Центр связывания, гетерогенность

Отметим, что как L, так и Q могут быть гетерогенны по своей молекулярной природе, однако процесс связывания будет описываться простейшей схемой (8.1), если при возможной молекулярной гетерогенности различные. по строению одновалентные L или Q будут гомогенны по отношению к кинетическим характеристикам процесса, т. е. будут иметь одинаковые константы скорости ki и й 1 и соответственно относиться к лигандам или центрам связывания одного кинетического типа. [c.181]

Молекулярная гетерогенность центров связывания может быть существенно больше, чем два типа, однако для настоящего рассмотрения важно, чтобы кинетически различающихся типов центров связывания было только два 01 и Рг. [c.271]

Вычисления, проведенные выше, а также данные табл. 4.7 основаны на двух допущениях, которые могут не подтвердиться. Первое касается возможной гетерогенности распределения присоединенных лигандов в ограниченных участках адсорбента величина т< может быть намного выше, поэтому даже при низких значениях констант связывания (например, 10 М) с адсорбентом может связаться гораздо больше белка, чем можно было бы предположить. В одном из недавних исследований для анализа распределения лигандов использовали модельные спин-меченые лиганды [86]. Оказалось, что негомогенность в их распределении незначительна. Однако было обнаружено (путем подсчета на основе степени модификации), что при близком расположении лигандов друг от друга белок среднего размера может связываться с ними одновременно в нескольких участках (если белок имеет более одного центра связывания). [c.155]

Исходной стадией гетерогенного катализа обычно является адсорбция реагентов. Как уже отмечалось в гл. 2, адсорбцию следует отличать от абсорбции. Адсорбция-это связывание молекул с поверхностью, тогда как абсорбция означает поглощение молекул в объеме другого вещества. Адсорбция происходит вследствие чрезвычайно высокой реакционной способности атомов или ионов на поверхности твердого вещества. В отличие от таких же частиц в объеме твердого вещества они имеют ненасыщенные валентные возможности. Благодаря способности поверхностных атомов или ионов к образованию связей молекулы из газовой фазы или раствора могут связываться с поверхностью твердого вещества. В действительности не все атомы или ионы поверхности обладают реакционной способностью, так как на поверхности могут быть адсорбированы различные примеси (загрязнения), которые занимают многие потенциально реакционноспособные центры и блокируют дальнейшую реакцию. Места поверхности, на которых могут адсорбироваться реагирующие молекулы, называются активными центрами. Число активных центров, приходящееся на единицу массы катализатора, зависит от природы катализатора, от способа его приготовления и обработки непосредственно перед использованием. [c.28]

Независимо от типа катализаторов первичным актом химического превращения, протекающего на их поверхности, является адсорбция реагентов. Последнюю подразделяют на физическую адсорбцию, определяемую дисперсионными силами, и хемосорбцию, зависящую от химического связывания адсорбата с активными центрами поверхности катализатора. В связи с этим важными характеристиками гетерогенных катализаторов являются величина их поверхности, размер и структура пор, равновесие и энергетика взаимодействия адсорбата с адсорбентом-катализатором. [c.273]

Во-первых, гетерогенностью антител по физико-химическим свойствам, в том числе по сродству к антигену. Во-вторых, сложностью определения общего количества антител, а также отдельных фракций. В-третьих, в случае поливалентных антигенов возможностью образования комплексов сложного состава, в том числе циклической структуры, в которых проявляется кооператив-ность Взаимодействия активных центров антител. Все это не позволяет применить традиционные методы для расчета истинных значений констант связывания. Более надежные данные могут быть получены для моноклональных антител и их РаЬ-фрагментов, так как в этом случае могут быть выделены индивидуальные антитела в гомогенном виде. [c.41]

Следующим принципом классификации методов ИФА является их разделение по типу проводимых на каждой из иммунохимических стадий реакций. В соответствии с этим все методы можно разделить на две группы — гомогенные и гетерогенные. Если в ходе выполнения анализа все реакции, включая ферментативную стадию, протекают в растворе, то метод является гомогенным. В нем отсутствует стадия разделения образующихся иммунохимических комплексов от свободных, не вступивших в реакцию компонентов. Определение концентрации исследуемого соединения основано на эффекте изменения каталитической активности фермента-метки,-возникающем при комплексообразовании с исследуемым лигандом или центрами специфического связывания. [c.81]

Гетерогенные методы ИФА антигенов основанные на определении оставшихся свободными центров специфического связывания (тип И). Схематично эта группа методов представлена в табл. 4.3. По сравнению с анализом типа I эти методы многочисленные и включают в себя как неконкурентные, так и конкурентные подходы, причем каждый из них в зависимости от использования на Первой стадии иммобилизованного реагента делится на твердофазный или гомогенно-гетерогенный. Рассмотрим каждый метод с учетом типа леченого и иммобилизованного реагента. [c.92]

Все известные в настоящее время схемы проведения гомогенного. ИФА относятся к типу П приведенной в начале гл. 4 классификации, т. е. во всех схемах регистрируется концентрация не образующегося специфического комплекса антитело — антиген, а оставшихся свободными центров специфического связывания. Однако, в противоположность гетерогенным схемам, наблюдаемая ферментативная активность, соответствующая концентрации незанятых мест специфического связывания, может как уменьшаться, так и увеличиваться, что обусловлено различной природой воздействия связывания лигандов на ферментативную активность. [c.114]

Анализ связывания антигена при гетерогенности активных центров антител. Неоднородность по константам, связывания присуща большинству популяций антител. В общем случае процесс связывания осуществляется множеством центров, обладающих различным сродством [c.235]

При наличии отрицательной кооперативности, т. е. когда связывание антигена одним активным центром антитела приводит к затруднению второго взаимодействия, поведение системы, очевидно, близко к рассмотренному случаю гетерогенной популяции антител, состоящей из одновалентных фракций с константами, равными константам первого и второго взаимодействий. [c.245]

В буферный раствор электролита ускоряет перенос электрона между гемовым центром цитохрома с и поверхностью золота. Важно подчеркнуть, что, хотя 4,4 -дипиридил значительно облегчает перенос электрона с гемового центра на золотой электрод, сам он электрохимически неактивен в представляющей интерес области потенциалов и, таким образом, явно не действует как просто переносчик электрона. Считают, что облегчение гетерогенного переноса заряда обусловлено адсорбцией 4,4 -дипиридила на поверхности электрода и быстрым обратимым связыванием цитохрома с на границе раздела модифицированный электрод/раствор. Это обеспечивает эффективное сближение белка с поверхностью электрода и правильную его ориентацию, необходимую для быстрого переноса электрона ([13], гл. 13). Важным условием считается также высокая скорость адсорбции/десорбции, иначе может произойти блокирование модифицированной межфазной границы. [c.220]

В предположении, что константы ассоциации Ki подчиняются распределению Сипсиана, коэффициент гетерогенности а центров связывания гаптоглобина рассчитывался по уравнению [c.373]

Вычислено, что а = 0,72, а средняя константа аффинности Ка = = 3,6-10 л/моль. Форма графика Скатчарда указывает на гетерогенность связывающих центров иммобилизованного гаптоглобина по связыванию а-цепей. Популяция высокоаффинных центров с аффинной константой /(1 = 5,26-10 л/моль, полученной экстраполяцией, мала, а число связывающих центров с низкой аффинностью с константой /(2 = 6,23-10 л/моль велико. Экстраполяция графика до пересечения с осью г показала, что максимальное число центров связывания п = 4,3, а число высокоаффинных центров равно 1,5. [c.373]

Вначале рассматривают данные по хемосорбцин, приведенные в разд. 2 и 3 гл. VI. Доля центров, активных для хемосорбции, изменяется от всех атомов поверхности металлов (хотя для связывания одной хемосорбированной частицы может требоваться несколько атомов поверхности) и всех узлов решетки при кумулятивной адсорбции на окислах до сравнительно небольшого числа дефектов кристаллов, используемых при деплетивной адсорбции на окислах. Почти универсальное уменьшение теплоты адсорбции по мере заполнения поверхности является ясным указанием на то, что не все центры в равной мере активны при связывании адсорбируемых частиц. Обычная форма кривых теплота адсорбции — степень заполнения поверхности указывает на то, что речь идет скорее не о наличии немногих очень активных и большого числа неактивных центров, а об очень равномерном понижении активности чистых поверхностей, возможно вследствие врожденной гетерогенности или влияния начальной адсорбции на последующую. К сожалению, применение изотопной метки не дает ясного доказательства того, действительно ли остается прочная связь с центрами, на которых [c.266]

В последнее время получает большое распространение химическая модификация поверхности адсорбентов. Связывание наиболее активных центров на поверхности адсорбента путем присоединения к ним силоксановых, дециловых, фенильных, нитрильных и других групп уменьшает гетерогенность поверхности и тем самым увеличивает линейную емкость адсорбента [5]. Химическая модификация может приводить к получению адсорбентов, обладающих адсорбционными свойствами, сильно отличающимися от исходных. Сорбенты с химически связаршыми фазами открьтают широкие возможности для высокоселективного разделения различных образцов и начинают все шире использоваться при разделении нефтепродуктов. Более подробные шедения об этих сорбентах содержатся в литературе [3-6,10] и разд. 2.8. [c.19]

Описано также поперечное связывание двух цепей в ДНК при действии азотистой кислоты и бифункционального алкилирующе-го агента, бис-(Р-хлорэтил)метиламина [81]. Такое образование поперечных связей приводит к полной обратимости свойств, возни-каюших у продукта при денатурации, даже у гетерогенной ДНК животного происхождения. Вероятно, точки поперечного связывания в двухтяжной структуре при процессах ренатурации играют роль центров, удерживающих смежные пары оснований. Так как образование поперечных связей под действием азотистой кислоты препятствует разделению комплементарных цепей, такой механизм может объяснить (помимо дезаминирования остатков, содержащих аминогруппы) мутагенную активность и, в особенности, ярко выраженный летальный характер азотистой кислоты [81]. [c.538]

Другое существенное подтверждение мутационного механизма — молекулярная гетерогенность у-глобулина, даже специфически синтезированного к данному антигену. Антитела имеют необходимые центры активности, нрпспособлепные для связывания данной гаптеиной группы. В прочих деталях молекулы этих белков, синтезируемые разными клетками, могут отличаться. Мутационная теория дает естественное объяснение отличию у-глобулпнов от всех других белков организма, в которых, как уже не раз упоминалось, все молекулы оказываются полностью идентичными. [c.510]

Ферментативный катализ обусловлен специфическим связыванием одной или нескольких молекул субстрата на каталитическом центре фермента и химическим взаимодействием с этим центром, которое может непосред-ственно использовать силы связывания для понижения свободной энергии активации катализируемой реакции. Цель настоящего труда — рассмотрение с единых позиций некоторых фактов и принципов, касающихся реакций и взаимодействий в водных растворах и необходимых для понимания механизмов катализа в этом необычном растворителе. Обсуждение будет ограничено главным образом гомогенными ионными реакциями, почти не будет затрагиваться гетерогенный катализ и окислительно-восстановительные реакции. Несмотря на то что в качестве примеров приведены некоторые конкретные ферментативные реакции, главный упор сделан на основные принципы взаимодействия, а не иа частные свойства данного фермента по той я е причине, по которой многие исследователи полагают, что постижение причин заболевания раком скорее всего будет достигнуто в результате исследования механизмов репликации и дифференциации, а не путем изучения самой раковой ткани. Эти принципы сами по себе также интересны для студентов и исследователей, занимающихся механизмадхи и катализом неферментативных реакций в водном растворе. Но весь материал данной монографии имеет в настоящее время прямое отношение к ферментативному катализу. Однако он является частью остова и языка знаний, которые возникли за последние годы в результате накопления новых сведений и развития новых взглядов на механизмы химических реакций и которые, хотя бы частично, должны стать основой для понимания ферментативного катализа в будущем. Перефразируя слова Хиндемита, приведенные в конце его книги Традиционная гармония [1], можно сказать, что усвоение материала данной книги ничего еще не говорит о творческой способности читателя, 1м, с другой стороны, даже одаренный энзимолог, который не владеет этим материалом, вряд ли может считаться законченным специалистом. [c.7]

Такой анализ связывания лиганда на однородной решетке применим к ряду ситуащЛ, встречающихся на практике. Хотя для анализа связывания лиганда на гетерогенных решетках, которые имеют лигандсвязывающие центры более одного типа, должен быть использован другой подход, приведенный выше анализ показывает, что нелинейные области на графиках Скэтчарда в значительной мере могут объясняться эффектом перекрывания . Гетерогенность решетки необходимо учитывать только тогда, когда наблюдаются эффекты, не предсказываемые уравнением (15.100) или (15.105). Такой анализ требует дальнейшего развития теории. [c.38]

В реакциях взаимодействия фермента с субстратом константа равновесия (К) неизменна при различных концентрациях субстрата. При связывании же антител с гомологичным антигеном дело обстоит иначе — популяция поликлональных антител гетерогенна по этой константе, т. е. по величине аффинности. Ранее предполагалось, что в любой антисыворотке количественное распределение антител по аффинности имеет характер нормального (Гауссова) распределения. Как геперь установлено, это предположение было ошибочным. Графический анализ данных по аффинности для реакции между антисывороткой и антигеном показывает, что распределение антител по аффинности не соответствует нормальному (рис. 9.16). Однако среднюю аффинность популяции антител в данной антисыворотке (Кд) можно определить с хорошим приближением как величину, обратную такой концентрации свободного антигена, которая необходима для насыщения половины всех антигенсвязывающих центров антител = 1/[Аг , д5 ]. [c.157]

С тонкими нитями перекрываются толстые, миозино-вые нити, содержащие тяжелые и легкие цепи миозина и С-белок с мол. массой 140 кДа. Кроме связывания с миозином С-белок способен к чувствительному к кальцию связыванию с полосой I. Существует несколько изоформ С-белка. Разные формы найдены в большой грудной мышце и в широчайшей мышце спины [78]. Таким образом, как и с тяжелой цепью миозина, наблюдается специфичность изоформ С-белка по отношению к мышечным волокнам с разными физиологическими характеристиками. Гетерогенность по С-белку может, впрочем, обнаруживаться и в одном и том же волокне, и даже в пределах одного саркомера. Есть мышцы, в каждом сар-комере которых присутствуют две формы С-белка. Центры толстых нитей располагаются по М-линии, которая содержит белок миомезин с мол. массой 165 кДа. Кроме того, в М-линии присутствует особая, мышечная форма креатинкиназы [79]. [c.51]