Центрифугирование равновесное

ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕ РАВНОВЕСНОЙ СИСТЕМЫ МОНОМЕР—ДИМЕР [c.257]

Порядок выполнения работы. Готовят растворы ПАВ 5—7 различных концентраций (по 50 см ), помещают в них равные навески угля (по 1 г) и выдерживают для достижения адсорбционного равновесия. После центрифугирования определяют равновесную концентрацию ПАВ в растворе с помощью интерферометра ИТР-2 по предварительно полученной калибровочной кривой (см. работу 9). Экспериментальные данные записывают в таблицу, приведенную в работе 9 (табл. П1.4). [c.75]

Размер коллоидных частиц, как уже указывалось, можно найти не только по скорости седиментации в ультрацентрифуге, но и определяя седиментационное равновесие. Для этой цели применяют центрифугирование при не слишком больших частотах вращения (обычно около 20 000 об/мин), так как иначе превалировала бы седиментация и равновесие не устанавливалось. Численный или молекулярный вес, найденный по седиментационному равновесию, отвечает равновесному распределению частиц в системе, он не зависит от способа достижения этого распределения, и, следовательно, на результатах анализа не может сказываться форма частиц и их сольватация. [c.80]

Эксперименты по равновесному центрифугированию довольно длительны (их продолжительность может достигать нескольких суток). Исходя из того, что время, необходимое для достижения равновесия, пропорционально квадрату высоты слоя жидкости, определение молекулярных масс по уравнению (УП.44) проводят по высоте слоя в несколько миллиметров. [c.157]

В отличие от скорости седиментации равновесное ультрацентрифугирование позволяет на основе термодинамики определить молекулярный вес М. В опытах по изучению равновесия, проводимых в ультрацентрифуге, центрифугирование продолжается до тех пор, пока стремление молекул к седиментации не уравновесится противоположным стремлением к диффузии в область с более низкой концентрацией. Поскольку такое перераспределение в растворе является равновесным, соотношение между концентрациями на двух уровнях и молекулярным весом можно вывести с помощью термодинамических методов. Для идеальных растворов молекулярный вес может быть вычислен по формуле [c.616]

При достаточно большом времени центрифугирования частицы достигают в градиенте плотности равновесных положений. Именно та-[ким образом в соответствии с их плотностью в градиенте сахарозы разделяют клеточные органеллы (гл. 1, разд. Б.6). Макромолекулы (на- [c.163]

Непродолжительное нагревание пленки полимера выше Тс на определенное время освобождает замороженные конформацион-ные структуры и тем самым делает возможным переход полимера в состояние, близкое к равновесному. При этом ослабляются и напряжения в полимерной пленке, возникающие при центрифугировании раствора и сушке. Подвижность сегментов полимерной V,,, цепи облегчает удаление остатков растворителя, [c.22]

Описанный метод особенно удобен при образовании устойчивых суспензий высокодисперсных адсорбентов в растворах полимеров, когда центрифугированием трудно отделить равновесные растворы от адсорбента. [c.8]

Едкий натр — наиболее широко применяемая щелочь. Классический метод удаления примеси карбоната заключается в приготовлении концентрированного раствора (весовое соотношением едкого натра и воды 1 1 или 4 5), в котором карбонат натрия практически нерастворим. После фильтрования через стеклянный фильтр или центрифугирования раствор разбавляют свежепрокипяченной и охлажденной или дистиллированной водой, находящейся в равновесии с двуокисью углерода воздуха. Такая равновесная вода содержит- всего па 1 л , Ъ моль двуокиси углерода и ее легко получить, про- [c.110]

Для удаления избытка растворителя (по сравнению с равновесным) можно применять отсасывание на воронке Бюхнера, центрифугирование [91] и др. [c.296]

Наиболее распространенный способ создания градиента плотности — центрифугирование р-ра полимера в смеси двух или более жидкостей, отличающихся по плотности, мол. массам или по обоим показателям. Полимер собирается в области, где плотность р-ра р близка к плотности полимера в р-ре, т. е. 11 где — кажущийся парциальный уд. объем полимера в смеси растворителей. Характер распределения с х) в равновесном градиенте плотности может указывать на гетерогенность полимера по мол. массе или по плотности при определении с х) необходим учет эффекта гидростатич. сжатия. [c.200]

ВЫХ оснований или нуклеотидов, полученных после расщепления полимера (подробнее — см. стр. 58). С нуклеотидным составом ДНК однозначно связаны два физических свойства двухцепочечных комплексов, которые часто используются для характеристики полученных препаратов 2 . 2в Одно из них — так называемая температура плавления Гщ — это температура, при которой происходит распад двухцепочечного комплекса на одноцепочечные молекулы этот процесс легко наблюдать по изменению УФ-поглощения или оптического вращения раствора (подробнее см. в гл. 4). Другая характерная константа ДНК — плавучая плотность р — может быть определена из результатов равновесного ультрацентрифугирования Такое центрифугирование проводят обычно в растворах солей, обладающих высокой плотностью чаще всего применяют хлорид или сульфат цезия. При длительном центрифугировании устанавливается градиент плотности раствора, а ДНК собирается в узкой зоне, где существует равновесие между центробежной силой и выталкивающей силой, которая определяется разностью плотности осаждаемого вещества и применяемого солевого раствора в данной зоне. Равновесное центрифугирование в градиенте плотности Сз С1 может служить не только аналитическим методом для характеристики препарата ДНК, но и полезным препаративным методом для разделения ДНК, различающихся по нуклеотидному составу. Подобным же образом препаративное ультрацентрифугирование в градиенте плотности сахарозы используется для разделения молекул ДНК, различающихся по скорости седиментации. [c.31]

Определение содержания ДНК на одну вирусную частицу показывает, что обычно в состав частицы входит либо одна молекула ДНК, либо один двухцепочечный комплекс. Естественно поэтому ожидать, что препараты ДНК, выделенные из вирусов, будут индивидуальными в химическом смысле молекулами ДНК или по крайней мере комплексами из двух индивидуальных молекул. Это предположение оправдывается во многих случаях, причем иногда удается после разрушения двухцепочечного комплекса разделить с помощью равновесного центрифугирования индивидуальные полинуклеотидные цепи. [c.32]

N раствора КС1, 5,20 мл 0,1 N раствора AgNOs, 4,00 мл 96%-ного oHgOH и 1,00 мл водного раствора ортохрома Т, исходная концентрация которого находилась в пределах 1,13-10" — I.TS-IO" г/мл. После перемешивания и установления сорбционного равновесия твердую фазу отделяли центрифугированием. Равновесную концентрацию красителя определяли при по.мощи колориметра системы Дюбоска. [c.116]

Иногда в трехкомпонентной системе одна связующая прямая является особой или даже сингулярной. Это может быть результатом совпадения плотности обеих равновесных фаз в этом случае речь идет об изопикнической прямой [53]. При процессах экстракции растворителями такое явление исключает возможность разделения фаз путем отстаивания или центрифугирования поэтому по практическим соображениям его необходимо избегать, хотя оно и не имеет теоретического важного значения. [c.238]

Ввиду недостаточного количества твердого вещества в сгущённом шламе необходимо его дополнительное обезвоживание, для чего бьши исследованы его водоотдающие свойства. Сфлокулированный сгущенный АИпри концентрациях твердой фазы 11-16 % представляет собой структурированную систему, которая уже малочувствительна к дополнительной обработке флокулянтами. Водоотдающие свойства АИ исследовались путем его фильтрования через бумажный фильтр белая и синяя лента (размер пор 10-20 мкм и 5 мкм соответственно) при перепаде давления 0,05 МПа и путём центрифугирования на лабораторной центрифуге при факторе разделения Кр = 2311 до равновесного состояния дисперсной фазы. [c.180]

Известно, что подобные полимерные разновидности присутствуют в растворе только в том случае, когда молярное отношение превышает 25102 НзгО. Отсюда следует, что в растворе с отношением 3,3 приблизительно (3,3—2,0)/3,3 или же 39 % от всего кремнезема будет представлять собой полимерную форму, тогда как 61 % составляет главным образом мономер. Если степень полимеризации высокомолекулярной фракции составляет - 15, то тогда усредненные по числу и по массе молекулярные массы будут, по расчетам, равны 180 и 284 соответственно. Эти значения имеют по крайней мере тот же самый порядок величины, что и среднечисленная молекулярная масса, равная 280, определенная криоскоиическнм методом [63], и усредненная по массе молекулярная масса, равная 325, определенная Дебаем и Нойманом [37] методом рассеяния света. Значение молекулярной массы 900, полученное Эвестоном [31] методом равновесного центрифугирования, оказалось выше, вероятно, из-за того, что автор измерял молекулярную массу в растворах хлорида натрия. Экстраполяция его данных к значению наименьшей концентрации соли (0,08 М) дает основание полагать, что молекулярная масса для данного отношения 5102 ЫазО равна -—бОО в отсутствие соли молекулярная масса была бы еще ниже. [c.174]

Степень насыщения обменника ионами Na (катиоиообменник) или С1 (анионообмениик) определяют специальным методом. Из обменника удаляют поглощенный раствор центрифугированием, освобождают ионы Na и С1 и определяют их концентрацию. Эту же величину можно определить (менее точно) титрованием равновесного раствора кислотой или основанием до pH 7,0. Концентрацию ионов Н+ или ОН рассчитывают по расходу титранта. [c.94]

Рис. 43. Схема эксперимента Мезельсона и Сталя (слева) и профиль оптической плотности при 260 нм (02бо) вдоль центрифужной я 1вйки при равновесном центрифугировании в граляенте концентрации СзС ДНК из бактерий, выращенных в среде с (а), и ДНК

Используя соответствующую соль, можно создать устойчивый в условиях центрифугирования градиент ее концентрации, а тем самым и градиент плотности растворителя. Если природа соли и распределение ее концентрации таковы, что плавучая плотность биополимера выше, чем плотность растворителя на мениске, но ниже, чем у дна пробирки, то по мере перемещения к дну пробирки биополимер достигнет участка, где множитель 1 - / о/р станет равным нулю и дальнейшая седиментация прекратится, т.е. возникнет устойчивая зона нахождения биополимера. Наиболее широкое применение для этой цели нашли растворы солей цезия, которые позволяют получить растворы с плотностью, достаточной для остановки перемещения нуклеиновых кислот. Эксперименты подобного рода весьма дороги, так как требуют длительной, обычно на протяжении нескольких суток, работы ультрацентрифуг. Однако они открывают некоторые уникальные возможности. Например, удается разделить биополимеры, различающиеся лишь изотопным составом. Молекулы ДНК из одного вида микроорганизма, выращенные на средах, содержащих в качестве источника азота соли аммония и 15NH4, не отличаются по объему, но имеют разные массы и, следовательно, различные плавучие плотности. Поэтому при равновесном центрифугировании и градиенте плотности хлорида цезия они образуют отдельные зоны. Пример применения этого метода для доказательства полуконсервативного характера репликации ДНК приведен в 5.1. [c.244]

Наложение на раствор гравитационного потенциала — например, при центрифугировании, что приводит к перераспределению компонентов среды по плотности и созданию в растворе областей, имеющих концентрацию некоторых компонентов выше равновесной [Shli hta Р. J., Кпох R. Е., 1968]. [c.72]

Однако во многих случаях избыток углеводорода создает столь высокодисперсную и устойчивую эмульсию, что ее присутствие оказывает существенное влияние на показатель преломления. Это обнаруживается, в частности, для таких ПАВ, для которых в статических условиях в системе водный раствор ПАВ — углеводород наблюдается явление квазиспонтанного эмульгирования на границе раздела фаз с образованием предельно высокодисперсной (коллоидной) эмульсии (подробнее см. стр. 171). Ультрамикрокапельки такой эмульсии, возникающие (наряду с относительно крупными каплями обычной эмульсии) и в реальных динамических условиях эмульгирования, приводят к тому, что измеряемые показатели преломления и, следовательно, величины солюбилизации оказываются завышенными. Поэтому для получения достоверных данных о солюбилизации необходимо измерять тот предельный равновесный показатель преломления водной фазы, который устанавливается при полном расслаивании эмульсии. Чтобы ускорить расслоение эмульсии, удобно применять центрифугирование образцов. [c.153]

Водный раствор ванадия (10 мл) с определенным значением pH встряхивали в течение 1 часа (время, достаточное для установления равновесия) с 10мл раствора БФГА в органическом растворителе. Встряхивание проводили в колбочках емк. 50 мл с притертыми пробками. Равновесные фазы разделяли центрифугированием, и радиоактивность аликвотной части каждой из фаз измеряли при помощи -сцинтилля-ционного счетчика с кристаллом МаЛ(Т ). Коэффициент распределения ( ) рассчитывали как отношение радиоактивности органической фазы к радиоактивности водной фазы. Равновесное значение pH водной фазы измеряли стеклянным электродом на потенциометре ЛП-58. [c.70]

Степень адсорбции привитых сополимеров на поверхности полимерных частиц была определена в условиях полимеризации [7]. В этих опытах количество привитого стабилизатора, ассоциированного с частицами полимера, определяли по разнице между взятым количеством и количеством, не израсходованным после завершения дисперсионной полимеризации и измеренным по сухому остатку после испарения жидкости, отделенной высокоскоростным центрифугированием от дисперсии. Полимерные дисперсии получали в алифатических углеводородах при 80 °С. При этой температуре адсорбция привитого сополимера в присутствии свободного мономера, вероятно, является равновесным процессом. При более низких температурах, применяемых при центрифугировании и в условиях отсутствия мономера, адсорбция является в основном необратимой и поэтому возможны лишь небольшие ошибки, возршкающие за счет установления нового равновесия при разбавлении дисперсии перед центрифугированием. [c.65]

Особым случаем равновесного центрифугирования является седиментация при градиенте плотности [14, 76, 135], для которой применяют двухкомпонентные системы растворителей. Градиент плотности возникает вследствие седиментационного разделения составных частей растворителя вещества с различной плотностью распределяются в различных точках, где их эффективная плотность равна плотности окружающей среды. Вследствие диффузии в этих полосах накопления зависимость с от г в идеальном случае подчиняется закону Гаусса. Чаще всего этот метод применяли для исследования нуклеиновых кислот, но можно получить распределение в градиенте плотности и для полимеров умеренного молекулярного веса, если в качестве растворителей брать смеси 1,2-дибром-1,2-дифторэтана с циклогексаном и использовать оптическую шлирен-систему [221. Другая система описана Бреслером и сотр. [30]. Сведения о распределении сополимеров по составу можно получить также путем измерения рассеяния света[33]. [c.61]

Предварительно часто проводят периодические испытания или измерения с небольшими порциями сорбента или ионообменного материала, предназначенного для широкого использования. Например, этим путем можно определять равновесную концентрацию сорбтива в твердой фазе или предельную сорбционную емкость. Твердая фаза предварительно насыщается раствором, в котором содержится растворенное вещество с точно определенной концентрацией, или приводится в равновесное состояние с двумй растворенными веществами, конечные концентрации которых в растворе определяются раздельно. Твердая фаза затем может быть полностью дренирована или отделена центрифугированием или промывкой от начального раствора. После этого проба, адсорбента суспендируется в некотором количестве другой жидкости или раствора для титрования или для анализа каким-либо другим способом. [c.546]

Разделение при помощи кристаллических комплексов. Тетрагалогены метана, тетрахлористый и те-трабромистый углерод образуют с п-ксилолом кристаллические комплексы, способные осаждаться и затем отделяться при центрифугировании. Они распадаются при нагревании и регенерируются перегонкой. В присутствии тетравалентных галогенных соединений эвтектические смеси г-ксилола и ж-ксилола изменяют равновесные Составы эвтектическая смесь, содержащая только 1% /г-ксилола, разделяется при помощи парных растворителей изопентан для ж-кси-лола и жидкий сернистый ангидрид для /г-ксилола. [c.203]

НОЙ концентрацией Сд. Суспензию помещали в колбочку с притертой пробкой и ставили в термостат, отрегулированный на заданную температуру. Через определенные промежутки времени осадок отделяли центрифугированием и в равновесном растворе определяли количество органических и вытесненных с поверхности монтмориллонита неорганических катионов. Начальную и равновесную концентрации бутиламмонийхлорида определяли методом кондуктометрического титрования раствором щелочи этим же способом определяли количество в равновесном растворе вытесненных с поверхности минерала ионов алюминия. Содержание вытесненных ионов Na и Са определяли методом пламенной фотометрии, а ионы — трилономет-рически. [c.23]

При равновесном центрифугировании в градиенте плотности s l препаратов ДНК многих животных и растений было обнаружено присутствие наряду с основным пиком ДНК небольшого пика спутника 8 В ряде случаев было доказано, что возникновение спутника связано с присутствием в препарате внеядерной ДНК (см. ниже). В других случаях, прежде всего в ДНК из тканей млекопитающих, показано, что ДНК- спутник локализована в клеточном ядре. Наиболее изучены два представителя таких полинуклеотидов ДНК- спутник из печени мышей и ДНК- спутник из тканей некоторых видов крабов Их количество составляет от 10 до 30% общего количества ДНК клеточного ядра мол, вес. ДНК- спутника мышей найден равным 40 10 . Эти полинуклеотиды существуют в виде двухцепочечных комплексов характерным их свойством является легкая ренатурируемость, т. е. способность двухцепочечного комплекса восстанавливаться после разрушения. [c.34]

Для выделения ДНК из хлоропластов используют тот же самый прием, что и при выделении митохондриальной ДНК, — обработку субклеточных частиц ДНК-азой перед их разрушением. В этом случае, однако, не удается добиться полного удаления ядерной ДНК, и ДНК хлоропластов очищают далее равновесным центрифугированием в градиенте плотности s l. Наиболее подробному исследованию подвергалась ДНК из хлоропластов зеленой водоросли Euglena gra ilis она отличается от ДНК ядра по составу оснований и существует в виде двухцепочечного комплекса с мол. весом 10 10 . [c.35]

Непродолжительное нагревание пленки полимера выше Тс на определенное время освобождает замороженные конформацион-ные структуры и тем самым делает возможным переход полимера в состояние, близкое к равновесному. При этом ослабляются и напряжения в полимерной пленке, возникающие при центрифуги-ровэчии раствора и сушке. Подвижность сегментов полимерной цепи облегчает удаление остатков растворителя, которого в полимерной пленке после центрифугирования содержится 1—3%, Так как испарение растворителя из полимерной пленки связано с диффузионным процессом, необходимо доста- [c.22]