифицированная целлюлоза (ОЕАЕ-целлюлоза) и иониты типа сефадекс (DEAE-сефадекс). [c.327]

На модифицированной целлюлозе разделение идет несколько хуже, чем на ионообменных смолах в принципе в этой случае разделение происходит по числу зарядов в молекуле., Помимо этого, модифицированная целлюлоза заметно отличается от полистирольных анионитов своей низкой емкостью.,, Для элюирования успешно пользуются бикарбонатом триэтилзммо-ния, который легко удалить из продуктов разделения перегонкой с водой. Бикарбонат триэтиламмония можно приготовить, [c.329]

Зейбин и Роллинс [388] проводили разделение на неорганических ионообменниках —фосфате циркония и водном оксиде циркония. Оба эти соединения — катиониты, однако последнее в кислой среде проявляет также свойства анионита. Эти иониты можно использовать без связующего, если слой не погружать непосредственно в элюент. В противном случае необходимо добавить 3 % крахмала. (Приготовление суспензий целлюлозных ионообменников описано в разделе, посвященном модифицированным целлюлозам.) [c.83]

На модифицированной целлюлозе (карбоксицеллюлоза) успешно разделен ВЬ-1,2-диаминопропан [225—229]. [c.47]

Разделение фосфолипидов на классы обычно осуществляют с помощью адсорбционной хроматографии на колонках с кремневой кислотой, силикагелем или тонкослойной хроматографией на силикагеле. В ряде случаев проводят предварительное разделение кислых и нейтральных фосфолипидов на колонках с модифицированными целлюлозами (ДЭАЭ- и ТЭАЭ-целлюлозы) [7, р. 272]. Для вымывания отдельных классов фосфолипидов при хроматографировании на колонке с кремневой кислотой преимущественно применяют смесь хлороформ—метанол с возрастающим количеством метилового спирта (4 1, 3 2, 1 4). При этом элюируются фосфолипиды в следующей последовательности фосфатидилэтаноламины, фосфоинозитиды, фосфатидилхолины, сфингомиелины. [c.189]

В ранних экспериментах олигорибонуклеотиды, полученные путем расщепления очищенных тРНК рибонуклеазой, фракционировали с помощью ионообменной хроматографии на DEAE-целлюлозе [124]. Чтобы установить полную структуру тРНК, сравнивали состав и нуклеотидные последовательности двух перекрывающихся наборов олигорибонуклеотидов. Эта трудоемкая процедура позволяла определять нуклеотидную последовательность лишь небольших РНК, содержащих остатки модифицированных нуклеотидов, которые выступают в роли структурных маркеров . Работа Сенгера [121], предложившего использовать высоковольтный ионофорез на модифицированной целлюлозе для разделения продуктов частичного гидролиза РНК ри- [c.188]

Для разделения методом ионообменной хроматографии высокомолекулярных соединений (например, белков и нуклеопротеидов) широко пользуются модифицированной целлюлозой. Обычные смолы с большим количеством поперечных связей для этой цели не подходят, поскольку они непроницаемы для крупных молекул. Целлюлоза же, напротив, является хорошим ионообменником, во-первых, потому, что имеет волокнистую структуру, а, во-вторых, большинство функциональных групп у нее расположено на поверхности волокон, в результате чего они легко доступны для макромолекул. Особенно хорошим катионообменником является карбоксиметил-целлюлоза (КМ-целлюлоза), в которой СНгОН-группа замещена на СН ОСНгСОО-группу одним из наиболее эффективных анионооб-менников является диэтиламиноэтилцеллюлоза (ДЭАЭ-целлюлоза). В последнее время широко применяется ГЖХ. на ионообменных материалах. [c.92]

Если известны коэффициенты распределения, то можно решить вопрос о разделении веществ на данном сорбенте. Процесс сорбции осуществляют двумя методами статическим и динамическим. Последний положен в основу хроматографических методов разделения (см. гл. 8). В анализе используют разнообразные сорбентьг активные угли, ионообменные и хепатообразую-щие синтетические смолы, обычные и химически модифицированные кремнеземы и целлюлозу, сорбенты на неорганической основе. [c.241]

Таблица 7.7. Селективность, наблюдаемая при разделении серии бензоатов и дибензоатов на силикагеле, модифицированном трибензоатом целлюлозы [227] (с разрешения изд-ва)

Аналогично, ранний метод синтеза FAD, описанный Тоддом и сотр. [24] и включающий конденсацию защищенного аденозин-бензилхлорфосфата с таллиевой солью рибофлавин-5 -фосфата с последующим удалением защитных групп, был модифицирован и улучшен в работах нескольких групп исследователей. Наиболее известным является метод Моффата и Кораны [25], заключающийся в конденсации рибофлавин-5 -фосфата с аденозин-5 -ами-дофосфатом схема (15) . Этими авторами описана также удобная методика хроматографического разделения флавиновых коферментов на анионообменной целлюлозе. [c.590]

Распределительная хроматография основала, на распределении веществ между двумя несмешивающимися жидкими фазами. При разделении биополимеров используют водно-органические фазы. Неподвижная жидкая фаза формируется в результате ее закрепления на пористом нерастворимом носителе силами полимо-лекулярной адсорбции. Если носитель по своей природе гидрофилен (целлюлоза, силикагель, стекло), то неподвижной является более гидрофильная жидкая фаза. Если же полимер, например силикагель, модифицирован объемистыми гидрофобными радикалами, то неподвижной является более гидрофобная фаза. В этом случае разделение называют хроматографией с обращенной фазой. [c.238]

Метод основан на визуальном определении содержания тяжелых металлов в хроматографической зоне по цветной реакции, возникающей на слое модифицированного сорбента, нанесенного на пластинку, после разделения металлов методом тонкослойной хроматографии (ТСХ). В качестве сорбента используют микрокристаллическую целлюлозу, содержащую группы азопирокатехина, которые взаимодействуют с рядом металлов с образованием окрашенных зон при различных pH [c.95]

Антрон-сернокислотный реагент используют также для автоматического контроля разделения моносахаридов методом распределительной хроматографии на сшитых декстранах, содержащих четвертичные ионы аммония в сульфатной форме (этанол— вода) [28, 63, 64]. Точность метода составляет 5%. Элюат смешивают с реагентом (2 г антрона на 1 л серной кислоты) в соотношении 1 2. Поршень, применяемый для подачи реагента в анализируемую систему, а также трубопроводы обычно покрывают политетрафторэтиленом для предотвращения коррозии. Далее, элюат и реагент смешиваются, и при прохождении раствора через трубопровод (внутренний диаметр 1,2 мм), покрытый политетрафторэтиленом и погруженный в нагревательную баню с температурой 100°С, проявляется окрашивание. Время реакции составляет около 1 мин Поглощение измеряют при 625 нм в 2-мм ячейке проточного типа и регистрируют автоматически. Для разделений на колонке, заполненной целлюлозой, этот метод был модифицирован [24], так как -бутанол, содержащийся в подвижной фазе (градиентные смеси вода—н-бутанол—этанол), мешает реакции между сахаридом и антроном. [c.73]

Понятие молекулярное сито с большим правом, чем к цеолитам, можно отнести к полупроницаемым мембранам. В первых работах по диализу мембранами служили пленки животного происхождения [7]. В настоящее время для диализа применяют преимущественно пленки из целлюлозы (Visking или Kalle). Эти пленки проницаемы в основном лишь для небольших молекул. Именно поэтому диализ вот уже в течение нескольких десятилетий используется как стандартный метод обессоливания высокомолекулярных соединений в водных растворах. Набухание мембран в растворе хлористого цинка или механическое растягивание значительно увеличивают их проницаемость [8]. Через такие мембраны довольно быстро могут диффундировать даже белки с молекулярным весом до 100 000 [8—10]. Из агара и агарозы получают мембраны, которые в набухшем состоянии полупроницаемы для белков [11] и даже для вирусов [12]. Изме- рение скорости диффузии через модифицированные мембраны из целлюлозы, обладающие ярко выраженной избирательностью, открывает новые возможности для изучения пространственной структуры сахаров [13], аминокислот [14] и пептидов [15]. Для такого тонкого разделения Крэйг предложил термин дифференциальный диализ [16]. [c.13]

Распределительная колоночная хроматография на целлюлозном порошке получила широкое распространение для разделения самых разнообразных веш еств [1]. После работ Петерсона и Собера [2] большое значение стали приобретать модифицированные ионообменные целлюлозы как адсорбенты для белков и нуклеиновых кислот. [c.270]

Гель-хроматография на сефадексе LH-20 в системе хлороформ— метанол — гексан оказалась особенно эффективным методом выделения каротиноидов из их смеси со стероидами [365, 366]. Для отделения каротинов от растительных белков и от других пигментов можно использовать ионообменную хроматографию на DEAE-целлюлозе в 0,5 М растворе хлорида натрия [367]. В работе [368] описан модифицированный вариант обычного метода анализа каротинов и ксантофиллов, предусматривающий периодическое обновление смеси силикагеля 60 и хайфлосуперцела [368]. Время разделения на новой колонке составляет 30 мин, причем ее можно использовать четырежды. [c.249]

Хроматографирование соединения с молекулами больших размеров лучше проводить на высокопористой целлюлозе, модифицированной различными заряженными группами. Из таких ионообменников наибольшее распространение для фракциони-)Ования кислых полисахаридов получила DEAE-целлюлоза 107]. Типичным примером ее применения может служить фракционирование полидисперсных полисахаридов растительных камедей на этом ионообменнике в фосфатной форме с использованием фосфатных буферов (от 0,1 до 0,5 М) 103, 104]. Рекомендуется также разделение на DEAE-целлюлозе в карбонатной форме в градиенте концентрации (О—>-0,5 М) карбоната аммония [108]. [c.26]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология