Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Выделение белков из тканей

    Во многих случаях источник, из которого должен быть выделен белок, по ряду причин предопределен заранее. Если же этого сделать нельзя, то полезно изучить возможности, предоставляющиеся для выбора такого источника среди различных видов организмов, различных штаммов или различных тканей. В основном [c.11]

    Давно было известно, что в тканях организма вырабатывается антикоагулянт, то есть вещество, препятствующее свертыванию крови, — гепарин. Гепарин, выделенный из тканей животных, многие годы применяют при лечении ишемической болезни сердца и других недугов, дабы предотвратить образование тромбов или приостановить его. И давно было также известно, что организм вырабатывает фермент, лизирующий, то есть растворяющий, белок кровяного сгустка — фибрин. [c.201]


    Сеть спектрина расположена на некотором расстоянии от мембраны, но с ней связана. Латеральная подвижность интегральных белков мембраны зависит от присутствия спектрина. При обработке тканей химотрипсином был выделен белок с массой 72 кДа, который ингибировал взаимодействие спектрина с обедненной этим белком мембраной. С помощью моноклональных антител показано, что 72 кДа белок принадлежит полосе 2,1 его назвали анке-рином. [c.57]

    В любом случае выделение и очистка ферментов — это наука, граничащая с искусством В самом деле, если химическая реакция протекает с выходом 0,1 % и с сотней побочных продуктов, то вряд ли химик-органик проявит интерес к процессу получения (и, тем более, очистки) целевого продукта Но именно такие задачи встают перед биотехнологами, желающими получить индивидуальный белок В работе с биологическим материалом необходимы и важны знания предварительных характеристик по содержанию белка в различных биообъектах (даже в органах и тканях одного и того же вида животного) От этого зависит выбор материала, его предварительная подготовка для включения в технологический процесс [c.54]

    Работа по очистке белка начинается с выбора природного материала, из которого будут производить выделение (если только, разумеется, экспериментатору есть из чего выбирать). Необходимо найти объект со сравнительно высоким содержанием нужного белка. Если исследуемый белок обладает какой-либо биологической активностью, которую можно точно оценить, то содержание его часто удается определить непосредственно в неочищенных смесях и подобрать таким образом наиболее подходящий исходный материал. Такие предварительные опыты очень ван 1ы, поскольку содержание белков в разных тканях сильно варьирует. Иногда содержание белка в определенной ткани удается повысить, изменяя физиологические условия (рацион, состав культуральной среды и т. и.). [c.79]

    Целый ряд факторов (действие сильных кислот и щелочей, солей тяжелых металлов, нагревание, механическое воздействие) приводит к нарушению конфигурации белковой молекулы — ее вторичной и третичной структуры. При этом изменяется пространственная форма, и белок утрачивает свойственные ему биологические функции. Примером денатурации белка служит варка яиц, створаживание молока (белка казеина), приготовление пищи и т. д. Сильное нагревание приводит не только к денатурации, но я к разрушению белка с выделением летучих продуктов, обладающих запахом жженых перьев. По такому запаху распознают наличие шерстяной нити в ткани. [c.313]


    Роль РНК в синтезе белка показана экспериментальным путем с помощью различных методов. Так, например, установлено, что синтез белка в клетках и тканях подавляется при разрушении РНК ферментом рибонуклеазой. Если обработать клетки амебы, корешки гороха или лука рибонуклеазой, то синтез белка в них прекращается. Под действием рибонуклеазы вирус табачной мозаики теряет способность размножаться в тканях табачного растения. Клетки бактерий, разрушенные ультразвуком, еще сохраняют способность синтезировать белок, но теряют ее после воздействия ферментом рибонуклеазой. В рибосомах, выделенных из проростков кукурузы и гороха, в присутствии рибонуклеазы прекращается синтез белка. [c.276]

    Маловероятно, что NGF — это единственный белок с такой функцией. Действительно, имеются многочисленные доказательства существования и других трофических факторов [6]. Сенсорные нервные волокна, например, встраиваются в ткани мишени in vitro, даже когда весь NGF удален с помощью антител к этому белку. Далее из мозга свиньи был выделен белок с [c.327]

    Рибосомы высших растений, подобно рибосомам из животных клеток, содержат в качестве главных компонентов РНК (40—50%) и белок (50—60%). Хотя состав оснований рибо-сомной РНК стеблей гороха и листьев клевера одинаков (табл. 2), вряд ли можно ожидать, что это окажется справедливым для всех вообще растительных тканей. В составе оснований рибосом, выделенных из тканей млекопитающих различных видов, имеются очень большие различия. Следует отметить, что во всех случаях в рибосомной РНК А У и Г Ц. [c.21]

    Аминокислотный анализ исследуемого белка, проведенный на анализаторе аминокислот JL -3B фирмы JEOL, свидетельствует о явном преобладании в нем основных аминокислот (лизина, гистидина и аргинина). Сумма этих аминокислот в два раза превышает содержание дикар-боновых аминокислот. По аминокислотному составу выделенный белок практически идентичен энцефалитогенному белку, полученному другими авторами из ткани головного и спинного мозга (Паллад1н и др., 1970). [c.25]

    Еще в 1909 г. русский ученый П.Н. Лащенков обратил внимание на то, что белок куриного яйца обладает антибактериальным действием. Спустя 13 лет после опубликования наблюдений П.Н. Лащенкова английский ученый А. Флеминг отнес этот белок к энзимам, а также обнаружил, что аналогичным действием обладают выделения ряда тканей человека и животных, растений и микробов. Он назвал эти антибиотические вещества лизоцимом. [c.394]

    В настоящее время установлено, что один из криоглобулинов идентичен белку фибронектину, связанному с поверхностью фибробластов. Последний был выделен как в мономерной (мол. масса 220000), так и в димерной формах. Данный белок широко распространен в соединительной ткани. [c.578]

    Название белок было дано веществу птичьих яиц, свертывающе муся при нагревании в белую массу. Позднее этот термин был распро странен и на другие подобные вещества, выделенные из различны животных и растительных тканей и клеток. [c.34]

    Рецепторы исследуются на трех уровнях в интактной ткани или в отдельных интактных клетках, в суспензиях мембран, полученных из этой ткани, и на молекулах, выделенных из нее. Считается, что биохимические исследования отражают физиологические свойства, если на всех уровнях получены согласующиеся результаты. Биохимические исследования рецепторных молекул увенчивались успехом только тогда, когда удавалось отделить эти молекулы от окружающих мембранных компонентов с сохранением присущих свойств. Наиболее полезными инструментами при таких исследованиях являются неионные детергенты, типа, например, тритона Х-100, эмульфогена или бриджа. Они солюбилизируют мембрану, но стабилизируют гидрофобный мембранный белок в воде и благодаря своим амфо-фильньш свойствам заменяют липиды на белковой поверхности. Тем самым они предотвращают агрегацию и осаждение белка и позволяют избежать денатурации, которая всегда происходит при применении ионного детергента додецилсульфата натрия (ДСН) (гл. 3). [c.242]

    Белок ацетилхолинового рецептора может быть выделен в количествах 10, мг из электрической ткани Torpedo, особенно богатой рецептором [5, 8]. Он состоит из гликопротеина с М 270 000. Рецептор представляет собой белковый комплекс, состоящий из пяти полипептидных цепей, имеющих стехиометрию (см. также с. 203). С помощью аффинных реагентов было показано, что связывающие центры для низкомолекулярных эффекторов располагаются на пептидах с М 40000, т. е. на а-субъединицах. В изолированном виде эти полипептиды, [c.262]

    Белки являются наиболее важным комйонентом живой материи. В отличие от других высокомолекулярных соединений, входящих в состав живых организмов, белки широко различаются по размерам молекул, заряду, растворимости в воде и других полярных растворителях и даже по содержанию в тканях. Сочетание свойств, характеризующих отдельный белок, в конечном счете определяется специфической аминокислотной последовательностью полипептидной цепи (или нескольких цепей, если речь идет о многоцепочечном или субъединичном белке). Огромное разнообразие белков служит причиной образования сложных смесей, различных по составу, но близких по физико-химическим свойствам. Основными факторами позволяющими фракционировать белки на колонках с различными материалами, является их амфотерный характер и большие вариации в размерах молекул. На способности белков связывать специфические лиганды основан эффективный метод избирательного выделения — аффинная хроматография. С другой стороны, в исходном материале всегда присутствуют протеазы и пептидазы, что накладывает на условия выделения определенные ограничения, например в отношении температуры, диапазона pH и т. д. [c.421]


    С печенью, в ряде случаев удоОно предварительно отделить цитоплазму от ядер и использовать только цитоплазму. Это можно осуществить путем экстрагирования гомогенизированной ткани 0,14 М раствором Na l, приводящего к отделению цитоплазматических рибонуклеопротендов от содержащего ДНК ядерного материала. Рибонуклеонротеид осаждают затем из экстракта при pH 4,5 и вновь растворяют его в растворе бикарбоната натрия. Продолжительное встряхивание с несколькими последовательно сменяемыми порциями хлороформа, содержащего небольшое количество октилового спирта, приводит к удалению белка нуклеиновую кислоту, остающуюся в водном растворе, осаждают в виде натриевой соли при добавлении спирта. Можно поступить и иначе вызвать спиртом денатурацию рибонуклеопротеида и экстрагировать нуклеиновую кислоту 10%-ным раствором хлористого натрия, из которого затем осадить ее добавлением двух объемов спирта [1—4]. Примерно аналогичный метод существует и для выделения РНК из животных тканей [5]. В этом случае нуклеиновую кислоту осаждают из раствора солянокислого гуанидина, в котором белок нерастворим для удаления белка можно использовать также додецилсульфат натрия [6, 7]. [c.40]

    Фермент каталаза содерн ится в животных тканях, наиболее богаты им печень и эритроциты. Кристаллическая каталаза, выделенная из печени, представляет собой содержащий железо белок с молекулярным весом около 250 ООО, она является одним из наиболее активных биологических катализаторов одна молекула этого фермента разлагает при О за одну лшнуту свыте [c.246]

    Т.-и.— широко распрострапенный фермент, присутствующий в большинстве животных и растительных тканей, а также в микроорганизмах. Т.-и., выделенная в кристаллич. виде из дрожжей,— белок с мол. в. 100 ООО. Оптимум активности Т.-и. находится при pH 7,0—8,0. Молекулярная активность Т.-и. составляет 945000 М мин . При 38° активность фермента увеличивается в 2 раза. Неорганич. фосфат в концентрации 0,05 М тормозит активность Т.-и. на 75%. Михаэлиса константа для D-глицеральдегид- [c.133]

    Фосфоглицеромутаза выделена в кристаллич. виде из различных источников. Фермент, выделенный из мышечной ткани,— белок, м. в. 57 000+2 ООО, из дрожжей — м. в. 112 ООО. Фосфоглицеромутаза (в отличие от фосфоглюкомутазы) не требует для своей активащга Mg + или др. ионов рН-оптимум фермента, выделенного из мышц или из дрожжей, находится при 5,9. Такие реагенты на SH-группы, как п-хлормеркурибензоат, ионы тяжелых металлов и F подавляют активность фосфогли-церомутазы. [c.241]

    РИБОНУКЛЕАЗЫ (РНК-азы) — ферменты, катализирующие гидролитич. расщепление рибонуклеиновых к-т на олиго- и мононуклеотиды. Р. широко распространены в природе и присутствуют во всех исследованных тканях. Наиболее изучена панкреатическая Р., секретируемая поджелудочной железой [систематич. название полирибонуклеотид — 2-олиго-нуклеотидо-трансфераза (циклизующая) шифр 2.7.7.16 — см. Номенклатура и классификация ферментов]. Р., выделенная в кристаллич. виде из поджелудочной железы быка экстракцией разведенной серной к-той с последующим фракционированием (NH4)2S04 — белок основного характера (р/ 7,8) с мол. в. 13 ООО. Установлена природа и последовательность аминокислотных остатков, входящих в состав Р., и выяснены существенные детали ее пространственной структуры, что дало возможность воссоздать трехмерную модель этого белка. Молекула панкреатич. Р. представляет собой одинарную полипептидиую цепь, состоящую из 124 аминокислотных остатков N-концевой аминокислотой в молекуле Р. является лизин, С-концевой — валин. [c.337]

    Наконец, полученные этими приемами результаты следует всегда рассматривать и с учетом происхождения выделенных белков и их высокой лабильности. При проведении серии исследований свойств белкового препарата может оказаться, что исследователь изучает при последнем анализе иные виды молекул, чем в начале работы. Более того, даже свежеприготовленные препараты могут в некоторых отношениях отличаться от присутствующих в исходной ткани белков. Насколько существенными могут быть эти различия Дать какого-либо общего ответа на этот вопрос невозможно. В случае относительно стабильных белков, естественно существующих в свободном растворе (например, белки плазмы крови), можно сравнить результаты измерений в условиях, не слишком отличных от биологических, с результатами, полученными для очищенных систем. В других случаях сохранение оригинальной структуры в значительной степени доказывается способностью системы к воспроизводству in vitro своей биологической функции. Для таких структурных белков, как, например, коллаген, данные физико-химических измерений на изолированных белках необходимо дополнять прямыми электронно-микроскопическими наблюдениями тех биологических систем, в которых находятся эти белки. В некоторых же случаях почти невозможно установить, в какой степени очищенный белок является артефактом получения. [c.129]

    Обычно различают протеиноиды беспозвоночных и позвоночных. К первым относят фиброин, спонгин, горгонин и др. Они входят в состав опорных или покровных тканей беспозвоночных. Фиброин входит в состав нити шелкопряда. Спонгин представляет иодсодержащий (1—2%) белок скелета морских губок при гидролизе из него выделен дииодтирозин. Горгонин выделен из скелета кораллов в составе различных горгонинов встречаются иод, бром, хлор входящий в их состав галоген замещает водород обычно в ароматическом ядре тирозина. [c.327]

    Похожий иа гемоглобин белок имеется в мышечной ткани это — миоглобин, или мышечный гемоглобин. Миоглобин, выделенный из различных видов, имеет молекулярную массу порядка 17 ООО и состоит из одной полипептидной цепи, соединенной с одной грустпой гема. Про-стетичеокая группа у него та же — протогем. [c.126]

    Большая часть методов выделения основывается на методике Чарльза и Скотта [5], которые использовали бычью печень и бычьи легкие как недорогой источник гепарина. Ткань подвергают автолизу и затем экстрагируют щелочным раствором. Растворимый белок удаляют, разрушая его с помощью ферментов, а жиры извлекают спиртом. Эта методика была упрощена обработке протеолитическими ферментами подвергалась непосредственно ткань [6, 7]. Предложен ряд методик окончательной очистки гепарина. Наибольшую ценность имеет метод, предусматривающий приготовление бензидиновой соли, которую затем превращают в кристаллическую кислую бариевую соль [8]. Кристаллическую кислую или нейтральную бариевую соль фракционируют. Новейшие методы заключаются во фракционировании цетилпиридиниевой соли [9 — 10] (см. также стр. 288) и адсорбции на колонках с различными ионообменными смолами [11 ] и ЭKTEOЛA-цeлJtюлoзoй [12]. Приведенная ниже методика основана на первоначальной методике Чарльза и Скотта [5, 8], и очистка проводится с использованием кристаллической кислой бариевой соли [13]. [c.365]

    Из генома В. thuringiensis бьш выделен ген токсина Ы2 и поставлен под контроль промотора 35S aMV. 6 -Ген был интегрирован в геном растений табака методом агробактериальной трансформации. Экспрессия бактериального Ы2-тт в растительных клетках была подтверждена как на уровне транскрипции, по присутствию соответствующей мРНК, так и на уровне трансляции, по синтезу белка-токсина. Полученные трансгенные растения табака бьши устойчивы к вредителям. Эффективность защиты сельскохозяйственных культур от вредителей была показана и на трансгенных растениях томата, трансформированных генами эндотоксина, при этом бактериальный белок, синтезированный в тканях растений, обеспечивал защитный эффект, сравнимый с использованием инсектицидных препаратов. [c.71]

    Впервые специфический для нервной ткани белок, названный S-100, был выделен Муром и МакГрегором (Moore, M Gregor, 1965) в 1965 г. За прошедшие годы этот белок изучен достаточно подробно, разрабо- [c.25]

    Протеиноиды — группа белков, содержащихся в опорных тканях организма животных,— в костной ткани, хрящах, сухожилиях, волосах и шерсти. Протеиноиды нерастворимы ни в воде, ни в солевых растворах, ни в разведенных кислотах и щелочах, т. е. они находятся в денатурированном состоянии. Они не гидролизируются пищеварительными ферментами (не перевариваются) и поэтому не могут быть использованы как продукты питания. Протеиноиды по своей структуре являются волокнистыми (фибриллярными) белками. К протеиноидам относится белок соединительной ткани коллаген (его биологический предшественник — белок проколлаген — выделен в кристаллическом виде и изучен В. Н. Ореховичем), оссеин — белок костной ткани, кератины — белки волос, шерсти, эпидермиса, рогов. Эти белки богаты цистином. Протеиноидом является также фиброин, образующийся в так называемых прядильных железах насекомых (гусениц бабочек-шелко-прядов, пауков). Из фиброина шелкопрядов изготавливаются шелковые нити. [c.39]

    Содержание меди в различных тканях позвоночных животных невелико и достигает десятых долей мг%. Исключение составляет печень, в которой содержание меди достигает 3—5 мг%. Из печени выделен медьсодержащий белок — гепатокупреин. Содержание меди в плазме крови человека составляет 0,1 мг%. [c.222]

    Образование таких восстановленных коферментов, как НАД-Нг или ФАД -Нг при окислении какого-либо богатого энергией питательного вещества сопровождается лишь переносом химической энергии от одной молекулярной частицы к другой. Преимущество коферментов как системы заключается в том, что они могут участвовать в сопровождающихся выделением энергии процессах, характерных для самых различных типов тканей и ферментов. Содержание энергии в восстановленных коферментах можно легко оценить. В табл. 1 приведены стандартные электродные потенциалы Е ) для некоторых биологически важных реагентов. Мы включили в эту таблицу содеря ащий железо протеин цитохром с для того, чтобы показать, что окислительно-восстановительный потенциал пары Ке /Ре заметно изменяется, если металл образует хелат с белком. Другой содернмщий железо белок — ферредоксин — мы рассмотрим более подробно позднее, укажем только, что восстановленный ферредоксин является мощным восстановителем [4,5]. [c.159]

    Многие компоненты циклазной системы, в том числе каталитическую субъединицу, удалось получить в очищенном виде, и сейчас уже ясно, что существует целое семейство G-белков. Так, очень близки к G-белку аденилатциклазы трансдуцин (белок, участвующий в сопряжении света с фотоактивацией сетчатки глаза) и продукты rai-онкогенов из ткани головного мозга выделен уникальный белок G,, другие, пока еще мало изученные белки этого ряда, по-видимому, участвуют в транспорте ионов кальция и калия или же метаболизме фосфоинозитидов. [c.163]

    Трансйортные белки. В крови позвоиочпых животных имеется особый белок — гемоглобин. Он очень активно связывает молекулярный кислород. При прохождении крови через легкие гемоглобин соединяется с кислородом, когда же кровь попадает обратно в сердце и другие ткани, связанный кислород освобождается и используется ткапями. Таким образом, гемоглобин пе катализирует химическую реакцию, а выполняет функцию переносчика определенного вещества. Строение гемоглобина способствует тому, что он узнает молекулы кислорода и связывается с ними. В клетках и на их наружных мембранах также содержится много разнообразных белков, которые облегчают поступление в клетки необходимых веществ и выделение из них отработанных продуктов обмена. Все известные транспортные белГки узнают специфические вещества и взаимодействуют с ними. [c.18]


Смотреть страницы где упоминается термин Выделение белков из тканей: [c.246]    [c.10]    [c.25]    [c.157]    [c.23]    [c.384]    [c.300]    [c.277]    [c.186]    [c.236]    [c.14]    [c.145]    [c.416]    [c.332]    [c.127]    [c.201]    [c.258]    [c.348]   
Смотреть главы в:

Биохимия Издание 2 -> Выделение белков из тканей




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Выделение белков



© 2024 chem21.info Реклама на сайте