Электрофорез в испарение

НОМ порошке, порошке поливинилхлорида и т. д., и главным образом на целлюлозе. Электрофоретический метод разделения имеет особое значение для разделения коллоидов и аминокислот, так как заряд частиц этих соединений зависит от значения pH среды. Поэтому значение pH раствора (изо-электрическая точка) оказывает большое влияние на направление движения ионов в растворе. Процесс электрофореза проводят часто в присутствии буферных растворов. Согласно уравнению (7.1.29), состав раствора оказывает большое влияние на скорость движения частиц в растворе. Движению частиц в электрическом поле препятствует явление диффузии. Влияние диффузии обратно пропорционально размерам частиц и силе поля. Для разделения ионов больших размеров можно применять электрофорез при низком напряжении, для разделения частиц небольших размеров следует работать при более высоких напряжениях. Электрофорез на носителе по технике выполнения проще, чем обычный электрофорез. При этом вещества в соответствии со скоростями их движения в электрическом поле фракционно осаждаются на носителе. Используя сорбционное действие носителя, можно замедлить движение частиц, что приведет к расширению зон фракционирования. Под действием выделяемого током тепла, особенно при работе с высокими напряжениями, происходит испарение растворителя, что затрудняет процесс разделения. Важным фактором является удаление перед разделением больших количеств электролитов, например, в процессе диализа. [c.387]

Метод электрофореза на носителе во многом подобен методу хроматографии. Камера для электрофореза состоит из трех частей, двух электродных сосудов и расположенной выше подставки для носителя, например бумаги. Камеры должны быть плотно закрыты для предотвращения испарения растворителя. Носитель укладывают горизонтально, уровень растворителей в обеих электродных камерах должен быть одинаковым. Электроды, платиновый или графитовый, встроены в диафрагму. Вещество наносят на носитель в виде точек или полос. Место нанесения пробы зависит от предполагаемого направления движения. При движении разделяемых, веществ к аноду пробу наносят на катодную сторону, и наоборот. Для количественной и качественной оценки процесса разделения (проявление вещества и т. д.) применяют методы, используемые в бумажной хроматографии. [c.387]

Подобно хроматографии на бумаге, при тонкослойной хромато графии также проводят разделение в двух направлениях под пря мым углом друг к другу. В одном направлении, как правило проводят электрофорез в электрофоретической камере с малым объемом для испарения контакт между слоем адсорбента и электрод ными отсеками в этих камерах обеспечивают фитили из фильтровальной бумаги. Из-за низкой теплопроводности стекла и связанным с этим слабым тепловым рассеянием может возникать проблема охлаждения хроматографической пластинки. Для снижения образования тепла рекомендуется работать на стеклянных пластинках минимальной толщины и применять буферные растворы по возможности минимальной ионной силы. [c.234]

Для выделения и очистки белков используются специфические методы химии белка диализ (отделение неорганических солей и низкомолекулярных органических соединений от белков благодаря тому, что белки не проходят через полупроницаемые мембраны из коллодия, целлофана и т. д.), электрофорез, хроматографирование на ионнообменных смолах и молекулярных ситах, лиофильная вакуумная сушка (испарение замерзшей воды в высоком вакууме) и т. д. [c.500]

Различные экспериментальные серийные установки для электрофореза на бумаге можно разделить на 3 группы з вертикальные, горизонтальные и с бумагой, зажатой между горизонтально расположенными стеклянными пластинками. Для точного измерения подвижности растворенных веществ особенно пригоден последний способ, при работе по которому отсутствует испарение. Испарение имеет место в установках с открытыми листами бумаги, поскольку при прохождении электрического тока выделяется тепло. Концы бумаги погружаются в раствор электролита, поток которого компенсирует испарение. [c.563]

Сущность метода заключается в том, что оба конца ленты фильтровальной бумаги, смоченные буфером, нужно опустить в буферный раствор, связанный с электродами. Исследуемый раствор нанести на бумагу в виде точки или полосы из нескольких капель. Аппарат (рис. 18) закрыть, чтобы препятствовать испарению тонкого слоя буферного раствора. Через несколько часов электрофореза (в зависимости от применяемой силы поля) белки под действием тока отходят от места их нанесения на не- [c.156]

В химических исследованиях метод меченых атомов применяется для изучения строения молекул, механизма и кинетики химических реакций, процессов адсорбции, хроматографии, электролиза и электрофореза, определения констант равновесия и распределения, энергии активации процессов, растворимости малорастворимых веществ, скорости испарения и диффузии, измерения поверхности веществ, размера частиц, давления пара, количественного анализа и т. п. [c.503]

Сборка аппаратуры для электрофореза. При отсутствии аппаратуры для электрофореза на бумаге можно собрать простую установку лабораторными средствами. Для этого требуется два стакана на 100 мл, две стеклянные пластинки (6 х 20 см), два угольных электрода, четыре зажима (типа бельевых), лист бумаги, источник постоянного тока. Вид установки показан на рис. 147. Необходимо следить за тем, чтобы с поверхности бумаги не происходило испарения (из-за выделения джоулева тепла), которое может внести ошибки. Во избежание этих ошибок установку следует помещать в закрытый сосуд, насыщенный парами воды. [c.277]

Как и в электрофорезе, скорость движения ионов на бумаге под действием электрического поля пропорциональна приложенному потенциалу. Лучшее разделение компонентов смеси происходит при высоких потенциалах. Но ве-пичина потенциала ограничена тем, что при большой силе тока бумага разогревается и растворитель сильно испаряется. При слишком большой силе тока бумага может даже обуглиться. Для уменьшения разогрева бумаги опыты проводят на холоду или применяют охлаждающие жидкости-неэлектролиты, например хлорбензол. Чтобы избежать испарения электролита с бумаги, последнюю помещают между двумя стеклянными пластинками. При прочих равных условиях подвижность ионов увеличивается с повышением температуры. [c.316]

Если исходная фаза является газом, при разделении может быть использована вторая фаза — твердая (например, при конденсации, сорбции или в хроматографических процессах), жидкая (также при конденсации, сорбции или в хроматографии) или газообразная (при диффузионных или магнитных разделениях). Если исходная фаза жидкая, вторая фаза может быть твердой (при осаждении, сорбции, электроосаждении или хроматографии), жидкой (при дистилляции, экстракции, диализе, электрофорезе, электроосаждении или хроматографии) или газообразной (например, при испарении). Если исходная фаза твердая, вторая фаза может быть также твердой (при рассеивании или магнитных разделениях), жидкой (при растворении) или газообразной (при сублимации или испарении). [c.445]

Затем 1—2 капли раствора помещают на середину полоски хроматографической бумаги в условиях, исключающих испарение. Полоску бумаги (щириной 2 см, длиной 50 см) предварительно выдерживают в приготовленном для электрофореза растворе, не содержащем Np. Проводят электрофорез раствора в течение 2—Зч при напряжении 2000 в и силе тока 1—5 ма. Градиент потенциала составляет 40 в см. [c.444]

Если поверхность бумаги открыта, испарение всегда происходит, несмотря на то что электрофорез проводится во влажной камере, так как ток нагревает бумажную полоску. Испарение вызывает движение жидкости от краев к середине полоски, а оставшаяся соль увеличивает электропроводность раствора. Таким образом, движение зон происходит неравномерно, в связи с чем электрофорез на бумаге мало пригоден для определения подвижностей. Но разрешающая способность этого метода очень хорошая. [c.94]

В установках другого типа, где бумага зажата между твердыми поверхностями или погружена в непроводящую жидкость, испарение полностью предотвращается. В этом случае легче добиться воспроизводимости положения зон и измерить подвижность, но зоны часто получаются более широкими, вероятно, из-за влияния слоя жидкости, образующегося между поверхностью бумаги и оболочкой, даже если последняя и не смачивается водой. При такой конструкции прибора легче осуществить хороший теплоотвод и можно резко повысить напряженность поля до 50 в см и более, уменьшив время разделения до десятков минут. Такой высоковольтный электрофорез, часто в сочетании с хроматографией, успешно применяется для быстрого разделения аминокислот, пептидов и других низкомолекулярных объектов. Белки этим методом разделяются плохо. [c.94]

Электрофорез, благодаря почти полному отсутствию в покрытии воды, позволяет избежать большой затраты энергии на ее испарение [19—26]. Однако наиболее важно, что этот метод дает возможность использовать самые разнообразные полимерные вещества независимо от их природы и строения. [c.5]

Конструкция прибора для электрофореза на мембранах из "САМ может быть достаточно простой, но она должна обеспечивать тщательное насыщение (водяными парами) пространства вокруг легко высыхающей тонкой ацетатцеллюлозной мембраны. В связи с интенсивным испарением воды с САМ происходит локальное увеличение электрического сопротивления носителя, приводящее к перегреву и искажению разделенных зон, а также к разрушению носителя. По этой причине камеру изолируют от окружающей атмосферы жидкостным затвором, а открытые кю- [c.294]

В простейшем приборе для низковольтного электрофореза белков на бумаге (см. рис. 12.5) оба конца полоски бумаги погружены в электролит, находящийся в электродных камерах. Во время электрофореза электролит движется к центру бумаги за счет капиллярных сил, и влажность, уменьшающаяся в результате испарения, восстанавливается. Электролит, кроме того, движется к катоду вследствие электроосмоса. Если нужно узнать заряд разделяемых веществ, то на старт следует нанести незаряженное соединение, например глюкозу. Ее положение после электрофореза указывает на место фактического старта. Градиент напряжения обычно составляет от 5 до 15 В/см. Для аналитических целей используют более тонкую бумагу, например ватман № 1, а для микропрепаративного разделения более подходит ватман № 3. [c.341]

Кинетические методы разделения веществ основаны на перемещении компонентов смеси в однородной системе под действием силового поля. К данным методам относятся различные процессы, основанные на седиментации (центрифугировании), диффузии или перемещении компонентов в электрическом поле (электрофорез). В отдельных случаях кинетические процессы можно использовать в гетерогенных системах. Здесь разделение веществ зависит от скорости перемещения компонентов из одной фазы в другую, скорости испарения, кристаллизации и т. д. [c.4]

Вторая методика основана на проведении процесса осветления, при котором мембрана уплотняется погружением в раствор, содержащий относительно летучий нерастворитель, например этанол, и относительно нелетучий растворитель, например циклогексан. Вследствие высокой концентрации нерастворителя осветляющий раствор не будет воздействовать на мембрану сразу же при погружении. Однако по мере того как происходит испарение, среда, в которую погружают мембрану, все более обогащается растворителем из-за потери летучего нерастворителя. За счет пластикации и приложенной нагрузки уменьшается пористость мембраны и достигается ее прозрачность. Эта методика широко используется при электрофорезе на ацетатцеллюлозных фильтрах [8]. Далее (в гл. 7) будет отмечено, что осветляющий раствор является противоположностью растворяющей системы, используемой в процессе сухого формования микропористых мембран, в котором применяются летучие растворители и менее летучие нерастворители. [c.86]

Литературу по электрофорезу на бумаге несколько осложняет разнообразие терминологии, используемой различными исследователями. Михаэлис [1] в 1909 г. применил термин электрофорез при описании движения коллоидных ионов в электрическом поле в обзоре, изданном в 1945 г., Мартин и Синге [2] называют электромиграцию ионов с низким молекулярным весом в опорной среде ионофорезом. Разделения как маленьких, так и больших молекул, основанные на различиях в заряде, проводятся в одинаковых или сходных аппаратах, и по этой причине большинство исследователей склонны применять термин электрофорез с соответствующим прилагательным, указывающим на характер используемой опорной среды. Тизелиус и др. предложили удачное выражение зональный электрофорез для разграничения этих методов от метода подвижной границы. По-видимому, нет надобности вводить специальные термины для обозначения побочных эффектов, обусловленных хроматографией, адсорбцией или испарением. [c.244]

Определение абсолютных значений подвижности на бумаге невозможно вследствие тех осложнений, которые возникают в связи с испарением и изменениями в ионной силе, возникающими при нанесении пятна, Сопоставляя величины подвижности белков сыворотки на бумаге и при свободном электрофорезе, Кункель и Тизелиус [5] отмечают, что различия в этих величинах можно объяснить тем, что при электрофорезе на бумаге белки проходят по более извилистому пути. В то время как при свободном электрофорезе белки проходят расстояние [c.247]

Электрофорез сыворотки крови проводят в 1%-ном агаре в ме-динал-вероналовом буфере (pH 8,6) с ионной силой 0,05. Все белки сыворотки при pH 8,6 заряжаются отрицательно и перемещаются в электрическом ноле в сторону анода. Однако практически медленно продвигающиеся фракции белков сыворотки обычно движутся в сторону катода. Аномальное движение этих фракций объясняется наличием в агаровом геле электроэндоосмотического тока жидкости, направленного в описанных выше условиях от анода к катоду, а также тока жидкости, возникающего при неравномерном испарении воды с поверхности геля. Неравномерное испарение приводит к неравномерному распределению электрического поля в нем. Уменьшить испарение воды можно двумя способами 1) герметически закрывая электрофоретическую камеру во время электрофореза, 2) проводя электрофорез при низкой температуре (в холодильнике или холодной кОмнате, буферный раствор должен быть заранее охлажден). [c.92]

Специфические свойства поверхности эффективно используются в тонкопленочной технологии получения, например, фотодиодов, интегральных магнитных элементов вычислительной техники, приемников и ИК-излучения, радиопоглощающих и радиоотражающих покрытий, тензодатчиков, преобразователей солнечной энергии и др. Для нанесения пленок используют следующие процессы диффузионное насыщение, плазменное (или иное) напыление, испарение —конденсация, электрохимическое осаждение, электрофорез, ионную имплантацию, химический транспорт. [c.53]

Б. Камера Канкеля — Тизелиуса [18]. В этом приборе полоски бумаги для электрофореза помещаются между двумя силикониро-ванными пластмассовыми пластинами, которые устраняют нежелательное испарение буферного раствора, что препятствует изменению его концентрации. Кроме того, этот прибор пригоден и для двумерного электрофореза (фиг. 3). [c.49]

В которую переходят из крахмала растворимые примеси, отбрасывают. Отмывание крахмала отстаиванием повторяют дважды, затем осадок переносят в воронку Бюхнера и 3—4 раза промывают буферным раствором. После этого делают пастоподобную смесь крахмала с буферным раствором и примерно 100 мл этой пасты переносят в коническую колбу емкостью 0,5 л. Постоянно размешивая, крахмальную пасту нагревают до получения абсолютно гомогенной массы, причем следует избегать кипения геля. Чтобы удалить пузырьки воздуха, в колбе, содер-жаш ей нагретый гомогенный крахмальный гель, с помош ью вакуумного насоса создают разрежение, и гель на 1—2 мин вскипает. После этого им заполняют ванну прибора для электрофореза избыток буферного раствора удаляют с помош ью толстой фильтровальной бумаги, а для того чтобы предотвратить испарение, поверхность геля заливают тонким слоем расплавленного парафина. [c.79]

Первым этапом любого анализа, в том числе с использованием метода КЭ, является отбор и подготовка пробы. Отобранная проба должна быть представительной (т.е. не отличаться по качественному и количественному составу от анализируемого материала), а процедура отбора пробы— легко воспроизводимой [24]. При необходимости проводят консервацию пробы [78]. Время хранения отобранных проб перед анализом должно быть минимальным, а условия и способы хранения должны исключать неконтролируемые изменения состава пробы за счет испарения, окисления и фотодеградации [32]. На этапе подготовки пробы к анализу проводят удаление мешающих веществ, выделение и концентрирование определяемых соединений, их превращение в более удобные аналитические формы [24]. Необходимость выполнения всех или только некоторых из перечисленных процедур обусловливается природой анализируемого объекта и свойствами содержащегося в нем доминирующего вещества. Так, например, зонный вариант капиллярного электрофореза с УФ-детекти- [c.368]

НОЙ бумаги. Для этого применяется прибор, изображенный на рис. 18.6. Концы полоски фильтровальной бумаги, лежащей на стеклянно.м столе, погружены в два буферных раствора, в каждом из которых находится по электроду, соединенных с регулируемым источником постоянного тока. Бумагу увлажняют разбавленным электролитом и образец при помощи обыкновенной медицинской пипетки помещают в центре бумажной П0Л01СКИ. После этого прикладывают потенциал в несколько сот вольт. Полоска бумаги должна быть чем-либо прикрыта, чтобы предотвратить испарение растворителя. Этот метод также называется бумажным или зонным электрофорезом. Описано мното конструкций приборов такого типа [12, 19, 40]. [c.261]

При электрофоретическом разделении водного гумуса использовалась подвижность составляющих его высокомолекулярных соединений в электрическом поле вследствие наличия у них ионогенных групп. Представлялось целесообразным получить не электрофореграммы, а отдельные фракции, как при жидкостной хроматографии. Поэтому применяли методику непрерывного электрофоретического разделения на бумаге, при котором перпендикулярно нисходящим потокам исследуемого и буферного растворов в капиллярах вертикального листа бумаги накладывается электрическое поле постоянного тока высокого напряжения. Гуминовые вещества для электрофореза извлекали из днепровской высокоцветной воды экстракцией изобутиловым спиртом [46]. После испарения растворителя осадок растворяли в 0,1-н. едком натре и добавляли фосфатный буферный раствор pH 7,5, этот же раствор использовали и как фон при разделении. [c.61]

С полными обзорами методов разделения можно ознакомиться по монографиям [1126, 1144]. Ряд методов, освещенных в обзорах [10491, относится к испарению при центрифугировании жидкостей [64], ионному обмену [757], противэточной электромиграции [1132], хроматографии [7581, прохождению через разделяющее сопло [146], фотосенсибилизации [207, 1591], нестационарным молекулярным потокам [18611, противоточному центрифугированию газа [7991, применению постоянного электрического поля [7911, прохождению молекулярного пучка через область ионизации [1860], электрофорезу [248], а также способам, специфичным для отдельных элементов [891. В одном из последних методов используются особые свойства сверхтекучего жидкого Не, которыми не обладает Не, обусловливающие очень быстрое повышение кон-дентрации Не (3-10 за одну ступень) [1908]. [c.461]

Краска состоит из высыхающего масла, называемого связующим, которое образует пленку, и тонкоизмельченного пигмента. Кроме того, краски часто содержат разжижители, которые уменьшают вязкость для облегчения окрашивания, сиккативы, которые ускоряют окисление связующего с превращением жидкости в твердую пленку, наполнители, которые способствуют измельчению пигмента, и иногда пластификаторы, которые уменьшают хрупкость пленки. В рамках этого общего описания имеется множество вариантов и существуют тысячи различных красок. Во многих из них употребляется в качестве связующего льняное масло. Некоторые содержат природные лаки. Многие изготовляются из многочисленных легкодоступных органических материалов, часто в форме полимеризованных соединений другие для ускорения физических и химических изменений требуют нагревания (например, эмали), в то время как лаки отверждак тся путем испарения, и поэтому при их смешении требуется большая осторожность. Некоторые краски наносятся с помощью электрофореза. [c.159]

Разработка теорпп метода электрофореза на бумаге, при при котором существенную роль пграют испарение и обусловленная нм миграция, адсорбгщя и поверхностное растекание, еще не закончена. [c.128]

В лаборатории авторов главы успешно используется нисходящий бумажный электрофорез без охлаждения, разработанный Микешом [70]. Принципиальная схема прибора для такого разделения показана на рис. 12.5. Этот прибор используется в основном для аналитического и препаративного разделения пептидов, содержащихся в ферментативных гидролизатах белков. Оптимальное разделение достигается при применении таких буферных растворов, электропроводность которых соответствует 1/150 М фосфатному буферному раствору Соренсена (3,63 г КН2Р04-Ь 14,32 г На2НР04-12Н2О в 10 л воды, pH 7). Летучие буферные растворы более удобны, если во время их испарения концентрация ионов на бумаге не увеличивается. Например, для разделения пептидов обычно используется пиридин-ацетат-ный буферный раствор, pH 5,6 (4 мл пиридина +1 мл уксусной кислоты, вода до 1 л). Нейтральные, незаряженные, соединения остаются в центре бумаги, т. е. на старте, и образуют узкую смешанную зону. В верхней части бумаги располагаются зоны пептидов основного характера, а в нижней части — кислотного. [c.291]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология