Флуоресценция влияние влияние концентрации

На интенсивность флуоресценции оказывает влияние ряд факторов. Но если проводят измерения в одних и тех же условиях и на одном и том же приборе, то по градуировочной кривой (зависимость интенсивности излучения от концентрации) можно определить содержание вещества, как и в колориметрии. Для очень разбавленных растворов зависимость между интенсивностью флуоресценции и концентрацией определяемого вещества прямолинейна. [c.368]

Рассчитанные расстояния находятся в пределах 50—100 А, что значительно превышает диаметр соударения. Это свидетельствует о том, что перенос энергии не является диффузионным процессом. Процессы переноса энергии необходимо учитывать при изучении тушения флуоресценции. Если эффективность флуоресценции донора высока, а положение полосы поглощения тушителя благоприятствует переносу энергии, то, чтобы можно было пренебречь его влиянием на интенсивность флуоресценции, необходимо снизить концентрацию тушителя до 10 моль/л или меньше. По резонансному механизму осуществляется синглет-синглет-ный перенос энергии. Для некоторых систем обнаружен резонансный перенос энергии между триплетным состоянием донора и синглетным состоянием акцептора [c.136]

Рис. 26. Влияние концентрации щелочи на интенсивность флуоресценции комплекса бериллия с морином

Влияние концентрации морина на интенсивность флуоресценции подробно изучено [213, 560, 567, 568]. С увеличением концентрации морина интенсивность флуоресценции сначала растет, достигая максимума приблизительно при 2,5-10- % (pH 11,5 0,5. мкг Ве). Однако при дальнейшем увеличении концентрации морина интенсивность падает вследствие поглощения реагентом возбуждающего излучения. Флуоресценция растворов морина зависит от степени очистки реагента [213] (наиболее чистые препараты дают наименьшую флуоресценцию). [c.120]

Флуоресценция используется также для определения урана в растворах, причем измеряется интенсивность флуоресценции в зависимости от концентрации урана в растворе [995, 996, 222]. Флуоресцентный метод позволяет определять минимальные количества урана применяя сухой метод, можно определить прп помощи фотоэлектрического флуорометра 0,0001 (одну десятитысячную) мкг урана. Процесс заключается в следующем исследуемый раствор соли урана в количестве 0,006—0,1 мл помещают пипеткой в платиновую чашечку и выпаривают на специальной лампе. К сухому остатку добавляют 0,3 г смеси фторида натрия с содой и сплавляют на газовой горелке. После охлаждения сплавленный диск соли облучают ртутной лампой и возникшую при этом желто-зеленую флуоресценцию измеряют специальным прибором. Количество урана определяется с помощью-калибровочной кривой. Обычно определяют от 0,001 до 10 мкг. Интересной особенностью метода является то, что примеси, обычно присутствующие в пробе, не отделяются, а влияние их на интенсивность флуоресценции устраняется предельным разбавлением раствора [997]. [c.382]

Насыщение паровой фазы во время хроматографии. Если измеряется флуоресценция твердого тела, то существует линейная зависимость между флуоресценцией и концентрацией до определенной величины при условии, что концентрация не слишком высока. В флуоресцентных измерениях на тонкослойных пластинках это не имеет места. Калибровочные кривые более или менее изогнуты. В этом проявляется влияние изменения концентрации образца по направлению к поверхности слоя, причем это изменение определяется испарением растворителя во время хроматографического процесса. [c.114]

Рис. 38. Влияние концентрации нафтацена на эффективность замедленной флуоресценции антрацена (1) и нафтацена (2) [123].

