Хроматография флуориметрический

Использование не самого образца, а его производных в жидкостной хроматографии позволяет увеличить чувствительность и селективность метода. Иногда для получения производных необходимо предварительное концентрирование образца. Для многокомпонентных смесей обычно требуется предварительное разделение на более простые по составу фракции, чтобы исключить перекрытие зон в конечной хроматограмме или удалить примеси, влияющие на характеристики колонки. Некоторые соединения не обладают способностью поглощать свет, и для их определения с помощью высокочувствительных фотометрического или флуориметрического детекторов необходимо получить производные, регистрируемые этими детекторами. Присоединяя способную к флуоресценции группу к окси- или аминогруппе образца, можно обнаружить очень малые концентрации флуоресцирующих веществ. [c.68]

Да означает, что обработанный образец может непосредственно вводиться в хроматограф. При использовании флуориметрического детектора Х1 соответствует максимуму возбуждения (первичная), а Ъ — максимуму эмиссионного излучения (вторичная). [c.71]

В качестве детекторов в жидкостной хроматографии обычно используют спектрофотометрический детектор в переменной (190—900 нм) или фиксированной (чаще при 254 нм) длиной волны, рефрактометрический или флуориметрический детекторы. Могут быть использованы и другие детекторы, например ионизационно-пламенный, электрохимические, масс-спектрометрический и т. д. [c.111]

На рис 5.8 представлена схема флуориметрического детектора хроматографа Милихром-5-7 . Ультрафиолетовое излучение от лампы ДДС-30 (1) через оптическую систему (2) попадает на дифракционную решетку (3). Поворотом дифракционной решетки нужное нам монохроматическое излучение направляется через щель монохроматора (4) на кювету (5), к которой присоединена хроматографическая колонка (6). Анализируемое флуоресцирующее вещество, попав в кювету, дает эмиссионное излучение, которое сферическим зеркалом (7) направляется через светофильтр (8), отрезающий ненужное излучение. Пройдя светофильтр, эмиссионное излучение регистрируется фотоэлектронным умножителем (9). Уф излучение, прошедшее через кювету, поглощается заглушкой (10). [c.58]

Рис. 5.8. Схема флуориметрического детектора хроматографа "Милихром-5-7"

Метод основан на использовании жидкостной хроматографии с флуориметрическим детектированием. Отбор проб производится с концентрированием на фильтр. Определению не мешают другие ПАУ (полиароматические углеводороды). Время выполнения измерения, включая отбор и подготовку проб, - от одного до четырех часов. [c.97]

Хроматограф жидкостный Милихром-5-7 с флуориметрическим детектором. [c.98]

Таким образом, за основу ФЛД хроматографа "Милихром-5" был взят ФЛД хроматографа "ХЖ-1313". Для работы с колонками с внутренним диаметром 2 мм было необходимо изменить размеры щелей монохроматора, перекомпоновать детектор под конструктив "Милихрома-5" и обеспечить стыковку ФЛД через блок управления микропроцессорный со встроенным интегратором "Милихрома-5" и компьютером. Все эти задачи были успешно решены, и по своим свойствам ФЛД-детектор "Милихрома-5", разработанный на основе ФЛД хроматографа "ХЖ-1313", до их пор является одним из лучших ФЛД с обычными источниками света. ФЛД "Милихрома-5" относится к типу флуориметрических детекторов со входным монохроматором и светофильтрами на эмиссионное излучение. [c.124]

При выборе детектора для вашего жидкостного хроматографа помните, что спектрофотометрические детекторы предназначены для анализа веществ, хорошо поглощающих УФ-излучение. Если ваши соединения плохо поглощают УФ-излучение, но можно легко получить производные этих соединений [9], хорошо поглощающие УФ-излучение, то также можно использовать СФД-УФ флуориметрические детекторы предназначены для анализа веществ, имеющих природную флуоресценцию, или для анализа веществ, для которых можно легко получить флуоресцирующие производные [9 ] рефрактометрические детекторы предназначены для анализа веществ, не поглощающих УФ-излучение и нефлуоресцирующих, наиболее часто этот тип детектора используется для анализа сахаров [9] вольтамперометрический детектор (часто называемый электрохимическим) предназначен для анализа легко окисляемых или восстанавливаемых соединений в высококлассных исследовательских лабораториях, так как требует чрезвычайно тщательной подготовки реактивов, особенно воды. Вольтамперометрический детектор в основном применяется для прямого определения катехоламинов в крови или ликворе [9]. Бессмысленно требовать проведения анализа, например, сахаров на жидкостном хроматографе, укомплектованном СФД-детектором. [c.126]

В табл. 1 приведен ряд флуориметрических определений. Выбор был сделан таким образом, чтобы дать примеры всех упомянутых выше методов сканирования. Единственное исключение — способ QR, который особенно широко используется в хроматографии липидов. [c.110]

Метод обладает рядом преимуществ по сравнению с бумажной хроматографией, заключающихся в том, что эти тонкие пленки ускоряют процесс диффузии, четче определяют степень разделения компонентов и дают возможность проявлять соединения с применением более широкого ряда реагентов. Тонкий слой обычно изготовляют из силикагеля, окиси алюминия, кизельгура или различных типов целлюлозы. Стеклянные пластинки, обработанные таким образом, обеспечивают получение настолько хороших хроматограмм, что они пригодны для фотометрического и флуориметрического анализов. [c.265]

Хромато-флуориметрический метод — выделение продуктов реакции методом тонкослойной хроматографии и последующее флуориметрическое определение (сравнение со стандартом) [257]. [c.104]

Применение газо-жидкостной и тонкослойной хроматографии при идентификации загрязнений воздуха флуориметрическим методом. (Полициклические ароматич. углеводороды.) [c.244]

В жидкостной хроматографии применяют селею-ивные детекторы (амперометрический, флуориметрический и др.), способные детектировать очень малое количество вещества. Очистка образца до ввода в жидкостной хроматограф минимальна, Циередко его вводят без предварительной обработки, и без получения производных, что часто невозможно при применении других методов анализа. Наконец, в жидкостной хроматографии возможно создание уникального диапазона селективных взаимодействий за счет изменения подвижной фазы, что значительно улучшает разрешающую способность всей хроматографической системы. Работа с микропримесями налагает ряд требований на весь процесс разделения. Особенное значение имеет разрешающая способность колонки, выбор детектора, предварительная обработка образца и построение калибровочного графика. Правильный выбор условий хроматографирования позволяет повысить чувствительность, надежность и воспроизводимость результатов, что очень актуально при работе с микропримесями. [c.84]

Нитрат-иоиы часто мешают последующему определению рения. При спектрофотометрических определениях они окисляют восстановитель и рений в степени окисления менее семи, осаждаются при весовом определении, соэкстрагируются при экстракционнофотометрическом и флуориметрическом определениях. Для отделения или уменьшения концентрации нитрат-ионов растворы выпаривают до небольшого объема ( == 1—2 мл) иа водяной бане или нагретом блоке с температурой < 110° С более полное удаление нитрат-ионов достигается при многократном выпаривании растворов с соляной кислотой. Показана возможность применения для этой цели выпаривания с серной кислотой до начала выделения ее паров. Иногда рекомендуют применять методы ионообменной хроматографии. Нитрат-ионы можно удалить из сильнокислых растворов путем восстановления их до низших окислов формальдегидом [325]. [c.234]

В ходе развития ЖХ было испытано более 20 типов детекторов для ЖХ. Основную массу предложенных детекторов можно разделить на оптические, электрические, электрохимические и детекторы для измерения радиоактивных веществ [4, 20, 62, 67—71). В некоторых детекторах используют сразу несколько принципов детектирования, причем такие детекторы можно разделить на две группы в первой — механическое совмещение нескольких разных или одинаковых типов детекторов в единой конструкции, во второй — регистрации различных фиЬико-химических явлений в одной ячейке детектора. К первой группе детекторов можно отнести электрохимические детекторы (ЭХД) с двумя рабочими электродами, один из которых окислительный, а другой восстановительный. Типичными представителями второй группы являются кварцевый флуориметрический — фотоакустический — фотоионизационный детектор или ультрафиолетовый — электрохимический детектор. В настоящее время для жидкостной хроматографии более 60 фирм серийно производят ультрафиолетовый абсорбционный детектор на фиксированную длину волны, более 50 фирм — спектрофотометрические с переменной длиной волны, более 40 фирм — флуориметрические детекторы, более 30 фирм — рефрактометрические, более 15 фирм — электрохимические. [c.265]

Методика количественного анализа атмосферного воздуха н воздуха рабочей зоны на содержание бенз(а)ннрена методом ВЭЖХ с использованием хроматографа Милихром-5-7 с флуориметрическим детектором [c.97]

Термооптический метод аппаратурно можно объединить с абсорбционным методом регистрации, рефлектометрическим, рефрактометрическим, флуориметрическим и (или) нефелометрическим, что делает термооптический спектрометр многофункциональным прибором. Как пример можно привести термолинзово-флуориметрические методики определения пикограммовых количеств комплексов переходных металлов или комбинированный термооптический-рефрактометрический детектор дпя жидкостной хроматографии и капиллярного электрофореза. [c.341]

Флуориметрический метод определения мик опримесей. Метод состоит в подготовке вещества к анализу и оценке интенсивности излучения. Вследствие высокой чувствительности метода необходимо применять реагенты особой чистоты или химически чистые. Во многих случаях реагенты дополнительно очищают перекристаллизацией, перегонкой, экстракцией, хроматографией. Хранить высокочистые вещества рекомендуется в посуде из полиэтилена или кварца. Особое. внимание должно быть обращено на качество применяемой воды. В дважды дистиллированной воде, полученной -в кварцевом перегонном аппарате, содержание примесей снижается до 10 —10" %. Во многих случаях для люминесцентного анализа вполне достаточно визуального сравнения интенсивности и цвета излучения при возбуждении ультрафиолетовым светом. Сравнивают интенсивность излучения анализируемого раствора с набором стандартных растворов. Для этого готовят раствор исследуемой пробы и серию стандартных растворов с известным содержанием определяемой примеси. Во все растворы добавляют соответствующие реагенты и по истечении времени, необходимого для образования люминесцирующего соединения, сравнивают интенсивность люминесценции анализируемого раствора с эталонными растворами и таким образом находят содержание примеси в анализируемой пробе. Содержание примеси л в процентах рассчитывают по формуле [c.64]

Флуориметрический метод определения микропримесей состоит из подготовки анализируемого вещества к анализу и оценки интенсивности его излучения. Высокая чувствительность метода требует применения реактивов с квалификацией особой чистоты или химически чистый . Во многих случаях реактивы подвергаются дополнительной очистке методами перекристаллизации, перегонки, экстракции, хроматографии. [c.150]

Хроматографический метод разделения основан на малых различиях в таких свойствах веществ, как растворимость, сорбируемость, летучесть, пространственная структура, скорость ионного обмена. Поэтому основой развития хроматографии является понимание химических взаимодействий, определяющих эти свойства. Впечатляет рост масштабов использования жидкостной хроматографии, достигнутый с момента ее появления в 1970 г. В настоящее время на приобретение жидкостных хроматографов, производимых в основном в США, ежегодно затрачивается 400 млн. долл. Такой быстрый рост стал возможен благодаря применению новых приемов и средств, обеспечивших значительное повышение скорости анализа и его разрешающей способности, в частности благодаря использованию давления и подвижных фаз переменного состава (градиентного режима). Повысить селективность разделения и увеличить срок службы колонки позволяют неподвижные фазы с привитыми молекулами . Применение электрохимических, флуориметрических и масс-спектрометрических детекторов повысило чувствительность обнаружения разделяемых компонентов вплоть до 10 г. Газовая хроматография старше жидкостной примерно на десятилетие, но и в ней достигнуты в последнее время заметные успехи. Современные высокоэффективные методы позволяют осуществить разделение всего за несколько десятых секунды. Вне лаборатории применяются портативные хроматографы размером со спичечную коробку. Сложные смеси можно разделять буквально на тысячи компонентов, применяя капиллярные колонки из кварцевого стекла, которые производятся непосредственно по той же технологии, что и оптические волокна для линий связи. Наконец, стало возможно разделять соединения, раз-личаюцщеся только по изотопному составу. [c.241]

Избирательное концентрирование, при котором из пробы выделяется один элемент или последовательно ряд элементов, применяется обычно в сочетании с фотометрическим, флуориметрическим, активационным или пламенно-фотометрическим методами определения, т. е. в тех случаях, когда одновременное присутствие в концентрате нескольких элементов может исказить результаты анализа. Очевидно, что при избирательном концентрировании необходим тщательный выбор экстрагируемого вещества, органического растворителя и реагента," pH водной фазы, а также маскирующих агентов. Для избирательного концентрирования весьма полезным оказывается изменение валзнтного состояния элементов, учет кинетических особенностей процесса. Большое значение для избирательного концентрирования будет, повидимому, иметь быстро развивающаяся экстракционная хроматография (см. гл. IV). [c.18]

Н а h о f е г E., He ht F., Mikro him. A ta, 1954, 417, применяли сплавление с карбонатом натрия для разложения глубинных морских осадочных пород. Уран выделяют методом непрерывной экстракции этиловым эфиром или методом хроматографии на бумаге. Уран определяют флуориметрически в перлах. [c.828]

Стандартные методы [45—47] ягаляются результатом многолетних исследований, проводимых во многих странах. Степень разделения вполне приемлема, хотя обычно полного отделения одного компонента от другого осуществить не удается (см. табл. 3.6). Однако использование адсорбционной спектроскопии в УФ-области и флуориметрического анализа для идентификации и количественного определения позволяет избежать необходимости хроматографического выделения чистых ПАУ из смесей. Тем не менее, сходство спектров некоторых ПАУ может затруднить анализ. В течение ряда лет были разработаны остроумные методы, позволяющие обойти эти трудности (см. об этом в разд. 3.4.11). Помимо спектрометрических определений предпринимались попытки полностью разделить ПАУ с помощью бумажной, тонкослойной и газовой хроматографии (эти вопросы в данной главе не рассматриваются), а также с помощью комплексо-образования. Следует упомянуть также об использовании для разделения ПАУ противоточного распределения [196, 197]. Тай и Белл [215] предложили метод. жидкостно-жидкостной хроматографии, основанный на образовании комплексов с сил1-тринитро- [c.153]

Определение 3,4-бензпирена в бензольных экстрактах образцов пыли [35] проводили методом нисходящей хроматографии с применением ацетилированной бумаги [23]. Длительность разделения равнялась 20—24 ч. Для выделения чистого соединения из образцов с большим содержанием масла или смолы описанную процедуру необходимо проводить дважды. 3,4-Бензпирен идентифицировали флуориметрически в Н2504 [36]. [c.186]

Хроматографии адренокортикостероидов посвящен относительно недавно опубликованный обзор [158]. Информация о незначительных усовершенствованиях методик анализа этих соединений продолжает появляться в литературе. Например, описаны методики разделения метиловых эфиров различных прегнанглюкозидуронатов с помощью ионообменной хроматографии на фильтровальной бумаге, пропитанной жидкими ионитами [159], ТСХ на полиамидных пластинках [160] и флуориметрического сканирования тонкослойных хроматограмм [161, 162]. [c.305]

Значительные успехи в жидкостной хроматографии были достигнуты в последние несколько лет, после того как выяснилось, что эффективность разделения можно существенно повысить, если проводить разделение на адсорбентах с частицами размером 5—10 мкм. Колонки, заполненные такими мелкими частицами, отличаются высоким сопротивлением потоку жидкости, и, следовательно, чтобы продавить через них элюент, его необходимо подавать под большим давлением (порядка 3,447—34,47 МПа). Однако осуществить это не столь уже сложно, поскольку насосы, способные развивать такие давления легкодоступны. Существенно большее значение имеет тот факт, что у колонок, предназначенных для ВЭЖХ, низкая емкость по веществу( от нескольких миллиграммов и ниже), поэтому их применение в методах типа 0 2549 невозможно. Поскольку процедура сбора фракций и определения их состава весьма трудоемка и отнимает много времени, при помощи детектора проводится непрерывное обнаружение соединений в элюате. Как и для газовой хроматографии, для жидкостной хроматографии предложено много различных типов детекторов, однако, как впоследствии выяснилось, три типа детекторов — УФ-детекторы с фиксированной и переменной длиной волны, флуориметрические и проточные рефрактометры — значительно превосходят все остальные, и именно они получили наиболее широкое рас-пространение. Рефрактометр является универсальным детектором и как таковой пригоден для обнаружения углеводородов. [c.399]

Если разделение смесей всех типов углеводородов с помощью ВЭЖХ рассматривается лишь в считанных работах, то литература, посвященная ВЭЖХ смесей многоядерных ароматических углеводородов с применением флуориметрических и УФ-детекторов, весьма обширна. Опубликованный в 1977 г. обзор литературы по этому вопросу насчитывает 43 ссылки [70] несколько более поздних работ [71—81] включено в список литературы к данной главе. В тех случаях, когда речь идет о процедуре разделения, мнения исследователей, по-видимому, разделяются одни предпочитают колонки с такими адсорбентами, как силикагель или оксид алюминия, другие — колонки с неполярными сорбентами с химически связанным мелкодисперсным носителем и элюирование полярным растворителем (обращенно-фазовая хроматография), наконец, третьи отдают предпочтение методу жидко-жидкофазной распределительной хроматографии (в этом случае сорбентом служит полярная [c.400]

Щелочноземельные элементы. После опрыскивания хроматограммы 8-оксихинолином и выдерживания ее в парах аммиака проводят флуориметрический анализ [280]. А1, Ве, Сг. Алюминий и бериллий определяют в этом случае также флуориметрически в виде оксинатов, а хром — после опрыскивания дифенилкарбамидом [445]. Перед разделением методом ТСХ проводят экстракцию оксинатов, а перед разделением методом распределительной хроматографии — их повторную экстракцию. [c.155]