Хроматография фронт растворителя

Тонкослойная хроматография [20— 22]. Разделение проводят на стеклянных пластинках, равномерно покрытых слоем активированного твердого адсорбента. На нижнюю (стартовую) линию пластины наносят капли исследуемой смеси, после чего пластину под определенным углом погружают в ванну с десорбентом так, чтобы уровень его был ниже стартовой линии. При движении фронта растворителя происходит разделение компонентов смеси. Для идентифицирования образовавшихся пятен хроматограмму проявляют с помощью тех или иных реагентов или рассматривают пластину в ультрафиолетовых лучах. Затем измеряют площадь образовавшегося пятна и Л/. Обычно величина характерна для индивидуальных соединений или групп однотипных соединений. [c.83]

В нисходящей хроматографии растворитель продвигается по слою сверху вниз под действием как капиллярных, так и гравитационных сил. Если процесс останавливается при достижении фронтом растворителя нижней границы слоя сорбента, то компоненты разделяемой смеси остаются в слое в виде пятен. Еслн же хроматографический процесс продолжать, то растворитель стекает со слоя и вымывает компоненты анализируемой смеси. В этом случае, как в колоночной хроматографии, раствор собирают отдельными порциями и анализируют. Однако широкого применения в таком виде нисходящая хроматография не получила. [c.126]

Ступенчатая хроматография может применяться с одним растворителем или же с разными. Один растворитель применяют в том случае, когда требуется разделить смесь веществ с низким или близким значением Яу. После некоторого продвижения фронта растворителя по слою пластинку вынимают и растворитель испаряют. Затем хроматографирование повторяют, причем фронт растворителя продвигается на большее расстояние. Число операций необходимых для удовлетворительного разделения заданной смеси, можно рассчитать по формуле [c.127]

В круговой хроматографии применяют прибор, схема которого приведена на рис. 1У.9. Он состоит из небольшого кристаллизатора (или чашки Петри), в который наливают растворитель. Пластинка с сорбентом имеет в центре отверстие диаметром 2 мм. Пробу для анализа наносят в виде кольца вокруг этого отверстия. В отверстие вставляют фитиль, который опускают в растворитель. Пластинкой слоем вниз закрывают кристаллизатор и производят хроматографирование. Опыт прекращают, когда от фронта растворителя до края кристаллизатора остается 1,5—2 см. [c.141]

При работе по методу нисходящей хроматографии с незакрепленным слоем требуется специальное устройство, схема которого изображена на рис. 1У.13. Сосуд с растворителем устанавливают в кристаллизаторе на подставке так, чтобы растворитель мог подаваться в верхнюю часть пластинки. Подача и слив растворителя (при проточном методе) происходят по фитилям нз фильтровальной бумаги, помещаемым в щели (рис. 1У.13). Пластинку помещают на раму и устанавливают в кристаллизаторе под углом 15—20°. Кристаллизатор герметизируют, после чего производят хроматографирование, останавливая движение фронта растворителя за несколько сантиметров до нижнего края слоя сорбента. [c.144]

Разделение проводят на полоске бумаги для хроматографии шириной 1 см и длиной 13,5 см. На расстоянии 1 см от одного из концов бумаги наносят капилляром 1 каплю исследуемого раствора. Полученное на бумаге пятно осторожно подсушивают теплым воздухом над пламенем горелки или над электрической плиткой. Наливают в пробирку 0,5—1 мл смеси, состоящей из 80 % (по объему) бутилового спирта и 20 % соляной кислоты. Закрывают пробирку пробкой с крючком, к которому предварительно прикрепляют полоску бумаги пятном вниз. Можно также пользоваться пробками без крючков, как показано на рис. 6.5. Конец полоски, на который нанесена испытуемая проба, должен быть погружен в жидкость примерно на 3—5 мм. Через 2 ч, когда фронт растворителя поднимется кверху, подсушивают бумагу и проявляют хроматограмму. Проявлять хроматограмму можно, опрыскивая полоску из пульверизатора раствором сульфида аммония, тогда внизу появится черная зона меди, вверху — желтая зона кадмия. [c.339]

Когда фронт растворителя переместится на определенное расстояние (обычно 10 см), пластинку вынимают из камеры и высушивают. Разделенные вещества можно идентифицировать различными методами. Мерой скорости передвижения веществ, в бумажной хроматографии является — относительная величина, зависящая от условий определения. Хроматограмма дает лишь информацию о распределении пятен, так называемый рисунок пятен. [c.88]

На готовой хроматограмме пятна очерчивают карандашом, отмечают центр пятна и замеряют расстояние от него до линии старта. В тонкослойной хроматографии неорганических веществ невозможно указать постоянные значения Rf, так как отношение расстояния, пройденного ионом, к расстоянию, пройденному фронтом растворителя, зависит от влажности сорбента. Поэтому можно говорить только о последовательности расположения характерных пятен отдельных ионов. Целесообразно одновременно нанести на бумагу эталонные растворы соединений известных ионов, а также получать хроматограммы для различных концентраций анализируемых веществ. [c.89]

Хроматография. Хроматография — физико-химический метод разделения сложных смесей, при котором компоненты распределяются по разному между двумя фазами. Одна фаза неподвижная с большой поверхностью контакта, другая подвижная в виде патока, фильтрующегося через неподвижный слой. Неподвижная фаза оформляется в виде колонки (рис. 58) или тонкого слоя. Через них протекает подвижная фаза. Разделяемые вещества в начале растворены в подвижной фазе. Они интенсивно взаимодействуют с неподвижной фазой, ассоциируясь с ней, а поэтому только медленно перемещаются в направлении фронта растворителя. Вещества, слабо взаимодействующие с неподвижной фазой, вымываются быстрее. Разделяются вещества в соответствии с их различной скоростью передвижения в колонке или в тонком слое. [c.254]

Величину Л х применяют главным образом в проточной хроматографии, где растворитель стекает с края бумаги и расстояние до фронта растворителя измерить невозможно. Стандартное вещество не должно перемещаться слишком быстро, чтобы оно не стекало с бумаги. Фронт [c.353]

Величина R может изменяться в пределах от 0,00 до 1,00, при этом наилучшему разделению соответствуют значения от 0,1 до 0,8. Экспериментально установлено, что в двухфазных системах растворителей вещества, примерно одинаково растворяющиеся в обеих фазах, имеют У / около 0,5. Однако большинство веществ не одинаково растворяются в обеих фазах, поэтому располагаются либо ближе к линии старта, либо ближе к фронту растворителя. Вследствие этого в гомологических рядах не все члены имеют удовлетворяющие исследователей значения Ri. Разности величин приходящиеся на одну СНз-группу, не постоянны в гомологических рядах они максимальны в середине рядов и уменьшаются у их концов. В связи с этим в распределительную хроматографию введена новая величина являющаяся функцией / / [c.354]

Рис. 99. Прибор для бумажной хроматографии и хроматограмма смеси веществ 1 — сосуд 2 — крышка с прорезью на внутренней стороне для крепления листа бумаги 3 — лист хроматографической бумаги, подвешенный к крышке 4 — растворитель 5 — линия старта 6 — пятна 7 — фронт растворителя

При плоскостной хроматографии вещество регистрируют непосредственно на пластинке с тонким слоем неподвижной фазы или на бумаге. При этом в качестве количественной характеристики поведения компонента принято использовать отношение скоростей перемещения компонента и растворителя, которое легко определяется как отношение расстояния, пройденного компонентом от точки старта (точки нанесения пятна или полосы разделяемой смеси), к расстоянию, пройденному за то же время фронтом растворителя. Это отношение обозначают Ri и так же, как время удерживания, широко используют для обнаружения веществ в анализируемых смесях. Принято считать, что если в трех достаточно сильно различающихся по своим характеристикам системах значения Rf некоторого вещества, подвергающегося анализу, совпадают со значениями для вещества известного строения, то можно считать эти вещества идентичными, т. е, фактически приписать анализируемому веществу определенное строение. Эту процедуру, конечно, нельзя рассматривать как установление строения анализируемого вещества, так как она основана на сопоставлении с веществом уже ранее установленного строения. Обычно в этом случае говорят об идентификации вещества по значениям 7 /. [c.342]

Величину R и коэффициент распределения /Ср определяют экспериментально из хроматографических данных. Для этого измеряют на хроматограмме величины смещения зон веществ и фронта растворителя. Коэффициент распределения вычисляют из уравнения, вытекающего из общего уравнения хроматографии [c.115]

Распределительная хроматография на бумаге. Теория колоночной хроматографии была перенесена и в бумажную распределительную хроматографию. Бумага удерживает в порах воду (22%)—неподвижный растворитель, сорбируя ее из воздуха. Нанесенные на бумагу хроматографируемые вещества переходят в подвижную фазу и, перемещаясь с различными скоростями по капиллярам бумаги, разделяются. Однако определить значение Кр так, как это определялось в колоночном варианте, здесь невозможно, поэтому для количественной оценки способности разделения веществ на бумаге введен коэффициент представляющий собой отношение величины смещения зоны вещества (х) к смещению фронта растворителя (х ) (рис. 22), т. е. [c.79]

Хроматография на бумаге не требует дорогостоящего оборудования, чрезвычайно проста в исполнении. В этом методе сочетается разделение с одновременным обнаружением или идентификацией веществ. Бумага удерживает в порах воду — неподвижный растворитель. Нанесенные на хроматографирующую бумагу вещества переходят в подвижную фазу и, перемещаясь с различными скоростями по капиллярам бумаги, разделяются. Способность веществ к разделению оценивается коэффициентом Rj, представляющим собой отношение величины смещения зоны вещества h к смещению фронта растворителя Н [c.112]

Тонкослойная хроматография. Этот способ разделения веществ основан на адсорбционной, распределительной или обменной хроматографии Обычно эти процессы протекают совместно. Тонкослойная хроматография очень похожа на бумажную, но вместо листа бумаги используют тонкий слой порошкообразного адсорбента. Для этого на прямоугольную стеклянную пластинку наносят тонкий слои (обычно 2—3 мм) гидроокиси алюминия или другого подходящего адсорбента на линии старта помещают исследуемые образцы и свидетели . Затем пластинку помещают в слегка наклонном положении, чтобы нижний конец, вблизи которого находится линия старта, был погружен в растворитель. Через некоторое время фронт растворителя подойдет к верхнему концу пластинки тогда проявляют пятна разделившихся веществ либо специальными краси- [c.147]

Тонкослойная хроматография имеет то преимущество, что можно менять адсорбенты. Поскольку тонкий слой более компактен нежели бумага, постольку устанавливается больше равновесий при движении фронта растворителя на то же расстояние. Часто разделение достигается на расстоянии в несколько сантиметров, поэтому в тонкослойной хроматографии применяют покровные стекла, используемые в микроскопах. [c.189]

Б. Проводят испытание, как в разделе Тонкослойная хроматография (т. I, с. 92), используя в качестве адсорбента кизельгур Р1 и импрегнируя пластинку в смеси 10 объемов формамида Р и 90 объемов ацетона Р путем погружения ее на 5 мм ниже поверхности жидкости. После того как фронт растворителя пройдет не менее 16 см, вынимают пластинку из хроматографической камеры и выдерживают ее при комнатной температуре до полного удаления растворителя. Используют импрегнированную пластинку в пределах 2 ч с момента приготовления, проводя хроматографирование в том же направлении, что и импрегнирование. В качестве подвижной фазы используют смесь 75 объемов толуола Р и 35 объемов хлороформа Р. Наносят отдельно на пластинку по 2 мкл каждого из двух растворов в смеси [c.161]

Посторонние примеси. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве адсорбента силикагель Р2, а в качестве подвижной фазы смесь 140 объемов дихлорэтана Р, 60 объемов метанола Р, 2,5 объема воды и 2,5 мл безводной муравьиной кислоты Р. Наносят отдельно на пластинку по 10 мкл каждого из двух растворов в хлороформе Р, содержащих (А) 10 мг испытуемого вещества в 1 мл и (Б) 0,050 мг испытуемого вещества в 1 мл. Проводят хроматографирование до прохождения фронта растворителя на 10 см. Вынимают пластинку из хроматографической камеры, дают ей высохнуть на воздухе и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 нм). Любое пятно, полученное с раствором А, кроме основного пятна, не должно быть более интенсивным, чем пятно, полученное с раствором Б. [c.264]

Если растворитель поступает на пластинку снизу вверх под действием капиллярных сил, то такая хроматография будет восходящей. По мере продвижения растворителя происходит разделение анализируемой смеси веществ в зависимости от их сродстёа к адсорбенту. После окончания разделения пластинку с адсорбентом вынимают из камеры, отмечают фронт растворителя и обрабатывают специальными реагентами для обнаружения пятен (например, парами иода, серной кислотой и Т. д.). [c.164]

Подставку помещают в камеру-эксикатор, на дно которого налит раствор кислоты. Следят, чтобы уровень кислоты был ниже нанесенных на стартовую линию пятен хроматографИ руемого соединения. Через 20 мин хроматограмму вынимают иа эксикатора, карандашом отмечают фронт растворителя и переносят на фарфоровый вкладыш эксикатора с концентрированным раствором аммиака. Проявляются пятна 4-нитрофенолятз аммония лимонно-желтого цвета. [c.221]

Внутренние и внешние хроматограммы. Вопрос получения внутренних или внешних хроматограмм при разделении веществ имеет важное значение для последующего качественного и количественного определения веществ. Внутренние хроматограммы получают в случае разделения или идентификации веществ непосредственно на стационарной фазе. В этом случае прояви ление хроматограммы заканчивается прежде, чем подвижная фаза доходит до конца слоя сорбента. Если же элюирование продолжают до тех пор, пока вещество вместе с подвижной фазой не достигнет конца стационарной фазы, и исследуют затем небольшие порции элюата, то получают внешнюю хроматограмму при построении зависимости концентрации элюата от его объема, (мл). В случае окрашенных компонентов или при отличии свойств компонентов (различной радиоактивности, способности абсорбировать УФ- или ИК-излучение) от свойств стационарной фазы внутреннюю хроматограмму можно определить визуально или зарегистрировать на стационарной фазе. Хроматограммы такого типа получают в бумажной и тонкослойной хроматографии, отчасти и в колоночной. Бесцветные соединения можно проявлять, химическим путем. Качественный анализ веществ проводят, оценивая за медление передвижения анализируемого вещества относительно движения фронта растворителя. Для этого сравнивают путь, пройденный веществом, с путем, пройденным фронтом растворителя, и отношение между ними обозначают через [c.345]

Хроматография на сухих колонках. По этому методу смесь разделяемых веществ помещают в верхней части сухой колонки растворитель движется через сухую колонку иод действием капиллярных сил восходящим или иисходящим потоком когда фронт растворителя достигает иижней части колонки, выталкивают столб адсорбента и вырезают фракции, соответствующие компонентам р азделяемой смеси. (При использовании тонкостепиых трубок из найлона адсорбент можно не выталкивать, так как трубку легко разрезать вместе с адсорбентом.) Качество разделения, достигаемое этим методом, сравнимо с качеством, получаемым в тех же условиях методом ТСХ 27]. [c.388]

В силу капиллярности органический растворитель будет передвигаться по листу хроматографической бумаги. Нанесенное на бумагу вещество движется с током растворителя. Степень сорбции исследуемого вещества--на гидратированных волокнах бумаги (воздушно-сухие листы фильтровальной бумаги в камере, насыщенной парами водонасыщенного органического растворителя, содержат до 20% воды) определяет скорость его передвижения. Вещества, хуже сорбирующиеся на гидратированных волокнах бумаги, будут передвигаться быстрее. После прохождения фронтом растворителя определенного расстояния бумагу высушивают и обрабатывают тем или иным проявителем. Параллельно с опытным раствором на тот же лист бумаги наносят стандартный раствор исследуемого вещества (свидетель), который будет указывать местоположение определяемого вещества. Для идентификации вещества можно также пользоваться величиной Rf, которая является отношением расстояния, пройденного данным веществом, к расстоянию, пройденному фронтом растворителя. Величина Rf зависит от растворителя и качества бумаги. Различают восходящую (растворитель поднимается по бумаге вверх) и нисходящую (растворитель движется по бумаге вниз) хроматографию. [c.46]

Хроматограммы № I и 2 станят в сосуды с системой растворителей I, а № 3 н 4 — в сосуды с системой II. Хроматографию продолжают до тех нор, пока фронт растворителя не поднимется хотя бы на 20 см (в системе 1 это продолжается около 3 ч, в системе И — 22—24 ч). [c.65]

Преимущество восходящей хроматографии состоит в том, что ее осуществление не требует специального оборудования и исключена опасность перетекания растворителя. Как только фронт растворителя подойдет к верх 1ему концу бумаги, хроматографирование само собой прекращается. [c.457]

Принцип распределительной хроматографии основан на различии в коэффициентах распределения аминокислот между водой и органическим растворителем. Особенность метода распределительной хроматографии на бумаге по сравнению с обычной экстракцией ам.инокислот из водного раствора органическим растворителем заключается в том, что одну из фаз, чаще всего водную, помещают на какой-нибудь инертный твердый носитель, а органический растворитель — подвижная фаза,— проходя через первую, извлекает и распределяет аминокислоты на бумаге в соответствии с их коэффициентами распределения. Положение аминокислот на бумаге определяют по отношению скорости движения аминокислоты скорости движения фронта растворителя и обозначают Rf. Величина за висит в первую очередь от строения аминокислоты, затем от системы растворителей, pH среды и сорта бумаги, Чем полярнее аминокислота, тем меньше она растворяется в органических растворителях и тем меньше ее R . Увеличение длины углеродной цепи повышает . Введение в молекулу полярных групп, например, гидроксильной, аминной или карбоксильной понижает Rf Так, Rf фенилаланина в системе фенол/вода = 0,85, а тирозиит 0,51. Другие примеры изменения в зависимости от строения аминокислоты представлены на рис. 3 и 4. Подбирая соответствующие смеси растворителей, можно провести достаточно тонкое разделение аминокислот. Наиболее часто пользуются для такого разделения системами вода — фенол — аммиа вода — бутапол — уксусная кислота бутанол — аммиак — коллидин и т. д. Разделение можно проводить на одномерной или двумерной хроматограммах. Можно пользоваться также различными типами распределительной хроматографии на бумаге — нисходящей, восходящей и радиальной. Величины Rt для каждой из систем растворителей оказываются постоянными при соблюдении [c.479]

Посторонние примеси. Проводят определение, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве адсорбента силикагель Р4, а в качестве подвижной фазы смесь 5 объемов 1-бутанола Р, 4 объемов воды и 1 объема уксусной кислоты ( 300 г/л) ИР. Наносят отдельно на пластинку по 5 мкл каждого из трех растворов в метаноле Р, содержащих (А) 40 мг испытуемого вещества в 1 мл, (Б) 0,40 мг испытуемого вещества в 1 мл и (В) 0,40 мг бефения оксинафтоата СО в 1 мл. Вынимают пластинку из хроматографической камеры, дают ей высохнуть на воздухе и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 и 365 нм). При 254 нм видны два основных пятна на хроматограммах растворов А, Б и В, в то время как при 365 нм флуоресцируют только пятна, близкие к фронту растворителя. Любое дополнительное пятно, видимое на хроматограмме, полученной с раствором А, кроме двух основных пятен, не должно быть более интенсивным при рассмотрении при двух длинах волн, чем пятно, расположенное ближе к стартовой линии при хроматографировании раствора Б. [c.56]

Б. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве адсорбента кизельгур Р1 и импрегнируя пластинку смесью 10 объемов фор-мамида Р и 90 объемов ацетона Р путем погружения ее на 5 мм ниже поверхности жидкости. После того как фронт растворителя достигнет высоты не менее 15 см, вынимают пластинку из хроматографической камеры и оставляют стоять по меньшей мере на 5 мин. Используют импрегнированную пластинку в пределах 2 ч с момента приготовления, проводя хроматографирование в том же направлении, что и импрегнирование. В качестве подвижной фазы используют смесь 50 объемов ксилола Р, 50 объемов этилметилкетона Р и 4 объемов формамида Р. Наносят отдельно на пластинку по 3 мкл каждого из двух растворов (А) испытуемого вещества и (Б) стандартного образца дигитоксина СО, приготовленных растворением 50 мг в смеси равных объемов хлороформа Р и метанола Р до получения 10 мл и затем разведением 1 мл до 5 мл метанолом Р. Проводят хроматографирование до прохождения фронта растворителя иа 12 см. Вынимают пластинку из хроматографической камеры, высушивают при П5°С в течение 20 мин, охлаждают, опрыскивают смесью 15 объемов раствора 25 г трихлоруксусной кислоты Р в 100 мл этанола ( — 750 г/л) ИР и 1 объема свежеприготовленного раствора тозилхлорамида натрия Р с концентрацией 30 мг/мл и затем нагревают пластинку при 115°С в течение 5 мин. Дают охладиться и оценивают хроматограмму в дневном свете и в ультрафиолетовом свете (365 нм). Основное пятно, полученное с раствором А, соответствует по положению, внешнему виду и интенсивности пятну, полученному с раствором Б. [c.113]

Б. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве адсорбента силикагель Р2 и импрегнируя пластинку смесью 5 объемов н-тетрадекана Р и 95 объемов гексана Р путем погружения ее на 5 мм ниже поверхности жидкости. Когда фронт растворителя достигнет вершины пластинки, вынимают пластинку из хроматографической камеры и выдерживают ее при комнатной температуре до полного удаления растворителей. Тотчас используют пластинку, проводя хроматографирование в том же направлении, что и импрегнирование. В качестве подвижной фазы используют смесь 90 объемов метанола Р и 10 объемов воды. Наносят отдельно на пластинку по 1 мкл каждого из двух растворов в этаноле ( 750 г/л) ИР, содержащих (А) 20 мг испытуемого вещества в 1 мл и (Б) 20 мг стандартного образца флуфеназина деканоата СО в 1 мл. Вынимают пластинку из хроматографической камеры, дают ей высохнуть на воздухе и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 нм). Основное пятно, полученное с раствором А, соответствует по положению, внешнему виду и интенсивности пятну, полученному с раствором Б. [c.138]

Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве адсорбента силикагель Р2, а в качестве подвижной фазы смесь 85 объемов этилацетата Р, 10 объемов метанола Р, 5 объемов воды и 2 объемов безводной муравьиной кислоты Р. Используют хроматографическую камеру, не имеющую обкладки из фильтровальной бумаги фронт растворителя должен продвинуться на 17сМ. Наносят отдельно на пластинку по 5 мкл каждого из двух растворов в смеси 5 объемов хлороформа Р, 4,5 объема метанола Р и 1 объема воды, содержащих (А) 40 мг испытуемого вещества в 1 мл и (Б) 0,080 мг испытуемого вещества в 1 мл. Вливают подвижную фазу в камеру и тотчас вносят пластинку, избегая предварительного насыщения камеры. Вынимают пластинку из хроматографической камеры, оставляют ее высыхать в потоке холодного воздуха в течение 5 мин и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 нм). Помещают пластинку в закрытую камеру, содержащую хлор, полученный путем смешения равных объемов раствора перманганата калия Р с концентрацией 15 мг/мл и соляной кислоты г/л) ИР, [c.303]

Б. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве сорбента кизельгур Р1 и СмесьЮ объемов фарма.мида Р и 90 объемов ацетона Р для импрегнирования пластинки путем ее погружения в эту жидкость на глуби.Н у 5 мм. После того как растворитель достигнет высоты по крайней. мере 16 ом, извлекают пластинку из хроматографической камеры и оставляют ее при КО М-натной температуре до полного испарения растворителей. Используют импрегнированную пластинку в течение 2 ч и проводят хроматографию в том же направлении, что и импрегнацию. В качестве подвижной фазы используют смесь 75 объемов толуола Р и 25 объемов хлороформа Р. Наносят на пластинку отдельно по 2 мкл каждого из 2 растворов в смеси 9 объемов хлороформа Р и 1 объема метанола Р, содержащих (А) 2,5 мг испытуемого вещества в 1 мл и (Б)2,5 мг флудрокортизона ацетата СО в 1 мл. Проводят хроматографирование до подъема фронта растворителя на 15 см. Вынимают пластинку из хроматографической камеры, дают ей высохнуть на воздухе до испарения растворителей, нагревают 15 мин при 120 °С, опрыскивают раствором серной кислоты в этаноле ИР и затем нагревают в течение 10 мин при 120 °С. Дают пластинке остыть и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (365 нм). Основное пятно, которое дает раствор А, соответствует по положению, внешнему виду и интенсивности пятну, которое дает раствор Б. [c.153]

Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве сорбента силикагель Р1, а в качестве подвижной фазы — смесь 93 объемов хлороформа Р, 6,5 объема метанола Р и 0,5 объема аммиака ( 260 г/л) ИР, и дают фронту растворителя подняться только на 10 см выше линии нанесения. Наносят на пластинку отдельно в виде полос 20X3 мм по 10 мкл каждого из следующих растворов для получения раствора А добавляют к 0,1 г распертого в тонкий порошок испытуемого вещества в маленькой пробирке 0,05 мл аммиака ( 260 г/л) ИР и 5 мл хлороформа Р, энергично перемешивают стеклянной палочкой, оставляют на 30 мин и фильтруют для получения раствора Б разводят 1 мл раствора А до 25 мл хлороформом Р для получения раствора В растворяют 5 мг эметина гидрохлорида СО и 6 мг цефаэлина гидрохлорида Р в количестве метанола Р, достаточном для получения 20 мл раствора. После извлечения пластинки из хроматографической камеры дают ей высохнуть на воздухе до исчезновения запаха растворителя, опрыскивают [c.183]

Посторонние примеси. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве сорбента силикагель Р6 (подходит и предварительно покрытая пластинка из коммерческих источников), а в качестве подвижной фазы смесь равных объемов этилацетата Р и гексана Р. Наносят на пластинку отдельно следующие 3 раствора в ацетоне Р (А) 10 мкл раствора, содержащего 10 мг испытуемого вещества в 1 мл, (Б) 2 мкл раствора, содержащего 1,0 мг испытуемого вещества в 1 мл, и (В) 2 мкл раствора, содержащего 1,0 мг нифуртимокса СО в 1 мл. Дают пятнам высохнуть перед помещением пластинки в ненасыщенную хроматографическую камеру, дают фронту растворителя продвинуться на 10 см. После извлечения пластинки из хроматографической камеры дают ей высохнуть на воздухе и оценивают хроматограмму В ультрафиолетовом свете (254 нм). Любое пятно, которое дает раствор А, кроме основного пятна, не должно быть более интенсивным, чем пятно, которое дает раствор Б. [c.246]

Посторонние примеси. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве сорбента силикагель Р4, а в качестве подвижной фазы смесь 65 объемов хлороформа Р, 25 объемов ацетона Р и 10объемов толуола Р. Дают фронту растворителя подняться на 14 см выше линии населения, используют нелинованную хроматографическую камеру. Готовят 4 испытательных раствора следующим образом для приготовления раствора (А) помещают 1,0 г растертого в тонкий порошок испытуемого вещества в пробирку с притертой пробкой, добавляют 5 мл эфира Р и встряхивают с помощью механического шейкера в течение 30 мин. Центрифугируют пробирку до получения прозрачной надосадочной жидкости и отделяют его от твердого осадка. Для приготовления раствора (Б) разводят 1 мл раствора А до 10 мл этанолом ( 750 г/л) ИР. Для приготовления раствора (В) растворяют 25 мг 4-хлорацстапилида Р в 50 мл этанола ( 750 г/л) ИР. Для приготовления раствора (Г) растворяют 0,25 г 4-хлорацетанилида Р и 0,1 г испытуемого вещества в количестве этанола (- 750г/л) ИР, достаточном для получения 100 мл. Наносят на пластинку отдельно 200 мкл раствора А и по 40 мкл каждого из 3 остальных растворов. После извлечения пластинки из хроматографической камеры дают ей высохнуть в струе теплого воздуха и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 нм). Любое пятно, соответствующее 4-хлорацетанилиду, которое дает раствор А, не должно быть более интенсивным, чем аналогичное пятно, которое дает раствор В. Любое пятно, которое дает раствор Б, кроме основного пятна и пятна, соответствующего 4-хлорацетанилиду, не должно быть более интенсивным, чем пятно, которое дает раствор В. Тест достоверен только в том случае, если на хроматограмме раствора Г видны 2 четко разделившихся пятна, соответствующих 4-хлорацетанилиду и испытуемому веществу, причем последнее с более низким значением Н/. [c.271]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология