Бумажная хроматография сахаров

Бумажная хроматография сахаров [c.186]

Центральной задачей при получении олигосахаридов почти из любого источника является выделение индивидуальных соединений из смеси моно- и олигосахаридов. Для этой цели разработано несколько методов, основанных на хроматографии . Наиболее старым из них является распределительная хроматография на целлюлозе . Для элюирования обычно используют системы растворителей, аналогичные тем, которые применяются для бумажной хроматографии сахаров (см, гл, 14), Этот метод позволяет осуществлять вполне удовлетворительное разделение, однако характеризуется малой емкостью колонок и требует довольно много времени. Более эффективна адсорбционная хроматография на смеси угля и целита (см., например, " ). С таких колонок моносахариды обычно элюируются водой, а олигосахариды элюируются в порядке возрастания степени полимеризации водно-спиртовыми смесями с увеличивающейся концентрацией спирта. В последние годы такой метод стал основным способом разделения смесей олигосахаридов. Смеси высших олигосахаридов хорошо разделяются гель-фильтрацией на сефадексе Г-25 . Однако для низших олигосахаридов (степень полимеризации 2—4) этот способ мало эффективен . [c.425]

Возникновение и бурное развитие метода хроматографии сахаров на бумаге повлекло за собой появление способов обнаружения веш,еств в мягких условиях, пригодных для обработки бумажных хроматограмм . Особенно часто для этой цели используют реакции восстановления серебряных oлeй окисления разнообразных производных моносахаридов периодат-купратом калия и многочисленные цветные реакции моносахаридов с ароматическими аминами — анилином, п- и о-аннзидином и многими другими в присутствии фталевой, ш,авелевой, трихлоруксусной, фосфорной и других кислот ( м. ). Напротив, тонкослойная хроматография на силикагеле и окиси алюминия позволяет применять для обнаружения предельно жесткие реагенты, из которых наибольшей популярностью пользуется концентрированная серная кислота ( м. ). [c.410]

Методика количественной бумажной хроматографии сахаров, органическ кислот и аминокислот у растений. Изд. АН СССР, 1962. [c.288]

Методика количественной бумажной хроматографии сахаров, органических кислот и аминокислот у растений. М.-Л., Изд-во АН СССР, 1962. 87 с. [c.400]

Применение бумажной хроматографии. Методом БХ разделяют органические кислородсодержащие соединения спирты, сахара, альдегиды и кетоны, органические кислоты, фенолы, флавоноиды, кумарины, стероиды и терпеноиды, хиноны, антрахи-ноны, полициклические соединения, пигменты из растений и т. п. [c.356]

Щелочной лигнин однократно очищали из ацетон-воды и отделяли от свободных сахаров бумажной хроматографией. Затем лигнин экстрагировали из бумаги ацетоном, гидролизовали серной кислотой и вновь хроматографировали. При 2-часовой экстракции были получены слабые пятна ксилозы при 4- и 8-часо-.вой экстракции пятен не было. [c.738]

После ацетилирования образцов целлюлозы при помощи хлороформа и ацетона были экстрагированы ацетилированные лигнины. Последние содержали как лигнин, так и пентозаны. Они были деацетилированы 0,1 н. едким натром и при помощи бумажной хроматографии разделены на лигнин и свободные сахара. Далее лигнины, свободные от углеводов, были экстрагированы из хроматограммы ацетоном и гидролизованы концентрированной серной кислотой. [c.741]

Большую роль в изучении продуктов ФГ гемицеллюлоз сыграл метод бумажной хроматографии, позволяющий разделить смесь продуктов, выделенных из реакционной среды, и идентифицировать сахара — как моно-, так и олигосахариды [42, 44, 54, 59, 74, 77, 78]. [c.226]

Известные в настоящее время многочисленные реактивы для обнаруже-лия сахаров в бумажной хроматографии можно также с успехом применять и в методе ХТС (реактивы № 7, 8, 9, 10, 18, 67, 110, 116, 120, 135, 137 и 145). [c.459]

Применение смесей бутанола, муравьиной кислоты и воды в бумажной хроматографии аминокислот и сахаров [299]. [c.221]

После идентификации сахаров, присутствующих в гидролизате, их можно количественно определить специфическими колориметрическими методами [53], ферментативными способами [117, 211] или гравиметрическими методами, заключающимися в избирательном осаждении нерастворимого производного. Количественное определение сахаров с помощью бумажной хроматографии, требующее всего лишь 1—50 мг исходного вещества, представляет собой общий и точный метод анализа сложных смесей [61, 97]. [c.304]

Структурный анализ олигосахаридов проводят классическими методами [171], которые включают гидролиз, метилирование и периодатное окисление. Применение бумажной хроматографии, микрометодов окисления йодной кислотой [100] и тетраацетатом свинца [174], а также использование газо-жидкостной распределительной хроматографии для анализа метилированных сахаров [31, 125, 136] значительно уменьшает количество олигосахарида, требуемое для структурного анализа. [c.304]

При помощи метода бумажной хроматографии можно не только определить качественный состав раствора сахаров, но и дать приближенную их количественную оценку. Для этого на лист фильтровальной бумаги наносят, в порядке уменьшения концентрации, ряд растворов отдельных сахаров от 20 до 10% (20 17,5 15 12,5 10%) и затем хроматографируют. [c.157]

Отдельные сахара можно определить количественным методом газожидкостной хроматографии в виде триметилсилильных производных [15, 22], или ионообменной хроматографией [22] с предварительным качественным определением их бумажной хроматографией. [c.219]

Метод бумажной хроматографии щироко используется в органических и биохимических исследованиях. Он позволяет проводить разделения таких соединений, как амины, алкалоиды, сахара, углеводы, глицериды, аминокислоты, протеины, витамины, гормоны, антибиотики и др. Следует отметить, что при хроматографировании вещества не изменяются химически, что чрезвычайно важно в биологических исследованиях. [c.48]

Весьма перспективна комбинация бумажной хроматографии с радиоактивными индикаторами. Содержание последних в отдельных пятнах определяется либо при помощи фотопластинки, либо счетчиком Гейгера. Применяя радиоактивную углекислоту, удалось таким путем выяснить, какие вещества (сахара и аминокислоты) образуются в растении при ассимиляции углекислоты [c.220]

Методы бумажной хроматографии в настоящее время вошли в практику агрохимических лабораторий. С ее помощью определяют аминокислотный состав биологических объектов. Белки, сахара, карбоновые кислоты и другие важные для растений и животных вещества могут быть определены с помощью этих методов. [c.355]

Важнейшей областью применения электрофореза является анализ биоколлоидов, например анализ смесей белков в клиническом анализе. Белки, как амфотерные полиэлектролиты, обладают собственными зарядами, зависящим от pH среды. Регулируя значение pH, можно в широких пределах менять их подвижность и даже изменить направление движения в процессе электрофореза. Для каждого белка при определенном значении pH общее число положительных зарядов равно общему числу отрицательных зарядов. Эта изоэлектрическая точка, при которой отсутствует движение частиц, является характерной величиной для определенного белка. Растворимость белка в этой точке минимальна. Подбирая соответствующие буферные растворы для установления определенной скорости движения и растворимости веществ, можно приспособить процессы электрофореза для решения разных проблем разделения веществ. Таким образом, электрофорез превосходит метод бумажной хроматографии. Кроме того, при помощи электрофореза, особенно при высоком напряжении, можно проводить разделение неионогенных веществ (например, сахар в виде боратного комплекса) [79]. Методом электрофореза можно также определять изоэлектрические точки амфотерных веществ или заряды коллоидных частиц (по направлению движения). [c.387]

Много работ опубликовано по хроматографии углеводов, особенно В. В. Рачинским, Б. Н. Степаненко. Установив зависимость между структурой и величиной Rf, можно оценить степень полимеризации олигосахаридов, влияние положения оксигрупп. На бумаге из стеклянных волокон, предварительно забуференной, можно четко разделять различные монозы, биозы, триозы, галактуровую и глюкуроновую кислоты. В микроорганизмах можно определять связанные углеводы, свободные MOHO- и дисахариды в растительном материале, также свободные олигосахариды, свободные углеводы в крови и моче, молоке, наблюдать гидролиз и синтез олиго- и полисахаридов, энзиматические превращения моносахаридов в связи с процессами окисления, восстановления, изомеризации, реакции углеводов с азотсодержащими соединениями, контролировать чистоту углеводов и идентифицировать их, определять кислоты и ла-ктоны, уроновые кислоты, кетокислоты, метилированные сахара, дезоксисахара, аминосахара, полисахариды, инозит, сорбит, эфиры фосфорной кислоты, структуру галактоманнана, эремурана, новых галактозидов, проследить превращение сахарозы, синтез олигосахаридов в растущей культуре. Бумажная хроматография применяется в сахарной промышленности, в пивоварении. Мало еще разработана теория распределительной хроматографии углеводов, мало изучены возможности разделения оптических изомеров и антиподов. [c.201]

Диоксанлигнин бука при помощи бумажной хроматографии был отделен от сахаров, затем исчерпывающе метилирован и подвергнут гидролизу 5%-ной соляной кислотой. При последующей бумажной хроматографии была доказана не диметилксилоза, а триметилксилоза. [c.742]

Трейнар обнаружил, что поведение этого комплекса при гидролизе идентично поведению комплекса, экстрагированного им водой при 140°, Осаждение лигнина совмещалось с выделением редуцирующи.х сахаров. Затем комплекс был исчерпывающе фракционирован. После этого бумажной хроматографией было установлено отсутствие в комплексе свободных сахаров. При его [c.747]

Хроматография на бумаге. Впервые в современной форме метод бумажной хроматографии был описан Консденом, Гордоном и Мартином [16]. Хроматографирование на бумаге может быть применено для разделения микрограммовых количеств многих веществ, таких, как алкалоиды, нуклеозиды, нуклеотиды, сахара, аминокислоты, флавоноиды, таннины, стероиды, птеридины и фосфолипиды. Метод имеет много общего с распределительной хроматографией в качестве носителя используется фильтровальная бумага. Однако в этом случае не происходит распределения в истинном смысле этого слова (между несмешивающимися растворителями), так как разделение достигается с помощью растворителей, смешивающихся с водой. Согласно Ледереру [2], вопрос о том, обусловлен ли процесс хроматографирования на бумаге адсорбцией на водно-целлюлозном комплексе или же распределением внутри этого комплекса, рассматриваемого в качестве стационарной фазы, относится скорее к области терминологии, чем к существу дела . [c.21]

Разработаны микрометоды для полной идентификации антоцианов, включая определение вида сахара и места его присоединения. Эти методы основаны на бумажной хроматографии гликозидов (в нескольких обычных растворителях), агликонов, сахаров и коричных кислот, получающихся при гидролизе (Харборн [175]), с последующим изучением спектров гликозидов и агликонов [176]. Антоцианы поглощают в видимой области при 500—550 ммк в 0,01%-ном растворе соляной кислоты в метаноле в ультрафиолетовой области полоса менее интенсивна. Положение максимума в видимой области изменяется в зависимости от значения pH и типа растворителя, поэтому существенным является использование указанных выше стандартных растворителей. Антоцианы с 3, 4 -диоксигруппой обнаруживают батохромный сдвиг в присутствии хлористого алюминия. Соотношение сахар — агликон в антоцианах определяют спектрофотометрически 1) путем установления вида сахаров после разделения кислотных гидролизатов на бумаге и опрыскивания фосфатом анилина 2) путем спектрофотометрического определения концентрации антоцианидина в гидролизате. Место присоединения и природа сахарных групп (если присутствуют ди- и трисахариды) определяют изучением сахаров, образующихся после расщепления молекулы путем окисления перекисью водорода и перманганатом калия (Чандлер и Харпер [177]), а также при частичном кислотном или ферментативном гидролизе. [c.65]

В отдельной навеске, после гидролиза 3%-ной НС1 и до экстракции Щелочью, было определено содержание целлюлозы гидролизом 72%-ной H2SO4. Полученный результат (содер- жание целлюлозы 1,1%) следует, однако, считать недостоверн ным, так как при наличии РВ в гидролизате присутствие сахаров не подтвердилось данными бумажной хроматографии. [c.67]

Идентификация двух-и трехатомных фенолов (пирокатехина, пирогаллола, резорцина, флуорглюцина, орсина и гидрохинона) [102]. Идентифицировать эти вещества можно методом бумажной хроматографии. Хроматограмму обрызгивают сахаром (2,0 г) в растворе соляной кислоты (10 мл) и спирта (90 мл), нагревают 40—60 секунд и наблюдают возникающую характерную для различных фенолов окраску и флуоресценцию в ультрафиолетовом свете. [c.214]

Известны особые свойства сахаров, фосфорилированных по гликозид-ному гидроксилу. Нами был впервые изучен синтез соответствующих трехвалентных фосфорных производных. Так, И. П. Гудковой и И. К. Голов-никовой было установлено, что 2,3,4,6-тетраацетат глюкозы может быть превращен в 1—Г,3 -бутиленфосфит-2,3,4,6-тетраацетат глюкозы. Продукт реакции окислен и гидролизован, причем получен глюкозо-1-фосфат, идентифицированный с известным образцом методом бумажной хроматографии. В настоящее время выясняются границы синтеза гликозид-фосфитов и подобных соединений. Кроме фосфорилирования производных гексоз в нашей лаборатории начато исследование по синтезу нуклеозид-фосфитов и подобных им соединений [17], которые привлекли внимание и других исследователей [18, 19]. [c.328]

Недавно появился обзор по химии самой эллаговой кислоты, а также родственных простых эфиров и карбоновых кислот (Джерд [50]). Эти соединения встречаются в природе в свободном состоянии или в соединении с сахарами. С помощью бумажной хроматографии эллаговая кислота легко отделяется от галловой кислоты, ее спектр в ультрафиолетовой области имеет две полосы при 366 ммк и более интенсивную — при 255 ммк. В присутствии ацетата натрия первая полоса испытывает гипсохромный сдвиг (И ммк), а интенсивность второй полосы удваивается. [c.54]

К числу наиболее удобных и широко применяемых методов специфического введения трития относится восстановление альдегидов, кетонов или лактонов боргидридом-ОД натрия. С появлением новых методов селективного окисления сахаров указанные оксопроизводные стали легкодоступными соединениями [1]. Продукты восстановления выделяют методом препаративной ТСХ (см. гл. 8), бумажной хроматографии или ферментативными методами [2], после чего полученные соединения разбавляют неактивными аналогами, чтобы активность препаратов соответствовала требуемой. Иногда наблюдается преимущественное образование одного из возможных изомеров. Так, восстановление 1,2 5,6-ди-О-изопропилиден-а-о-рмбо-гексофуран-З-улозы боргидридом- Н натрия приводит к о-алло-соед.шению, выход которого превышает 98% [3] (см. [c.375]

Сахарозу определяют после легкого гидролиза разбавленной (до 2%) соляной кислотой при температуре 68—70°С в течение 3 мин [11]. Фруктозу, глюкозу, мальтозу, лактозу — различными химическими методами [8, 16]. Лактозу, мальтозу и рафинозу также часто определяют энзиматическими методами с добавлением суспензии дрожжей или препаратов ферментов [8, 16, 22]. Методом бумажной хроматографии [7, 11, 19] отдельные сахара можно определять только полуколичествен-но. Поэтому при подготовке данных для настоящего справочника работы с использованием метода бумажной хроматографии не принимались во внимание. [c.219]

Идентификация компонентов основана на том, что их положение на хроматограмме при данных условиях постоянно и может быть установлено предварительными опытами. Таким путем удалось идентифицировать не только все содержащиеся в природных смесях, белковых гидролизатах и т. д. известные аминокислоты, но и обнаружить ряд новых. Бумажная хроматография применена с успехом также к анализу сахаров, пуринов и пири-мвдинов, антибиотиков и т. д. Методика применима и для количественного микроанализа Для этого отдельные пятна экстрагируются, и экстракт анализ нруетч я колориметрическим или [c.219]

Одна из областей применения бумажной хроматографии — исследование химических превращений пенициллинов. Так, например, были изучены реакции 6-АПК с сахарами и другими веществами [1400, 1401]. Хроматографией контролировали гидрирование /г-нитробензилпенициллина с целью получения п-аминобензилпенициллина [1395]. Появление зоны бензилпенициллина при хроматографировании а-карбоксибензилиени-циллина доказывало распад последнего [1402]. Довольно часто бумажная хроматография использовалась при получении пол/-синтетических препаратов пенициллинов и цефалоспоринов [1403—1410]. [c.223]

Некоторые применения газовой и бумажной хроматографии для исследования полисахаридов. Модельные изучения на синтетическом D-маннане. (ТМС-производные ман-нозид НФ SF-96 на диатопорте, а метилированные сахара на версамиде.) [c.136]