Полярные липиды класса

Полярные липиды класса 3 [c.54]

Жиры, масла, воски и другие нейтральные липиды в большинстве случаев разделяют на классы соединений методом адсорбционной ХТС на силикагеле Г. В качестве растворителя, как правило, применяют смеси петролейного и диэтилового эфиров. Для разделения сильно полярных липидов на слоях силикагеля Г используют спиртовые и водные растворители, поэтому фракционирование подобных соединений на отдельные классы часто происходит по механизму распределения, а не адсорбции, В некоторых случаях для разделения липидов на отдельные классы соединений применяют обращенные фазы на гидрофобизованном силикагеле Г (см, рис, 88), [c.149]

Метод адсорбционной ХТС может быть дополнен методом распределительной ХТС на дезактивированных, содержащих воду адсорбентах и методом распределительной ХТС с обращенными фазами на гидрофобизованных слоях распределительная ХТС на дезактивированных адсорбентах позволяет разделять сильно полярные липиды (см. стр. 163). Методом распределительной ХТС с обращенными фазами можно фракционировать соединения одного класса липидов (см. стр. 170—175). [c.180]

Последней группой липидов, которую необходимо рассмотреть, являются полярные липиды — фосфолипиды. В их состав входят остатки глицерина, фосфорной кислоты и азотистых оснований, иногда остатки глюкозы или галактозы. Этот класс липидов содержит почти все жирные кислоты, находящиеся в обычных жирах. Вследствие сложности их химического состава и сравнительно малого значения (по крайней мере, в рамках настоящей статьи), целесообразно подождать, когда задача их хроматографического определения будет решена. [c.535]

Нейтральные липиды и свободные жирные кислоты можно разделить на соединения, принадлежащие к различным классам, с помощью модификации хроматографических систем, предназначенных для разделения неполярных и полярных липидов. Обычно в этих целях применяют ТСХ, однако достаточно часто используют и адсорбционную, и распределительную колоночную хроматографии, особенно если требуется разделить большие количества вещества. [c.137]

В общей фракции липидов водородных бактерий найдено семь классов, из них идентифицированы моно-и диглицериды, стерины, жирные кислоть, триглицериды. Полярные липиды представлены фосфолипидами. [c.88]

Эта группа выделена из других полярных липидов, названия которых отражают присутствие в них остатков моносахаридов, фосфора или других гетероатомов. В липидах класса 3 ни одного из этих остатков нет. Известны два типа таких липидов содержащие метилированные гомосерин или р аланин. Первый обнаружен в водорослях, низших сосудистых растениях и грибах, второй - в бурых водорослях. Эти вещества бывают одними из главных липидов в некоторых организмах, Об их роли известно пока мало. [c.63]

Термин липиды объединяет широкий класс химических соединений. Встречающиеся в литературе определения этого термина неоднозначны. Обычно к липидам относят низкомолекулярные вещества, молекулы которых состоят из гидрофильной полярной головки и одного или нескольких гидрофобных хвостов [423, 424]. Последние представляют собой небольшую углеводородную цепь (СНг) (для фосфолипидов л = 8ч-20). Фосфолипиды были изучены наиболее тщательно, так как они составляют основу биологических мембран. [c.148]

В некоторых случаях измерение биологической активности может служить полезным средством оценки влияния липидов на конформацию белков (ферментов, гормональных рецепторов). В этой области проведены многочисленные работы, показавшие, что некоторые ферменты мембран обладают специфичностью по отношению к некоторым классам фосфолипидов и физическое состояние липидов (фаза геля или жидкого кристалла) влияет на активность ферментов [42, 91]. Специфичность ферментов мембран по отношению к некоторым фосфолипидам касается только полярной части (табл. 7.8). [c.314]

Углеводороды с длинной цепью, спирты, альдегиды, кислоты, моно-глицериды, диглицериды, триглицериды и аналогичные липиды можно разделять методом адсорбционной ХТС на классы соединений, обладающих различной полярностью, в зависимости от природы и числа функциональных групп в них. Большие различия в длине цепи и степени ненасыщенности компонентов данного класса соединений в редких случаях могут приводить к дополнительному фракционированию внутри этого класса соединений. Подобное дополнительное фракционирование выражено, однако, не столь отчетливо, чтобы это могло осложнить разделение на отдельные классы соединений. [c.149]

Можно также проводить ХТС, используя растворитель с постепенно увеличивающейся полярностью для разделения классов липидов, значительно отличающихся по полярности . [c.152]

Различные более старые методы хроматографического фракционирования этих групп веществ описаны Ханааном [32]. Сильно полярные природные липиды и синтетические вещества с аналогичными свойствами разделяются методом ХТС на классы соединений. Фракционирование таких соединений осуществляют как адсорбционным, так и распределительным методом. Особенно хорошее разделение было достигнуто при применении дезактивированных слоев (для подавления адсорбционных эффектов, ведущих к образованию хвостов). Силикагель, не содержащий гипса (см. примечание на стр. 40), оказался при этом более подходящим, чем силикагель Г. [c.162]

Растворитель. Поведение класса липидов на адсорбционных слоях позволяет судить о их полярности и облегчает, таким образом, выбор соответствующего растворителя для фракционирования этих соединений методом распределительной ХТС с обращенными фазами. [c.172]

На слое силикагель — гипс в эфире хорошо разделяются различные классы соединений [29], как природные липиды, так и продукты их гидролиза. В системе петролейный эфир (т. кип. 60—70° С) — эфир — уксусная кислота (90 10 1) разделены высшие алифатические углеводороды, спирты, альдегиды, кислоты и сложные эфиры. Более полярные соединения — моноглицериды, глицериновые эфиры и фосфатиды разделены в системе петролейный эфир — эфир — уксусная кислота (70 30 1). [c.73]

Второй важный класс мембранных липидов-сфинголипиды-тоже имеют полярную голову и два неполярных хвоста, но не содержат глицерола. Сфинголипиды построены из одного остатка длинноцепочечной жирной кислоты, одного остатка длинноцепочечного амино-спирта сфингозина (или его производ- [c.335]

Термин липиды охватывает большое количество различных типов соединений, в том числе сложные эфиры, свободные кислоты, простые эфиры, моно-, ди- и триглицериды. Исследуя такую сложную природную смесь, прежде всего целесообразно разделить входящие в нее компоненты на классы. Эту задачу можно выполнить с помощью ТСХ данному вопросу посвящен ряд обзоров [1 — 10]. Большинство работ по ТСХ липидов, а таких работ было довольно много, проводили на слоях силикагеля. Для того чтобы разделить на силикагеле неполярные липиды на классы, применяли неполярные растворители, например петролейный эфир, бензол и тетрахлорид углерода, а также их смеси с очень малыми количествами более полярных растворителей, например диэтилового эфира и уксусной кислоты. Выбор растворителя, конечно, зависит от природы смеси, подлежащей разделению. Ниже приводится несколько примеров подбора растворителей, предназначенных для разделения нейтральных липидов. [c.52]

Одним из наиболее важных классов липидов являются фосфолипиды, их основная химическая структура представлена на рис. П-28. Две гидроксильные группы глицерина связаны с двумя длинными цепями жирных кислот. Эти длинные цепи жирных кислот, в основном состоящие из 16-21 атома углерода, образуют гидрофобную часть липидной молекулы. Жирная кислота может быть полностью насыщена, как, например, пальмитиновая кислота (см. рис. П-28), но может также содержать одну или несколько двойных связей. Фосфатная группа присоединена к третьей гидроксильной группе глицерина. Другая полярная группа, часто четвертичное аммониевое основание, как, например, в холине, присоединена к этой фосфатной группе. [c.80]

Липиды мембран представлены тремя основными классами полярных липидов фосфолипидами (глицеро- и сфингофосфолипиды), гликолипидами и стероидами. Все мембранные липиды (несмотря на различие в составе) являются амфифильными молекулами, построены по единому плану и имеют две области, отличающиеся сродством к воде гидрофобные радикалы (хвосты) и полярные головки (рис. 22.2). [c.303]

В настоящее время хроматографические методы в значительной степени вытеснили все другие методы фракционирования липидов в аналитическом и микропрепаративном масштабе. Для разделения сложных смесей липидов на отдельные классы соединений использовали адсорбционную и распределительную хроматографию на колонках с силикагелем, на целлюлозных фильтрах, импрегнированных силикагелем, и на бумаге из стекловолокна. Распределительная хроматография с обращенными фазами использовалась для разделения членов винилогомологического ряда на гидрофобизованной колонке или на гидрофобизованной бумаге. Газовую хроматографию использовали в виде распределительно-хроматографического варианта в первую очередь для разделения метиловых эфиров жирных кислот. Разделение смеси липидов по степени ненасыщенности можно осуществить путем хроматографического разделения на силикагеле комплексных ртутноацетатных соединений ненасыщенных липидов. Для выделения кислот и для фракционирования сильно полярных липидов была использована ионообменная колоночная и ионообменная бумажная хроматография. Методом хроматографии на колонках с мочевиной или на бумаге, пропитанной мочевиной, можно отделить жирные кислоты с прямой цепью от кислот с разветвленной цепью. Эффект разделения основан на образовании соединений включения неразветвлеиных жирных кислот с мочевиной. Разли шые хроматографические методы разделения липидов описаны в многочисленных обзорах [23, 86, 96, 100]. [c.144]

Большинство смесей растворителей, применяемых при хроматографии липидов на бумаге, пригодны также для ХТС на гидрофобизованных слоях [58, 76]. Триглицериды и менее полярные липиды (см. рис. 70) обычно можно разделить в соответствии с длиной цепи и степенью ненасыщенности, применяя ледяную уксусную кислоту или ацетонитрил, которые содержат до 10% воды. Хорошими растворителями для фракционирования слабо полярных классов липидов являются также смеси хлороформ — метанол с 5% воды и смеси ацетона или метилэтилкетона с ацетонитрилом. Для разделения полярных липидов в соответствии с длиной цепи и степенью ненасыщенности пригодна смесь ледяная уксусная кислота — ацетоиитрил, а также смеси ледяной уксусной кислоты и ацетонитрила или тетрагидрофураиа с 10— 50% воды. Сильно полярные липиды, например алкилсульфаты или четвертичные аммонийные основания, фракционируют на целлюлозе с водным этанолом в качестве растворителя. [c.172]

Пригодные для липидов растворители выбирают, проводя хроматографическое разделение этих веществ при использовании нескольких полярных растворителей. Растворитель, который перемещает данный класс липидов вблизи фронта, следует применить в качестве элюирующего вещества (см. стр. 138). Для элюирования нейтральных липидов наиболее пригоден диэтиловый эфир, иногда с добавкой 10—20% метанола. Сильно полярные липиды имеют склонность образовывать трудно растворимые соли и комплексы с ионами кальция адсорбента, к которому в качестве связующего добавлен гипс. Однако, применяя специальные растворители, можно количественно элюировать и такие классы соединений, как, например, фосфолипиды [111]. Сильно полярные липиды чксто имеет смысл подвергнуть хроматографическому разделению в форме слабо полярных производных, которые элюируются затем без затруднений [80, 84]. [c.181]

Липиды—это сложные эфиры глицерина или сфингозина (длинноцепочечного аминоспирта) и жирных кислот (предельных и непредельный), содержащих в основном углеводородные радикалы —С18. Большинство лигшдов имеют в молекуле две такие гидрофобные цепи. Полярные части могут включать различные химические группы эфирвые (моно-, ди- и триглицериды), остатки фосфорной кислоты (фосфолипиды), а также углеводные остатки (в большой группе гликолипидов). На рис. П-ЗО приведены структурные формулы некоторых наиболее распространенных липидов различных классов. В организме липиды, как правило, вместе с белками являются основной составляющей таких биоструктур, как клеточные мембраны. [c.96]

Около 20 лет назад Траппе [128 и др, работы] показал, что липиды можно элюировать с адсорбционных колонн в виде отдельных классов соединений последовательным применением ряда растворителей различной полярности. Он расположил различные полярные растворители по их элюирующему действию в ряд и назвал эту серию элюотропным рядом растворителей . Ряд Траппе и аналогичные ряды, предложенные другими авторами, приведены на стр. 139, [c.149]

Сорбент. Чаще других сорбентов для фракционирования липидов применяют силикагель. Брен [145] описал свойства и преимущества этого сорбента. На пластинке размером 20 X 20 см с нанесенным на нее силикагелем Г можно разделить 10—20 мг, сложной смеси липидов. При необходимости фракционирования лишь небольшого числа веществ, сильно отличающихся По полярности, можно наносить на стандартную пласгинку до 50 М8 вещества. Окись алюминия применяют редко, поскольку липиды вй ней гидролизуются [128] и изомеризуются [119]. Для разделения методом ХТС Мо но также использовать флорисил — синтетический силикат Магния, часто применяемый в колоночной хроматографий аипйдон. 81. Весьма подходящим адсорбентом для липидов является также вторичный фосфат магния (см. стр. 219). Для разделения липидов на классы соединений Катен [52] применял сахар. Этот адсорбент обладает хорошими разделительными свойствами, однако емкость его мала. Его хорошая растворимость в воде облегчает извлечение адсорбированных липофильных веществ. ПоэТ(ь му следует изучить применимость сахара для ХТС липидов. [c.150]

Растворитель. Выбор р астворителя определяется полярностью компонентов СмеСи липидов и необходимым эффектом разделения. Перечень растворителей для разделения нейтральных липидов методом ХТС приведен в табл. 10. Для разделения углеводородов, сложных алкилэфиров, стерилафиров и полирнолл эфиров яа классы соединений особенно пригодны смеси петролейного эфира [c.150]

Поскольку большинство природных смесей липидов содержат вещества, сильно отличающиеся по полярности, часто йивает нввоз жно Достш ну полного разделения на классы соединений, используя один растйоригедь. [c.151]

Усовершенствованный Хиршем и Аренсом [34] метод хроматографического фракционирования сложных липидных экстрактов на колонках с силикагелем, по мнению этих авторов, не пригоден для разделения алкоксиди-глицеридов и триглицеридов. Однако анализ методом ХТС фракций элюата таких колонн доказывает отчетливое фракционирование этих двух классов липидов. На рис. 75 приведена хроматограмма фракций триглицеридного элюата из человеческого жира. На пластинке видно обогащение двух менее полярных классов липидов в первых фракциях триглицеридного элюата, однако оно отсутствует на соответствующей весовой кривой. [c.155]

Минорные кислые фосфолипиды можно анализировать также методом ТСХ в менее полярных элюирующих системах, содержащих меньшие количества метанола и воды, например хлороформ — метанол —вода (40 10 1) [262, 263]. Система хлороформ — метанол — вода (65 25 4) и сходные с ней [212,. 253] подходят для разделения смеси нейтральных липидов с наиболее часто встречающимися фосфолипидами всех классов. В сочетании с пластинками силикагеля, приготовленными с силикатом магния (вместо сульфата кальция) в качестве связующего вещества, эта элюирующая система очень эффективна и широко используется при одномерной ТСХ в количественном анализе [262—264] и в препаративном варианте ТСХ [265, 266]. Она также применяется для ТСХ плазмалогеновых фосфолипидов [267, 268]. Эти фосфолипиды нестабильны в кислых растворителях и могут разлагаться при элюировании и упаривании. Методом ТСХ с использованием этой системы для элюирования можно разделить лизофосфатидилхолин, сфингомиелин, фосфатидилхолин с фосфатидилинозитом, фосфатидилэтаноламин с фосфатидилсерином, фосфатидилглицерин с кардиолипи-ном и фосфатидной кислотой, нейтральные липиды. Следует отметить, что в такой системе тиоэфирные аналоги фосфатидилхолина и фосфатидилэтаноламина мигрируют намного бы- [c.152]

При обсуждении имеющихся в настоящее время данных любое разделение внутри определенного класса липидов мы будем рассматривать как разделение индивидуальных соединений, хо-ся отдельные компоненты не всегда могут быть получены в ка-кой-либо одной хроматографической системе или даже при сочетании нескольких систем. Для разделения жирных кислот, а также их эфиров и амидов в пределах всего класса липидов наиболее эффективными из доступных сейчас методов являются следующие ТСХ на носителях, содержащих ион серебра, ГЖХ на жидких полярных фазах, ВЭЖХ на колонках с обращенной фазой. В большинстве случаев эффективность разделения значительно увеличивается, если разделяемые соединения предварительно превратить в их менее полярные и термически более устойчивые производные. [c.167]

Для тонкослойной хроматографии липидов применяют слои мелкозернистого силикагеля (силикагель Н). Для аналитических целей используют слой сорбента толпд иной 0,25 мм, для препаративных — 0,5 мм. Размер стеклянной пластинки для разделения чаще всего — 20x20 см. Для разделения различных классов липидов используют разные системы растворителей. Например, полярные фрсфолипиды и гликосфинголипиды разделяют в смеси хлороформ—метанол, содержащей аммиак или разведенную уксусную кислоту. Элюирующая способность смесей растворителей определяется полярностью ее составных компонентов. [c.228]