НИИ ртутной лампы, выделенной двойным кварцевым монохроматором. Спектры анализировали с помощью второго двойного монохроматора, поэтому наложением возбуждающего света, рассеянного анализирующим монохроматором, можно было пренебречь. Однако один источник помех показан кривой 6, он является сигналом от кюветы с чистым этанолом. Это испускание дает линза из плавленого кварца, используемая для фокусировки флуоресценции на входную щель анализирующего монохроматора. От этой флуоресценции избавлялись заменой линзы из плавленого кварца на линзу из синтетической двуокиси кремния или устраняли облучение линзы с помощью кюветы из синтетической двуокиси кремния с бензолом, помещенной между образцом и фокусирующей линзой анализирующего монохроматора. Остальные кривые иллюстрируют три эффекта самопоглощение флуоресценции, влияние сильного поглощения возбуждающего света и концентрационное тушение. В разбавленных растворах антрацена (кривые 1 и 2) самопоглощение флуоресценции ничтожно, и были получены практически неискаженные спектры. При увеличении концентрации первая (коротковолновая) полоса флуоресценции сильно поглощалась из-за перекрывания с полосой поглощения и практически полностью отсутствовала в более концентрированном растворе (кривая 5). Напротив, поглощение при 400 нм было пренебрежимо мало во всех растворах, и интенсивность основной колебательной полосы при этой длине волны, таким образом, являлась мерой скорости испускания флуоресценции растворов. Поглощение было полным при концентрации 3,4 10 Л4, и интенсивности флуоресценции при 400 нм в этом растворе и в растворе концентрации 3,4-10" М были одинаковыми (кривые 3 ц 4). Интенсивность флуоресценции уменьшалась в растворе концентрации 3,4-10 М из-за концентрационного тушения (см. раздел. II, Б, 2). [c.220]

Второй ВОЗМОЖНОСТЬЮ является комплексирование хлорофилла с акцептором А (механизмы Бч2 и Б 2). Такое комплексирование МОГЛО бы объяснить отсутствие влияния концентраций акцептора на флуоресценцию сенсибилизатора, так же как этот факт объясняется реакцией с растворителем или таутомеризацией, т. е. рассматривая сенсибилизацию и флуоресценцию как мономолекулярные реакции. [c.528]

Влияние концентрации на выход флуоресценции. [c.182]

Фиг. 206. Влияние концентрации тиосульфата на интенсивность флуоресценции [158].

Фиг. 207. Влияние концентрации водорода на интенсивность флуоресценции [158].

Было изучено также влияние концентрации магния на интенсивность флуоресценции растворов. Работа была проведе- [c.11]

Влияние изменения концентрации уранила и pH раствора на количественные соотношения между различными урансодержащими нонами можно видеть на спектрах флуоресценции и [c.105]

Согласно Франку, причина ускорения рассеяния электронной энергии при более высоких температурах заключается в том, что внутреннее превращение электронной энергии в колебательную требует одновременного теплового воздействия. Это воздействие придает электронновозбужденной молекуле конфигурацию, идентичную той, которую имеет в основном состоянии сильно колеблющаяся молекула. На рис. 3.9 показано влияние концентрации соли уранила и температуры на выход флуоресценции. [c.204]

Вавилов и Левшин получили уравнения, описывающие влияние концентрации на флуоресценцию уранила. Они объяснили его дезактивирующими столкновениями между нормальными и возбужденными ионами уранила [c.210]

Рис. 3.18. Влияние концентрации с гасителя на длительность флуоресценции раствора уранилсульфата (при температуре жидкого азота) (по Галанину, 1951)

В работе [ПО] изучено влияние посторонних примесей на яркость флуоресценции. Исследовано влияние неорганических кислот и 18 металлов, которые могут сопутствовать золоту. Исследуемые растворы содержали 5-10- % Аи и стократные избытки примесей. Найдено, что тушение флуоресценции в воздушно-водородном пламени, обусловлено А1, В1, КЬ, У и Хп, оно полностью отсутствует в более горячих пламенах. С другой стороны, палладий, сильно ослабляющий флуоресценцию в воздушно-ацетиленовом пламени, практически не оказывает влияния на яркость в воздушно-водородном пламени и в пламени Аг — Нг — Ог. Подавление флуоресценции катионами может быть устранено добавлением лантана до концентрации в анализируемом растворе -0,1%. [c.83]

Впервые эксимеры были открыты при изучении влияния возрастания концентрации некоторых растворов на флуоресценцию. Интенсивность нормальной флуоресценции уменьшается, в то время как в длинноволновой области появляется новая полоса, интенсивность которой возрастает с увеличением концентрации. Особенно отчетливо такой характер проявляется у некоторых ароматических углеводородов типа пирена. В разбавленном растворе пирен имеет фиолетовую флуоресценцию. При высоких концентрациях вместо флуоресценции наблюдается быстроструктурное голубое излучение. Это излучает эксимер, образованный возбужденным синглетным пиреном и пиреном в основном состоянии. Если пирен обозначить как Р, то схема возбуждения выглядит так [c.132]

Раствор аурамина О готовят на том же буфере, используя коэффициент молярной экстинкции, равный 4,41-10 М см при 430 нм. Титрование ЛДГ аурамином О проводят непосредственно во флуори-метрической кювете, добавляя к раствору белка конечной концентрации 4,4-10 5 М раствор аурамина О так, чтобы его конечные концентрации менялись от М до 2,5-10 М. В качестве контроля снимают флуоресценцию тех же концентраций аурамина О в отсутствие белка Значения интенсивности флуоресценции исправляют на флуоресценцию свободного зонда и на разведение белка при добавлении аурамина О (следует использовать минимальные объемы раствора красителя). Учитывают влияние эффекта внутреннего фильтра по формуле [c.341]

Значения а находят из отношения ДФ/ДФтах, где АФтах — изменение флуоресценции связанного зонда при насыщающей концентрации НАД, АФ — изменение флуоресценции при данной концентрации НАД. При графическом представлении данных по оси абсцисс откладывают Lo/a, по оси ординат — 1/(1—а). Величину к находят как котангенс угла наклона полученной прямой. Определенное значение к сравнивают со значениями этой величины, известными из литературы и равными 0,5 мМ. Аналогичным образом может быть определено значение к для комплексов пирувата и АДФ с ЛДГ по их влиянию на флуоресценцию связанного с ЛДГ аурамина О. [c.344]

При изучении в аналитических целях растворов, флуоресценция которых изменяется от прибавления кислот и щелочей, необходимо прежде всего дать себе отчет, влияют ли на их флуоресценцию незначительные колебания концентрации водородных ионов, и при положительном ответе надлежит парализовать это влияние путем прибавления кислоты или щелочи. Однако это возможно не всегда, так как во многих случаях самими условиями анализа вызывается необходимость вести наблюдения при определенном pH применение буферных растворов помогает в этом случае избежать ошибку, которую могло бы вызвать случайное изменение концентрации водородных ионов. Поясним сказанное на конкретном примере при определении содержания озона в воздухе флуоресцентным методом, по измеряемому нарастанию концентрации акридина в растворе, анализ нельзя вести в щелочном растворе, так как в этих условиях слишком слаба флуоресценция акридина не годится и кислая среда, так как при лшлых pH дигидроакридин, окисляемый озоном в акридин, недостаточно индифферентен в отношении кислорода. При применении буфированного [c.40]

Во многих случаях противоречивость данных относительно флуоресценции того или иного соединения обусловливается неправильным использованием результатов наблюдений. Если бы флуоресценция вещества описывалась раздельно для ионов и для недиссоциированных молекул, то значительная доля этой неопределенности отпала бы. Например, обычно указывают, что цвет флуоресценции акридина сине-фиолетовый в спиртовом растворе и зеленый — в сернокислотном. Между тем, как показывают приведенные выше спектры (рис. 15), акридин в воднощелочном растворе флуоресцирует фиолетовым светом, типичным для спиртового раствора, а цвет флуоресценции, характерный для сернокислотного раствора, можно наблюдать и в спиртовом растворе, если последний иодкхгелить. На этом примере ясно видно, что разница в цвете флуоресценции, приписываемая влиянию растворителя, может обусловливаться им на самом деле только косвенно, решающим же является изменение соотношения концентрации ионов (флуоресценция зеленым светом) и недиссоциированных молекул (фиолетовый цвет флуоресценции). [c.43]

Влиянию концентрации на интенсивность свечения и на спектры флуоресценции растворенного вещества уделялось много внимания со стороны физиков вопрос этот детально изучен, и в нем достигнута полная ясность. Тем не менее в работах по люминесцентному анализу недоучет влияния концентрации флуоресцирующего вещества обусловливает нередко существенные недоразумения. Можно смело сказать, что во многих случаях именно здесь надо искать причину расхождений указаний отдельных авторов относительно цвета флуоресценции растворов одного и того же вещества. Влияние концентрации мо/кет сказываться в двух нанравлв ниях в концентрационном тушении и во вторичной абсорбции. Оба явле ния уже рассмотрены в главе И. [c.48]

Приготовление холостой пробы (для учета влияния на флуоресценцию фона, создаваемого тукими компонентами сточных вод, как лигнин, скшшдар, фенолы и др.) 50 мл исследуемой сточной воды подкисляют НС1 до рН=1 и кипятят 10 мин затем пробу охлаждают, подщелачивают до рН=14 и доводят объем до 50 мл дистиллированной водой.. Аликвотную часть (1 мл) вносят в цилиндр на 10 мл, добавляют 1 мл раствора ТРАФ и дистиллированную воду до 10 мл. Интенсивность флуоресценции этого раствора /j- Разность (/о — /г) — поправка на влияние фона, которую при расчете концентрации H2S прибавляют к /1. [c.606]

Однако если донор и акцептор являются разными соединениями с благоприятным перекрыванием спектров испускания и поглощения, а выход флуоресценции донора высок, то эффективность безызлучательного переноса может быть значительно больше, чем в случае одинаковых молекул. Процессы переноса энергии в такого рода системах были исследованы экспериментально. Боуэн и Ливингстон [100] количественно изучили три донор-акцепторные пары хлорантрацен — перилен, хлорантра-цен — рубрен и цианантрацен — рубрен. Они установили, что в хлороформе и бензоле константы скорости переноса энергии в 15—30 раз превосходят диффузионные значения, а в более вязком жидком парафине различия еще больше. Эти результаты показали, что обмен энергией не является диффузионным процессом. Следовательно, если эффективность флуоресценции донора высока, а положение полосы ноглощения тушителя благоприятствует переносу синглетной энергии, то для того, чтобы можно было пренебречь его влиянием на интенсивность флуоресценции, необходимо снизить концентрацию тушителя до 10 " М или даже меньших значений. [c.86]

Искажение спектра возбуждения может быть вызвано наличием второго растворенного вещества, имеющего сильное поглощение при некоторых длинах волн. Это особенно коварный эффект, так как он может привести к неверной интерпретации спектров возбуждения. Хорошим примером этого может служить влияние различных концентраций бензола на основную полосу возбуждения антрацена (рис. 80). Бензол флуоресцирует в коротковолновой области, далеко от полосы испускания антрацена. Но первая полоса поглощения бензола перекрывается со второй полосой поглощения антрацена (рис. 80, кривая Е — спектр возбуждения флуоресценции бензола). В отсутствие бензола разбавленный раствор антрацена дает истинный спектр возбуждения (кривая Л). При увеличении концентрации бензола оп иогло- [c.213]

Искажение спектра флуоресценции в результате самопоглощения или поглощения флуоресценции вторым веществом при расположении в линию больше, чем, при фронтальном освещении или освещении под прямым углом, так как в сильнопоглощающем растворе весь свет флуоресценции должен пройти весь слой жидкости до того, как попасть в регистрирующий прибор. Тем не менее расположение в линию имеет преимущество перед фронтальным расположением, так как его легче осуществить и наблюдаемая интенсивность не так сильно зависит от точного положения кюветы, содержащей образец. По этой причине такой метод используется для исследования влияния больших концентраций на флуоресценцию растворенного вещества. При выполнении таких измерений не следует игнорировать тот факт, что часть спектра подвержена самопо-глощению. Например, на рис. [c.219]

Двуокись углерода. О влиянии концентрации СОд на флуоресценцию было уже упомянуто ранее. Прежде всего были отмечены результаты Мак-Алистера и Майерса (см. фиг. 199), которые нашли, что <р у пшеницы увеличивается на сильном свету, если концентрация СОа равна 0,03%, и не изменяется при концентрации последней в 4%. В качественном согласии с этими данными находятся результаты Франка, Френча и Пака [155], которые установили, что при интенсивности света в 17-10 apzj M сек выход флуоресценции Hydrangea в отсутствие двуокиси углерода был почти на 207о выше, чем в присутствии 5% СО . [c.484]

Восстановители. Влияние концентрации восстановителей (тиосульфата, водорода и т. п.) на форму кривых флуоресценции hromatium иллюстрируется фиг. 205—207. Сравнивая их с фиг. 204, можно видеть, что влияние восстановителя гораздо сильнее, чем влияние [c.486]

Гидроксиламин и азид. Наблюдения над действием этих двух ядов на флуоресценцию были проведены Вассинком с сотрудниками [158] при работе с пурпурными бактериями. Полученные ими результаты приводятся на фиг. 220, 221. Влияние гидроксиламина, повидимому, подобно тому, которое оказывает цианистый калий вплоть до концентрации в 0,05% (при которой фотосинтез ингибируется приблизительно на 50%) гидроксиламин не оказывает никакого действия на флуоресценцию, затем, при концентрации 0,1°/о, он вызывает сильное стимулирование флуоресценции. [c.495]

Вассинк, Катц и Доррештейн [158] изучали это явление на пурпурных бактериях. Фиг. 224 показывает типичные результаты, полученные в присутствии и в отсутствие восстановителей. Картина весьма напоминает ту, которая получается под действием азида натрия в отсутствие восстановителей добавление увеличивающихся количеств этилуретана вызывает прогрессивно увеличивающееся тушение флуоресценции (впрочем, влияние становится обратным, если концентрация уретана оказывается больше 1,5%, во всяком случае при интенсивности света меньше 15 10 apz Afi сек). В присутствии восстановителей умерен- ные количества этилуретана совершенно не дают эффекта или оказывают лишь небольшое влияние на вид кривой флуоресценции, тогда как концентрация свыше 2% вызывает сильное ее повышение. [c.498]

Рис. 3. Влияние концентрации магния на флуоресценцию его растворов с бис-салицилальэтилен-диамином

Исследование влияния концентрации бис-салицилальэти-лендиамина на интенсивность флуоресценции его растворов с [c.12]

Рис. 4. Влияние концентрации щавелевой кислоты на интенсивность флуоресценции соединения ниобия с люмогаллионом. Концентрация ниобия— 1 мкг1мл, pH 5,5

Работы последней четверти прошлого века были посвящены изучению влияния концентрации флуоресцирующих, веществ в растворе на цвет и яркость флуоресценции ее зависимости от температуры, растворителей, степени аггрегации флуоресцирующих веществ и некоторых других условий тушению флуоресценции и ее длительности. Для исследования этой последней Александр Эдмон Беккерель (1820—1891), много работавший в области фосфоресценции (как он называл флуоресценцию), предложил в 1879 г. фосфороскоп, усовершенствованный в 1888 г. Э. Видеманом . [c.20]

Наконец, последний и, вероятно, наиболее точный метод исключения влияния пробы на результаты анализа — спект-1ально-изотопный. Он состоит в том, что в исследуемый обра-ец добавляют известное количество одного из более редких табильных изотопов определяемого элемента. Добавляемое олпчество долл но быть таким, чтобы интенсивность линий того изотопа в спектре флуоресценции была того же поряд- а, что и интенсивность линии более распространенного изо-спа в спектре образца. Ширина возбул<дающей линии прн том должна быть такой, чтобы одинаково возбуждались ли-ии, принадлежащие обоим изотопам. Тогда концентрацию (пределяемого элемента легко вычислить из наблюдения от-[ошения интенсивности составляющих изотопической струк-уры [46]. [c.53]

Обнаружено значительное влияние различных примесей на яркость флуоресценции кальция в пламенах. Оказалось, что в то время как присутствие Ва, Си, Со, К, Ьа, Мп, N1, 2п, СЮ, СГ мало сказывается вплоть до их содержания 0,1% в растворе, А1, Сг, Ре, Ь1, M.g, РЬ, СОд", Г, Р, 8 , 50 , ЫОд, ацетаты и цитраты вызывают значительное уменьшение яркости, а фосфаты, силикаты и оксалаты полностью гасят флуоресценцию. Эти влияния обусловлены образованием стойких соединений в пламени, связывающих кальций их можно существенно уменьшить добавлением ЗгСЬ до его концентрации в растворе 0,1% при этом помехи, обусловленные сульфидами и силикатами, не уменьшаются [120]. При возбуждении источником со сплошным спектром значительное влияние оказывает наложение линий флуоресценции хрома [121], расположенных вблизи аналитической линии кальция. [c.85]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология