Препаративная бумажная хроматография

ПРЕПАРАТИВНАЯ БУМАЖНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ [c.97]

Бумажная хроматография может быть использована и для препаративных целей. Однако этот метод выделения веществ из смеси трудоемок и малопроизводителен. [c.51]

Это так называемая тонкослойная хроматография, получившая за последнее десятилетие широкое применение в химии и особенно Б биохимии благодаря значительно большей скорости выполнения анализа в сравнении с бумажной хроматографией. Вид хроматограммы и техника выполнения при этом аналогичны. Преимущество тонкослойной хроматографии перед бумажной, кроме значительно большей скорости анализа, состоит в значительно меньших размерах аппаратуры и Б возможности разделения примерно на порядок больших количеств смесей без существенного ухудшения качества разделения. Это преимущество позволяет применять тонкослойную хроматографию как препаративный метод выделения индивидуальных продуктов из сложной смеси в чистом виде с целью дальнейшего их исследования другими методами. [c.11]

Аппаратура для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, сосуды для элюента, лампы для облучения хроматограмм и др. Хроматографические камеры значительно различаются по форме и размерам, и это в большой степени зависит от характера процесса хроматографирования (восходящее, нисходящее, круговое, двумерное, препаративное), На рис. 9.15 изображена камера для восходящей хроматографии, на рис. 9.16 — аппаратура для нисходящей бумажной хроматографии. [c.239]

Бумажная хроматография обычно применяется для идентификации веществ в смеси, но может быть использована и для грубого количественного определения, например фотометрически — по цвету или по площади пятен или вырезыванием пятна до обработки цветным реактивом (его положение может быть определено по положению соседнего пятна, подвергнутого действию реагента) и элюированием из него подходящим растворителем исследуемого вещества. Эту пробу можно затем подвергнуть любому виду количественного микроанализа. Для препаративных целей получаемые таким способом количества вещества слишком малы. [c.41]

Если перечисленные способы обнаружения оказались неэффективными, необходимо пожертвовать частью слоя. Используется прием, заимствованный из бумажной хроматографии основную часть хроматограммы закрывают, оставляя открытыми узкие полосы по обеим сторонам. Эти полоски обнаруживают подходящим реагентом. Рекомендуют разграничивать эти полосы от основной части хроматограммы, чтобы предупредить возможное просачивание раствора реагента в основной слой. Если по ходу обнаруж ения хроматограмму необходимо нагревать, то закрытую часть слоя покрывают асбестовой, пластиной, а свободные боковые участки хроматограммы после опрыскивания обнаружителем нагревают под инфракрасной лампой. Чтобы быть уверенным в том, что зоны веществ, обнаруженные по краям пластинки, находятся на том же уровне по всей длине слоя, необходимо работать с качественными слоями, равномерно нагруженными на старте разделяемой смесью и проявленными в камере, насыщенной парами растворителя. Можно также пользоваться и таким приемом, при котором обнаруживают предварительную, вспомогательную хроматограмму, а полученные значения Яр переносят вслепую на препаративный слой. Этот способ, однако, требует строжайшего [c.137]

Бумажная хроматография хотя и является микрометодом, но в то же время не относится к быстрым методам, так как процесс разделения компонентов смеси на бумаге продолжается от 4 ч до двух суток. Бумажную хроматографию также нельзя отнести к препаративным методам, так как она непригодна для выделения больших количеств веществ. [c.62]

Для проведения биохимических работ лаборатория должна иметь рефрижераторные скоростные центрифуги, спектрофотометры для измерений в ультрафиолетовой и видимой области, приборы и установки для колоночной и,бумажной хроматографии, электрофореза, хорошие вытяжные шкафы для работы с фенолом, хлороформом, четыреххлористым углеродом, холодную комнату для препаративных работ, холодильный шкаф и шкаф глубокого охлаждения, место для работы с изотопами. [c.22]

С развитием более эффективной тонкослойной хроматографии (см. разд. А,2.б.З) бумажная хроматография в значительной степени потеряла свое значение, в особенности в препаративном отношении. С практическим проведением разделения при помощи восходящей бумажной хроматографии можно познакомиться по 15-му изданию Органикума (русский перевод см. М. Мир , 1979). [c.95]

Большим достоинством бумажной хроматографии является то, что она дает возможность производить анализы с весьма малыми количествами вещества (десятыми или сотыми долями миллиграмма). С другой стороны, она неприменима для препаративных целей. Однако, пользуясь полученными при хроматографировании на бумаге данными, можно воспроизвести этот процесс в большом масштабе на колонне из целлюлозы и таким путем выделить желаемые компоненты в достаточном количестве. [c.220]

Методы тонкослойной и бумажной хроматографии рассматриваются совместно оба метода широко используются в рядовой и исследовательской работе и очень важны для аналитика. В своей основе каждый из методов прост, но для получения хороших результатов методическим тонкостям следует уделять должное внимание. Полная автоматизация хроматографических процессов от нанесения пробы до обработки полученной хроматограммы с точки зрения изготовителей приборов не является экономически выгодной. В литературе проблемы автоматизации тонкослойной и бумажной хроматографии отражены недостаточно. Обычно рассматриваемые процессы хроматографирования можно разделить на три отдельные стадии а) нанесение пробы, б) разделение пробы 4 проявление хроматограммы и в) количественная обработка результатов. Для каждой из этих стадий описан ряд автоматических и механических средств, обсуждаемых в соответствующих разделах главы. В конце главы рассматриваются полностью автоматические системы, предназначенные в первую очередь для препаративных целей. [c.272]

При выделении и очистке бумажная хроматография может использоваться не только как аналитический метод, но и как препаративный. В этом случае хроматографирование проводят или в пачке листов хроматографической бумаги [305], или на одном листе бумаги обычным методом. Препаративная хроматография на бумаге имеет некоторые преимущества перед другими методами легкость подбора условий для разделения, очень простой переход от аналитических опытов к препаративным, возможность работать с минимальными количествами препаратов, методическая простота. Хотя теми же достоинствами обладает и хроматография в тонком слое адсорбента, все же бумажная хроматография удобнее при работе с антибиотиками, так как при помощи биоавтографического метода антибиотики проще выявлять на бумаге, чем на тонкослойной пластинке. В некоторых [c.34]

Крайне заманчиво применение бумажной хроматографии при определении спектров поглощения. Хотя такое изучение можно провести в некоторых случаях непосредственно на хроматограммах [634], при изучении спектров антибиотиков хроматографию обычно используют как препаративный метод, нужное вещество элюируют (иногда дополнительно очищают) и определяют УФ-или ИК-спектры [123, 128, 136, 327, 328, 329, 333—335]. [c.67]

Выделение меченых аминокислот достигается следующим образом. Водоросли настаивают в 80% этиловом спирте, затем отделяют центрифугированием и подвергают гидролизу 6н. H I в запаянной ампуле при 105—110° С. Белковый гидролизат упаривают в вакууме и очищают от углеводов, органических кислот и гуминоподобных веществ. Раствор, содержащий смесь аминокислот пропускают через катионит КУ-2 в Н+-форме. Использование в качестве элюента соляной кислоты различной концентрации позволяет разделить смесь на отдельные группы аминокислот (рис. 14). Разделение групп аминокислот на индивидуальные соединения можно осуществить методом препаративной бумажной хроматографии. [c.57]

Во многих учебниках [12, 13, 14] подробно рассматриваются различные методы препаративной бумажной хроматографии одномерной, двумерной и противоточной. [c.37]

При окислении дисульфида, кроме нужного циклического мономера (2), образуются параллельный (За) и антипараллель-ный (36) димеры, а также циклические или линейные высшие полимеры. Эти продукты окисления разделяют противоточным распределением [1300, 1329] или препаративной бумажной хроматографией [1300]. В разбавленных растворах вероятность образования высших полимеров минимальна. Относительное количество образующихся димеров (За) и (36) и мономера (2) зависит не только от концентрации [2405], но и от расстояния между остатками двух меркаптоаминокислот в пептидной цепи [971]. В табл. 15 (стр. 361) приведены данные, показывающие изменение соотношения различных продуктов реакции при окислении пептидов типа Н-Суз-(01у) -Суз-0Н в зависимости от величины п. Здесь нетрудно проследить аналогию с удвоением при синтезе гомодетных циклических пептидов. В любом случае более короткие пептидные цепи имеют тенденцию к димеризации. Так, димер образуется в качестве единственного продукта реакции, если линейное соединение содержит около 10 атомов в цепи (гомодетный трипептид с 9-членным циклом гетеродетный пептид с и=1 и И-членным циклом). При этом в результате удвоения получаются энергетически выгодные соединения, содержащие соответственно 18-членный (гомодетный) и 22-членный (гетеродетный) циклы. В случае несколько более длинной цепи [c.351]

Калибровку проводят по гидратам глюкозы и мальтозы, которые специально очищают методом колоночной хроматографии на целлюлозе или методом препаративной бумажной хроматографии. Высшие олигосахариды, необходимые как стандарты, можно выделить из кукурузной патоки методом препаративной бумажной хроматографии. [c.10]

Установление природы моносахаридов. Для установления природы моносахаридов, входящих в дисахарид, последний подвергается кислотному или ферментатив1НОму гидролизу. В полученной таким образом смеси моносахаридов последние идентифицируются одним из описанных выше методов. Чаще всего первоначальная оценка проводится с помощью бумажной хроматографии, которая очень подробно разработана для моносйхаридов. После этого смесь моносахаридов подвергают разделению методом препаративной распределительной хроматографии на носителе, в качестве которого чаще всего применяются целлюлоза, силикагель, уголь или их комбинации. Разделенные моносахариды идентифицируют в виде одного из кристаллических производных. [c.138]

Тонкослойная хроматография. Все большее значение получает пред-ложенпая Н, А. Измайловым и М. С. Шрайбером тонкослойная хроматография, которая в принципе может быть н адсорбционной и распределительной, но обычно применяется ее адсорбционный вариант. Она совмещает преимущества хроматографии в колонке (широкий выбор адсорбента, возможность препаративного применения) и бумажной хроматографии (быстрота, пригодность для аналитических целей). По приемам работы этот вид хроматографии более похож на бумажную хроматографию. [c.41]

Бумажная хроматография олнгосахаридов и тонкослойная хроматография их ацетатов могут быть весьма эффективно использованы для препаративного разделения малых количеств этих соединений (см., например, ), что особенно удобно, когда исследователь вынужден оперировать с весьма малыми количествами веществ. [c.426]

Во многих случаях желательно использование достаточно летучих растворителей. Это необходимо в основном 1) при препаративном выделении веществ 2) прн работе с транспортно-ионизационным детектором 3) в тонкослойной и бумажной хроматографии, когда проявляющий реактив может реагировать с компонентами системы растворителей. Однако чрезмерно высокая летучесть создает определенные неудобства в работе. Такие низкокипящие растворители, как пентан и диэтиловый эфир, могут образовывать пузырьки в колонке и в детекторе. В тонкослойной и бумажной хроматографии применение систем растворителей с компонентами, обладающими слишком большим давлением пара, обычно сопряжено с низкой воспроизводимостью. В разд. 162 приведены сведения о температуре кипения при 760 мм рт. ст. и давлении насыщенных паров растворителей при 20 °С. Последние значения полезно сопоставить с ПДК — предельно допустимой концентрацией токсичных веществ в воздухе рабочих помещений — для принятия необходимых мер по технике безопасности. ПДК соответствуют Санитарным нормам проектирования промышленных предприятий СН 245-71 (Стройиздат, 1972). Данные о набухаемости твердых фаз в различных раствори-, телях приведены в соответствующих разделах. Эти данные имеют большое значение при работе с нежесткими гелями и ионообменными смолами набухание должно обеспечивать достаточную проницаемость твердой фазы, но чрезмерная набухаемость сильно затрудняет работу с колонками. [c.382]

Тонкослойная хроматография (ТСХ) очень похожа на бумажную хроматографию, за исключением того, что стационарной фазой является адсорбирующий материал, такой, как силикагель или оксид алюминия, распределенный тонким слоем по поверхности стеклянной (или алюминиевой) пластинки. Метод используется как для аналитических, так и для препаративных целей. Для препа ративного разделения используется более толстый слой стационарной фазы, и смесь, которую нужно разделить, наносят узкой полоской около нижнего края пластинки. После проведения опыта стационарную фазу соскабливают секциями, каждую секцию экстрагируют отдельно подходящим рас-тво рителем и получают индивидуальные компоненты смеси в чистом виде. [c.60]

В последние, пять-шесть лет в аналитической и препаративной радиохимии все более широко используют метод тонкослойной хроматографии [318, 319], который по существу очень близок к методу бумажной хроматографии. Этот метод известен уже более 20 лет, но только теперь получает широкое применение в связи с появлением усовершенствованной аппаратуры. [c.156]

Открытие в 1944 г. метода бумажной хроматографии (БХ), чрезвычайно расширившего возможности обнаружения, идентификации и разделения малых количеств веществ, означало подлинную революцию в химии, особенно в биохимии. Этот метод был открыт Консденом, Гордоном, Мартином и Синджем, которые разработали и применили его для анализа белковых гидролизатов, т. е. смесей аминокислот. Последние два из перечисленных авторов были удостоены Нобелевской премии за открытие распределительной хроматографии. В последующие 10 лет метод БХ был значительно усовершенствован и получил такое распространение, что нельзя было представить без него работу какой-либо химической или биохимической лаборатории. Однако с 1952 г. БХ начала постепенно вытеснять ее младшая сестра — тонкослойная хроматография (ТСХ), которая оказалась эффективнее благодаря возможности более быстрого проведения эксперимента, большей пригодности для препаративных работ и более широким возможностям обнаружения (включая применение коррозионно-активных реагентов). В настоящее время ТСХ используется чаще, чем БХ, в примерно 5 и более раз. [c.58]

Подготовка образца перед записью спектра. Очевидно, что с уменьшением числа компонентов в данном образце возрастает точность и полнота структурного и функционального анализа по инфракрасным спектрам. Поэтому в инфракрасной спектроскопии приготовление образцов играет чрезвычайно важную роль. Современный инфракрасный спектрофотометр, какими бы хорошими ни были его конструктивные характеристики, не может дать лучшего спектра, чем это определяет качество представленного образца. Исследуемый образец должен быть обработан механически и химически для удаления по возможности всех нежелательных примесей. Полосы представляющего интерес соединения должны быть записаны в оптимальных условиях. Очевидно, что для этого нужно иметь соответствующее лабораторное оборудование и аппаратуру, с помощью которых можно проводить ректификацию или вакуумную перегонку, использовать адсорбционную, бумажную и препаративную газожидкостную хроматографию, провести химическое разделение (например, применяя реактив Жирара для выделения альдегидов или боратный метод для выделения первичных или вторичных спиртов, которые затем могут быть регенерированы водой). Необходимо также оборудование для разделения на основе различной растворимости, начиная с делительной воронки и кончая протнвоточнымн жидкостными колоннами. Все это увеличивает возможности ИК-метода в значительно большей степени, чем какие-либо тщательные калибровки прибора. [c.139]

Нанесение пробы является одной из наиболее критических стадий в тонкослойной или бумажной хроматографии. При проведении анализа проба обычно наносится в виде маленького пятна правильной формы, в препаративной хроматографии на стартовую линию пластинки или бумаги наносится тонкая полоска. Важно, чтобы поверхность абсорбирующей среды не имела повреждений и чтобы размеры пятна или полоски были не слишком велики. При использовании разбавленных растворов предпочтительно наносить пробу несколькими небольшими порциями, а не одной большой дозой, дающей бoJ Iьшoe пятно неправильной формы. Нанесение пробы требует довольно высокого мастерства и для получения надежных результатов должно проводиться с предельной тщатачьностью. [c.272]

Для полной автоматизации тонкослойной и бумажной хроматографии без особых усилий можно было бы использовать устройство для нанесения проб на основе насоса фирмы "Te hni on". Эта система имела бы простую конструкцию 14 могла бы получить широкое распространение в данной области. В препаративной системе, разработанной Солм-сом [24], в качестве хроматографической среды используется цилиндр из бумаги, вращающийся в горизонтальной плоскости под углом 90° к направлению движения фронта элюента. Разделяемая смесь непрерывно подается из капиллярной трубки в определенную точку на верху бумаги, а компоненты смеси движутся по спирали. Отдельные фракции собираются в приемники у основания цилиндра и направляются на анализ. Солмс использовал данную систему для разделения смесей хлоридов лития и калия, ксилозы и галактозы, метиленового голубого и фуксина. [c.283]

Антибиотики группы антоцианов. Ряд антоцианов (пеларгони-дин-З-моноглюкозид, дельфинидин-З-моноглюкозид, апигенидин), его производные обладают антибактериальным действием [151, 1026]. Разработаны условия хроматографирования на бумаге названных пигментов [151, 169, 308, 859, 865, 1027—1029]. Бумажною хроматографию применяли для препаративного выделения [308, 1027], при определении УФ-спектров [1030]. [c.167]

Бумажную хроматографию использовали при изучении гомогенности препаратов и контроля препаративного разделения [71, 241, 243, 247, 248, 343, 1193—1197], идентификации вновь выделяемых препаратов этой группы [374, 760, 1198—1207] для количественных определений [250, 360, 1208], при получении и изучении радиоактивных препаратов антибиотиков [186, 578], при исследовании процессов биотрансформации неомициновых антибиотиков [244, 348, 524, 578], биологически активных продуктов деградации канамицина [217], синергидного действия смеси неомицина и эндомицина [642], в исследованиях по систематике актиномицетов [19, 594]. Довольно широкое применение бумажная хроматография нашла при изучении строения неомициновых антибиотиков [c.196]

При изучении антибиотиков этой группы хроматографию на бумаге применяли для доказательства идентичности синтезированных антибиотиков природным образцам [1354—1356]. Бумажную хроматографию использовали также как препаративный метод, разделенные фракции кристаллизовали и идентифицировали по данным рентгеноструктурного анализа. Таким методом можно идентифицировать тиолютин и ауреотрицин [337]. [c.218]

При изучении актиномицинов бумажную хроматографию использовали, как уже было указано, для идентификации отдельных представителей этой группы антибиотиков, для изучения биосинтеза [227, 230, 281, 339, 361, 387—395, 399, 479, 1629-1633]. Методом хроматографии на бумаге было обследовано большое число штаммов актиномицетов, и среди них были выявлены новые продуценты актиномицинов [см., например, 154, 389, 613, 963, 1634, 1635], изучены продукты деградации актиномицинов и некоторые их производные [1598, 1603, 1636, 1637]. Исследованы процессы распада актиномицинов в почве [591], а также при воздействии микроорганизмов [1638]. Хроматографию применяли также как контроль выделения и очистки [1539, 1639], для препаративного разделения радиоактивных препаратов [315], в исследованиях по синтезу актино.мицииов [1640—1642]. [c.256]

При изучении стрептотрицинов бумажную хроматографию использовали не только для анализа компонентного состава различных препаратов, но также для препаративного разделения [1643], контроля выделения и очистки [231, 240, 245], количественного анализа компонентов смесей стрептотрицинов [231, 369, 1662], при изучении биосинтеза [413] и влияния состава сред на образование стрептотрицинов [1665]. Также разработаны методы хроматографической идентификации продуктов гидролиза антибиотиков группы стрептотрицинов гулозамина, стрептоли-дина, р-лизина и др. [1663, 1664, 1666—1668]. [c.260]