Глутамин, применение

Гидролиз белков ферментами пищеварительного тракта применяет-1СЯ главным образом для Проведения неполного ступенчатого расщепления. Полученный тем или иным способом гидролизат содержит смесь аминокислот и аммиак, образовавшийся в -результате расщепления аспарагина и глутамина и частичного дезаминирования пептидов и аминокислот. После предварительного удаления основной массы кислоты или щелочи гидролизат подвергают фракционному разделению на аминокислоты. В течение первых двух десятилетий текущего столетия аминокислоты разделяли в виде их эфиров, которые подвергали перегонке в вакууме (метод Э. Фишера). Позднее этот метод потерял свое значение из-за сложности выполнения и необходимости применения большого количества белка. В настоящее время благодаря появлению метода газовой хроматографии, применение эфиров аминокислот, возможно, вновь окажется интересным. [c.479]

Азотистый обмен связан преимущественно с обменом белков, структурными единицами которых являются аминокислоты. Поэтому далее представлены накопленные к настоящему времени данные о нарушениях обмена отдельных аминокислот при патологии. Повышенный интерес биохимиков, физиологов и клиницистов к проблемам патологии обмена аминокислот объясняется рядом обстоятельств. Во-первых, имеются экспериментальные доказательства и клинические наблюдения о развитии патологического синдрома, в основе которого лежат нарушения нормального пути обмена отдельных аминокислот в организме. Во-вторых, в последнее время аминокислоты и их производные нашли широкое применение в клинической практике в качестве лекарственных средств например, метионин используется для лечения ряда болезней печени, глутаминовая кислота — некоторых поражений мозга, глутамин — кетонурии и т.д. Наконец, ряд аминокислот и продукты их декарбоксилирования (биогенные амины) оказывают регулирующее влияние на многие физиологические функции организма. Следовательно, знание закономерностей обмена отдельных аминокислот в норме и особенно при патологии представляет исключительный научно-теоретический и практический интерес. [c.464]

Кислотный гидролиз, который происходит при нагревании белков с 25%-ной серной кислотой или 20%-ной соляной кислотой при 100—105° в течение 20—24 часов. Для этого часто используют также смесь концентрированной соляной и уксусной кислот (1 1). Обычно берут 10—20-кратное количество кислоты к весу белка, но чем шире это отношение, тем меньше потерь при гидролизе. После окончания гидролиза кислоту удаляют и образовавшуюся смесь аминокислот используют для анализов. Применение серной кислоты менее удобно, чем соляной, так как последнюю легче удалить из смеси. При кислотном гидролизе триптофан полностью разрушается, а глутамин и аспарагин дают соответствующие аминокислоты и аммиак. [c.203]

Возможную роль аминокислот в качестве предшественников, в биосинтезе пуринового ядра изучали уже давно. В опытах с применением меченых соединений было найдено, что гистидин и аргинин, несмотря на их структурное сходство с пуринами, не являются непосредственными источниками азота для синтеза пуринов [669, 670]. Вместе с тем было показано, что срезы печени голубя синтезируют гипоксантин и что добавление глутамина или щавелевоуксусной кислоты к таким тканевым препаратам повышает количество синтезируемого гипоксантина [671—673]. [c.283]

Синтез пептидов по этому методу осуществляют обычно следующим образом смесь N-защищенного карбоксильного компонента, триэтиламина и конденсирующего агента (72) выдерживают некоторое время при 0° в ацетонитриле или нитрометане, после чего добавляют соответствующий аминокомпонент. Несомненные преимущества этого метода — высокие выходы пептидов, в том числе и для производных аспарагина и глутамина, а также возможность применения оксиаминокислот без предварительной защиты гидроксильной функции. Если в качестве карбоксильного компонента использовать пептиды, то в этом случае может наблюдаться незначительная рацемизация [2581]. Рассматриваемый метод использован для синтеза природных полипептидов [1322, 1411]. [c.163]

Амид карбоновой кислоты представляет собой нейтральную функциональную группу, которая блокирует карбоксильную функцию и поэтому не нуждается в дополнительной зашите. Это верно также и для концевой а-амидной функции в условиях обычных реакций конденсации и деблокирования, если не считать иногда наблюдающейся дегидратации с образованием нитрила. Гораздо чаще побочные реакции происходят у ш-амидных групп аспарагина и глутамина. Дегидратация амидной группы до нитрила может происходить при применении дициклогексилкарбодиимида и, кроме того, при гидразинолизе, если он необходим в ходе пептидного синтеза ш-амидные группы могут переводиться в гидразидные. Отщепление защитных групп в спиртовых растворах может приводить к алкоголизу амидных группировок. Образование сукцинимидных производных в случае пептидов, содержащих аспарагин с незамещенной амидной функцией, влечет за собой нежелательную транспептидацию (а) [c.121]

Гуанидиновая группа аргинина может блокироваться нитрованием или тозилированием. Последний метод, очевидно, предпочтительнее, так как тозильный остаток может быть удален как посредством HF, так и с помощью расщепления бортрис-(трифторацетата) [427]. В случае нитроаргинина существует опасность расщепления с образованием орнитина. Все еще недостаточно решена проблема защиты цистеина при твердофазном синтезе, хотя перепробовано множество вариантов. Амидные группы глутамина и аспарагина целесообразно защищать. Общеизвестные побочные реакции при применении многофункциональных аминокислот, такие, как, например, транспептидация в случае аспарагиновой кислоты или образование пирролидон-5-карбоновой-2 кислоты с глутамином, представляют опасность также и в случае синтезов Меррифилда. [c.188]

Эта реакция не пригодна для отщепления С-концевых остатков пролина, так как они не образуют тиогидантоин, остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот, которые образуют циклические ангидриды, а не тиогидантоины (аспарагин и глутамин, наоборот, дают тиогидантоины [301]), а также остатков серина, треонина, цистина, аргинина и лизина [19, 301], которые неустойчивы при циклизации или регенерации аминокислоты из тиогидантоинового производного. Таким образом, этот метод находит весьма ограниченное применение для прямого определения строения пептидов и белков. Для определения С-концевого остатка по разности [107] реакция может оказаться более полезной, но ее все же нельзя использовать для определения аспарагиновой и глутаминовой кислот и пролина. Однако путем микробиологического анализа [107], специфичного для остатков /-аминокислот, эти аминокислоты могут быть определены по потере оптической активности на 50% вследствие рацемизации в том случае, когда они являются С-концевыми. [c.247]

В последнее время получило признание применение в онкологической клинике ферментов бактериальной природы в качестве лекарственных средств. Широко используется Ь-аспарагиназа (выпускается в промышленных количествах и Ь-глутамин(аспарагин)аза для лечения острых и хронических форм лейкозов и лимфогранулематозов. Более десятка описанных в литературе бактериальных ферментов испытаны в основном на животных с перевивными опухолями или на раковых клетках опухолей человека и животных, выращенных в культуре ткани. Основными постулатами применения ферментов в онкологии являются различия в метаболизме клеток опухолей по сравнению с обменом в нормальной, здоровой, клетке. В частности, современные стратегия и тактика энзимотерапии опухолевых поражений учитывают разную чувствительность нормальных и опухолевых клеток к недостатку (дефициту) незаменимых (так называемых эссенциаль-ных) факторов роста. К таким ростстимулирующим факторам относятся не только пищевые факторы (витамины, незаменимые аминокислоты, макро-и микроэлементы), но и ряд так называемых заменимых веществ, включая заменимые аминокислоты, к недостатку которых опухолевая клетка ока- [c.167]

Как указывалось ранее, наряду с методами бумажной и ионообменной хроматографии для определения аминокислот из гидролизатов [65, 89, 118, 154, 162] существует ряд других методов, используемых в меньшей степени или находящихся еще в стадии разработки. Применялась также газовая хроматография для разделения этерифицированных аминокислот [9, 87] или продуктов окисления аминокислот [195]. Хотя этот метод очень чувствителен, применение его ограничено, так как некоторые аминокислоты не образуют достаточно летучие производные. Был сделан ряд усовершенствований для улучшения существующих методов. Колориметрический метод определения гистидина улучшен за счет дегазации раствора перед добавлением окрашивающего реагента — диазосульфаниловой кислоты [159]. Аспарагин и глутамин могут быть определены путем этерификации с последующим восстановлением боргидридом лития. После гидролиза эти амиды идентифицируются в виде соответствую1цих кислот, в то время [c.401]

Эти производные тоже использовали для определения М-кон-цевых аминокислот и последовательности пептидов [34]. Они хорошо хроматографируются на силиконовых жидких фазах, однако известную трудность представляют серин, треонин, аспарагин, глутамин и основные аминокислоты [96]. Вторую карбоксильную группу аспарагиновой и глутаминовой кислот предварительно этерифицировали трифторидом бора в метаноле. Можно думать, что ГХ этих производных, как и ДНФ-производ-ных, не найдет широкого применения. [c.90]

W e.s t а 1 I R. G., Применение ионообменных смол для выделения глутамина и других веществ, содержащих азот, из свекловичных корней, J. S i. Food а. Agri ., 1, 19 (1950). [c.332]

Заслуживает обсуждения одно наблюдение, сделанное в лаборатории автора и касающееся этой хорошо известной реакции. При обработке М-карбобензилоксиаминоацилсерина или треонина бромистым водородом в нитрометане [65] обычно в осадок выпадает бромгидрат М-дипептида немедленно после его образования, что предотвращает перегруппировку в 0-дипептид. С другой стороны, применение бромистого водорода в ледяной уксусной кислоте [26] приводит к перегруппировке и О-дипептид может быть выделен. Чтобы избежать опасности дезамидирования аспарагиновых или глутаминовых пептидов при последующем омылении эфира, вместо соответствующего эфира можно применять натриевую соль аспарагина или глутамина, хотя выходы в этом случае будут ниже [66]. [c.186]

Фосфитные смешанные ангидриды применялись для получения пептидов глицина, DL-аланина, DL-валина, L-лейцина, L-фенилаланина, L-тирозина и L-лизина. Возможность применения этого метода, по-видимому, такая же, как и метода со смешанными ангидридами на базе алкилугольных кислот. Можно ожидать, что выходы будут ниже среднего в случае производных L-серина, L-треонина, L-аспарагина и L-глутамина. Однако если применить обратный порядок добавления реагентов так, чтобы предпочтительно образовывался фосфитамид, а не смешанный ангидрид, то это должно дать возможность избежать этого затруднения. Пептиды на основе L-аспарагина были получены по амидному методу [66, 415, 416]. Этот метод применялся также для синтеза пептида из L-аргинина [23, 406] и ключевых промежуточных соединений окситоцина [417, 418] и аргининвазо-прессина [86]. [c.297]

Нет сомнения в том, что из гидролизатов белков могут быть получены высокоочищенные Ь-аминокислоты. Тем не менее продажные препараты аминокислот зачастую загрязнены аминокислотными примесями, которые могут быть источником экспериментальных ошибок. В связи с этим микробиологи при приготовлении сред для определения аминокислот посредством бактерий нередко предпочитают применять синтетические ВЬ-аминокислоты, а не Ь-изомеры, выделенные из белковых гидролизатов. Можно привести следующие примеры часто встречающихся загрязнений в полученных из белков препаратах лейцина и глутаминовой кислоты часто содержатся метионин, а в препаратах глутамина — аргинин и аспарагин препараты триптофана бывают загрязнены тирозином, а препараты тирозина — цистином. Выделенный из гидролизатов изолейцин обычно содержит лейцин, и наоборот. Развитие современных хроматографических методов в значительной степени упростило задачу выделения аминокислот, и повсеместное применение этих методов, несомненно, улучшит качество продажных препаратов аминокислот. [c.91]

Связь амидного азота с у арбоксильной группой аспарагиновой кислоты и 6-карбоксильной группой глутаминовой кислоты доказана выделением аспарагина и глутамина после ферментативного гидролиза белка. Количество первичных аминогрупп в белке или в гидролизате может быть точно определено микрометодом Ван-Слайка (1911). Кислота, содержащая первичную аминогруппу, реагирует с азотистой кислотой с количественным выделением азота последний определяется манометрически. В лизине и а- и е-аминогруппы могут быть определены по Ван-Слайку, в аргинине реагирует только а-аминогруппа и не реагирует гуанидогруппа ЫН-группы пролина, триптофана и гистидина в этих условиях азот не выделяют глутамин дает 2 моль азота. Этот метод может быть применен для анализа гидролизата, осаждаемого фосфорновольфрамовой кислотой. Осадок содержит три основные аминокислоты и цистин, количество которого может быть вычислено, исходя из результатов анализа общего азота (по Кьельдалю) и опре- [c.640]

При синтезе пептидов карбодиимидным методом N-защищен-ный карбоксильный компонент и аминокомпонент вводят в реакцию одновременно, вследствие чего может происходить образование соответствующей соли однако обычно это не препятствует реакции образования пептидной связи [1104]. Карбодиимид иногда рекомендуют прибавлять в несколько приемов [1523]. Если в качестве карбоксильного компонента использовать глутамин или аспарагин, то в результате элиминирования воды иногда образуются соответствующие у- или -нитрилы (см. гл. IV, В, 1, а, 5 и 2, а, 4). Во многих случаях побочный продукт реакции, N, N -дициклогексилмочевина, осложняет процесс выделения и кристаллизации полученных пептидов. В связи с этим была исследована возможность применения в пептидном синтезе водорастворимых карбодиимидов [2061, 2069]. Карбодиимиды и образующиеся в процессе синтеза производные мочевины, в молекуле которых содержится третичная аминогруппа, растворяются а воде в виде соответствующих аммониевых солей. В качестве примера можно привести М-(циклогексил)-Ы -(п-диэтил-аминоциклогексил)-карбодиимид (57). Соединения, содержащие четвертичные аммониевые группировки, например мето-л-толуол-сульфонат Ы-циклогексил-М -[2-морфолинил- (4) -этил]-карбо-диимида (58), также являются очень подходящими реагентами [c.158]

Бенсон и Паттерсон [15] описали методику быстрого хроматографического анализа аминокислот, входящих в состав физиологических жидкостей. Они использовали гранулированные иониты и иониты со сферическими зернами и вели анализ по слегка модифицированному варианту двухколоночной методики Спакмана и сотр. [186] с применением аминокислотного анализатора Be kman Spin o Model 120 С (см. гл. 8). Позднее Бенсон и сотр. [14] приспособили эту методику для анализа соединений нейтрального и кислотного характера в присутствии литиевых буферных растворов, которые обеспечивают хорошее разделение глутамина и аспарагина. Авторы работы [15] применили эту методику для разделения соединений основного характера, а авторы [14]—для разделения соединений с нейтральными и кислотными свойствами. В обоих случаях применялись иониты со сферическими частицами и нингидриновый реагент [186]. [c.306]

Задача определения азота, входящего в состав амидов, содержащихся в физиологических жидкостях (и тканях), отличается от задачи определения содержания амидного азота в молекуле белка. В физиологических жидкостях, вследствие присутствия мочевины, а также других соединений, содержащих азот, метод полного гидролиза исследуемых соединений использован быть не может. Поэтому анализируемый образец подвергают гидролизу в мягких условиях, в результате которого только амиды, входящие в состав образца, превращаются в аммиак. При анализе некоторых жидкостей, например мочи, серьезной помехой является аммиак, поскольку он присутствует в количествах, значительно превосходящих количество амидов, и определяется с помощью любого метода, который может быть использован для определения аммиака, образующегося в результате гидролиза амидов. Борсук и Дубноф [5] в общих чертах описали ультрамикрометод определения амидов. Однако они не привели никаких данных относительно пределов применения этого метода, его надежности, а также воспроизводимости получаемых с его помощью результатов. Исследования этого метода в лаборатории автора показали, что при анализе таких веществ, как аспарагин, глутамин и ацетамид, он дает несколько заниженные и плохо воспроизводимые результаты. [c.209]

Путем применения специфических амидаз были идентифицированы аспарагин и глутамин (Мардашев и Сёмина) (рис. 179). [c.432]

В классическом пептидном синтезе для удаления грег-бутилоксикарбонильных групп часто применяют безводную трифторуксусную кислоту, что логично использовать и в твердофазном синтезе. Применение трифторуксусной кислоты для отщепления грег-бутил-оксикарбонильных групп привело недавно к интересному решению проблемы твердофазного синтеза аналогов окситоцина [135]. Глутамин успешно вводился в различные пептиды при твердофазном синтезе, но включение глутамина в пептидил-полимер иногда приводило к прекращению роста пептидных цепей [128, 135] — вероятно, за счет циклизации Н-концевого остатка глутамина в остаток пироглутаминовой кислоты под влиянием безводного хлористого водорода, используемого для удаления гр т-бутилоксикарбо-нильной защитной группы из глутамина. Мэррифилд логично предположил, что трифторуксусная кислота, [c.50]

При реакциях пептидообразования с использованием карбодиимида [16] возможно дегидратирование со-амидных группировок аспарагина и глутамина до нитрилов и, таким образом, какая-то часть этих со-цианпроизводных может постоянно включаться в пептидную цепь. Эта побочная реакция препятствует применению карбодиимидов для введения остатков аспарагина и глутамина в пептидные цепи при твердофазном синтезе, поскольку удобных методов удаления этих побочных продуктов не разработано. Это затруднение успешно преодолевают, используя для введения указанных аминокислот в пептидную цепь метод -нитрофениловых эфиров. Условия проведения соответствующих реакций рассматриваются ниже. [c.61]

В настоящее время в твердофазном синтезе успешно используют активированные эфиры различных аминокислот [14] (рис. 16). Как уже отмечалось выше, для введения в пептидную цепь остатков грег-бутил-оксикарбонильных производных аспарагина и глутамина обычно используют их п-нитрофениловые эфиры это позволяет избежать побочной реакции дегидратации амида до нитрила, вызываемой карбодиимидом. Нитрофениловые эфиры аминокислот также ограниченно применялись для синтеза ряда пептидов [15], включая А-цепь инсулина [39]. Реакции пептидообразования с применением этих эфиров обычно протекают медленнее, чем при использовании карбодиимида. В лаборатории Мэррифилда были получены удовлетворительные результаты при проведении реакций [c.64]

Реакция образования пептидной связи с использованием карбодиимида является стандартной. В случае же применения активированных эфиров (для присоединения, например, глутамина или аспарагина) в программу следует внести некоторые изменения. Последовательность операций при синтезе с помощью активированных эфиров представлена в программе Б (табл. 3, стр. 92). В слуаче и-нитрофениловых эфиров в качестве растворителя следует применять ДМФА, а не хлористый метилен, так как в последнем п-нитро-фениловые эфиры не реагируют. Большой избыток активированного эфира БОК-аминокислоты, увеличение продолжительности реакции и минимальный [c.87]

Смотреть страницы где упоминается термин Глутамин, применение: [c.654] [c.186] [c.297] [c.39] [c.154] [c.168] [c.37] [c.221] [c.466] [c.108] [c.147] [c.245] [c.256] [c.260] [c.197] [c.108] [c.147] [c.245] [c.256] [c.260] [c.78] [c.273] [c.139]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология