Метод двойной диффузии

Транзисторную или диодную структуру можно получить любым из известных способов изготовления полупроводниковых диодов и транзисторов. На рис. 74 представлен транзистор,, пот лученный методом двойной диффузии. [c.187]

Метод двойной диффузии. В стерильные чашки Петри наливают 2% агар без добавления сыворотки. Так же как в предыдущем случае, при постановке реакции методом простой диффузии устанавливают матриксы и наливают еще один слой среды. [c.133]

Оптическая и геометрическая анизотропия коллоидных частиц исследуются методами поляризационной оптики, среди которых основное значение имеет изучение двойного лучепреломления, как собственного, обусловленного оптической анизотропией частиц, так и двойного лучепреломления формы, зависящего от ориентированного расположения асимметричных частиц. Метод двойного лучепреломления при течении особенно широко используется для определения коэффициента вращательной диффузии (III. 9) и линейных размеров вытянутых частиц для той же цели иногда изучают поляризацию флуоресценции. [c.72]

МЕТОД ДВОЙНОЙ (ОДНОМЕРНОЙ) ЛИНЕЙНОЙ ДИФФУЗИИ В ГЕЛЕ [15, 20] [c.129]

Принцип метода. Иммуноэлектрофорез представляет собой комбинацию электрофоретического разделения белков с двойной диффузией и иммунопреципитацией в геле. Вслед за электрофоретическим разделением белков в агаровом геле навстречу полученным фракциям диффундирует специфическая иммунная сыворотка. Этот метод позволяет характеризовать белки не только по скорости миграции в электрическом поле, но и по антигенным свойствам. [c.137]

Наиболее широко используемым методом для наблюдения вращательной диффузии является метод двойного лучепреломления в потоке. Ориентация асимметричных частиц в этом методе происходит за счет силы сдвига, возникающей в движущейся жидкости. Этой ориентации противодействует процесс вращательной диффузии, и зависимость степени ориентации от силы сдвига является [c.497]

Сопоставление средних размеров макромолекул графтполимеров стирола с метилметакрилатом, полученных методами светорассеяния диффузии (/ ,) и динамического двойного лучепреломления (R (размеры в ангстремах) [184] [c.239]

К методам жидкой фазы относят методы тигля, слоистого расплава, двойного тигля, обменной диффузии, модифицированный метод обменной диффузии фазил , ионного обмена. [c.144]

Для анализа антигенов, разделенных с помощью электрофореза или электрофокусирования в полиакриламидном геле, разработаны многочисленные методы иммунодиффузии. Так, для этой цели можно использовать различные варианты двойной иммунодиффузии. Цилиндрические столбики геля разрезают продольно на две половинки (см. разд. 1.15.6), а из пластин нарезают полоски, содержащие разделенные антигены. Разрезанный гель помещают на стеклянные пластинки, заливают их теплым раствором агара и дают ему застыть. Канавки для антител располагают на соответствующем расстоянии от полиакриламидного геля. Как только полиакриламидный гель покроется слоем агара толщиной 1 мм, в непосредственной близости от него сразу же вырезают канавку для антисыворотки. Если для анализа используют разрезанные вдоль столбики полиакриламидного геля, то их кладут на слой агарового геля и в нем рядом с полоской геля по обеим ее сторонам быстро вырезают канавки для антител. Преципитаты образуются под полоской полиакриламидного геля. Столбик полиакриламидного геля можно также разрезать в поперечном направлении на диски и проанализировать присутствующие в них антигены методом двойной радиальной диффузии 203, 394]. [c.244]

Двойная диффузия в геле — это единственный в своем роде, уникальный и простой метод изучения антигенных взаимосвязей между молекулами и специфичности антител. Он имеет два главных недостатка а) относительно низкую чувствительность по сравнению с непрямыми методами, например реакциями агглютинации и иммуноферментными тестами, и б) при исследовании смесей антигенов методом ДДГ часто наблюдаются перекрывающиеся и накладывающиеся друг на друга линии преципитации. В этом отношении ДДГ уступает ИЭФ (разд. 4.1), в котором антигены разделяются в геле иа Начальной электрофоретической стадии. [c.207]

Рис. 4.7. Результаты, полученные методом связывания комплемента, с одной стороны, и методом двойной диффузии, с другой стороны, для сравнения антиген ности р-амилаз, экстрагируемых из непроросшего и пророс него зерна ячменя. В двух упомянутых методах использована одна н та же моноспецифическая иммунная сыворотка р-амилазы ячменя. Оба экстракта подвергли диализу и разбавили >1.0 получения одинаковой их активности.

Некоторые методы требуют использования моноспецифических иммунных сывороток. Основной момент при этом — контроль моноспецифичности препаратов антител, который достигается методом специфической преципитации в геле между иммунной сывороткой и экстрактом, из которого иммуноген был очищен. Наличие более одной линии преципитации показывает, что сыворотка неспецифична. Трудность контроля нередко заключается в том, что моноспецифичность иммуносыворотки проверяется методами, имеющими определенный порог чувствительности (например, методом двойной диффузии), тогда как иммунная сыворотка используется при методах с намного более высокой [c.113]

Широко используемый метод двойной диффузии в агаре предложенный О. Ухтерлони (О. ОисЬ1ег1опу, 1948), состоит в том, что антиген (ы) и антитело a) помещают в лунки, проделанные в топком слое геля на [c.254]

Помимо выявления аитигенной неоднородности метод двойной диффузии в геле позволяет сравнить антигенное строение нескольких веществ и выявить наличие сходства и различий между ними. Как всякий иммунологический метод, метод двойной диффузии в геле имеет ограничения, основное из которых — спектр антител в исследуемой антисыворотке. Так, в ранних работах при сравнительном изучении антигенного строения IgG кролика и его Fab- и F -фрагментов использовали антисыворотку против IgG кролика, полученную от коз. Исследователям не было тогда известно, что животные этого вида не образуют практически антител против детерми-Бант Fab-участка молекулы. Поскольку при использовании этой антисыворотки F -фрагмент давал реакцию антигенной идентичности с нерасщепленной молекулой IgG, сделали ошибочное заключение об отсутствии в РаЬ-участке видоспецифических антигенных детерминант. Ошибка была исправлена после исследования фрагментов молекулы IgG с помощью антииммуногло- булиновых сывороток, полученных от животных других видов, в антисыворотке осла против IgG кролика содержится примерно равное количество антител против антигенных детерминант Fab- и F -участком. На этом примере можно еще раз убедиться в необходимости использования при антигенном анализе антисывороток, полученных от животных разных видов (см. гл. 2). [c.255]

М КС1 и 0,015 М Mg b). Полноту насыщения контролируют, определяя наличие антител в надосадочной жидкости методом двойной диффузии в агаре (А. И. Гусев, 1968) или по реакции кольцепреципитации. Готовые сэндвич-сорбенты суспендируют в стандартном буфере из расчета 5 мг/мл. Сэндвич-сорбенты рекомендуется готовить небольшими порциями, рассчитанными на 1— [c.295]

Дополнительная информация может быть получена с помощью метода двойной диффузии (метод Ухтерлони), схематически изображенного на рис. 10-2, Б—Г. В агаровом геле, находящемся в чашке Петри, делают три лунки, две из которых заполняют антигеном, а третью — антисывороткой. Из каждой лунки по всем направлениям происходит диффузия. При достижении [c.251]

Б. Двойная диффузия специфические преципитаты, соответствующие экстрактам из иепроросших зерен (левая луика) и нз проросших (правая лунка), образуют непрерывную линию и не выявляют различий в антигенах, тогда как они четко выявляются другим методом [211. [c.104]

Особое значение приобрела комбинация иммунодиффузии с электрофорезом, названная методом иммуноэлектрофорезаН]. С его помощью можно одновременно электрофоретически разделить компоненты белковой смеси и получить их иммунологическую характеристику. Простота осуществления, высокая разрешающая способность и, наконец, очень малое количество материала, требуемое для анализа, ставят иммуноэлектрофорез в ряд наиболее ценных методов аналитического изучения белков. Соединение иммуноэлектрофореза с двойной диффузией в геле позволяет выявлять идентичность определенных компонентов двух белковых смесей [10]. [c.19]

МЕТОД ДВУМЕРНОЙ ДВОЙНОЙ ДИФФУЗИИ В ГЕЛЕ ПО УХТЕРЛОНИ [17] [c.131]

Попытки разработать методы иммунодиффузии, позволяющие количественно оценивать содержание антигенов и антител, делались неоднократно. Одна группа таких методов основьгоается на двойной диффузии в геле по Ухтерлони (см. стр. 131), другая — на измерении скорости диффузии и степени мутности полос преципитации при иммуноэлектрофорезе (стр. 137). Пока эти методы еще не получили широкого распространения. [c.157]

Метод трак-сляционной диффузии Метод вращательной диффузии Метод динамического двойного лучепреломления в потоке Метод двойного лучепреломления в электрическом поле [c.131]

По Геришеру и Тишеру и Мэлю и Бокрису перенапряжение на твердом серебряном электроде состоит в основном из перенапряжений кристаллизации и диффузии, что следует из очень большой величины плотности тока обмена этой системы. Однако с помощью метода гальваностатического замыкания цепи эти авторы смогли заметить небольшую долю перенапряжения перехода. Геришер и Тишер применив метод двойных [c.699]

Один из первых методов консервирующей обработки древесины был основан на способе двойной диффузии . Процессы, разработанные в последнее время, сводятся к опрыскиванию древесины сульфатом меди, который затем впитывается в материал. Такая же обработка проводится и с хроматом натрия. В результате внутри древесины образуется хромат меди, который препятствует поражению изделия грибками. Можно обработать древесину также натриевой солью пентахлорфенола, мышьяковой кислотой и сульфатом цинка. При применении этих материалов необходимо иметь в виду, что наличне в воде ионов меди или цинка может привести к развитию питтинговой коррозии или засорению системы. Поскольку первая порция рециркуляционнои воды, используемой после рассмотренной обработки древесины, будет содержать большое количество ионов указанных металлов, ее необходимо удалить из системы. [c.100]

Схема интерферометра Брингдаля используется при исследовании диффузии в растворах, теплопроводности в газах [59] и жидкостях [60]. Интерферометр Брингдаля с двумя пластинками Савара нашел применение в изучении термодиффузии в газах [61]. В последнем случае при линейном V/г интерферограмма состоит из набора равноудаленных вертикальных полос, которые при нелинейном V/г принимают форму, соответствующую распределению Wn. Как и в предыдущих схемах, соответствие этой формы и Vn тем лучше, чем Ь меньше, однако при этом уменьшается чувствительность метода. Двойная экспозиция [62] в такой схеме (при повороте фотопластинки между экспозициями на 180°) значительно увеличивает точность регистрации полос. [c.311]

Схема интерферометра Брингдаля используется при исследовании диффузии в растворах, теплопроводности в газах [33] и жидкостях [34]. Интерферометр Брингдаля с двумя пластинками Савара нашел применение в изучении термодиффузии в газах [35]. В последнем случае при линейном Чп интерферограмма состоит из набора равноудаленных вертикальных полос, которые при нелинейном V принимают форму, соответствующую распределению У п. Как и в предыдущих схемах, соответствие этой формы и V тем лучше, чем Ь меньше, однако при этом уменьшается чувствительность метода. Двойная экспозиция [36] в такой схеме (при повороте фотопластинки между экспозициями на 180°) увели-, ивает точность регистрации полос. Получаемые интерферограммы удобны для автоматизации процесса их обработки, однако интерферометр Брингдаля имеет и существенные недостатки. С его помощью трудно исследовать растворы, для которых Апк<.% метод не представляет непосредственно распределений 1п х) или п х) неоднозначно обнаружение полимодальности. [c.296]

Фракции поли-Ы-изобутилмалеимида (П-М-ИБМИ) исследовали методами поступа1ельной диффузии, седиментации и двойного лучепреломления. В интервале молекулярных весов 0,19- 10 — 3,6 10 установлена зависимость между молекулярным весом (М) фракций, характеристической вязкостью [г ] и константами диффузии и седиментации ( ) и 5). [c.52]

Физические и химические свойства белков, Р-ры Б. обладают рядом свойств, характерных для лиофильных коллоидных р-ров. Частицы Б. не проходят через полупроницаемые мембраны, что используется для их очистки от низко-молекулярных соединений диализом. Наличие на поверхности частиц Б. многочисленных полярных групп обусловливает их значительную гидратацию. Так, количество гидратационной воды, связанной с альбуминами и глобулинами, составляет 0,2—0,6 г на 1 г сухого веса Б. В определенных условиях Б. образуют гели (студни). Во многих случаях Б. удается получить в кристаллич. виде. Б. в р-рах седимен-тируют в ультрацентрифугах при ускорении порядка 200 000 константы седиментации (s) Б. находятся в пределах от l-10 i до lOO-lO i сек. Коэфф. диффузии Б. О,МО —10-10 см /сек средний удельный объем 0,75 см г. Эти физико-химич, характеристики используются для определения мол. веса Б., а также степени асимметрии их молекул е/а, где в и а — продольная и поперечная полуоси гидродинамически эквивалентного эллипсоида, приближенно принимаемого за форму молекулы Б. Мол. вес Б. — от 5000 до нескольких миллионов, в/а — от 1 до 200. Для определения мол. весов и размеров молекул Б. широко применяется метод светорассеяния. Мол. веса могут быт1> определены также методом осмометрии, методом исследования монослоев на поверхности жидкой среды. Размеры молекул Б. определяются методом двойного лучепреломления в потоке, измерением коэфф. вращательной диффузии. Макромолекулы некоторых Б. наблюдались в электронном микроскопе. Для изучения структуры Б. широко применяется метод рентгеноструктурного анализа и электронографии. [c.193]

И интерпретация данцых по седиментации и диффузии с точки зрения фактора формы [65] показывают, что молекулы-ионы в водных растворах представляют собой вытянутые стержни, которые могут скручиваться и становиться меиее асимметричными при добавлении вязких электролитов. Результаты расчета длины цепи [123] из вращательной константы диффузии, определенной методом двойного лучепреломления в потоке, хорошо согласуются с длиной цени, полученной из измерений характеристической вязкости. Кроме того, длины цепей, полученные по данным титрования концевых групп в предположении, что длинные нормальные цепи имеют слабокислотные ионы водорода только на концах, достаточно хорошо согласуются со степенями полимеризации, полученными другими методами. [c.55]

В опытах по иммунодиффузии раствор исследуемого препарата отделен от антисыворотки зоной геля, в который и препарат, и антисыворотка могут диффундировать (двойная диффузия). По другому способу раствор антигена диффундирует в гель, в котором уже находятся антитела (одиночная диффузия). С течением времени концентрация реагентов становится достаточно высокой для специфической преципитации, и в том месте, где это произошло, линия или полоса преципитации становится видимой. В общем случае каждая система антиген — антитело образует отдельную полосу. Для решения специфических вопросов преципитации разработано большое число различных экспериментальных приспособлений двойную диффузию обычно проводят в чашках Петри или (в меньших масштабах) в тонкой пленке геля на предметном стекле. Полосы можно сделать более заметными путем окрашивания. Одиночную диффузию удобнее проводить в маленьких вертикальных трубочках. Недавно Охтерлони [68] опубликовал обзор с исчерпывающей библиографией, охватывающей все аспекты иммунодиффузионного анализа. Очищенный препарат следует проверить в опытах по одномерной или двумерной диффузии при возможно большем числе концентраций препарата [69]. Появление одиночной полосы с обеими антисыворотками является доказательством гомогенности препарата. Однако гомогенный препарат не обязательно должен давать одиночную полосу. Имеется несколько причин, которые могут вызвать образование двойной полосы и в случае гомогенного антигена. Это может объясняться недостаточным контролем температуры или осаждением, напоминающим кольца Лизеганга, при использовании определенных типов антител, если применяется очень сильная неразбавленная антисыворотка. Более того, установлено, что гомогенный антиген, имеющий несколько антигенных детерминантов, может дать несколько полос преципитации. Эти вопросы обсуждены Кроуле [70] и Фингером [71]. Тем не менее гетерогенность является наиболее обычной причиной двойных или множественных полос нрецииитации. Следует иметь в виду, что неантигенные компоненты нельзя определить этим методом, и нужно также отметить, что примеси, дающие перекрестную реакцию, не будут найдены, если их скорость диффузии меньше, чем у гомологичного антигена [72]. Это обычно не вызывает осложнений, за исключением случаев, когда компонент, дающий перекрестную реакцию, сам является довольно сильным антигеном и может порождать свое собственное антитело, [c.53]

Для претгаратов с большим молекулярным весом и высокой вязкостью важное значение могут иметь два других гидродинамических метода двойное лучепреломление в потоке и измерения неньютоновской вязкости. При измерениях двойного лучепреломления в потоке с помощью оптических средств неносредственно наблюдают направление и степень преимущественной ориентации. В неньютоновской вискозиметрии ориентация проявляется в снижении характеристической вязкости с увеличением скорости сдвига. Теория и практика метода двойного лучепреломления в потоке рассмотрены в ряде обзоров [200—202]. Неньютоновская вискозиметрия описана в обзоре Янга [149]. Оба метода позволяют вычислить коэффициент вращательной диффузии. Если предположить, что молекула велика и обладает высокой асимметрией, этот коэффициент можно использовать для измерения длинной оси молекулы [149]. [c.79]

Самым распространенным методом определения антигена и антител является преципитация в агаре (реакция двойной диффузии в геле по Оухтерлони). Преимуществами данной реакции являются относительная простота, высокая специфичность, отсутствие ложноположительных и ложноотрицательных ответов, небольшой расход материалов и возможность определения полноты антигенной идентичности. Недостатками реакции являются низкая чувствительность, длительность получение предварительного ответа через 24 ч, а окончательного—лишь спустя 48—72 ч. Для исследования берут кровь больного в количестве, необходимом для получения 0,3 мл сьшоротки. Реакции ставят на пластинах, в 1% агаре, в котором вырезают лунки для ингредиентов реакции. В качестве тест-системы используют стандартный австралийский антиген и соответствующую специфическую антисьшоротку. Учет реакции проводят через 1—3 дня по появлении дуг преципитации между лунками. [c.248]

E hino o us. Эхинококкоз является другой серьезной паразитарной инфекцией, распространенной в развивающихся странах. Чувствительность и специфичность используемых в настоящее время методов диагноза, таких, как непрямая гемагглютинация, иммуноэлектрофорез и двойная диффузия, могут изменяться в широких пределах. Некоторые из этих анализов технически сложны, требуют электрофоретического оборудования или больших количеств антигена и антисыворотки. Оказалось, что приме- [c.130]

В этом отношении эффективны такие методы, как двойная диффузия по Ухтерлони (наименее чувствительный метод), иммуноэлектрофорез (для индивидуального антигена или смеси антигенов), ракетный ИЭФ (для индивидуального антигена) и двумерный ИЭФ (для определенного антигена или смеси. антигенов). Данные методы описаны в гл. 6. На рис. 2.1 при- [c.55]

Наиболее широко распространен метод двойной радиальной диффузии в геле, предложенный Ухтерлони [Ou hterlony, 1950]. [c.124]

Для получения антител к этому ферменту кролика иммунизируют с использованием обычной для этой цели техники. Взятие крови у кролика и определение в ней антител осуществляются методами иммунопреципитации, двойной диффузии или значительно более чувствительным радиохимическим методом, который состоит в выявлении комплексов антиген — антитело с помощью 1-меченого белка А (один из белков Staphylo o us aureus, прочно связывающийся с цепями иммуноглобулина IgG [99]). [c.173]

Показано, что сыворотка больных аспергиллезом легких имеет на-иболее высокий титр при использовании методов непрямой гемагглюти-нации и непрямой иммунофдюоресценции в тоже время только 91 и 87 соответственно были позитивны при проточном иммуноэлектрофорезе и двойной диффузии в агар. [c.42]

В ранних работах по иммунодиффузии пользовались небольшими пробирками (одномерная диффузия). Реакцию ставили таким образом, что диффундировал либо один реагент (простая диффузия), либо оба (двойная диффузия). Но в дальнейшем все эти модификации были вытеспеньт методом двойной двумерной диффузии на пластинках геля. Общее описание этих методов дает Ухтерлони [1300]. [c.366]

В слое агара пробивают лунки, располагая их в определенном порядке. В обычных опытах по двойной диффузии антисыворотку вносят в центральную лунку, а растворы антигена — в песколько лунок, располагая их вокруг центральной. Растворы антигена и аптител диффундируют в агаре навстречу друг другу, и через какое-то время в зоне, где оба реагента оказываются в подходящих соотношениях, образуется преципитирующий комплекс. В этой точке реагенты выпадают из раствора и появляются видимые полосы преципитации. Piepeагирующий антиген (или антитела) может проходить сквозь полосу преципитации, ие задерживаясь. Полосы преципитации можно наблюдать визуально при подходящем освещении, их можно сфотографировать, а можно и воспользоваться белковыми красителями. Если в препарат вируса ввести радиоактивную метку, то для выявления полое преципитации можно воспользоваться радиоавтографией в соответствующих условиях метод радиоавтографии отличается высокой чувствительностью [1185]. [c.366]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология