Диапазон молекулярных масс разделяемых

Главной характеристикой сорбентов для эксклюзионной хроматографии является размер пор, определяющий диапазон молекулярных масс, которые можно разделить на данном геле. Этот диапазон определяют по соответствующей калибровочной кривой, построенной в координатах /Р—1д М. Сорбенты с очень узким распределением пор по размерам характеризуются высокой разрешающей способностью в небольшом диапазоне молекулярных масс. Напротив, более широкое распределение пор приводит к увеличению диапазона разделения за счет снижения разрешающей способности. Наилучшими характеристиками обладают сорбенты с умеренно узким распределением пор, которые имеют максимальную длину линейного участка калибровки. [c.102]

МОИ пептидов, полученных из другого белка. Этот метод извес-теи как картирование по Кливленду (по имени первого автора статьи, где он был описан) [12]. В ПААГ в присутствии ДСН могут быть разделены полипептиды с диапазоном молекулярных масс от 10 до 10 но наиболее достоверные результаты получаются при анализе белков с истинными молекулярными массами от 10" до 10 , поэтому для белков с молекулярной массой dO" метод обычно не применяется. [c.224]

Вторая особенность электрофореза нуклеиновых кислот и их фрагментов — очень широкий диапазон молекулярных масс. Например, при определении нуклеотидной последовательности ДНК или РНК приходится разделять полученные при их гидролизе олигонуклеотиды, содержащие единицы и десятки мономерных звеньев, т. е. молекулы с массами от тысячи до нескольких сотен тысяч дальтон, а это — тот же диапазон, что для белков и пептидов. Естественно, что электрофорез при этом ведут в ПААГ с концентрацией от 5 до 20%, в зависимости от конкретной задачи. С другой стороны, электрофорез можно успешно использовать для разделения плазмид, крупных рестриктов ДНК и даже целых молекул ДНК или РНК вирусов. В этих случаях электрофорез ведут в гелях агарозы. [c.121]

В целом, в неорганической масс-спектрометрии используют тот же тип масс-спектрометров, что и в органическом анализе. Основное различие заключается в том, что в неорганическом анализе нет необходимости, чтобы диапазон масс превышал 300 а.е.м. В неорганической масс-спектрометрии, однако, бывает необходимо определять низкие молекулярные массы (< 10 а.е.м). В настоящее время в неорганической масс-спектрометрии, вероятно, наиболее широко применяется квадрупольный масс-фильтр. Используют также время-пролетные (ВП) масс-спектрометр и магнитный сектор, но в меньшей степени. Читатель адресуется к разделу по органической масс-спектрометрии (разд. 9.4) для описания этого типа масс-спектрометров. [c.132]

В целом в ГПХ полимеров и пластмасс соблюдение базовой линии является не слишком обязательным требованием исключение, пожалуй, составляет анализ олигомеров. Это объясняется тем, что все синтетические полимеры представляют собой фактически смеси веществ, молекулярные массы которых расположены в широком диапазоне. Следовательно, трудно ожидать, что каким-либо методом удастся разделить два последовательных п-мера, состоящих из сотен и даже тысяч мономерных звеньев. Поэтому в большинстве случаев [c.281]

Усвоение нуклеопротеиновых комплексов во всем диапазоне их молекулярных масс и тканевой принадлежности происходит в тонком кишечнике на реснитчатой поверхности путем эндоцитоза. Эндоцитоз — процесс, характерный для большинства клеток, уже рассматривался в разделе 2.2. Он представляет собой адсорбцию лиганда на внешней поверхности клеточной мембраны, после чего происходит прогибание этого участка мембраны внутрь клетки вместе со связанным веществом, замыкание мембраны с образовани- [c.183]

Измельчение в вибромельнице — обычный метод изучения механохимических явлений в твердом состоянии. Если в исследуемом температурном диапазоне не происходит фазовых изменений полимеров, влияние температуры на снижение молекулярной массы при измельчении сравнительно мало [792 913, с. 1248]. Тем не менее во многих работах [312, 709, 720, 792 ] был обнаружен типичный отрицательный температурный коэффициент. Площадь поверхности частиц, образующихся при измельчении, тоже сильно зависит от температуры размола [977, 980, 1113]. Как отмечено в разделе 7.1, при снижении температуры виброизмельчения ориентированных полимеров удельная поверхность частиц увеличивается, а конечная молекулярная масса уменьшается (рис. 3.1 см. также рис. 7.5). Несколько иные результаты были получены при размоле полиуретана [188]. [c.76]

Хотя в составе нуклеиновых кислот имеется некоторое количество основных групп, эти соединения нельзя подвергать электрофорезу в виде катионов, так как при низких значениях pH высокомолекулярные нуклеиновые кислоты нерастворимы в воде. В нейтральной и щелочной средах молекулы нуклеиновых кислот заряжены отрицательно, поскольку их заряд определяется диссоциацией фосфатных групп. Оливера и др. [940] обнаружили, что в этом диапазоне значений pH электрофоретическая подвижность РНК и денатурированной ДНК в свободном растворе не зависит от их молекулярной массы. Такая закономерность объясняется постоянством отношения заряда молекулы к ее массе и указывает на то, что нуклеиновые кислоты невозможно разделить с помощью электрофореза с подвижной границей. [c.368]

В качестве среды для электрофореза нуклеиновых кислот чаще всего используют полиакриламидный гель. Размер пор полиакриламидного геля, а следовательно, и его свойства как молекулярного сита варьируют в широком диапазоне, благодаря чему в этой среде можно разделять нуклеиновые кислоты различной молекулярной массы. Так, например, в гелях, содержащих 2—3% Т, разделяют рибосомные РНК (мол. масса 0,5-10 —2-10 ) в гелях с Т, составляющим около 10%, —транс- [c.370]

Дальнейшие исследования [309] показали, что в диапазоне мол. масс от ЫО до 2-10 кольцевые двухцепочечные и кольцевые одноцепочечные молекулы нуклеиновых кислот можно разделить даже в том случае, если они имеют одинаковую молекулярную массу. Полинуклеотиды меньшей молекулярной массы (от 2-10 до 2-10 ) распадаются по подвижности на два класса. Один класс составляют одноцепочечные полинуклеотиды, образовавшиеся в результате диссоциации двухцепочечных молекул, а другой класс — линейные двухцепочечные и природные одноцепочечные полинуклеотиды, такие, как рибосомные РНК [308]. [c.382]

В. В. Кафаров [51, 67, 205] выдвинул ряд положений, являющихся базой теории межфазного массопереноса, основанной на представлениях о межфазной турбулентности. На границе раздела фаз, течение которых не ограничивается твердыми стенками, возникает особый гидродинамический режим, характеризующийся образованием вихрей последние пронизывают пограничные слои и проникают вглубь фазовых потоков. Такой режим определяется как режим развитой свободной турбулентности. В этом режиме (режиме эмульгирования или турбулентной пены) двухфазная си-тема представляет собой недвижный комплекс газожидкостных вихрей со значительным развитием межфазной поверхности и быстрым ее обновлением. Газожидкостной системе присущи основные особенности свободной турбулентности — отсутствие гашения турбулентных пульсаций, наличие нормальных составляющих скорости, отсутствие заметного влияния молекулярных характеристик на массоперенос. Таким образом, межфазная поверхность сама становится источником турбулентности и масса переносится через поверхность раздела фаз вихрями с осями, перпендикулярными направлению движения потоков. Анализируя условия, в которых возникает межфазная турбулентность, В. В. Кафаров указывает [51], что вихри на межфазной поверхности возникают при различающихся по величине и направлению скоростях движения фазовых потоков, в частности в тарельчатых колоннах создается благоприятная обстановка для вихреобразования на границе раздела фаз. В наших экспериментах на тарельчатых контактных устройствах различного типа — это важное обстоятельство следует подчеркнуть еще раз — во всем исследованном диапазоне нагрузок по жидкости и газу наблюдался режим развитой свободной турбулентности (см. гл. ГУ, стр. 114). [c.155]

Предварительное фракционирование по молекулярным массам дает большой эффект при последующем фракционировании на хроматографических колонках. Так, если смесь должна быть фракционирована в широком диапазоне молекулярно-массового распределения, то применение гель-хроматографии малоэффективно, так как раствор должен быть пропущен через ряд колонок, чтобы достичь нужной степени разделения индивидуальных компонентов. Но если исходную смесь предварительно разделить с помощью ультрафильтрации на несколько фракций, то дальнейшее фракционирование на хроматографических колонках не представляет труда. При этом разделение будет пр01ведено не только быстрее, но и качественней. Более того, ультрафильтрацией рас- [c.284]

Оказалось, что фракция Ч ъ слишком сложна по составу, чтобы ее можно было проанализировать на масс-спектрометре. Поэтому ее разделили при —80° на фракции 25 и У--8о- Фракция У-8о, которая составляет в среднем 4,2% от общего количества летучих, анализировалась на масс-спектрометре. Полученные результаты (опыты 1,3—7) приведены в табл. 102. Средний выход мономера в этих шести опытах составлял приблизительно 1,5 вес. о от общего количества летучих. Фракцию 25 нельзя было анализировать на масс-спектрометре, так как ее молекулярный вес был слишком высок и выходил за пределы рабочего диапазона масс использованного прибора. По аналогии с такой же фракцией, образующейся в результате пиролиза полиизопрена, как будет показано в гл. X, можно предположить, что эта фракция состоит из димеров. Изопрен довольно легко димеризуется с образованием дипентена [3, 4]. Так, при пиролизе полиизопрена образуется дипентен [c.219]

Теоретически установлено, что нефть в источнике залегания может образовываться из полярных компонентов, содержащих азот, серу, кислород, металлы, а также углеводороды с широким диапазоном изменения молекулярных масс, включая ароматические, нафтеновые, парафиновые вещества. Во время миграции нефти те компоненты, которые являются более полярными или более поляризующими, адсорбируются в первую очередь. Например, компоненты, содержащие аминовые нитрогены, порфирины, могут вести себя как катионы и адсорбироваться ria глинах. Это — одна из-причин формирования весьма неровных границ раздела нефть—вода, особенно в породах, содержащих небольшое количество глин. Концентрация активных компонентов вблизи первоначального водонефтяного контакта приводит к образованию более низких поверхностных натяжений между нефтью и водой, чем в точках, более отдаленных от водонефтяного раздела. Возможно также, что вода вблизи области залегания нефти может иметь-растворенные органические компоненты, такие, как нафтеновые-кислоты или их соли, которые в условиях неоднородного коллектора могут изменить поверхностное натяжение между нефтью-и водой в ту или иную сторону. Кроме того, на характеристику смачиваемости коллекторов заметное влияние оказывает их неоднородность по минералогическому составу, степень шероховатости , чистоты отдельных минеральных зерен, их окатанность, структура кристаллической решетки. Одни минеральные частицы обладают лучшей смачиваемостью, другие— худшей в зависимости от их химического состава и строения кристаллической решетки. [c.207]

Вопросы, на которые хроматографисту нужно знать ответы до выбора варианта ВЭЖХ, сводятся к следующим. Что будет интересовать — анализ следовых количеств или микропримесей, аналитическое разделение компонентов примерно равной концентрации, препаративное выделение разделенных компонентов для исследований или идентификации Какова молекулярная масса образца или диапазон молекулярных масс компонентов Какая полярность компонентов образца, их кислотность или, основность, способность диссоциировать на ионы В каких растворителях растворимы компоненты образца и какова их растворимость Нужно разделить близкие по молекулярной массе изомеры или ряд гомологов Является ли вещество новым или используется давно Есть ли опубликованные работы по ВЭЖХ этой смеси или близких по составу и свойствам смесей Каковы характеристики образца по показателю преломления, УФ-спектру, флуоресценции и др. [c.192]

Большой практический интерес представляет разделение олигомеров по функциональности в отсутствие молекулярно-массовой зависимости Rf. Так, при ТСХ полиоксипропиленполиолов в этил-ацетате, насыщенном водой с добавкой метилэтилкетона, удается разделить моноолы, диолы, триолы, пентаолы в большом диапазоне молекулярных масс (рис. VIII.26). При этом наблюдается небольшая зависимость Rf от М, не перекрывающаяся с влиянием их функциональности на Rf. [c.319]

По данным [74], макромолекулы в поверхностном слое могут укладываться параллельно поверхности раздела фаз. Юбер-рейтер [75], рассматривая процесс конформационной перестройки как псевдокристаллизацию, использовал для описания кинетики этого процесса известное уравнение Авраами. При обработке экспериментальных данных, полученных при исследовании растворов полистирола в широком диапазоне молекулярных масс и концентраций полимера, рассчитанные значения коэффициента, характеризующего тип растущих структур, оказались близкими к единице, что может свидетельствовать о линейной форме макромолекул в поверхностном слое. Отмечено [73], что процесс организации структуры поверхностного слоя лимитируется качеством растворителя и концентрацией полимера в растворе. [c.53]

Теория и методология гель-хроматографии подробно обсуждается в ряде обзоров и книг Г1—9]. Этот метод позволяет разделять белки в соответствии с размерами их молекул. Первыми с колонки элюнруются самые большие молекулы, в то время как молекулы меньшего размера, способные диффундировать в поры матрицы, заполненные жидкой фазой, удерживаются на колонке. Размер пор матрицы геля определяет диапазон молекулярных масс макромолекул, способных проникать в частицы геля и выходить из них. Для фракционирования белков пригодны различные полиакриламидные, агарозные и декстрановые гели. [c.106]

При механодеструкции ПЭВП под действием сдвиговых напряжений концентрация низкомолекулярных фракций в начале процесса уменьшается, а потом возрастает, в то время как для высокомолекулярных фракций наблюдаются противоположные изменения (рис. 2.22). Такое поведение полимера объясняется доминированием реакций образования поперечных связей при разрыве цепей на ранних стадиях процесса. Авторы работы [45] постулировали, что при вальцевании БСК реакции рекомбинаций вызывают изменения ММР и Л1 (см. раздел 6.1.2, рис. 6.20, 6.21 и табл. 6.7). При вальцевании НК рекомбинация макрорадикалов сопровождается возникновением максимума в области высокомолекулярного хвоста ММР, который исчезает при увеличении продолжительности процесса [336]. При исследовании ММР методом ГПХ было установлено, что пик кривой распределения (рис. 2.23) постепенно смещается в область более низких молекулярных масс. Здесь важно отметить, что Мцт в этом эксперименте почти не изменяется, хотя метод ГПХ в этом диапазоне молекулярных масс теряет чувствительность. Авторы, однако, заметили появление нового пика на высокомолекулярном хвосте кривой ММР. Существование этого пика не позволяет характеризовать изменение ММР только отношением [c.59]

Гель-фильтрация. Общие принципы гель-фильтрации нативных белков рассмотрены в разд. 1.2.2 хроматография в денатурирующих условиях не имеет существенных особенностей. В присутствии денатурирующих агентов (гуанидингидрохлорид, мочевина, ДСН) меняется конформация белковых молекул, что часто приводит к увеличению гидродинамического объема. Поскольку разделение идет по размерам молекул, меняются диапазон молекулярных масс, а также градуировочный график для конкретного геля. Например, в неденатурирующих условиях на сефарозе СЬ-6В можно разделить белки с М 10" —4-10 в денатурирующих условиях в присутствии гуанидиигидрохлорида диапазон молекулярных масс составляет 3000—80 000 [8]. [c.32]

Шуерх и соавторы обнаружили, что оптимальное фракционирование двунитевых РНК реовируса в интервале молекулярных д сс от 0,3 до 3 млн. получается в 7,5%-ном ПААГ (С=2,6). Однонитевые РНК в том же диапазоне молекулярных масс лучше разделять в смешанном геле (1,8%-ный ПААГ с 0,6% агарозы и добавлением мочевины до 6 М) (S huer h et al., 1975]. В последнем случае электрофорез приходилось вести в трубках из стекла Perspex , вымоченных в течение ночи в 1%-ном ДДС-Na и промытых перед использованием стерильной водой (лишенной РНКаз), так как обычное стекло плохо сцепляется с гелем столь малой концентрации. [c.128]

Цитохалазин В-антибиотик, который часто используют как ингибитор клеточной подвижности, обеспечиваемой актином,-служит также мошным конкурентным ингибитором поглощения О-глюко-зы клетками млекопитающих. Когда тени эритроцитов инкубируют с цитохалазином В, меченным Н, а затем облучают ультрафиолетовым светом, происходит связывание цитохалазина с переносчиком глюкозы за счет поперечных сшивок. Если в среде имеется избыток О-глюкозы, то меченый цитохалазин не взаимодействует с переносчиком. Однако избыток в среде Ь-глюкозы (которая не переносится через мембрану) не влияет на связывание. Если мембранные белки из меченых теней разделить при помощи гель-электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН, то переносчик выявляется в виде размытой радиоактивной полосы в диапазоне молекулярных масс от 45000 до 70000 Да. Если меченые тени до проведения электрофореза обработать ферментом, отщепляющим связанные сахара, то эта размытая полоса исчезает и вместо [c.56]

Для работы в водных системах используют главным образом жесткие сорбенты иногда очень хорошие результаты удается получить на полужестких гелях специальных типов. Затем по калибровочным кривым или данным о диапазоне фракционирования, приведенным в гл. 4, выбирают сорбент нужной пористости с учетом имеющихся сведений о молекулярной массе образца. Если анализируемая смесь содержит вещества, отличающиеся по молекулярной массе не более чем на 2-2,5 порядка, то обычно удается разделить их на колонках с одним размером пор. При более широком диапазоне масс следует использовать наборы из нескольких колонок с сорбентами различной пористости. Ориентировочно калибровочную зависимость в этом случае получают сложением кривых для отдельных сорбентов. [c.44]

Для работы в водных системах используют главным образом жесткие сорбенты или псшужесткие гели спещ1альньЕХ типов. Затем по калибровочным кривым или данным о диапа )нс фракционирования выбирают сорбент нужной пористости с учетом имеющихся сведений о молекулярной массе образца. Если анализируемая смесь содержит вещества, отличающиеся по молекулярной массе не более чем на 2-2,5 порядка, то обычно удается разделить их на колонках с одним ра 1мсром пор. При болсс широком молскулярно-массовом диапазоне используют наборы из нескольких колонок с сорбентами различной порис-гости. Ориентировочно калибровочную зависимость в этом случае получают сложением кривых для отдельных сорбентов. Особое значение в эксклюзионной хроматографии придают линейной зависимости логарифма молекулярной массы полимера от удерживаемого объема. В этом случае можно рассматривать хроматограмму как зеркальное отображение дифференциальной кривой ММР в логарифмическом масштабе сорбента. [c.177]

Из-эа узкого диапазона эксклюзии (значение А от О до 1) П1йсовол емкость в гель-хроматографии ограничена (см. табл. 5.1-4). Более того, не могут быть разделены вещества близкого размера, например юомеры. Считается, что разделение на основании молекулярных масс может быть успешным только при различии масс как минимум на 10%. [c.292]

М мочевины часто используют для электрофоретического фракционирования гистонов [Рапу1т, СЬа1к1еу,- 1969]. Молекулярные массы гистонов лежат в диапазоне 11—22 тыс. дальтон, поэтому для их разделения используют мелкопористые гели (7 = 15 -20). Положительно заряженные в кислой среде гисто-ны мигрируют в направлении катода. Наибольшей подвижностью обладает гистон Н4, затем следуют Н2А, Н2В и НЗ, которые в этой простой системе разделяются довольно плохо. От них заметно отстает относительно более крупный гистон Н1. В качестве лидирующего красителя используют пироиии. [c.55]

Институт химической физики АН СССР совместно с НИИ МТРН модифицировал стандартный изотопный прибор МС-1 таким образом, что он отвечает всем специфическим требованиям, предъявляемым к спектрометрам для молекулярного ана.пиза, перечисленным и обоснованным в третьем разделе статьи [7, 8, 9, 17]. В масс-спектрометр внесены конструктивные изменения. Этот прибор находится в эксплуатации в течение 2 /, лет, причем на нем произведено за это время около 1500 анализов газовых и жидких, преимущественно углеводородных, смесей. Этот п])ибор положен в основу конструкции промыпхленного прибора МС-5 с диапазоном веществ до молекулярного веса 600. [c.69]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология