Электрофорез см тонком слое

В производстве резины, где требуется выделять полужидкие частицы каучука из латекса, латекс подвергают электрофорезу анодом служит движущееся металлическое полотно, на котором осаждаются частицы латекса и выносятся на этом полотне из ванны. При производстве прорезиненных тканей ленту ткани пропускают вблизи неподвижного анода частицы латекса передвигаясь к аноду, удерживаются на ткани. Для гуммирования металлических деталей аппаратов с антикоррозионными целями деталь погружают в латекс каучука, делая ее анодом. После образования на детали каучуковой пленки ее вулканизируют. Широко распространен электрофоретический метод нанесения тонких слоев изолирующего покрытия из суспензии алунда (плавленного корунда) на подогреватели электронных ламп или карбонатов щелочноземельных металлов на катоды этих ламп. Комбинацией электролиза и электрофореза достигается довольно высокая степень очистки воды. Очищаемая вода проходит последовательно ряд ячеек, каждая из которых разделена двумя пористыми диафрагмами на три пространства анодное, среднее и катодное. Под действием электролиза ионы примесей электролитов свободно проходят сквозь поры диафрагмы, концентрируясь в электродных пространствах, откуда вымываются промывными водами. Твердые коллоидные частицы примесей при своем передвижении к электроду удерживаются поверхностью диафрагм. [c.33]

Электрокинетические явления широко используются не только при научных исследованиях, но и в технике. В частности, электро- форез применяют для нанесения тонкого слоя частиц коллоидных размеров на поверхность проводящего материала. Этим способом лолучают весьма однородные покрытия, толщину которых легко регулировать. Электроотложение можно проводить в таких средах, как спирт, ацетон и других, что исключает выделение газов на электродах дал<е при большой силе тока и малой электропроводности жидкости. Для нанесения токопроводящих покрытий электрофорез используют при производстве изолированных нагревательных спиралей и активированных катодов для радиоламп, представляющих собой металлическую проволоку, покрытую тонким слоем окисла щелочноземельного металла. [c.218]

Тонкослойный электрофорез (ТСЭ). Аналогично ТСХ, ТСЭ проводят на тонких слоях высокодисперсных сорбентов. Преимуществом метода ТСЭ является возможность использования универсальных обнаруживающих реагентов, применяемых в ТСХ. [c.364]

В основу этого метода положен зонный электрофорез в электролите, который движется перпендикулярно направленик> электрического поля. Первоначальный вариант метода предназначен для разделения на бумаге. Позднее [2] он был применен в отсутствие носителя, при этом стабилизация зон осуществлялась ламинарным потоком достаточно тонкого слоя электролита. Электрофоретическая ячейка имела форму плоской квадратной или прямоугольной рамки, длина ее стороны составляла несколько десятков сайтиметров, а толщина слоя равнялась 0,25—0,60 мм. Вначале этот прибор использовался для разделения высоко- и низкомолекулярных пептидных соединений, нсь позднее выяснилось, что таким способом можно эффективно разделять не только растворимые электрофоретические соединения, но и коллоидные частицы, включая субклеточные частицы и клетки, если конструкция аппарата не допускает быстрого осаждения макрочастиц на стенках электрофоретической ячейки. Движение частиц в условиях непрерывного электрофореза описывается следующим простым соотношением [39] [c.285]

Электрокинетические явления имеют разнообразные практические применения электрофорез — для создания тонких слоев произвольного состава на проводя-ших субстратах, для разделения смеси белков на отдельные компоненты, для введения лекарственных препаратов через кожу пациента электроосмос — для прецизионного дозирования жидкостей и создания микроманипуляторов потенциалы оседания (движения) и протекания — как сигналы разнообразных датчиков. [c.617]

При выборе методов разделения пептидов учитывают физ.-хим. свойства, кол-во и длину молекул разделяемых соединений. Для первичного фракционирования смесей коротких пептидов, содержащих до 15-20 аминокислотных остатков, в большинстве случаев используют ионообменную хроматографию на катионитах. Дальнейшее разделение и очистку проводят с помощью хроматографии и электрофореза на бумаге или пластинках с тонким слоем целлюлозы или силикагеля. [c.251]

Электрофорез в тонких слоях [c.160]

Большое распространение получил электрофорез в тонких слоях для разделения высокомолекулярных веществ на различных носителях, особенно на агаровом, крахмальном и полиакриламидном гелях. Благодаря замечательной разделительной способности этот метод нашел применение прежде всего в клинической биохимии. Напомним, что в подавляющем большинстве случаев разделение с помощью этого метода осуществляется на носителях, приготовленных в форме геля. Опыт, накопленный в области хроматографии в тонких слоях, показал, однако, что для разделения некоторых групп веществ, в первую очередь низкомолекулярных, можно с успехом применять и суспензии некоторых сорбентов. [c.160]

Решающим при сочетании электрофореза с ТСХ является правильный выбор электролита, которым предварительно пропитывают тонкий слой сорбента. Обычно для разделения смесей ионов-щелочных металлов в качестве электролита применяют буферный раствор ЫН4С1 + НС1 (pH 2,18), 3,5-10- М раствор паравольфра-мата аммония или 0,001—0,1 М раствор нитрата аммония. Для анализа щелочноземельных металлов применяют 0,15 М раствор лимонной кислоты, для анализа тяжелых металлов — 0,05 М раствор КаОН, 0,1 М раствор НС1 или 0,1 М раствор а-оксиизомас-ляной кислоты. Редкоземельные элементы анализируют на фоне [c.159]

Хорошее разделение всех соединений тиамина (даже в больших количествах и в присутствии многих примесей) обещает хроматография на слоях ионообменников [43] и электрофорез в тонких слоях, которые оказались пригодными в случае фенолов, фенолкарбоновых кислот [41] и аминокислот [25]. [c.239]

Сущность метода заключается в том, что оба конца ленты фильтровальной бумаги, смоченные буфером, нужно опустить в буферный раствор, связанный с электродами. Исследуемый раствор нанести на бумагу в виде точки или полосы из нескольких капель. Аппарат (рис. 18) закрыть, чтобы препятствовать испарению тонкого слоя буферного раствора. Через несколько часов электрофореза (в зависимости от применяемой силы поля) белки под действием тока отходят от места их нанесения на не- [c.156]

Известны методы электроосмотической пропитки тканей. Предложено электрофорезом осаждать тонкие слои алунда из его водной взвеси окислы, карбонаты, силикаты и некоторые соли металлов [c.534]

НЫХ электролитов являются оксикислоты. а-Оксимасляная кислота применяется при электрофорезе редкоземельных элементов на ацетатцеллюлозной пленке [10]. В присутствии этой кислоты на бумаге и в тонких слоях наряду с лантанидами удалось также разделить актиниды [1]. Большие различия в под- [c.329]

Явления электрофореза и электроосмоса широко используются в технике и производстве. Электрофорез применяется в фарфоровом производстве для выделения из суспензий глин чистого каолина. Наиболее мелкие отрицательно заряженные частицы каолина после тщательного взмучивания в воде осаждаются на вращающемся свинцовом барабане, заряженном положительно. Посторонние примеси в виде положительно заряженных частиц РеаОз, а также более крупные частицы каолина уносятся проточной водой. С помощью электрофореза различные изделия покрывают тонким слоем каучука из латекса. При этом отрицательно заряженные частицы латекса движутся в электрическом поле к аноду (покрываемый предмет) и осаждаются па нем. За последние годы метод электрофореза нащел широкое применение в получении оксикатодов в радиолампах. [c.312]

При проведении двумерного процесса особенно интересно сочетание ТСХ (в одном направлении) с тонкослойным электрофорезом (в перпендикулярном направлении) [118]. Комбинация этих двух способов была использована для разделения различных гидролизованных форм хлоридных комплексов трех- и четырехвалентного иридия на тонких слоях целлюлозы [317]. [c.20]

В классический период развития органической химии, длившийся почти столетие, экспериментатор обходился, как правило, небольшим числом сравнительно простых типовых методов. Для овладения экспериментальной техникой тех лет достаточно было научиться осуществлять синтез нескольких десятков соединений, так как основные операции выделения и очистки веществ часто повторялись и мало отличались друг от друга. За последние десятилетия арсенал методов и приемов, применяемых в органической лаборатории, неимоверно вырос. Особенно много принципиально нового введено в методы выделения веществ, эффективность которых неизмеримо возросла благодаря внедрению различных видов хроматографии, противоточного распределения, электрофореза и т. д. Появился целый набор специальных приемов для работы в микро- и полу-ми кромасштабах. Такие методы, как хроматография в тонких слоях и на бумаге, в сочетании с физическими методами идентификации и контроля позволили органикам непрерывно следить за ходом химических реакций или процессов разделения веществ. [c.5]

Для тонкослойного электрофореза пригодна большая часть устройств, предназначенных для электрофореза на бумаге. Общая схема такого устройства изображена на рис. 5.20. Обычно устройство для электрофореза на тонких слоях геля агара или крахмала содержит ячейку с забуференным гелем, помещенным между электродной камерой и хроматографическим слоем, однако при применении других хроматографических материалов [c.166]

В тонкослойном электрофорезе с использованием крахмальных гелей удовлетворительная регистрация тонких слоев достигается путем пластифицирования самых тонких слоев [42—47]. В этом методе лучше всего воспользоваться целлофановой подложкой. После окраски и промывки тонкого слоя рекомендуется следующая методика пластифицирования [43]. Слой геля погружают на 5 мин в абсолютный метиловый спирт (эту стадию [c.302]

В которую переходят из крахмала растворимые примеси, отбрасывают. Отмывание крахмала отстаиванием повторяют дважды, затем осадок переносят в воронку Бюхнера и 3—4 раза промывают буферным раствором. После этого делают пастоподобную смесь крахмала с буферным раствором и примерно 100 мл этой пасты переносят в коническую колбу емкостью 0,5 л. Постоянно размешивая, крахмальную пасту нагревают до получения абсолютно гомогенной массы, причем следует избегать кипения геля. Чтобы удалить пузырьки воздуха, в колбе, содер-жаш ей нагретый гомогенный крахмальный гель, с помош ью вакуумного насоса создают разрежение, и гель на 1—2 мин вскипает. После этого им заполняют ванну прибора для электрофореза избыток буферного раствора удаляют с помош ью толстой фильтровальной бумаги, а для того чтобы предотвратить испарение, поверхность геля заливают тонким слоем расплавленного парафина. [c.79]

Изоэлектрическая фокусировка - электрофорез на слое с градиентом рн. Амфолиты перемещаются по тонкому слою до тех пор, пока не достигнут такого места, где величина pH равна их изоэлектриче-ской точке в этом месте они концентрируются в виде резко очерчен- [c.101]

Для электрокинетических явлений характерны два предельных случая. В первом толщина двойного электрического слоя считается малой ио сравнению с характерным линейным размером задачи. В случае электроосмотическо-го течения таким линейным размером может быть диаметр капилляра, в котором происходит течение. При электрофорезе характерным линейным размером является радиус частицы. В рассматриваемом предельном случае раствор можно считать электронейтральным везде, кроме очень тонкого слоя, прилегающего к поверхности твердого тела. Второй предельный случай характеризуется тем, что толщина двойного слоя превосходит линейный размер задачи. Теоретическое рассмотрение этого случая представляет наибольшие трудности, поскольку раствор уже нельзя считать электронейтральным. С прикладной точки зрения этот случай имеет большое значение в биологии, поскольку размер биологических частицы, как правило, меньше толщины дебаевского слоя. В большинстве практических случаев приходится иметь дело с гораздо большими размерами частиц, поэтому основное внимание в дальнейтпем уделяется первому предельному случаю. [c.153]

При разделении менее сложных смесей (10—15 пептидоа) часто опускается стадия ионообменной хроматографии. Выбор схемы разделения проаодится на основании анализа так называемых пептидных карт. Для получения пептидной карты (рис. 10) смесь пептидоа, образовавшаяся в результате ферментативного или химического гидролиза белка, наносится в анде небольшой полоски на лист хроматографической бумаги или пластинки с тонким слоем целлюлозы и подвергается электрофорезу или хроматографии во взаимно перпендикулярных направлениях. После проявления пептидной карты специфичным реактивом иа бумаге или пластинке образуется характерный для данного белка набор пятен, их взаимное расположение позволяет оценить эффективность использованных методов разделения и выбрать оптимальный вариант. [c.53]

В качестве преимуществ метода ХТС по сравнению с хроматографией, на бумаге следует специально отметить следующее а) небольшая диффузия приводит к меньшим пятнам, благодаря чему достигается более высокая чувствительность б) меньшее время разделения в) возможность применять самые агрессивные реагенты для обнаружения разделяемых веществ. Последа нее справедливо также для ионофореза в тонких слоях, а пункт б), уменьшение времени разделения, имеет силу в первую очередь для низковольтного электрофореза. Применение свободных неохлаждаемых стеклянных пластинок в качестве носителей адсорбционного слоя имеет известные недостатки. Вследствие сравнительно большой толщины стеклянных пластинок (3,5 мм) затрудняется эффективное охлаждение, совершенно необходимое-для разделения при высоком напряжении (выше 500 в). При использовании более тонких стеклянных пластинок этот недостаток в некоторой степени устраняется. Из-за опасности повреждения слоя труднее осуществить охлаждение с верхней стороны, которое, в противоположность Пастуска и Тринксу [195], мы считаем необходимым уже при напряжении 400—500 в. [c.430]

Если бы удалось полностью элюировать с сорбционного слоя продукты расщепления нуклеиновых кислот, разделенных методом ХТС, то комбинация этого метода с УФ-спектрофотометрией обеспечилд бы количественный анализ нуклеиновых кислот. Весьма перспективной кажется комбинация метода ХТС с электрофорезом в тонких слоях [39] (см. стр. 430) [c.452]

Электрофорез проводится на стеклянных пластинках с нанесенным тонким слоем агарового геля, приготовленного на буферном растворе при pH 8,6. В геле ближе к одному краю пластинки по одной линии высекают гнездо и очень аккуратно вносят в него 0,1 мл раствора исследуемой смеси белков. После нанесения исследуемого раствора на оба края пластинки параллельно стартовой линии кладут фильтровальные бумажки, покрытые агаром. Эти бумажки служат соединительными мостиками, соединяющими агар на пластинке с буфе- [c.126]

Эффективное разделение аминокислот в тонких слоях может быть достигнуто путем сочетания хроматографии и электрофореза [184]. Сорбент — целлюлоза MN-300 с толщиной слоя 0,25 мм, размер пластинок 20X40 см. В одном направлении по короткой стороне пластинки проводили нисходящую хроматографию в системе растворителей пиридин — этанол — вода (2 2 1) в течение 7,5 ч (за ходом хроматографии следили по передвижению пятна красителя — бриллиантового черного). После удаления растворителя слой сорбента пропитывали 0,025 М раствором буры и проводили электрофорез в перпендикулярном направлении при градиенте напряжения 10 В/см в течение 3 ч. [c.114]

В некоторых случаях тонкослойный электрофорез превосходит электрофорез на бумаге и тонкослойную хроматографию. Так, например, предложенный в работе [102] метод дает гораздо меньший разброс результатов при анализе РЗЭ, чем электрофорез на бумаге и ТСХ. В упомянутой работе авторами было показано, что на тонких слоях ацетилцеллюлозы (0,24—0,30 мм), предварительно в течение 1 часа пропитанных 0,2—0,4 М раствором а-оксиизомасляной кислоты, электрофоретическим методом хорошо разделяются все РЗЭ и особенно тяжелые (сила тока 8,2—8,7 ма, градиент потенциала 40— 80 б1см). Пятна РЗЭ тем компактнее, чем меньше количество нано- [c.128]

Предложен [201] метод оценки качества пищевых продуктов путем анализа пептидных карт, полученных на тонких слоях целлюлозы. Пептидные карты получают хроматографией проб на пластинке в одном направлении в системе ннбутанол — уксусная кислота — пиридин — вода и электрофореза в пиридин-ацетатном буфере при pH = 6,5 в перпендикулярном направлении. [c.118]

При диск-микроэлектрофорезе, как и при любом электрофорезе с применением поддерживающей среды, надо учитывать некоторые факторы, которые могут стать источником ошибок. Всегда можно принять, что между гелем и внутренней поверхностью стенок трубки существует слой жидкости, по которому может течь поток молекул. Йертен [21] показал, что если стенки стеклянного капилляра покрыть раствором метилцеллюлозы, имеющей вязкость 100 сП, то электроэндоосмос полностью ликвидируется. Поэтому авторы этой главы рекомендуют покрывать капилляры тонким слоем метилцеллюлозы. [c.284]

С помощью электрофореза проводят покрытие различных изделий тонким слоем каучука из латекса. В этом случае отрицательно заряженные частицы латекса движутся в электрическом поле к аноду (покрываемый предмет) и осаждаются на нем. За последние годы метод электрофореза нашел широкое применение в получении оксикатодов в радиолампах. [c.396]

Сефадекс выполнял роль среды при разделении белков [125, 349—351]. Ферменты, которые нельзя разделить методом электрофореза на бумаге или тонких слоях крахмала без потери их активности, можно выделить без потери активности после электрофореза на сефадексе [349]. Иоханссон и Реймо [125] и Фазелла и сотр. [350] использовали сефадекс для двумерного тонкослойного разделения, в котором в одном направлении проводили тонкослойную гель-фильтрацию, а в другом — электрофорез. При приготовлении тонких слоев сефадекса сухой порошок смешивают с избытком подходящего буферного раствора (1 7,5) и оставляют на 24 ч. После этого удаляют избыток жидкости, полученный гель наносят на стеклянную пластинку и выравнивают слой стеклянным прутком, перемещая его по направляющим полоскам. Чтобы предотвратить потерю влаги в процессе электрофореза, слой геля можно покрыть стеклянной пластинкой. [c.169]

Хелук и др. [95] разделял фенолокарбоновые кислоты методом тех в одном направлении и методом электрофореза — в другом. Пробу наносили на слой силикагеля. Бензойные кислоты элюировали смесью бензол—диоксан—уксусная кислота (90 25 4) а коричные кислоты анализировали методом тонкослойного электрофореза, причем pH смеси растворителей бензол—метанол—уксусная кислота (45 8 4) доводили до 5,3 буферным раствором пиридин—уксусная кислота—вода (25 10 24) [96]. На тонких слоях полиамидов хроматографирование осуществляли смесью этилацетат—уксусная кислота (95 5), затем проводили электрофорез бензойных кислот pH 8,9 (буфер Аронсона) и коричных кислот при pH 3,55 в последнем случае растворителем служила смесь пиридин—уксусная кислота—вода (1 6 90). На целлюлозе сначала проводили тонкослойный электрофорез при pH 5,3, а затем тонкослойное хроматографирование 30 %-ной уксусной кислотой. [c.402]

Пастушка и Петрович [53] анализировали хроматографически азотосодержащие производные бензола, фенола, толуола, хлорбензола, азобензола, бензотриазола, феназина и бензидина. В работе этих авторов приведены величины Rt, полученные с такими элюентами, как бензол, бензол—метанол (4 1) и бензол—диоксан—уксусная кислота (90 25 4). Лепри и др. [54] провели хроматографический анализ смеси 45 первичных ароматических аминов на тонких слоях ряда анионообменников АС 1-Х4(СНзСОО-), АС1-Х4(С10-), дауэкс 50Х-4(Н+), целлекс О (СНзСОО ), натрийкарбоксиметилцеллюлозе и на микрокристаллической целлюлозе. Двадцать аминов исследованы методом электрофореза на тонких слоях АО 1-Х4(СНзСОО ). Дункан и др. [55] провели хроматографический анализ смеси девяти ароматических аминов на слоях целлюлозы, пропитанных жидким ионообменником бис-(2-этилгексил) фосфатом. [c.461]

Хонеггер [88]- продемонстрировал разделение аминокислот методом электрофореза на тонких слоях силикагеля О, кизельгура О и оксида алюминия, приготовленного на буферном растворе цитрата натрия (0,1 М, pH 3,8). Напряжение составляло 460 В при токе 12,6 мА электролитом служила смесь 2 н. уксусной и 0,6 н. муравьиной кислот (1 1). (Методика такого способа разделения рассматривается в гл. V, разд. 5.) Описана также комбинированная методика разделения, сочетающая электрофорез и хроматографирование вначале в одном направлении проводят электрофорез, затем пластинку высушивают н осуществляют хроматографическое разделение в другом направлении. Найбом [42] описал методику анализа аминокислот комбинированным способом, сочетающим электрофорез и хроматографирование. [c.494]