Подготовка элюента

Подготовка элюентов к работе [c.62]

Любой жидкостный хроматограф состоит из следующих частей (рис.1) 1 - насос, 2 - узел ввода пробы, 3 - хроматографическая колонка, 4 - детектор, 5 - регистратор (самописец, интегратор или компьютер) 6 - термостат колонок, 7 - узел подготовки элюента с емкостями для элюента, 8 - слив элюата или коллектор фракций. [c.8]

Подготовка элюентов (растворителей). Витамин В12 элюируют 80%- и 50%-ными растворами ацетона. Безводный ацетон доводят до нужной концентрации 0,1%-ным раствором сульфата аммония в дистиллированной воде, который добавляют для стабилизации витамина В12. Растворители — это в основном органические вещества, обладающие различной полярностью. В зависимости от величины полярности наиболее распространенные растворители можно расположить в следующем порядке бензол, хлороформ, эфир, ацетон, этанол, метанол. [c.139]

Варьирование природы элюента и его давления в колонке в значительной степени способствует расширению возможностей газовой хроматографии как аналитического и препаративного метода, а также как метода физико-химического исследований. Фактически в газовую хроматографию вводится дополнительная переменная, с помощью которой можно в достаточно широких пределах управлять селективностью, эффективностью и сорбционной емкостью колонки. Естественно поэтому, что теория хроматографического процесса с неидеальными элюентами существенно сложнее, чем в обычной газовой хроматографии. Кроме того, при переходе к неидеальным элюентам необходимо решить целый ряд практических задач, связанных с разработкой узла подготовки элюента, с дозированием проб под давлением, с герметизацией аппаратуры, с учетом повышения летучести неподвижных жидкостей и изменения чувствительности и других характеристик детекторов, с интерпретацией получаемых хроматограмм. [c.3]

Схема установки, использованной в работах Нонаки [16—23], изображена на рис. IV.3, в. Здесь одной из стадий подготовки элюента является очистка пара над окисью меди при 500—600° С. [c.84]

Как уже говорилось, ацетонитрил чаще всего используется в ОФХ для приготовления элюентов. Стандартная подготовка подвижной [c.313]

Тестирование колонок, заполненных обращенно-фазовыми адсорбентами (химически алкил-модифицированные силикагели типа С8, С16 и С18), лучше производить смесью "бензол-нафталин-антрацен" или "нафталин-антрацен-м-терфенил" при использовании элюента "ацетонитрил-вода" в соотношении от 60 40 до 75 25 по объему в зависимости от содержания углерода в адсорбенте. Для сорбентов, содержащих 12-14% углерода, предпочтительнее элюент "ацетонитрил-вода" в соотношении 55 45. При содержании углерода 16-18% и выше используются элюенты с содержанием ацетонитрила, большим 70% по объему. Расчет эффективности ведется по антрацену или м-терфенилу. При подготовке колонки к анализу беиз(а)пирена расчет эффективности целесообразнее проводить по бенз(а)пирену (рис. 2.6). В этом случае используется элюент "ацетонитрил-вода" в соотношении 75 25 или 80 20. [c.22]

Почти однородная волокнистая или гранулярная КМ-целлюлоза обеспечивает сравнительно постоянную скорость протекания элюента через колонку. Однако если в суспензии ионообменника содержится много мелких частиц, то колонка постепенно забивается. Поэтому рекомендуется во время подготовки и регенерации ионообменника удалять мелкие, плохо оседающие частички смолы. [c.202]

X 45 с.ч с пористым полистирольным диском у основания. Сверху на слон сорбента помеш,ают диск фильтровальной бумаги и для уплотнения содержимого колонки пропускают 500 мл элюента. После такой подготовки в колонку вводят 1 мл раствора с концентрацией каждого галогенида 0,05 М. Когда он впитается в верхние слои сорбента, вводят две порции элюента по 0,5 мл, а затем начинают элюирование со скоростью 0,5 мл мин, собирая фракции по i мл и определяя СГ, Вг и аргентометрическим титрованием, F — колориметрическим методом. [c.64]

Избираемый способ подготовки проб должен соответствовать характеру аналитической задачи. При исследовании реакционных смесей, готовых продуктов или их композиций подготовка проб обычно сравнительно проста. Как правило навеску исследуемого образца растворяют в определенном количестве растворителя и отфильтровывают от механических примесей. В качестве растворителя лучше всего использовать подвижную фазу. Это обеспечивает наилучшую воспроизводимость результатов и форму хроматографических пиков. Иногда возникает необходимость растворения образца в подвижной фазе меньшей элюирующей силы. Это, вообще говоря, допустимо, хотя воспроизводимость анализа может оказаться несколько ухудшенной. Очень рискованно использовать для растворения проб смеси, обладающие, большей элюирующей силой, чем подвижная фаза. В результате смешения такого растворителя с элюентом в колонке форма хроматографического пика окажется искаженной, возможно [c.315]

Операция анализа методом ТСХ включает следующие стадии 1) подготовку пробы 2) подготовку пластины 3) нанесение образцов 4) подготовку хроматографической камеры 5) элюцию (проявление, развитие) хроматограммы 6) удаление элюента с пластины 7) детектирование (визуализация) 8) идентификацию 9) количественную оценку 10) документацию. [c.337]

Современный жидкостный хроматограф включает в себя следующие системы и устройства систему подготовки и подачи элюента, в которую входит резервуар для элюента и насос, система ввода пробы, хроматографические колонки, термостаты колонок и детекторов, детекторы и сборники фракций. Кроме того, к нему может быть присоединен интегратор или ЭВМ. [c.315]

Системы подготовки и подачи элюента [c.316]

Для гель-проникающей хроматографии используют гель-хроматографы, состоящие из набора хроматографических колонок, заполненных соответствующим сорбентом (макропористыми стеклами, стирогелями и пр.), блока подготовки растворителя для элюции, насосов для прокачивания элюента и детектирующей системы, обеспечивающей запись концентрационного профиля хроматографической зоны. Кроме того, гель-хроматограф имеет [c.98]

После подготовки колонки на верхний слой носителя вносится исследуемый раствор пипеткой с оттянутым концом. Есть и другой способ внесения исследуемого раствора в колонку для этого его перемешивают с небольшим количеством сухого носителя и эту смесь количественно переносят в колонку на чистый слой носителя. Затем колонку промывают элюентом и получают кривую элюирования. [c.419]

Рис. 2. Схема хроматографа для гель-проникающей хроматографии 1 — система подготовки и подачи элюента 2 — регуляторы расхода элюента г — сравнительные колонки

Стадия сорбции (удачный общий термин, позволяющий не уточнять механизм процесса) является только частью процесса подготовки пробы. Для того чтобы выделение прошло количественно (а возможно, и качественно), сорбция анализируемых веществ должна быть полной. По этой причине масса адсорбента должна быть достаточно большой или же адсорбент должен обладать повышенной адсорбционной емкостью по отношению к анализируемым веществам. Однако выделить сорбаты необходимо в минимальном объеме растворителя. Чем больше масса используемого адсорбента, тем больший объем растворителя необходим для полного вымывания сорбатов. Концентрацию элюата можно повысить упариванием, однако на этой дополнительной стадии часть летучих анализируемых компонентов может теряться, т. е. результаты анализа окажутся и не количественными, и не качественными. При использовании сильно удерживающих адсорбентов могут потребоваться многократная промывка и (или) большие объемы элюента. Чтобы вымывание сорбированных компонентов было более полным, его иногда проводят при повышенной температуре и применяют такие элюенты, которые сорбируются сильнее анализируемых соединений и в результате вытесняют последние, или повторяют промывку несколько раз одним и тем же объемом элюента ограниченного количества адсорбента. [c.44]

Осуществление фракционирования методами последовательного растворения предполагает перевод полимера в соответствующее физическое состояние с последующим экстрагированием фракций с возрастающими молекулярными весами с помощью ряда элюирующих жидкостей, растворяющая способность которых увеличивается. В отличие от методов последовательного осаждения нри фракционировании методами последовательного растворения первой выделяется фракция с минимальным молекулярным весом, а последней — фракция с максимальным молекулярным весом. На практике используются весьма разнообразные экспериментальные приемы. Можно экстрагировать тщательно измельченный полимер или наносить его в виде пленки на тонкую алюминиевую фольгу или на носитель (например, песок) нри экстрагировании в колонке. Можно также проводить избирательное экстрагирование концентрированного раствора (коацерват), содерн ащего значительное количество полимера. Общим для всех этих способов является подготовка полимера в такой форме, которая позволяет осуществить быстрое экстрагирование элюентом. Необходимо удерживать полимер в процессе фракционирования неподвижным, так чтобы экстрагирование осуществлялось при минимальных механических воздействиях на образец. Ниже будут подробно рассмотрены различные методы экстрагирования. Следует отметить, что в литературе проводится различие между методами экстрагирования полимера из колонки. Если полимер экстрагируется при постоянной температуре, то процесс называют последовательным растворением или фракционированием методом элюирования. Если же нри фракционировании применяется градиент температуры как один, так и совместно с градиентом концентрации растворителя, то процесс называют хроматографическим фракционированием. В этой главе будет рассмотрен метод последовательного растворения и одновременно проведено сравнение с методом хроматографического фракционирования, поскольку различия между этими методами заключаются не столько в их природе, сколько в названиях. [c.62]

Подготовка колонок. Наличие высококачественного сорбента не дает полной гарантии высокоэффективного анализа. Слабым местом хроматографического метода является упаковка колонок. Для того, чтобы заполненная сорбентом колонка создавала однородное удерживающее поле , ее необходимо упаковать так, чтобы дисперсия скоростей элюента в каналах между частицами сорбента [c.182]

Наиболее ответственными системами жидкостного хроматографа, не считая сорбента, являются система подготовки и подачи элюента, дозирующая система и детектор. Особых требований к системам термостатирования в жидкостной хроматографии не предъявляется. [c.199]

Повторное использование растворителей. Чаще всего подвижную фазу используют однократно, после чего уничтожают или, того хуже, выливают в канализацию. По нашему мнению, такая практика не оправдана ни экономически, ни экологически, ни даже с точки зрения хроматографии как таковой. Можно предложить два пути повторного использования растворителей — регенерацию и рециркуляцию. При регенерации элюат после детектора собирают и порциями подвергают перегонке. В результате получают смесь растворителей, несколько отличающуюся по составу от первоначального элюента. Проанализировав ее (например, методом ГЖХ), можно рассчитать, сколько и какого растворителя необходимо добавить, чтобы получить подвижную фазу первоначального состава. Регенерация позволяет избавиться от всех нелетучих примесей, и поэтому ее следует использовать преимущественно для подготовки элюентов для препаративной ВЭЖХ. [c.206]

Диапазон рабочих давлений во флюидной хроматографии составляет, как уже указывалось, 20—200 кг1см . Он определяется в следствие низкой вязкости флюида в основном критическим давлением подвижной фазы, хотя, по данным работы [18], требуемый перепад давлений может достигать 20% от входного давления из-за местных сопротивлений в системе подачи и подготовки элюента в диапазоне давлений от 40 до 77 кг см . [c.135]

Системы подготовки и подачи элюента. Весьма важный узел жидкостного хроматографа представляет система подготовки и подачи элюента. В систему подготовки элюента входят резервуар с элюентом, в котором должна быть предусмотрена возможность дегазации растворителя в вакууме, при нагревании или ультразвуком [18], а также соответствующие фильтры для удаления воды и взвешенных твердых частиц из органических растворителей. Система подачи элюента должна обеспечить, во-первых, беспульсационный поток жидкости через колонну и детектор. Пульсация или монотонное изменение скорости потока элюента приводит к невоспроизводимости удерживаемых объемов, а это в свою очередь затрудняет качественный и количественный анализ. Кроме того, пульсация потока элюента искажает работу детектирующих систем, что также отражается на погрешности измерений и чувствительности анализа. Система подачи элюента должна обеспечить, во-вторых, возможность изменения в сравнительно широких пределах скоростей потока (в пределах двух порядков) в-третьих, возможность работы при высоких давлениях, необходимых для сокращения времени разделения, и, в-четвертых, возможность работы в режиме градиентного элюирования. [c.199]

В открытую колонку (без адаптора) препарат вносят вручную из пипетки. Начинают с того, что спускают жидкость из колонки так, чтобы открылся (но не начал обсыхать ) слой сорбента. Затем сливную трубку зажимают. Раствор препарата остороншо, чтобы не взмутить сорбент, заливают по стенке колонки, начиная от расстояния в 1 мм над поверхностью сорбента и постепенно вместе с уровнем раствора препарата продвигая кончик пипетки вверх по стенке. После того как весь объем препарата внесен в колонку, сливную трубку освобождают от зажима и дают слою препарата войти в сорбент до того момента, когда его поверхность снова обнажится. Так же, как описано, вносят объем элюента, равный объему препарата, а затем спускают его в сорбент. Такую промывку стенок колонки целесообразно повторить еш е раз. После этого заливают (так же) некий объем элюента (на высоту 1—2 см) и вставляют верхнюю пробку с капельницей. Слой свободного элюента предназначен для того, чтобы обеспечить образование некоторого разрежения над сорбентом, необходимого для всасывания жидкости из резервуара, если он располагается ниже верха колонки при элюции без насоса (образование сифона), или для предотвраш ения обнажения верхнего слоя сорбента при. неработающем насосе и открытом сливе из колонки (в первый момент после открывания слива пз колонки вытекает немного жидкости, затем, если система герметична, вытекание прекращается). Вместе с тем следует иметь в виду, что в слое свободного элюента над сорбентом происходит перемешивание градиента, поэтому в случае градиентной элюции высота этого слоя должна быть минимально необходимой. После того как внесение препарата п подготовка колонки закончены, можно присоединить резервуар нли насос, открыть сливную трубку п начать элюцию. [c.77]

Для гель-фильтрации при высоком давлении используются уже готовые фирменные колонки. Их подготовка ограничивается заменой элюента, если это необходимо. Колонки низкого давления, как правило, заполняются в лаборатории. Готовые пластиковые колонки для обессоливания, наполненные сефадексом G-25 Medium Vf = 9.1 Л1л), предлагает фирма Pharma ia под маркой PD-10. [c.126]

Этот способ нанесения достаточно прост. На линии, соединяющей слой сорбента и сосуд с элюентом, устанавливают тройник. После соответствующей подготовки слоя (удаление следов кислорода и воды или приведение сорбента в равновесие с газовой фазой посредством различных полярных растворителей) в данную систему вводят пробу объемом 20—1000 нл. При этом следует выполнять следующие условия мертвый объем дозирующего устройства не должен превышать ] нескольких нанолитров, эффект памяти должен отсутствовать. [c.108]

Наиболее эффективным методом исследования РТФ является хроматографическое разделение олигомеров по типам функциональности с пос. едующим измерением Мп и Мэ отдельных фракции и расчетом fл и /а, и функций РТФ. При этом выбор того или иного варианта хроматографического метода зависит от класса исследуемых олигомеров. В настоящее время для разделения олигомеров используют колоночную адсорбционную хроматографию, тонкослойную хроматографию и гель-проникающую хроматографию. Колоночая адсорбционная хроматография может проводиться в различных режимах элюирования, отличаться способами загрузки образца, подготовки насадки — силикагеля, анализа элюата и масштабностью фракционирования. Впервые колоночная хроматография на силикагеле с использованием диоксана в качестве элюента была применена для исследования молекулярпо-массового распределения олигомеров. [c.244]

Для подготовки хроматографической колонки берут 16 г BW-100 Solka-Flo в примерно 150 мл воды. Когда большая часть воды стечет, проводят промывку 100 мл спиртовой промывной жидкости и затем 100 мл элюента 1. Дают жидкости стечь до уровня при [c.468]

Несмотря на сложность зависимости селективности разделения от природы адсорбента, анализируемых веществ и элюента, следует выделить некоторые общие свойства анализируемых молекул, которые могут сильно влиять на их удерживание в ЖХ и которые следует принимать во внимание при подготовке колонны и элюента для лучщего разделения [3, 363, 364, 417]. [c.198]

Кроме малого извлечения линдана, методика имеет еще два весьма существенных недостатка во-первых, для элюирования пестицидов вместе с подготовкой колонки требуется довольно значительный объем растворителей (350 мл) во-вторых, использование в качестве элюента хлороформа весьма нежелательно при анализе пестицидов методом газовой хроматографии с детектором по захвату электронов, так как в присутствии остатков хлороформа в пробе получается очень широкий пик растворителя. [c.209]

В работе [130] предложен метод программирования температуры колонны в системе со смешанным растворителем, дающий эффект, аналогичный эффекту градиентного элюирования. При обычном градиентном элюировании происходит постепенное увеличение концентрации полярного компонента во время анализа, но у входа в колонну концентрация полярного компонента всегда больше, чем у выхода. В результате этого полоса анализируемого растворенного вещества в начале коло1Шы движется быстрее, чем в ее конце. В предложенном методе [130] для осуществления этого эффекта нет необходимости создавать градиент полярности элюента по длине колонны, так как при повышении температуры происходит постепенная десорбция полярного компонента в подвижную фазу сразу по всей длине колонны. Этот метод обеспечивает лучшее разделение по сравнению с обычным градиентным элюированием, но имеет тот л<е недостаток — длительную подготовку системы к следующему анализу. [c.241]

Для подготовки смеси к разделению на бумаге осадок растворяли в разбавленной НС1 и центрифугировали для отделения нерастворимых материалов. Ионы бария осаждали сульфат-ионом или пропускали экстракт через ионообменные смолы. При одномерном варианте БХ в качестве элюента использовали систему метанол — аммиачная вода. Общее содержание инозитфосфатов в различных почвах в среднем составляло (в пересчете на Р2О5) 50 мг на 100 г почвы. В работе[152] представлены данные определения инозитфосфатов электрофорезом на бумаге. [c.317]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология