Подготовка колонок

Подготовка колонки. Для обессоливания 100 мл белкового раствора необходимо примерно 25 г сухого сефадекса 0-25. Объем раствора, из которого требуется удалить соли, должен быть не более одной пятой объема геля, заполняющего колонку. [c.220]

Подготовка колонки.Перед заполнением внутреннюю поверхность капилляров очищают от загрязнений, используя различные реагенты и растворители. Очищают на установке, показанной на рис. 35. Ниже приведены рецепты очистки капилляров, разработанные Дзержинским филиалом ОКВА. [c.78]

Разработан метод определения состава поглотительной фракции на капиллярной колонке [84]. Показано, что при анализе на одной колонке относительная ощибка составляет 4,6 1,7% из-за трудностей воспроизведения условий подготовки капиллярных колонок результаты анализа тех же систем на пяти разных колонках имеют относительную ощибку 13,7 8,6%. Это подчеркивает важность унификации методов подготовки колонок и сорбентов, а также целесообразность централизации выпуска стандартных капиллярных и набивочных колонок. [c.138]

Выполнение работы. 1. Подготовка колонки к работе. Катионит помещают в делительную воронку, в которой его 5 раз промывают 5%-м раствором НС1 для удаления ионов железа. При этом объем промывного раствора должен быть примерно в 30 раз больше объема катионита. Каждый раз катионит взбалтывают с раствором НС1 и оставляют в контакте с ним на 2 ч при периодическом перемещивании. После удаления железа промывают катионит дистиллированной водой до нейтральной реакции по метиловому оранжевому. При такой обработке катионит переходит в Н-форму. [c.308]

Подготовка колонки. Полисорб-1 последовательно отмывают от низкомолекулярных органических примесей раствором, содержащим 25 г/л хлорида натрия и 2,5 г/л гидроксида натрия, и сушат до постоянной массы при 105°С. Экстрагенты растворяют в органических растворителях следующим образом. 50 мг диантипирилметана смешивают с небольшим объемом ацетона в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем до метки амилацетатом. Диэтилдитиокарбаминат свинца растворяют в I4. 100 мг дифенилкарбазида растворяют в небольшом объеме ацетона в мерной колбе вместимостью 100 мл и разбавляют амилацетатом до метки. [c.335]

Ход работы. Две колонки заполняют сорбентами с жидкими фазами разной полярности — неполярным скваланом и полярным полиэтиленгликолем. После подготовки колонок проводят хроматографирование четыреххлористого углерода, гексана и водорода. [c.272]

Методика работы на колонках с ионитами ничем не отличается от методики работы с силикагелем. Подготовка колонки к работе и нанесение разделяемой смеси могут выполняться теми же способами. [c.152]

Метод, может быть. применен в тех случаях, где не требуется особой точности определения (например, в полевых условиях). Продолжительность исследования 15—20 мин, включая подготовку колонки для анализа требуется около 4 мл раствора. [c.212]

Подготовка колонки и ионитов [c.209]

Подготовка колонки с анионитом АВ-17 (16% ДВБ) в фосфатной форме. Подготовленный анионит в гидроксильной форме переводят в фосфатную форму, для чего через колонку пропускают 20 л 10%-ного раствора гидрофосфата натрия до полного насыщения. Колонку отмывают от ионов Р04 - 50 мл дистиллированной воды. После этого колонка готова для концентрирования растворов свинца. [c.278]

Подготовка колонки и ионитов. .......... [c.311]

Количественный анализ проводят после предварительной подготовки колонки н ионита. 5 10 г ионита промывают дистиллированной водой или 4 п-ным раствором соляной кислоты при наличии в катион 1те железа (проба с раствором роданида аммония). При наличии значительных примесей же.пеза, зерна ионита настаивают с соляной кислотой в течение 12 ч и промывают дистиллированной водой до отрицательной реакции на железо. [c.40]

Подготовка колонки для иммуноаффинной хроматографии [c.115]

Подготовка колонки, заполненной сферической ДЭАЭ-целлюлозой (полимер в виде шариков), не отличается от подготовки колонки с гранулярной или волокнистой целлюлозой. Использование сферической ДЭАЭ-целлюлозы имеет ряд весьма существенных преимуществ, несмотря на несколько меньшую разрешающую способность [c.208]

Катионообменные целлюлозы при регенерации обрабатывают так же, как при подготовке колонки к хроматографии. [c.215]

Тестирование колонок, заполненных обращенно-фазовыми адсорбентами (химически алкил-модифицированные силикагели типа С8, С16 и С18), лучше производить смесью "бензол-нафталин-антрацен" или "нафталин-антрацен-м-терфенил" при использовании элюента "ацетонитрил-вода" в соотношении от 60 40 до 75 25 по объему в зависимости от содержания углерода в адсорбенте. Для сорбентов, содержащих 12-14% углерода, предпочтительнее элюент "ацетонитрил-вода" в соотношении 55 45. При содержании углерода 16-18% и выше используются элюенты с содержанием ацетонитрила, большим 70% по объему. Расчет эффективности ведется по антрацену или м-терфенилу. При подготовке колонки к анализу беиз(а)пирена расчет эффективности целесообразнее проводить по бенз(а)пирену (рис. 2.6). В этом случае используется элюент "ацетонитрил-вода" в соотношении 75 25 или 80 20. [c.22]

Подготовка аппаратуры к анализу. Подготовку колонки хроматографа и заполнение ее насадкой, а также вывод хроматографа на рабочий режим проводят по инструкции к прибору. Устройство для ввода проб (испаритель) или приставку к хроматографу, предварительно промытые ацетоном, заполняют стекловатой или стекловолокном. Через каждые 10—20 анализов их меняют, а испаритель прочищают стальной проволокой или просверливают. [c.212]

Приготовление сорбента и подготовка колонок к работе. Для [c.30]

Подготовка колонки к работе. Перед началом работы на колонке ее следует промыть каким-либо растворителем (спирт, эфир, бензин) и просушить. Для этого в куб заливают растворитель (не забыть бросить кипелки ) и заставляют колонку работать 30—60 мин при полном орошении, дав при этом ей захлебнуться [c.52]

Использование литературных данных по параметрам удерживания. Из широкого набора параметров. удерживания для целей идентификации при сопоставлении с опубликованными данными используют индексы удерживания и относительные времена удерживания. Чтобы сопоставление было корректным, необходимо измерения выполнять в условиях, идентичных тем, прн которых получены опубликованные данные. Эти условия должны контролироваться в Первую очередь по следующим пунктам 1) тнп сорбента (марка, фирма-изготовитель, количество неподвижной фазы и характеристики твердого носителя, условия предварительной активации илн обработки сорбента, условия кондиционирования колонки) 2) температурные режимы колонки и системы ввода пробы 3) параметры (длина, диаметр, материал) и условия предварительной подготовки колонки 4) объем вводимой пробы 5) расход, входное и выходное давление газа-носителя 6) способ измерения мертвого времени. [c.214]

Подготовка колонки и ее заполнение. Операции, включающие очистку внутренних стенок колонки и загрузку ее приготовленной насадкой, осуществляют в соответствии с инструкцией к прибору. Колонку помещают в термостат и продувают током газа-носителя при 120° С в течение 2—3 ч. [c.308]

Методика подготовки колонки, нанесения и стабилизации неподвижной фазы сводилась к следующему. Капиллярная колонка последовательно в течение 24 ч продувалась водородом, промывалась по три. раза 5 мл бензола, эфира, спирта, воды, слабым раствором аммиака. После заверщения этого цикла все операции были повторены в обратном порядке. [c.119]

Подготовка колонки обработка растворами в количестве нескольких объемов от объема колонки и затем ппо-мывка чистой водой (десятикратный объем по отношению к объему колонки). Скорость истечения жидкости 5 мл мин. Температура 25 . [c.141]

Открытые (безнасадочные) и насадочные капиллярные колонки широко используются в ГХ Применительно к ЖХ основной их недостаток заключается в том, что неподвижная жидкая фаза постепенно смывается со стенок колонки подвижной фазой Тем не менее такие колонки все-таки получили распространение, поскольку их сравнительно легко изготовить и они удобны для изучения параметров, влияюш их на эффективность разделения Зависимость эффективности колонки от вязкости подвижной и неподвижной фаз, диаметра трубки, толщины пленки неподвижной фазы, коэффициента емкости и линейной скорости подвижной фазы можно определить из уравнения (3) Эффективность колонки зависит также и от ряда других факторов, однако предсказать их значение, пользуясь основным уравнением, не представляется возможным В число этих факторов входит предварительная подготовка колонки, объем дозатора и объем вводимой пробы [c.63]

Подготовка колонки. В колонку размером 1 X 25 см с закрытым краном наливают небольшое количество дистиллированной воды. На дно колонки помещают кусочек стеклянной ваты. Очень важно при этом избежать попадания пузырьков воздуха. Затем в колонку через воронку вливают густую суспензию геля сефадекса. Колонку устанавливают в штативе строго вертикально. [c.29]

Подготовка хроматографа. Включение в сеть, управление измерительным блоком и регистратором, ввод газообразных проб через дозатор, подготовку колонок и их заполнение сорбентом выполняют в соответствии с инструкцией по монтажу и эксплуатации хроматографа. Так как для проведения полного анализа нефтезаводских газов необходимы две кололки, то газовую схему любого отечественного хроматографа необходимо дооборудовать четырехходовым пробковым краном для перек./1ючения потоков газа-посителя. Схема прибора с указанным изменением приведена на рис. 44. [c.97]

До подготовки адсорбционной колонки определяют необходимую кратность растворителя для разбавления сырья. Для этого разделяемый (анализируемый) продукт растворяют в соответствующем растворителе. Примерные соотношения сырья и растворителя 1 3 — для маловязких продуктов с Vjq = 10—12 мм /с 1 4 — при Vio,, = 9—1 мм /с 1 6—при Vjoo = 20—25мм /с более 1 6 — при разделении гудронов и экстрактов. При подготовке колонки нужно обратить особое внимание на то, чтобы все краны были хорошо притерты и ничем не смазаны. При определении масляного потенциала нефти, мазута, гудрона их предварительно деасфальтенируют, а затем депарафинируют масляные дистилляты только депарафинируют. [c.244]

Тренировка (кондиционирование) колонок Устанавливают свежезаполненную колонку в термостате хроматографа (не забывайте о прокладках]), не соединяя выход из колонки с детектором, и в течение 3—4 ч продувают колонку азотом, пропуская его со скоростью 40—60 мл/мин при ступенчатом или непрерывном (режим программирования) повышении температуры примерно от 75 °С до температуры на 20—30 °С выше предполагаемой рабочей (но не выше максимально допустимой для данной неподвижной фазы). Затем охлаждают колонку и соединяют ее выходной конец с детектором (не забудьте поставить прокладки ). Проверяют герметичность газовой линии прибора, выводят хроматограф на рабочий режим и проверяют стабильность нулевой линии на хроматограмме. Шумы и дрейф сигнала свидетельствуют о необходимости продолжить кондиционирование (при подготовке колонки к анализу следовых количеств компонентов пробы, регистрируемых на максимально чувствительных шкалах прибора, кондиционирование может продолжаться долго — десятки часов). Иногда, при работе с силиконовыми эластомерами, рабочие характеристики [c.263]

Описанию современной хрэматографической техники (колонок, насосов, детекторов, коллекторов фракций и др.) также посвящена отдельная глава. Наряду с рассмотрением принципов работы этих устройств сюда включены и сопоставляются данные каталогов по последним (на конец 1983 г.) моделям соответствующей аппаратуры, особенно многочисленным для высокоэффективной хроматографии при высоком давлении. В этой же главе приведены подробные рекомендации по общим для всех вариантов хроматографии методическим приемам подготовке колонок, внесению препаратов, осуществлению элюции, детектированию фракций и др. [c.4]

В открытую колонку (без адаптора) препарат вносят вручную из пипетки. Начинают с того, что спускают жидкость из колонки так, чтобы открылся (но не начал обсыхать ) слой сорбента. Затем сливную трубку зажимают. Раствор препарата остороншо, чтобы не взмутить сорбент, заливают по стенке колонки, начиная от расстояния в 1 мм над поверхностью сорбента и постепенно вместе с уровнем раствора препарата продвигая кончик пипетки вверх по стенке. После того как весь объем препарата внесен в колонку, сливную трубку освобождают от зажима и дают слою препарата войти в сорбент до того момента, когда его поверхность снова обнажится. Так же, как описано, вносят объем элюента, равный объему препарата, а затем спускают его в сорбент. Такую промывку стенок колонки целесообразно повторить еш е раз. После этого заливают (так же) некий объем элюента (на высоту 1—2 см) и вставляют верхнюю пробку с капельницей. Слой свободного элюента предназначен для того, чтобы обеспечить образование некоторого разрежения над сорбентом, необходимого для всасывания жидкости из резервуара, если он располагается ниже верха колонки при элюции без насоса (образование сифона), или для предотвраш ения обнажения верхнего слоя сорбента при. неработающем насосе и открытом сливе из колонки (в первый момент после открывания слива пз колонки вытекает немного жидкости, затем, если система герметична, вытекание прекращается). Вместе с тем следует иметь в виду, что в слое свободного элюента над сорбентом происходит перемешивание градиента, поэтому в случае градиентной элюции высота этого слоя должна быть минимально необходимой. После того как внесение препарата п подготовка колонки закончены, можно присоединить резервуар нли насос, открыть сливную трубку п начать элюцию. [c.77]

Техника подготовки колонки и препаратов для гель-фильтрации в 6 М растворе гуанидинхлорида описана довольно подробно [Mann, Fish, 1972]. 6 M раствор гуанидинхлорида ( 50%) должен быть прозрачным. Оптическая плотность его резко увеличивается только вблизи длпны волны 225 им. Перед исиользованием раствор следует отфильтровать сперва через средний, а затем — через мелкий стеклянный фильтр и деаэрировать. [c.154]

Подготовку колонки и проведение процесса хроматографии см. на с. 102. Все операции можно осуществлять при комнатной температуре. После определения свободного объема Vo через колонку последовательно пропускают растворы соответствующих белков- маркеров (по 3—4 мг в объеме 0,5—1 мл) . Белки удобно наносить последовательно в порядке уменьшения их молекулярной массы с интервалом, зависящим от размера колонки. Для колонки 1,5x50 см он равен 20 мл (объем собираемого элюата между нанесением отдельных образцов составляет 20 мл). Во время нанесения белков колонку перекрывают. Элюат, вытекающий из колонки со скоростью 15-20 мл/ч, собирают небольшими порциями (1—3 мл). Строят профиль элюции отдельных белковых фракций (с. 108). Затем строят график зависимости отношения объема выхода белка к свободному объему колонки Ve/Vo или величины Kav от логарифма молекулярной массы белков. [c.117]

Выбор сорбента и колонки для ГВЭЖХ также имеет свои особенности. Прежде всего, колонка должна быстро приходить в равновесие с растворителем постоянно изменяющегося состава как в процессе градиентного элюирования, так и при возвращении к исходному составу растворителя при подготовке колонки к новому анализу. Если для старых колонок в жидкостной хроматографии, работавших однократно, градиент формировался и использовался один раз, после чего сорбент в колонке заменялся свежим, и это позволяло применять силикагель и оксид алюминия, то для ГВЭЖХ эти сорбенты не подходят, так как уравновешивание их со слабым растворителем после градиента слишком длительно. Однако современные обращенно-фазные и другие привитые сорбенты достаточно быстро приходят в равновесие с исходным растворителем после окончания градиентного элюирования, что позволяет успешно использовать их для этих целей. Время, необходимое для уравновешивания колонки, для каждого сорбента устанавливается экспериментально по достижению постоянства времени удерживания веществ, входящих в анализируемую смесь. Это время различно как для разных сорбентов, так и для разных по составу растворителей, и может колебаться от десятков до нескольких сотен минут. [c.66]

Обычно для фильтрования через сефадекс используют колонки с впаянным фильтром из пористого стекла, причем мертвое пространство под фильтром должно быть возможно меньшим. Наполнение колонки проводят так же, как при подготовке колонок для хроматографирования через иониты (см. гл. XX). Сефадекс наливают в колонку в виде суспензии и дают ему осесть. Вещество наносят в виде максимально концентрированного раствора, избегая взмучивание верхнего слоя сефадекса. Скорость вымывания может быть значительна по сравнению с ионитами, так как равновесие устанавливается очень быстро. Контроль фракций может быть осуществлен спектрофотометрически (для белков и нуклеиновых кислот) или измерением электропроводности (для неорганических солей). На рис. 222 изображен [c.204]

Обработка ионообменной смолы и подготовка колонки. Обычно ионообменную смолу оставляют для набухания в воде на 24 ч затем ее укладывают в подходящую колонку. Если это анионообменная смола, ее переводят в основную форму, пропуская гидроокись натрия ( вО г/л) ИР через колонку со скоростью около 3 мл в минуту до отрицательной реакции элюата на хлориды затем промывают водой, сво бод-ной от углекислоты, Р для удаления щелочности. Если смола катионообмениая, переведение в кислотную форму достигается пропусканием через колонку соляной кислоты ( 70 г/л) ИР с последующим промыванием водой, свободной от углекислоты, Р до нейтральной реакции. [c.102]

Подготовка колонки. Смолу дауэкс 50 х 2 переводят в Н" -фор-му и в течение 1 ч перемешивают в 0,2 М пиридинформиатном буферном растворе pH 3,1. Затем смолу загружают в колонку и промывают тем же самым буферным раствором, до тех пор пока pH вытекающего раствора не станет 3,1. [c.199]

А. Подготовка колонки. Соответствующее количество фосфо-целлюлозы (Ф-целлюлозы) сначала с помощью декантации трижды отмывают дистиллированной водой, а затем последовательно 0,5 М NaOH, дистиллированной водой, 0,1 М Н3РО4, дистиллированной водой и стартовым буферным раствором. Отмывание дистиллированной водой всегда продолжают до тех пор, пока pH надосадочной жидкости не достигнет pH воды. Окончательное уравновешивание лонообменника стартовым буферным раствором производят уже в колонке. [c.214]

А. Подготовка колонки. Колонку КМ-целлюлозы готовят так же, как колонку Ф-целлюлозы, но отмывка ионообменника несколько отличается ее проводят следующим образом 0,5 М NaOH, дистиллированной водой, 0,1 М уксусной кислотой, дистиллированной водой и стартовым буферным раствором. [c.215]

Подготовка колонки. Для анионообменной хроматографии белков обычно применяют ДЭАЭ-сефадекс А-50. 1,0 г ионообменника суспендируют в дистиллированной воде и оставляют на 1 ч, после чего надосадочную жидкость вместе с медленно оседающими мелкими частичками декантируют. Затем ионообменник отмывают от ионов С1" 0,5 М NaOH. Избыток щелочи отмывают дистиллированной водой и продолжают дальнейшее отмывание кислотой. В связи с тем, что белки сыворотки крови обычно фракционируют в фосфатном буферном растворе, в качестве кислого отмывающего раствора применяют 0,1 М фосфорную кислоту. Избыток кислоты в свою очередь отмывают дистиллированной водой, а затем ионообменник отмывают стартовым буферным раствором до тех пор, пока не наступит равновесие. Проще всего отмывание вести фильтрованием на воронке Бюхнера, поскольку при этом удобно не только отмывать, но и анализировать промывную жидкость. [c.216]

Подготовка колонки с сефадексом G-200. Размер колонки 3x80 см. Сефадекс G-200 суспендируют в 0,1 М трис-НС1 pH 8,0, содержащем 0,2 М Na l, и на сутки оставляют для набухания. Мелкие плавающие в надосадочной жидкости частицы удаляют декантацией. На дно колонки кладут фильтр из бумаги или стеклянную вату и наполняют колонку на 1/3 высоты буферным раствором. Сначала в колонку вносят порцию сефадекса G-25, образующего слой высотой 2 см (сефадекс G-25 должен быть предварительно оставлен на сутки в буферном растворе для набухания) Затем начинают заполнять колонку разбавленной суспензией сефадекса G-200 и через несколько минут оседания открывают выходное отверстие. По мере вытеканид буферного раствора продолжают заполнение колонки суспензией сефадекса, следя за тем, чтобы образующиеся при заполнении пузырьки воздуха не задерживались в столбике геля. Когда образуется столбик геля требуемой высоты, через колонку пропускают один объем буф ного раствора. [c.222]

Подготовка колонки обработка насыщенным раствором хлористого натрия (объем превышает в несколько раз объем колонки), затем промывка чистой водой (двадцатикратнын объем по отноше-пн 0 к объему колонки). [c.140]

Простая задача по разделению красителей на колонке с окисью алюминия требует много времени. Чтобы закончить ее в течение одного лабораторного занятия, необходимо в самом начале приступить к подготовке колонки. Все свободное время, пока стекает жидкость или вымываются компоненты, надо полностью использовать для подготовки к заключительному этапу приготовить стандартные растворы красителей и составить калибровочные кривые. [c.62]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология