Хроматография спиртов на ионообменных смолах

Впервые разделение углеводов методом распределительной хроматографии на ионообменных смолах в смесях растворителей различной полярности было описано в 1952 г. [1]. В последние годы метод был значительно усовершенствован. В обзорной статье [2] приведены данные о влиянии ряда факторов на разделение, а также примеры использования метода. В качестве элюента при разделении сахаров и их производных наиболее пригоден водный спирт, и далее речь будет идти только об этом элюенте. [c.55]

После перекристаллизации получается треонин, содержащий значительно меньше аллотреонина. Однако при проведении реакции с указанными количествами исходных веществ общий выход уменьшается до 50%. Ни этот химический метод, ни метод бумажной хроматографии не позволяет полностью разделить изомеры в случае малых количеств исходных веществ. Такие смеси можно разделить фракционированием натриевых солей [5] в растворе этилового спирта или при помощи хроматографического метода с использованием ионообменных смол (см. ниже). [c.198]

Из реакционного раствора смесь моно-, ди- и трифосфатов тиамина выделяют ацетоном или спиртом. В небольших количествах это осуществляется хроматографией на бумаге [352] ТДФ выделяется через фосфорновольфрамовую соль [337, 3401. Для больших количеств предложены методы разделения хроматографией иа крах.мале, электрофорезом на колонках с порошкообразной целлюлозой или на ионообменных смолах 1313, 314, 353—355]. [c.419]

III. Хроматография спиртов на ионообменных смолах [c.27]

Наиболее важным преимуществом газо-жидкостной хроматографии перед колоночной хроматографией на смолах является значительная экономия времени. Если аппарат установлен, то время, требуемое для разделения методом газо-жидкостной хроматографии, измеряется минутами, тогда как время, необходимое для разделения на ионообменной колонке, исчисляется часами, днями и даже неделями. Например, для разделения сахарной, малеиновой, винной и лимонной кислот (гл. 8, разд. Б.П.а) требуется около 7 ч на вымывание девяти спиртов (рис. 47) уходит 10 ч, а разделение семи кетонов (рис. 49) отнимает 17 ч. С другой стороны, на автоматизированное хроматографическое разделение на ионообменных смолах расходуется немного больше времени, чем на газо-жидкостную хроматографию. [c.254]

Выделение производили по следующей схеме двухкратная экстракция нуклеотидов из измельченных тканей хлорной кислотой, адсорбция их на активированном угле, элюция с угля аммиачным спиртом, разделение на ионообменной смоле Дауэкс 1, хроматография на бумаге. [c.253]

Катионообменные смолы имеют преимущество перед анионообменными смолами, так как в промышленности они легко получаются в виде мельчайших однородных частиц (благодаря чему их используют в аминокислотных анализаторах). Наиболее часто используются дауэкс 50 / -Х8, амберлит 1К-120, аминекс (Ат1пех) А-6 и техников (ТесЬшсоп) Т5С, техникой Т4 или дауэкс 1-Х8 с величинами частиц в пределах 5—20 мкм. В качестве противоионов обычно используют литий-, натрий-, калий-, барий-, кальций-, сульфат- и хлорид-ионы. Из изученных типов смол наиболее благоприятное разделение многоатомных спиртов получалось при использовании литиевой формы (рис. 22.1) (о методике этого разделения см. разд. V, А, Хроматография на ионообменных смолах). В последнее время стали использовать противоионы органических оснований, такие, как пиперидиний и метил-, диметил- и триметиламмоний [26]. Применение иона триметиламмония давало оптимальное соотношение между объемами удерживания, шириной хроматографических зон и временем анализов. [c.64]

Ц. к. присутствуют во многих животных и растительных тканях, а также в дрожжах, откуда их выделяют экстракцией и хроматографией на ионообменных смолах. В организме Ц. к. образуются в результате взаимодействия цитидинтрифосфата (ЦТФ) с соответствующими фосфатами спиртов холина, этанола-мина, глицерина и т. д., путем реакций, катализи- [c.440]

Исходным сырьем для промышленного получения гепарина является печень и легкие. Изолирование его представляет сложную, многостадийную процедуру (описанную в ряде патентов), включающую автолиз с водой и ксилолом при комнатной температуре, извлечение щелочью и сульфатом аммония (при 50—55°), удаление главной части белков после свертывания (при 70—80°) и осаждение комплекса гепарина с белком при pH 2,5. Далее удаляют примеси жиров спиртом, примеси белков — трипсином после удаления фермента гепарин осаждают ацетоном. Дальнейшая очистка достигается обработкой реактивом Ллойда, фракционированием ацетоном, обработкой хлористы1 [ кадмием и оксалатом аммония, осаждением бензидином и, наконец, получением и кристаллизацией бариевой соли [190]. В лабораторных условиях для очистки гепарина применяется фракционирование с использованием хлористого цетилпиридиния и колоночная хроматография на ионообменных смолах. [c.228]

КИПЯТЯТ С обратным холодильником в течеиие 24 час. на паровой бане. Минеральную кислоту удаляют в вакууме, причем последние следы ее удаляют, добавляя к остатку четыре порции воды по 60 мл. Оставшуюся хлористоводородную соль кислоты (примечание 4) растворяют в нескольких миллилитрах воды, и равные порции пропускают через 2 колонки (200 X 15 мм), содержащие 60 мл ионообменной смолы дауэкс-50 в Н-форме. Колонки промывают 300 мл воды и затем элюируют 300 мл 2 н. раствора гидроокиси аммония и промывают 800 мл воды. Элюаты и промывные воды объединяют и упаривают досуха, а остаток перекристаллизовывают из водного спирта. Маточные жидкости после получения второй порции валина упаривают досуха, а остаток возгоняют в вакууме, получая в результате третью порцию валина. Выход очищенного вещества 1,196 г, что в расчете на цианистый калий составляет 51,4 /о. Анализы, проведенные методами двухмерной бумажной хроматографии и радиоаутографии, свидетельствуют о том, что полученное вещество гомогенно (примечание 5). [c.200]

В работе Гросса [5] описано получение S-этил-1-С -/-гомоци-стеина из йодистого этила-1- и 8-бензил-/-гомоцистеина. Исходное вещество (1,14 г), полученное из метионина через 8-бен-зил- /-гомоцистеин [6] и Ы-ацетил-5-бензил- /-гомоцистеин [7], восстанавливают металлическим натрием в жидком аммиаке, и образовавшийся меркаптид обрабатывают 0,63 г йодистого этила-ЬС Прибор для проведения реакции представляет собой модификацию прибора, о котором идет речь в примечании 2. Вещество, оставшееся после испарения аммиака, растворяют в воде, и полученный раствор подкисляют соляной кислотой до pH 1—2, затем этот раствор пропускают через колонку [8] (высота 2,5 м, диаметр 22 см), наполненную ионообменной смолой дауэкс-50 (степень сшивания 8%) с величиной зерен 200—400 меш. Фракции, содержащие продукт реакции, полученные при элюировании 2,5 н, соляной кислотой, объединяют и испаряют при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде и с помощью раствора едкого натра создают среду с pH 6,2. Для очистки вещество сублимируют при температуре 180—200° и давлении 1 мм рт. ст. Выход 0,400 г (60%),[а]д + 23°, концентрация 1% в 2 н. растворе соляной кислоты. Методом бумажной хроматографии в системе бутиловый спирт — вода— уксусная кислота (10 5 2) или в системе третичный амиловый спирт — вода — пиридин (7 6 8) при температуре 22—25° на бумаге ватман № 4 показано, что вещество состоит из свободной аминокислоты и радиохимических примесей RjSi,61 и 0,61 соответственно. [c.218]

К 3 Л1У1 0,5 М эфирного раствора алюмогидрнда лития [I] прибавляют при перемешивании раствор 0,022 г амида пировино-градной-2- кислоты в 10 мл абсолютного эфира с такой скоростью, чтобы поддерживалось слабое кипение с обратным холодильником. Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 4 час., выдерживают в течение ночи, концентрируют до объема 3—5 мл, затем обрабатывают 10 мл безводного хлороформа и вновь испаряют. Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 4—5 час. с 0,6—0,7 мл хлорокиси фосфора в 10 мл хлороформа, затем выдерживают в течение ночи и разбавляют 15 Л1Л воды. Хлороформ испаряют на паровой бане, нагревают водный раствор при 100° в течение 2 час. (примечание 2), охлаждают и с помощью 10 н. раствора едкого кали доводят pH среды до 7. Раствор нагревают при перемешивании при 100° в течение 5 мин. с 12—14 мл 1 /М раствора ацетата бария (примечание 3). Фосфат бария отделяют центрифугированием и пять раз промывают водой (порциями по 25 Л1уг) (примечание 4). Промывные воды объединяют и пропускают раствор через колонку (высота 20 см, диаметр 2 см) с ионообменной смолой дауэкс-50 (Н-форма), которую затем пять раз промывают водой (порциями по 10 мл). Элюат объединяют и концентрируют в вакууме при комнатной температуре до объема 5 ма (примечание 5) и очищают продукт реакции методом двухмерной нисходящей хроматографии на бумаге (примечание 6), причем в качестве растворителей используют следующие смеси изопропиловый спирт — концентрированный раствор аммиака — насыщенный водный раствор версена (6 2) изопропиловый спирт — насыщенный водный раствор версена — 2 М раствор хлоруксусной кислоты (7 2 1). Общий выход продукта 25—39% в расчете на амид пировииоградной кислоты (примечание 7). [c.544]

Ч1ротеииы с помощью кислотного, основного или ферментативного гидролиза могут расщепляться на простейшие составляющие — а-ами-нокарбоновые кислоты, обычно называемые просто а-аминокислотами. Ка.чественный анализ получающихся при этом смесей аминокислот связан с относительно большими трудностями. Э. Фишер (1901 г.) обрабатывал такие смеси спиртом и разделял образующиеся в результате смеси сложных эфиров а-аминокислот дробной перегонкой. В настоящее время эти соединения разделяют и идентифицируют методами газовой хроматографии. Использование ионообменной хроматографии позволяет разделить подобные смеси без предварительной этерификации. Существуют приборы, которые автоматически проводят качественный и количественный анализ смесей такого рода. При этом первоначально а-аминокислоты разделяются на ионообменных смолах, элюаты обрабатываются нингидрином, а образующиеся синие окрашенные вещества анализируются колориметрически, кривые поглощения записываются с помоп ью самописца. [c.647]

Имеются сообщения [За, 20, 40, 121, 137, 138] о нескольких других методиках хроматографии на бумаге для качественного анализа аминов и дикарбоновых кислот из гидролизатов синтетических волокон полиамидного и полиэфирного типа. Гидролизаты перлона L (поликапролактам), найлона 66 и перлона U (полиуретан) были исследованы на содержание е-аминокапроновой кислоты и гексаметилендиамина. Описан метод определения солянокислого гексаметилендиамина в присутствии гидрохлорида 8-аминокапроновой кислоты [55] с помощью ионообменной смолы амбер-лит IRA-400. Пфафф [104] использовал хроматографию на бумаге для анализа синтетических смол в текстильных изделиях. Ткань тщательно экстрагировали четыреххлористым углеродом, горячим спиртом, горячей водой и затем кипятили в 1 %-ном растворе НС1. Аликвотные части неизвестной смолы и контрольной смолы, гидролизованные одинаковым образом, наносили на бумагу и хроматографировали. Тетраметилолацетилендимоче-вина и эпоксидные смолы не дают удобных для использования хроматограмм. [c.336]

Для анализа низших спиртов с одной гидроксильной группой лучше использовать газовую хроматографию, в то время как жидкостная хроматография успешнее используется для разделения и определения высших свободных спиртов и их производных. Для разделения спиртов и гликолей методом жидкостной хроматографии используются простые сорбенты, а также ионообменные смолы и гели. За последнее время были разработаны новые сорбенты и носители, например пористая двуокись кремния, в виде микросфер, которые дают возможность достигнуть существенного увеличения скорости разделения [1]. Когда анализируют диолы, главным образом полимерные соединения типа по-лиэтиленгликоля, наиболее важной задачей является определение молекулярной массы. Для этой цели наиболее подходящей является гель-проникающая хроматография, но может также применяться и силикагель. [c.22]

Высшие спирты были разделены на колонке, наполненной дауэксом 50-Х8 (Н+) (200—400 меш), путем постепенного элюирования уксусной кислотой возрастающей концентрации (1—Зн.) [7] (табл. 18.3). Шерма и сотр. [8] также изучали возможность, разделения высших спиртов на дауэксе 1 (СНзСОО ) при элюировании водноорганическими солевыми растворами. При этих разделениях важное значение имеет как высаливание, так и растворимость, и, следовательно, зависимость логарифма коэффициента распределения выделенного вещества относительно концентрации электролита не всегда линейна. Эти работы показывают, что возможно неполное разделение высших спиртов (к-гексанола, н-гептанола и н-октанола) с использованием в качестве элюента 4 М раствора ЫС1 в метаноле. Однако наблюдалось существенное расширение кривых элюирования. Шерма и Лаури [9] изучили хроматографию на основе солюбилизации на макропористых ионообменных смолах. Разделение гомологического ряда алифатических спиртов с помощью хроматографии на основе солюбилизации на макропористых ионообменных смолах амберлист 15 было проведено не так успешно, как на гелях обычных смол. [c.27]

Для разделения фенолов путем хроматографии на колонке используют ряд адсорбентов. Ионообменные смолы обычно применяют для поглощения кислых или основных компонентов, содержащихся в моче или в водных экстрактах растений. Фенолы и фенолокислоты поглощаются катионообменнымк смолами (Н+-форма), а аминофенолы — анионообменными смолами или слабокислыми катионообменными смолами. Их можно элюировать из этих колонок с помощью соответствующих кислот или оснований. Некоторые вещества на этих смолах либо совсем не разделяются, либо разделяются с трудом. При выделении аминофенолов, таких, как адреналин, часто используют окись алюминия. Для флавоноидов и других фенолов лучше применять магнесоль (синтетический гидратированный кислый силикат магния), силикагель, порошок целлюлозы, полиамид и карбоксиметилцеллюлозу [10]. При использовании колонок с магнесолем проявляют и элюируют сначала влажным этилацетатом, затем водой и, наконец, 95%-ным спиртом. Колонки с силикагелем, приготовленные с фосфорной кислотой, элюируют смесями бутанола и разбавленной уксусной кислоты, иногда содержащими бензол или хлороформ, либо смесью ацетона с бензолом (1 3) [11]. В колонках с порошком целлюлозы можно использовать все проявители, используемые в бумажной хроматографии (см. табл. 1). Колонки с полиамидом и карбоксиметилцеллюлозой проявляются и элюируются сначала водой, затем водным раствором спирта. [c.37]

Хотя бумагу с ионообменными смолами использовали главным образом для разделения неорганических веществ, на ней можно разделять и органические ссединения. Хюттенраух и Клотц [125] разделили несколько витаминов группы В на бумг-ге ША-2 в ацетатной форме с помощью воды. Шерма и его ученики распространили принципы растворяющей хроматографии (гл. 9, )азд. В.И) на разделение фенолов [126], спиртов [127] и кетонов 128] на бумаге, содержащей ионообменные смолы. [c.326]

Высаливающая элюентная хроматография — разделение неэлектролитов или слабых электролитов посредством вымывания с колонки водным раствором соли высокой концентрации. Разделение неэлектролитов на ионообменных смолах облегчается при элюировании водным раствором соли. Например, вымыванием 1—2 М раствором сульфата аммония удается разделить смесь спиртов ( i—С5). Применяемая соль не должна мещать определению компонентов в элюатах [218]. [c.100]

Для выделения циклического пептида из реакционной смеси раствор последней в воде или водном спирте пропускают последовательно через кислую и основную ионообменные смолы, которые абсорбируют все полярные побочные продукты. Очистку циклопептидов проводили также с помощью противоточного распределения [1215] и колоночной хроматографии на целлюлозе [1285]. Одним из самых существенных этапов идентификации продукта циклизации является определение его молекулярного веса. Для этого применяют метод изотермической перегонки в трифторуксусной [1285, 2018, 2533] или в муравьиной кислоте [2545], а также криоскопический метод. В последнем случае, кроме обычно используемых фенола и камфоры, предложено также применять диметилсульфоксид [2031, 2035] и ге-аминогек-сагидробензойную кислоту [1865, 1868]. [c.348]

Ионоэксклюзионная распределительная хроматография является хорошо известным методом, который в последнее время привлек к себе повышенное внимание. Благодаря эффекту доннановского распределения ионизированные соединения не удерживаются ионообменной смолой, в то время как неионизированные продукты могут распределяться между неподвижной водной фазой, находящейся внутри частиц смолы, и подвижной жидкой фазой, перемещающейся в пространстве между частицами насадки. Разделение основано на полярных и ван- дерваальсовых взаимодействиях между растворенным компонентом и смолой. Таким способом можно разде- лять органические кислоты, аминокислоты, сахара, спирты, фенолы и другие соединения. [c.202]

Альдегиды и кетоны можно разделить хроматографически, если они находятся в свободном состоянии или в виде производных. Хотя карбонильные соединения являются неионогенными, большинство исследователей для их разделения используют ионообменную хроматографию. Очень часто также необходимо решать задачи группового отделения альдегидов и кетонов от органических кислот и других веществ. Кислоты связываются количественно на колонке с сильноосновной анионообменной смолой амберлит IRA-400 (НСО ). Альдегиды и кетоны переходят в фильтрат, а кислоты затем десорбируются раствором карбоната натрия [1]. Для отделения кетонов от спиртов можно использовать количественную сорбцию кетонов на анионообменных смолах в бисульфитной форме, тогда как спирты переходят в элюат. Кетоны можно элюировать горячей водой или раствором, содержащим смесь карбоната и бикарбоната [2]. [c.49]

Дополнительное количество продукта можно выделить, пропуская маточный раствор через ионообменную колонку, заполненную смолой амберлит ША-400 в хлоридной форме. Элюат упаривают до 2,5 жл и к остатку добавляют 0,060 г носителя — сернокислой соли. аденина. К полученной смеси добавляют 0,1 мл 18 н. серной кислоты и продукт выделяют, как описано выше (выход 0,080 г). Сернокислую соль аденина перекристаллизовывают из 2 н. серной кислоты в виде соли (С5Н5М5)2- Н2804 НгО. Хроматографией на фильтровальной бумаге в системе н-бутиловый спирт (40%)—пропионовая кислота (25%)—вода (35%) установлено присутствие только одного радиоактивного вещества 0,42, если применять бумагу ватман № 1 из солянокислого раствора). [c.168]

Определение содержания в промышленных сточных водах фенолов, анилина, таких ароматических углеводородов, как терфе-нил, и многих других соединений проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, используя в качестве наполнителей как ионообменные, так и неионообменные мелкоиз-мельченные смолы [67]. В качестве элюентов применяли водный спирт или борат-нитратные буферные растворы. [c.516]

Ионоэксклюзионная распределительная хроматография используется для разделения слабых кислот, аминокислот, сахаров, спиртов и других веществ на ионообменной колонке. Ионизированные соединения отторгаются смолой и не удерживаются колонкой, а неионизирован-ные продукты удерживаются ею и разделяются. [c.202]