Сбор фракций скорость сбора

Для разделения и количественного определения аминокислот особенно эффективными оказались методы распределительной, адсорбционной и ионообменной хроматографии. Большое применение, в частности, получил метод Мура и Стейна, в котором исследуемый раствор пропускают через колонку, наполненную или крахмалом (твердый полярный адсорбент), или ионообменной смолой (сочетание адсорбции с ионным обменом), и затем связанные на колонке вещества вымывают с различной скоростью подходящими растворителями. Сбор и анализ отдельных фракций осуществляются при помощи автоматических приспособлений. Метод Мура и Стейна позволяет получить через 24 часа данные о полном аминокислотном составе образца белка, используя при этом только 2,5—3,5 мг белка. Для оценки эффективности и значения этого метода полезно напомнить, что старые и более грубые аналитические приемы требовали для получения данных о полном аминокислотном составе белка нескольких недель трудоемкой работы, связанной с расходованием десятков граммов белка. [c.35]

Коллекторы могут быть трех типов одни представляют собой диск, по окружности которого в один или несколько рядов расположены отверстия. В эти отверстия вставляются пробирки для сбора фракций. Объем пробирок зависит от размеров колонки и порций собираемого раствора. При заполнении пробирки заданным объемом или массой раствора автоматическое устройство передвигает коллектор так, чтобы под колонкой оказалась соседняя пробирка. Другой тип коллекторов представляет собой кассету прямоугольной формы с рядами пробирок, расположенных параллельно друг другу. Перемещение такой кассеты после заполнения пробирки происходит также автоматически. В третьем типе коллекторов применяется цепь, состоящая из сочлененных между собой полиэтиленовых пробирок квадратного сечения. Передвижение коллектора в любом случае происходит после заполнения пробирки до заданного объема или массы, что определяется специальными автоматическими устройствами. Принцип действия устройств для этой цели может быть различный. Одни системы имеют сифон, объем которого заранее задан, другие имеют на определенной высоте сосуда контакты, замыкаемые токопроводящим раствором. Возникает электрический сигнал, подающий команду на слив раствора из сборника или передвижение коллектора. В третьих системах передвижение коллектора осуществляется автоматически через определенное число капель раствора или же через определенный промежуток времени. При этом скорость вытекания раствора из колонки должна быть строго постоянной. [c.98]

Основные элементы газохроматографической системы — источник сжатого газа и колонка с неподвижной фазой. Большинство хроматографических установок содержат элементы, схематически изображенные на рис. 1.9. К ним относятся источник сжатого газа с регулятором давления регулятор расхода для поддержания постоянной скорости потока подвижной фазы узел ввода пробы, обогреваемый независимо от термостата колонки детектор с автономной системой контроля температуры и диаграммный регистратор. Перед колонкой и после детектора, а- в некоторых случаях только после детектора, в линию включают расходомер. Часто в состав хроматографов вводят манометры, необходимые для измерения абсолютных (но не относительных) характеристик удерживания блок программирования температуры во времени автоматические устройства для ввода пробы (испарители), приспособленные для измерения характеристик удерживания ловушки для сбора фракций, а также устройства для обработки данных, например дисковые и цифровые интеграторы и компьютеры. Список фирм-изготовителей публикуется в ежегодно выпускаемом каталоге по аналитическому химическому оборудованию [24], в котором помещаются также данные по номенклатуре хроматографического оборудования. В издании 1970—1971 гг. соответствующий раздел занимает 2 /4 страницы, на которых перечислены названия фирм-поставщиков, перечень дополнительного оборудования и запасных частей. [c.46]

Аналогичным образом, но при помощи интегрального метода можно рассчитать содержание вещества по профилю элюирования, полученному на аминокислотном анализаторе. Площадь пика делят вертикальными линиями на участки, соответствующие смещению ленты за время сбора одной фракции. Так, при скорости подачи элюента 30 мл/ч, скорости смещения ленты самописца 75 мм/ч и объеме фракций 1 мл расстояние между двумя вертикальными прямыми составляет 2,5 мм. Величину поглощения определяют в точке пересечения кривой элюирования с вертикальной линией. Однако эти данные не пересчитывают на лейцин, поскольку в условиях анализа на аминокислотном анализаторе построение стандартной лейциновой линии является сложной задачей. Поэтому найденные величины поглощения суммируют, вычитают среднее значение фона, умноженное на число фракций, и в итоге получают число, соответствующее площади данного пика. При анализе стандартной смеси аминокислот определяют так называемый цветовой показатель (константу С ), соответствующий каждой аминокислоте (см. [c.354]

Применить многоступенчатую схему или ряд параллельно соединенных колонок. Наибольшим достижением в этом направлении является применение вращающейся установки в виде цилиндра, по окружности которого устанавливают большое число хроматографических колонок [1]. Через неподвижную газонепроницаемую крышку (герметично притертую по всей плоскости) непрерывно поступает газ-носитель. При вращении цилиндра в каждую колонку последовательно дозируется разделяемая смесь и в каждой колонке проходит процесс разделения в проявительном режиме. В нижней части цилиндра с колонками находится неподвижное плато с ловушками для сбора разделенных фракций. При вращении цилиндра колонки последовательно соединяются со всеми ловушками. Если все колонки наполнить одним и тем же сорбентом с одинаковой плотностью так, чтобы эффективность и удерживаемые объемы были одинаковыми, то все колонки будут давать качественно тот же результат, что и одна колонка. В аналогичном приборе фирмы ЭНИ 100 колонок диаметром 6 мм длиной 1,2 м Цри скоростях вращения цилиндра от 1 до 50 об/ч. В этой системе высокая разделительная способность колонок сохраняется, так как они небольшого диаметра. Однако в целом эта установка имеет ряд серьезных недостатков во-первых, исключительно трудно обеспечить герметичное соединение верхнего и нижнего блоков, во-вторых, приготовить абсолютно одинаковые колонки практически невозможно, поэтому со временем система может выходить из установленного режима. [c.177]

Наиболее эффективный способ сохранения разрешения, полученного на колонке для ГЖХ, — это сбор очень малых фракций, который является, однако, длительной и трудоемкой процедурой. Как отмечалось, при работе с пропорциональным счетчиком объемом 10—12 мл не происходит существенного перемешивания разделенных компонентов при условии, что скорость газа не слишком мала. [c.222]

Самотечные системы сбора нефти имеют ряд существенных недостатков из-за низкой скорости движения потока жидкости в них образуются отложения механических примесей, солей, парафина из-за наличия открытых мерников и резервуаров велики потери газа и легких фракций, достигающие 3 % от общего объема нефти. Эти системы трудно автоматизируются и требуют многочисленного обслуживающего персонала. [c.19]

После окончания опыта зоны элюируют потоком растворителя, подаваемым сверху насосом или под гидростатическим напором. Для сбора фракций обычно нижняя часть колонки отсоединяется от прибора и на нее надевается на шлифе специальная коническая насадка верхняя часть колонки при этом тоже должна быть изолирована от электродного сосуда — или с помощью крана с большим проходным сечением или каким-либо иным способом. Фракции можно собирать автоматическим коллектором. Скорость движения зон должна быть невелика, чтобы не было чрезмерного их размывания. По данным Пората колонке допустима линейная скорость [c.86]

Часть приготовленной соляной кислоты разбавляют до получения 500 см КИСЛОТЫ пл. 1,10 г/см . Ее перегоняют со скоростью 3—4 см /мин, дистиллат собирают в чистую колбу и время от времени переливают в цилиндр. После отгонки 375 см кислотьБ следующие 50 смЭ кислотьг собирают в пропаренную сухую колбу, в которой, теперь находится чистый азеотроп соляной кислоты. При сборе этой фракции термометром контролируют постоянство температуры кипения, до и после сбора фракции ло барометру определяют давление воздуха и находят среднее из двух значений. Точное содержание кислоты рассчитывают интерполяцией данных из табл. Д.14. [c.155]

После нанесения образца колонку соединяют с верхним резервуаром, устанавливают необходимую скорость протекания элюирующего раствора путем изменения рабочего давления и начинают сбор фракций с помощью коллектора. Собирать фракции элюата необходимо с момента нанесения образца на колонку. Фракции можно собирать в пробирку по объему (с помощью сифоноу), по определенному количеству капель или через определенные прамежутки времени. [c.104]

После установления колонки с адсорбентом в строго вертикальном положении в нее вливают всю полученную в работе 3 парафинонафтеновую фракцию, растворенную в петролейном эфире. По окончании впитывания фракции в колонку подают непрерывным потоком и с постоянной скоростью проявитель — петролейный эфир. Скорость потока не должна превышать 0,5 мл1мин. Сбор фракций производят автоматически при помощи карусельной установки по 5 мл [c.50]

Препаративная ЖХ. Колонка силикагелевый картридж преппак-500, нутр=5,7 см, /=30 см. Объемная скорость 350 мл/мин. Детектор РФ. Размер образца 10 г в 100 мл подвижной фазы. Время анализа приготовление колонки—1,5 мин, смачивание и уравновешивание колонки — 5,0 мин, приготовление и введение образца — 2 мин, разделение и сбор фракций — 8 мин, общее время разделения— 16,5 мин. [c.67]

Данные по асфальтену, приведенные в табл. 2, получены при температуре колонки 281°С и скорости, газа-носителя 65 см 1мин. Последующие опыты показали, что в этих условиях разделение лучше, чем при сборе фракций, выделенных при температуре колонки 300°С и скорости газа-носптеля 80 см 1мин. [c.298]

Как правило, автоматические хроматографы управляются датчиком времени или сигналом от хроматографического пика. В обоих случаях необходимо соблюдать некоторые предосторожности. При временном управлении (датчиком времени) устройством для отбора фракций необходима чрезвычайно высокая воспроизводимость времени удерживания. Любое изменение продолжительности цикла разделения или старение колонки означает изменение вре- мени выхода компонентов и вызывает ошибочные переключения устройства для сбора фракций. Ввиду того что для каждой колонки существует определенная скорость выхода из нее паров жидкой фазы, количество жидкой фазы в колонке постоянно уменьшается и уменьшается время удерживания. Исправить этот недостаток можно либо путем введения соответствующей дополнительной программы автоматической компенсации, либо путем увеличения степени разделения, с целью получения временных окон для предотвращения перемешивания компонентов из-за наложения друг на друга соответствующих им хроматографических полос. Однако большинство разделений, проводимых на практике, сложны и требуют высоких температур, характеристики колонок при этом заметно изменяются, и поэтому автоматическое временное управление ими осуществить трудно. [c.98]

В продаже имеются коллекторы фракций различных типов, позволяющие отбирать вытекающие из колонки растворы по времени [18]. Юнгпикель и Вайс [2] рассматривают в качестве примера коллектор, позволяющий отбирать фракции сразу из двух или трех колонок. Фракции можно также отбирать по объему с помощью сифона, который периодически высвобождает постоянное количество вытекающей из колонки жидкости в приемник [19]. Последний необходимо заменять, но, если замена приемников фракций осуществляется по сигналу временной схемы, изменения скорости потока могут обусловить возникновение ряда трудностей, папример две фракции попадут в один приемник или сифон высвободит содержащуюся в нем норцию как раз в момент смены приемников. Купер с сотр. [21] использовал металлический поплавок в камере сифона, на которую была навита спираль, с тем чтобы в результате изменения индуктивности получить сигнал, управляющий движением поворотного приспособления для смены приемников. Такая конструкция позволила избежать отмеченных выше трудностей. В рассматриваемой работе Купера приведена полная блок-схема прибора для сбора фракций, позволяющего одновременно обслуживать две колонки. Аналогичную конструкцию с поплавком, замыкающим ртутные контакты, [c.93]

Подвижная фаза должна быть селективной по отношению к компонентам анализируемой смеси и обладать малой вязкостью, с тем чтобы обеспечивать меньший перепад давления на колонке и увеличивать скорость массопередачи. В препаративной хроматографии часто используют летучую подвижную фазу, чтобы облегчить ее отделение после сбора фракций интересующих компонентов. [c.54]

Для удаления аминокислот и смены буферного раствора необходимо пропускание фракции 5зо через колонку, содержащую сефадекс С-25 (грубый). Колонку заполняют сефадексом и хранят под тридистиллированной водой, а перед нанесением препарата уравновешивают буфером Г. Объем геля сефадекса в колонке должен в 7—10 раз превышать объем пропускаемого экстракта. Препарат наносят и собирают при малой скорости протекания (6—8 капель в 1 мин). Обычно нужную фракцию находят по мутности элюата, однако необходимо знать свободный объем колонки, так как в ряде случаев после преинкубации экстракт становится почти прозрачным, и тогда сбор фракции производят по объему. Первые капли препарата, сильно разбавленные буфером, отбрасывают, а собирают среднюю концентрированную часть препарата (1,5—2,0 мл). [c.366]

Наиболее прост коллектор, обеспечивающий сбор фракций по времени. На практике он применяется очень редхш, так как им можно лользоваться только в том случае, если скорость элюирования стабильна. [c.207]

Для препаративного разделения веществ и сбора разделенных фракций особенно полезной является жидкостная хроматография высокого разрешения. Этот процесс превосходит традиционные варианты газовой и жидкостной хроматографии по скорости разделения и удобству работы. Кроме того, при использовании этого метода снижается возможность разрушения пробы, так как она не подвергается воздействию высоких температур. Типичный прибор для препаративной жидкостной хроматографии высокого разрешения показан на рис. 7.27. [c.470]

Непрерывное двухмерное хроматографическое разделение смеси веществ на произвольное число фракций становится возможным при одновременном равномерном перемещении обеих фаз в направлениях, перпендикулярных друг другу. Сущность такого процесса поясняет рис. 3.14. Слой стационарной фазы АВСВ движется с равномерной скоростью в направлении ММ относительно неподвижных систем А В и С В, предназначенных соответственно для подачи потока второй фазы по границе АВ и для сбора элюата по границе СВ. Разделяемая смесь непрерывно подается в слой сорбента в точке 0. В направлении АС компоненты смеси движутся по слою стационарной фазы в соответствии с закономерностями хроматографического процесса. В направлении АВ зоны разделяемых веществ смещаются в пространстве вместе со слоем стационарной фазы. [c.190]

Аналитическую колонку, или колонку несколько большего размера, можно использовать в приборе с регулярной автоматической подачей пробы и отбором желаемой фракции или желаемых фракций. Амброз и Коллерсон [1 ] первые предложили применение часового механизма для регулирования автоматического ввода пробы и улавливания веществ по мере их выхода из колонки. Они применяли колонку длиной 1 м ж диаметром 1,5 см. Пробы вещества несколько менее 1 г вводились через каждые 15—20 мин, желаемый компонент собирался автоматически. Циклы ввода и сбора регулировались автоматическим таймером и 50-позицион-ным селектором. Получалось 70—80 г очищенных углеводородов Сд в сутки. Метод обладает тем недостатком, что характеристики колонки — температура колонки и скорость потока газа-носителя должны поддерживаться постоянными. [c.363]

Сборники с постоянными интервалами времени просты по устройству, надежны в работе и вполне достаточны для вынолнения большинства аналитических разделений. Главное возражение, которое может быть выдвинуто против сборников этого типа, состоит в том, что объем фракций изменяется с изменением скорости протекания раствора. При разделениях, в которых трудно поддерживать постоянство скорости протекания, лучше пользоваться насосом, обеспечивающим постоянную скорость подачи элюента, чем применять сложные устройства, гарантирующие сбор равных фракций элюата независимо от изменения скорости протекания. В большинстве сборников с равными интервалами времени приемнпки помещаются в отверстиях или гнездах, расположенных по периферии поворотного столика, который через онределенные промежутки времени поворачивается таким образом, что каждый приемник но очереди оказывается под выпускным отверстием колонки. Повороты обычно осуществляются с помощью груза, висящего на нити, которая обвязана вокруг обода, жестко соединенного с поворотным столиком. Повороты регулируются электромагнитом, действующим от часового механизма или реле времени. Полное онисапие устройства этого тина приводят Шредер и Корей [103 ]. Другой простой сборник фракций описан Зандом и Ситроном [138] движущийся поворотный столик позволяет собирать большое число фракций элюата (рис. 10. И). [c.197]

В период сбора паров колебаний скорости испарения не измеряли. Поскольку жидкие фазы представляли собой кубовые остатки молекулярной перегонки, легкие компоненты фракций, вероятно, де являлись причиной изменения скорости. Определение вещества, собранного с микровэкса как жидкой фазы за 64 час., крайне трудно. Наблюдавшиеся при масс-спектральном анализе осколочные ионы были аналогичны ионам микровэкса. Определение паров, собранных с других жидких фаз, не проводилось. Масс-спектральный анализ парафиновых фракций показал отсутствие пиков веществ с более высокой молекулярной массой, что свидетельствовало о чистоте конечных фракций. [c.298]

Для определения полноты сбора ботву собирают с отведенной площадки и взвешивают. При определении отходов сахароносной массы в. ботву и загрязненности ботвы землей пробы берут при рабоче ) скорости. агрегата иа брезент в прицепе, разбирают в мешки по фракциям и взвеии1вают. Отношение массы фракций к массе пробы определяет оценку качества уборки ботвы (табл. 72)., [c.155]

Качество работы корнеуборочных мапиш оценивают за рабочий день не менее двух раз. На повреждение и загрязненность корней пробы берут при рабочей скорости агре1 ата в прищепе на брезент, используемый для сбора оставшихся корней. Взятую пробу перебирают сначала иа загрязненность, затем на повреждение корней. Разобранные фракции взвешивают и по отношению к массе всей пробы определяют процент загрязненности и повреждения (табл. 73). [c.155]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология