Высаливание белков

Осаждение белков солями тяжелых металлов. С солями тяжелых металлов (ртути, серебра, свинца, меди и др.) белки образуют металлоорганические соединения, нерастворимые в воде. Чтобы осадить белки солями тяжелых металлов в отличие от высаливания белков солями щелочных и щелочноземельные [c.40]

Высаливание белков концентрированными растворами солей является одним из основных методов фракционирования белковых смесей на альбумины и глобулины. Понижения растворимости белков можно достичь также добавлением спирта и действием низкой температуры. На сочетании действия спирта, солей и охлаждения основаны способы детального фракционирования белковых смесей по Кону например, из сыворотки крови этим путем выделено свыше 12 белков. [c.369]

Высаливание белков. Осаждение белков из растворов солями называется высаливанием. Принцип высаливания заключается в следующем. Молекула белка удерживается в растворе вследствие действия на нее стабилизирующих факторов электрического заряда и водной оболочки (гидросферы). Ионы щелочных и щелочноземельных металлов несут заряд, противоположный заряду белковой мицеллы, и обладают большей гидрофильностью, чем белок. Поэтому при добавлении соответствующего количества солей в раствор белка он осаждается. При уменьшении количества солей в растворе, что достигается диализом или разбавлением водой, белки могут вновь перейти в раствор. [c.39]

Высаливание лежит в основе одного из методов фракционирования высокомолекулярных веществ, поскольку способность этих соединений выделяться из раствора весьма сильно зависит от их химической природы и резко возрастает с увеличением молекулярного веса. Особенно широко применяется фракционирование с помощью высаливания для разделения белков. При этом высаливание часто сочетают с введением в систему нерастворителя (например, спирта) и охлаждением раствора. Высаливание белков целесообразно проводить при значении pH, близком к изоэлектрической точке, так как при значении pH, большем или меньшем изоэлектрической точки, возрастает заряд и гидратация белковых молекул и увеличивается их растворимость. [c.466]

Удобен следующий прием медленного добавления сульфата аммония при изоэлектрическом высаливании белков в забуференный рас твор белка опускают целлофановый мешочек с твердым сульфатом аммония, электролит диффундирует через мембрану и вызывает осаждение белка. Осадок белка, содержащий неорганическую соль, диали-зуют (дистиллированная вода) сульфат аммония удаляется и белок переходит в раствор. Для переосаждения используют описанный выше прием. Кристаллизации белка можно достичь после подходящего числа повторений этого процесса. Другой удобный метод переосаждения и иногда кристаллизации — добавление этилового спирта к раствору белка в изоэлектрической точке и охлаждение. [c.689]

Каким образом производится высаливание белков, чем оно определяется, как используется - [c.197]

Наиболее часто используют метод высаливания белков концентрированными растворами солей. Еще в конце XIX в. было установлено, что различные ионы можно расположить по уменьшению катионы Sr T a ,Mg t s Rb , [c.389]

Больщинство белков выделяется из водных растворов солями щелочных или щелочноземельных металлов, не подвергаясь при этом денатурации. Так как многие белки по-разному относятся к различным высаливающим средствам (солям), то таким путем часто удается их разделять. Для высаливания белков применяют хлористый натрий, сернокислый натрий, уксуснокислый натрий, уксуснокислый калий, сернокислый магний, азотнокислый кальций, сернокислый аммоний, сернокислый цинк и другие соли. Некоторые из них осаждают белки, даже будучи прибавлены к раствору в небольшом количестве, что может быть с успехом использовано для дробного выделения белков. [c.62]

К обратимым реакциям осаждения следует отнести большинство реакций высаливания белков, а также осаждение их спиртом или ацетоном при непродолжительном действии этих реактивов на белок при низ кой температуре. [c.20]

На величину высаливания белков оказывают влияние не только природа и концентрация соли, но и pH среды и температура. Считают, что главную роль при этом играет валентность ионов. Действие разных ионов принято сравнивать не по молярной концентрации соли, а по так называемой ионной силе ([ ), которая равна половине суммы произведений концентрации каждого иона (с) на квадрат его валентности У) [c.26]

Высаливание. При добавлении растворов солей щелочных и щелочноземельных металлов происходит осаждение белков из раствора. Обычно белок не теряет способности растворяться вновь в воде после удаления солей методами диализа или гельхроматографии. Высаливанием белков обычно пользуются в клинической практике при анализе белков сыворотки крови и других биологических жидкостей, а также в препаративной энзимологии для предварительного осаждения и удаления балластных белков или выделения исследуемого фермента. Различные белки высаливаются из растворов при разных концентрациях нейтральных растворов сульфата аммония. Поэтому метод нашел широкое применение в клинике для разделения глобулинов (выпадают в осадок при 50% насыщении) и альбуминов (выпадают при 100% насыщении). [c.26]

Что касается физик о-х имических свойств белков, то они представляют большие возможности для классификации некоторых белковых веществ. Неодинаковая растворимость белков в воде и других растворителях, различные концентрации солей, необходимые для высаливания белков, — вот обычно те признаки, которые позволяют классифицировать ряд белков. [c.49]

Диполи воды соединены с гидрофильными группами белков водородными связями. Учитывая явления гидратации, можно объяснить рассмотренный нами процесс высаливания белков из растворов. При прибавлении к раствору белка высоких концентраций солей или таких органических растворителей, как спирт или ацетон, возникает конкуренция за молекулы воды между солью или спиртом, с одной стороны, и молекулами белка — с другой. При определенных концентрациях ионы солей, молекулы спирта или ацетона связывают такое большое количество молекул воды, что несвязанной воды недостаточно для растворения белка, и он выпадает в осадок. [c.215]

Растворимость белков также сильно зависит от pH, с минимумом в изоточке (рис. 74) при смещении от изоточки возрастают заряд и гидратация белковых молекул и повышается их растворимость, поэтому при высаливании белков всегда поддерживают pH близким к изоточке. [c.185]

Высаливание белков из растворов [c.352]

Соли щелочных металлов и магния при достаточно высокой их концентра ции осаждают— высаливают —многие белки из их растворов. Причинами высаливания белков являются как снятие электрического заряда коллоидных частиц белка адсорбирующимися на них противоположно заряженными ионами соли, так и снятие водных оболочек с гидрофильных частиц белка сильно гидратирующимися ионами добавленной в большом количестве соли. Оба указанных фактора уменьшают устойчивость коллоидного раствора, так как облегчают слипание и укрупнение (коагуляцию) частиц белка, и последний выпадает в осадок. [c.353]

После некоторого стояния выпавшие осадки белка отфильтровать и к фильтратам добавить твердый сернокислый аммонии до насыщения. Пробирка с минимальной концентрацией сернокислого аммония (см. форму), в которой жидкость не дает при этом помутнения, определяет верхнюю границу высаливания-белка. [c.179]

Выделение белков из водных растворов южeт быть осуществлено повышением концентрации солей этот процесс называется высаливанием. Высаливание белков производится полунасыщенными или насыщенны.чш растворами солей (На2804, (НН4)2 804 и др.) и совершенно отличается от коагуляции лиофобных коллоидов слабьпш концентра- [c.184]

Способность белков осаждаться при известных условиях представляет интерес не только с точки зрения возможности их открытия с помощью реакций осаждения, но также и с точки зрения освобождения биологических жидкостей от белков в тех случаях, когда это необходимо в аналитических целях. Помимо осаждения белков кипячением в присутствии уксусной кислоты применяется также осаждение спиртом, ацетоном, высаливание белков из раствора концентрированными растворами нейтральных солей щелочных металлов, осаждение фосфорновольфрамовой кислотой, фосфорномолибденовой кислотой, трихлоруксусной кислотой и т. д. [c.277]

Осадки белков, полученные высаливанием, могут быть вновь растворены после уменьшения концентрации солей диализом или разведением водой. Высаливание белков, следовательно, является обратимым процессом. [c.20]

Раствор белка для реакций осаждения (не высаливанием). Белки куриных яиц отделяют от желтков, смешивают с 19 — 20-кратным объемом воды и фильтруют через несколько слоев марли. [c.329]

Получение чистых нативных биологически активных белков— гораздо более трудная задача, чем их простое осаждение. Для этого обычно используют метод высаливания, которое основано на том, что многие растительные белки выпадают в осадок при насыщении их растворов различными минеральными солями (хлористым натрием, сернокислым натрием, сернокислым магнием и т. д.) и все белки осаждаются при насыщении их растворов сернокислым аммонием. Отдельные группы белков выпадают в осадок при определенной концентрации сернокислого аммония в растворе. Этот метод осаждения белков под действием сульфата аммония уже давно применяется при работе с белками. Осажденные при высаливании белки освобождаются от солей диализом и вновь переходят в раствор, но их свойства при этом не изменяются. [c.213]

Выделение белка из раствора после прибавления различных солей носит название высаливания. Процесс высаливания белка во многих слу-16 [c.16]

При высаливании белка нейтральными солями щелочных или щелочноземельных металлов, а также сернокислым аммонием необходимо применять высокие концентрации этих солей. Различные белки высали в а ю т ся при неодинаковых концентрациях солей. Этим обстоятельством пользуются для разделения белков на различные фракции. Так, для высаливания так называемых глобулинов [c.17]

При высаливании белка нейтральными солями щелочных или щелочноземельных металлов, а также сернокислым аммонием необходимо применять высокие концентрации этих солей. Р а з л и ч н ы е б е л к и высаливаются при неодинаковых концентрациях соле й. Эгим обстоятельством пользуются для разделения белков на различные фракции. Так, для высаливания так называемых глобул и н о в (например, из сыворотки крови) достаточно прибавлять сернокислый аммоний до иолунасыщеиия. Отделив глобулины фильтрованием, можно оставшуюся в фильтрате так называемую альбуминовую фрак ц и ю осадить добавлением сернокислого аммония до полного насыщения. Методом фракционирования белков путем высаливания широко пользуются для получения различных белковых препаратов. [c.17]

В отличие от лиофобных золей, растворы высокомолекулярных веществ являются термодинамически устойчивыми обратимыми истинными растворами. Они подчиняются правилу фаз и их устойчивость определяется соотношением энергетического (ДЯ) и энтропийного (ТД5) членов в уравнении (VIII. 1). Для растворов полярных полимеров, обычно обладающих жесткими цепями, основное значение имеют изменения ДЯ, в значительной мере зависящие от сольватации. Тепловые эффекты, изменения упругости пара, сжимаемости и других свойств растворов при сольватации указывают, что наиболее прочно связанная часть растворителя составляет около одного слоя молекул вокруг полярных групп полимера (табл. 15). Для растворов неполярных полимеров с гибкими цепями основное значение имеют изменения энтропии смешения, во много раз превышающие идеальные значения, и непосредственно связанные с гибкостью макромолекул в растворах. Различные соотношения ДЯ и Д5, приводящие к возможности самопроизвольного растворения полимеров (Д2<0) приведены в табл. 16. Нарушение устойчивости растворов полимеров при понижении температуры, добавлении нерастворяющей жидкости или высоких концентраций солей приводит к различным случаям расслоения на две фазы, выпадения полимеров, высаливания белков и др. Зависимость растворимости полимеров от молекулярного [c.196]

Зеренсена и Мак Бена-, которые изучали процессы высаливания белков и желатина из водных растворов солями N32804, (N N4)2504, КЫОз, К аМОз и т. д. Зцая число компонентов и число фаз, они рассчитывали по уравнению (3) число степеней свободы для исследованных систем. На основании этого был сделан вывод, что растворы желатина термодинамически устойчивы в том смысле, в каком устойчивы кристалл1л или растворы сахара ч соли Несмотря на наличие таких указаний, растворы желатина, так же как и других полимеров, очень долго считались коллоидными, агрега-тивно II термодинамически неустойчивыми системами. Такие представления. однако, впоследствии были опровергнуты и были получены диаграммы состояния для многих систем полимер — растворитель. [c.326]

Очистка остатка, исследуемого на алкалоиды, после их изолирования по методу В. Ф. Крамаренко. На основании данных литературы и собственных исследо-ван1п 1 В. Ф. Крамаренко рекомендует для очистки применять высаливание белков и продуктов их распада безводным сульфатом аммония, центрифугирование и экстрагирование этиловым эфиром веществ, сопровождающих алкалоиды. Методика очистки описана на стр. 129. Этим способом очистки устраняются процессы фильтрования, приводящего к потере алкалоидов за счет адсорбции фильтром и образования стойких эмульсий. Потери алкалоидов при этом способе очистки, по данным В. Ф. Крамаренко, не превышают 1—3%. [c.165]

Белок, осажденный высаливанием, можно отделить от белков, оставшихся в растворе, центрифугированием или фильтрованием и вновь растворить, добавив воду или буферный раствор. Этим методом можно концентрировать растворы (после осаждения раст1ворить белок в меньшем объеме растворителя). Метод высаливания белков широко используется в научно-исследовательских лабораториях при выделении и очистке различных белков (ферменты, гормоны и др.) и в производственных условиях для получения белковых препаратов (лечебные сыворотки, кристалличеекиёОелки и др.). [c.24]

По силе высаливающего действия ионы располагаются в определенной последовательности, называемой лиотропным рядом. Лиотропный ряд анионов > >СзН40Н(С00)- >СНзС00->С1->Ы07 >1->СЫ5- лиотропный ряд катионов Li+>Na+>K+>Rb+> s+. Первые члены этих рядов наиболее сильно гидратированы. Высаливание белков обратимый процесс. При добавлении воды к осадку белок снова переходит в растворенное состояние. [c.114]

Высаливание белков концентрированными растворами ЫагЗО или (NH4)2S04 применяется при выделении ферментов из экстрактов тканей и является одним из методов фракционирования белковых смесей на альбумины и глобулины. Растворимость белков уменьшается также при добавлении дегидратирующих веществ (спирта, ацетона). [c.114]

Если необходимо более точно определить границы высаливания белка, взять большее число различных концентраций сернокислого aiiMOHHH. [c.179]

Выделение белка из раствора после прибавления различных солей носит название высаливания. Процесс высаливания белка во многих случаях не связан с потерей белком способности вновь растворяться в воде после удаления водоотнимающего средства. Так, осажденный сернокислым аммонием или сернокислым натрием белок сыворотки крови после удаления основной массы соли (например, диализом) легко вновь растворяется в воде с образованием раствора, во всех отнош еннях тождественного исходному. [c.17]

Руководство к практическим занятиям по коллоидной химии Издание 3 (1952) -- [ c.173 ]

Руководство к практическим занятиям по коллоидной химии Издание 4 (1961) -- [ c.203 ]

Физическая и коллоидная химия (1964) -- [ c.239 , c.240 ]

Катализ в химии и энзимологии (1972) -- [ c.279 , c.293 , c.297 ]

Биохимия Издание 2 (1962) -- [ c.37 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология