Ацетилхолинэстераза ингибиторы

Ингибирование бывает обратимым и необратимым. Последнее относится к реакциям, приводящим к безвозвратной потере активности фер- мента [33а]. Примером необратимого ингибирования может служить инактивация фермента ацетилхолинэстеразы под влиянием ядов нервно-паралитического действия — фосфорорганических соединений (гл. 7, разд. Г, 1). Часто стадии необратимой инактивации предшествует обратимое связывание ингибитора с комплементарным ему центром на поверхности молекулы фермента. Здесь мы не будем рассматривать математическую обработку кинетических данных, соответствующих необратимому ингибированию, и ограничимся обсуждением количествен лых аспектов действия обратимых ингибиторов. [c.27]

Результаты определения молекулярной активности, полученные Берри [100], по-видимому, не могут быть признаны достаточно точными по причинам, указанным выше (недостаточно высокая специфичность использованных ингибиторов и наличие в эритроцитах других белков, помимо ацетилхолинэстераз, которые могут реагировать с ингибиторами). Данные лаборатории Коэна [101, 102], полученные с отмытой стромой эритроцитов и предотвращением побочных реакций ингибитора, и наши данные [103] с очищенным препаратом растворимой ацетилхолинэстеразы эритроцитов, полученные кинетическим методом, наиболее близки. Это дает основание считать, что молекулярная активность ацетилхолинэстеразы эритроцитов при оптимальных условиях действия фермента состав- [c.168]

Эти препараты действуют как ингибиторы ацетилхолинэстеразы, они сравнительно безопасны для растений, но высокотоксичны для людей и животных. Применяются преим. в виде гранул с содержанием действующего в-ва [c.207]

Рис. 57. Зависимость ао (г) от концентрации ингибитора для взаимодействия а-нафтил-Л -метилкарбамата с ацетилхолинэстеразой мозга мышей

Ингибиторы ацетилхолинэстеразы могут взаимодействовать либо с активным центром, либо с периферическими связываю- [c.206]

Кроме таких ковалентно связывающихся ингибиторов, есть другая группа эффекторов ацетилхолинэстеразы, которые реагируют не с ее эстеразным центром, а благодаря наличию в них четвертичной аммониевой группы с анионным центром фермента (рис. 8.10). Где находится место связывания таких эффек- [c.207]

Этот ингибитор, близкий по строению препарату Гд-42, обладает высокой реакционноспособностью по отношению к ацетилхолинэстеразе. О специфичности его действия свидетельствует тот факт, что при доведении реакции между ферментом и ингибитором до конца степень торможения активности ацетилхолинэстеразы линейно зависит от концентрации ингибитора. [c.172]

Торможение активности ацетилхолинэстеразы прозерином, являющимся катионом, при значениях pH более 7, не зависело от концентрации водородных ионов, в то время как активность третичного амина — эзерина — возрастала с уменьшением pH, т. е. по мере увеличения концентрации катионной формы этого ингибитора (рис. 50). Снижение тормозящего действия прозерина в сильно кислой среде объясняется, по-видимому, подавлением диссоциации анионного центра. [c.187]

На основании результатов исследования зависимости скорости гидролиза ацетилхолина (при его нескольких концентрациях) от концентрации ингибитора были рассчитаны константы ингибиторов Ki) для тетраметил- и тетраэтиламмония. В качестве ферментов использовались частично очищенные препараты холинэстеразы сыворотки крови лошади и ацетилхолинэстеразы бычьих эритроцитов. [c.188]

При измерении констант скорости взаимодействия ингибиторов Гд-7 и Гд-42 (см. стр. 219) с холинэстеразой сыворотки крови лошади и ацетилхолинэстеразой эритроцитов было установлено, что антихолинэстеразная активность ингибиторов, не содержащих катионной группы, в отношении обоих типов эстераз примерно одинакова (табл. 30). Появление катионного центра в молекуле ингибитора увеличивает реакционноспособность в различной степени. В случае холинэстеразы активность увеличивается в 160 раз, в случае ацетилхолинэстеразы — в 3500 раз (табл. 30). [c.222]

Несомненно, что анионная группировка в активном центре ацетилхолинэстеразы играет более важную роль, чем в холинэстеразе при каталитическом действии фермента, и, как будет показано дальше, это проявляется не только в случае обратимых ингибиторов. [c.194]

Если рассматривать карбаматы, в соответствии с изложенными представлениями Уилсона и сотрудников (стр. 196), как плохие субстраты ацетилхолинэстеразы, то кинетика ферментативного гидролиза в присутствии конкурентного ингибитора и ацетилхолина может быть описана уравнением [c.198]

Ингибитор Ацетилхолинэстераза нервной системы мышей Ацетилхолинэстераза голов мух [c.211]

Следует отметить, что энергия активации реакции обоих ингибиторов с ацетилхолинэстеразой в 2,5 раза ниже энергии активации взаимодействия с холинэстеразой. Однако такое снижение энергетического барьера не сопровождается соответствующим увеличением скорости реакции, вследствие того, что абсолютное значение предэкспонента для реакции с ацетилхолинэстеразой на четыре порядка ниже, чем для реакции с холинэстеразой. [c.223]

Для большинства м-Х.с. периферического и смешанного (центрального и периферического) действия характерными фармакологич. эффектами являются уменьшение секреции слюнных, желудочных, бронхиальных, потовых желез, поджелудочной железы, учащение ритма сокращений сердца, понижение тонуса гладкомышечных органов (бронхи, желудок, кишечник, желчевыводящие и мочевыводяш1Ие пути), расширение зрачка и паралич аккомодации. Эти препараты применяют при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, пилороспазме, холецистите, желчекаменной болезни, спазмах кишечника и мочевыводящих путей, бронхиальной астме, Щ1Я ограничения секреции экзокринных желез, нек-рых заболеваниях сердца, при болях, связанных со спазмами гладкой мускулатуры, при отравлениях фосфорорг. ингибиторами ацетилхолинэстеразы, а также дгы диагностич. целей. [c.300]

Компенсационный эффект свойствен ферментативным процессам. Так, при гидролитическом расщеплении эт-илового эфира Ы-ацетил-Е-триптофана химотрипсином АР очень мало, а ДЯ и Д5 велики. В сущности, почти все данные, пр 1веденные в последних трех столбцах табл. 6.2, свидетельствуют о компенсации. Связывание ряда ингибиторов ацетилхолинэстеразой также сопровождается компенсацией — ДЯ варьирует в этих процессах от —7 до +2 ккал/моль, а Д5 от —10 до - -20 кал/моль-град [26. Если здесь справедливо предположение об определяющей роли воды, то нужно установить, как влияет на поведение белковых молекул окружающая водная структура. Ламри и Ражендер считают, что связь белка с водой проявляется в изменении объема белковой молекулы в ходе реакции. Как будет показано в 6.5 и 6.7, ферментативная активность зависит от конформационных превращений белка и, тем самым, глобулы могут изменять свой объем. Изменение энергии водно-белковой системы можно представить в виде [c.372]

На локализацию в синапсе нарушений, вызывающих это заболевание, указывает, то, что ингибиторы ацетилхолинэстеразы (неостигмин или эдрофоний) приводят к ослаблению симптомов, в то время как наблюдается исключительная чувствительность к кураре. Наблюдаются заметные морфологические изменения в структуре концевой пластинки. Расстояние между пре-п постсинаптической мембранами значительно больше, постсинаптическая мембрана имеет меньше складок, а субсинаптическая поверхность кажется уменьшенной. Пресинаптические изменения проявляются на развитых стадиях заболевания. Синтез, упаковка медиатора в синаптические везикулы и его пресинаптическое высвобождение не затрагиваются. [c.267]

Аффинная хроматография основана на способности ферментов образовывать прочные комплексы с иммобилизованными антителами, субстратами, эффекторами или ингибиторами. Примером аффинной хроматографии на иммобилизованном конкурентном ингибиторе [67] — ионе фенилтриметиламмрния — служит выделение ацетилхолинэстеразы из электрического органа морского угря [68]. Прочность комплекса падает при увеличении ионной силы [69], и это свойство можно использовать для избирательной десорбции фермента. [c.22]

Избирательное выделение биологически активных макромолекул аффинной хроматографией основано на обратимых взаимодействиях между имхмо билизованным аффинным лигандом и свободной макромолекулой. Однако принцип аффинной хроматографии может быть также использован даже с сорбентом, который содержит необратимый ингибитор, когда после сорбции комплементарной макромолекулы в специфическом комплексе образуется ковалентная связь. Для освобождения выделяемого вещества из комплекса с аффинным сор бентом используют подходящую химическую реакцию. Пример ковалентной аффинной хроматографии— выделение ацетилхолинэстеразы с помощью иммобилизованных органофосфатов [1, 56]. Ацетилхолинэстераза принадлежит сериновым эстеразам, для которых типично ингибирование связыванием с органофосфатами или органофосфонатными эфирами, содержащими легко отщепляемую группу, например, [c.158]

Примером обратимого ингибитора является йон тетраметилам-мония, тормозящий ферментативный гидролиз ацетилхолина, катализируемый ацетилхолинэстеразой. Тетраметиламмоний образует с ферментом каталитически неактивный диссоциирующий комплекс. В качестве необратимого ингибитора можно назвать йодацета-мид, образующий в результате алкилирования сульфгидрильной группы прочные и каталитически неактивные производные ряда тиоловых ферментов (например, алкогольдегидрогеназы, папаина и др.). [c.80]

При этом необходимо иметь в виду, что, работая с неочищенными ферментными препаратами (гомогенатами или экстрактами мозга, мышц и т. д.) и используя в качестве субстрата ацетилхолин, исследователь не имеет возможности различить холинэстеразу и ацетил-холинэстеразу и определяет суммарную скорость реакции, связанную с действием обоих типов фермента. Для изучения свойств отдельных ферментов необходимо их препаративное разделение с соответствующим контролем индивидуальности. В практике работы принято использование специфических субстратов, расщепляющихся одним и не расщепляющихся другим типом фермента, либо использование специфических ингибиторов. В последнем случае, если ингибитор избирательно тормозит действие] одного из ферментов, можно в качестве субстрата использовать ацетилхолин. Для измерения активности ацетилхолинэстеразы в присутствии холинэстеразы принято использование в качестве субстрата ацетил-Р-метилхолина для измерения активности холинэстеразы — бутирилхолина. [c.142]

Для измерения молекулярной активности ацетилхолинэстеразы нервной ткани нами был применен метод титрования каталитических центров ингибитором Гд-42 (формула II, стр. 166). Этот ингибитор обладает высокой реакционноспособностью по отношению к ацитил-холинэстеразе нервной ткани (бимолекулярная константа скорости реакции в присутствии ацетилхолина 10 —10 л моль-мин). Высокая скорость реакции при низких концентрациях Гд-42 характеризует выраженную специфичность этого соединения по отношению [c.169]

Отличие механизма действия диметилкарбамилфторида от действия фосфорсодержащих ингибиторов состоит в том, что образующееся диметилкарбамильное производное фермента с измеримой скоростью гидролизуется, в то время как фосфорильные производные в водной среде практически не гидролизуются. Вследствие этого активность ацетилхолинэстеразы, ингибированной диметилкарбамилфторидом, постепенно восстанавливается, и, следовательно, такой ингибитор может рассматриваться как своеобразный субстрат. [c.172]

Исследование кинетики ингибирующего действия четвертичных солей алкиламмония позволило установить различия в свойствах холинэстеразы и ацетилхолинэстеразы. Первоначально на основании, по-видимому, ошибочных экспериментальных данных Адамс и Уиттекер [133] сделали заключение, что активный центр холинэстеразы сыворотки вовсе не содержит анионной группировки, в то время как в ацетилхолинэстеразе она имеется. Однако Бергман и Вурцель [127] в результате подробного изучения влияния ионов тетраэтиламмония и других ингибиторов на активность холинэстеразы плазмы показали, что последняя содержит анионную группировку. Блокирование этой группировки приводит к снижению каталитического эффекта. Интересно, что четвертичные соли алкиламмония тормозили ферментативный гидролиз не только катионных субстратов типа ацетилхолина, но также и субстратов, не содержащих катионного центра, например, алкилгалогенацетатов или ди-ацетина. Очевидно, такой эффект солей тетраалкиламмония связан с их влиянием на конфигурацию активной поверхности белковой молекулы. [c.193]

В связи с противоречивыми результатами, полученными в работах [127, 133, 134] Бергман и Сегал [128] предприняли более подробное исследование ферментов обоих типов и действия на них моночетвертичных и бесчетвертичных солей алкиламмония. На основании измерения величин /50, пропорциональных Кг, авторы рассчитали величины ААР при увеличении длины молекулы СНз (СН2) Ы (СНз)з на одну (СНг)-группировку. Далее удалось рассчитать величину Кг для единичного заряда при взаимодействии с активными центрами холинэстеразы и ацетилхолинэстеразы и по уравнению Бренстеда-Христиансена вычислить расстояние максимального сближения ингибитора и фермента, придавая отрицательному заряду холинэстераз значения — 1 и —2. [c.193]

Расчеты показали, что холинэстераза имеет в активном центре одну анионную группировку (заряд = —1), а ацетилхолинэстераза — две (заряд = —2). Однако исследованиями Шукудза и Шинода [122] установлено, что действие, например, тетраэтиламмония на оба типа холинэстераз характеризуются близкими кинетическими и термодинамическими константами. Так, значения рК/ для холинэстеразы сыворотки крови и эритроцитов равны 3,88 и 3,91, а теплота диссоциации комплексов фермент-ингибитор—6,0 и 6,5 ккал моль. На основании полученных данных авторы приходят к выводу [c.194]

Приведенные представления и результаты исследования кинетики действия карбаматов на ацетилхолинэстеразу показывают, что определение величины для таких ингибиторов, исходя из зависимости активности фермента от концентрации ингибитора, необоснованно. Это очень отчетливо можно проиллюстрировать результатами исследования кинетики ингибирования двух типов холинэстераз серией производных карбаминовой кислоты [75]. [c.198]

Согласно этому уравнению, величина ио/У(/) при постоянной [5] должна линейно изменяться с изменением концентрации ингибитора. Однако экспериментальные данные, полученные при исследовании ацетилхолинэстеразы нервной ткани мышей и мух, как оказалось, не следуют этой закономерности. Так, при изучении скорости гидролиза ацетилхолина в присутствии а-нафтил-Л -ме-тилкарбамата, взятого в разных концентрациях, и выражении результатов в виде зависимости ио/%) от [I] получаются непрямые, а кривые (рис. 57), что может быть объяснено двумя схемами, предусматривающими либо возможность взаимодействия ингибитора с ацетилированным ферментом (схема I), либо взаимодействие второй молекулы ингибитора с карбамилированным ферментом (схема II) [c.199]

Н. А. Лошадкина, М. А. Чистовой и И. Л. Кнунянца [153] при исследовании кинетики ингибирования ацетилхолинэстеразы нитрофе-нилфосфатами и нитрофенил-фосфонатами не наблюдалось линейной зависимости между Еоф заместителей у атома фосфора и константой скорости ингибирования фермента. В то же время гидролиз этих соединений лучше описывается корреляционными уравнениями при использовании 0ф [153]. По-видимому, в ингибировании холинэстераз существенно большее значение, чем в более простых реакциях (например, гидролиза), имеют стерические затруднения. Бесспорно, немалую роль в этом отношении играет и то, что при взаимодействии с ферментами, в реакции участвуют одновременно несколько атомных групп как активного центра, так и ингибитора. [c.213]

Для выяснения этого вопроса проводилось исследование кинетики ингибирования холинэстеразы сыворотки крови и ацетилхолинэстеразы эритроцитов тремя ФОС в присутствии тетраметиламмония и тетраэтиламмония [170]. При этом были взяты два необратимых ингибитора, которые должны взаимодействовать лишь с нуклеофильной группировкой активных центров эстераз — соединение Гд-7 (XXVI) и диизопропилфтор-фосфат (ДФФ) (XXXIII) [c.224]

Смотреть страницы где упоминается термин Ацетилхолинэстераза ингибиторы: [c.226] [c.92] [c.104] [c.244] [c.241] [c.68] [c.105] [c.209] [c.181] [c.244] [c.159] [c.264] [c.170] [c.170] [c.201] [c.223] [c.224] [c.228] [c.234] [c.235]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология